微波輔助提取梔子多糖的工藝研究大學(xué)論文

PAGEPAGE１５微波輔助提取梔子多糖的工藝研究摘要：植物多糖是由許多相同或不同的單糖以α-或β-糖苷鍵所組成的化合物，普遍存在于自然界植物體中，其分子量一般為數(shù)萬甚至數(shù)百萬，是構(gòu)成生命活動(dòng)的四大基本物質(zhì)之一，同維持生命功能密切相關(guān)。近年來，大量研究表明多糖除了免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤的生物學(xué)效應(yīng)外，還有抗衰老、降血糖、抗凝血等作用，且其對機(jī)體毒副作用小，因此，對多糖的研究已成為醫(yī)藥界的熱門領(lǐng)域。目的:以水為提取劑，采取L9（33）正交優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，研究了微波輔助提取梔子多糖的工藝，尋求最佳提取工藝。方法：以苯酚-硫酸法測定樣品中多糖的含量。結(jié)果：最佳提取條件：時(shí)間為：20min；固液比：1:30；微波次數(shù)：2次，此時(shí)多糖的含量為7.61%。關(guān)鍵詞：植物多糖；梔子多糖；微波輔助提??；正交實(shí)驗(yàn)；提取工藝Abstract:Polysaccharidesofplantbyalotofthesameorwithα-orβ-glucosidechemicalcompoundkeymakeupdifferentmouose.Generallyexistinthenatureplantbody.Itismolecularweightisgenerallyseveraltensofthousandsofevenmillions.Itisoneoffourmajorbasicmateralswithformthelifeactivitywithkeepingthelifefunctioncloselyrelated.Inrecentyears,alargenumberofresearchindicatesthereisimmuneadjustmeatandtheantitumorbiologicaleffectoutsideinexceptmanycandies,havinganti-ageing,lowerthebloodsugarate.Itissmalltothemalicioussideoforganism.sostudyonpolysaccharidesbecomeshot-fieldinthedrugmarker.Object:Bytheexperimentsoforthogonaltest.Themicrowave-assistedextractiontechnologyforgardeniaspolysaccharidewasstudied,withwaterastheextractionsolvent.Lookingforaoptimalextractiontechnology.MethodsThepolysaccharidewasdeterminedbyphenolsulfuricmethod.ResultsTheoptimalconditionofextraction:Theextractiontimewas20minundersolid-liquidratioof1:30,thetimesofmicrowarewastwo.ThetemporalityofGardeniasPolysaccharidewas7.61%.Keywords:Polysaccharidesofplant;gardeniasPolysaccharide;microware-assistantextraction;orthogonaltest;extractiontechnology.1文獻(xiàn)綜述梔子是茜草科植物山梔GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果實(shí),是一種常綠灌木,生于山野間,適應(yīng)性強(qiáng),廣泛分布于熱帶和亞熱帶地區(qū),全世界約有250種。我國有4種,為梔子、海南梔子、狹葉梔子和匙葉梔子。梔子也稱黃梔子、山梔子、黃果樹、紅梔子等。我國梔子資源主要分布于江浙、安徽、江西、臺(tái)灣等南方各省。梔子尖長橢圓形,表皮有棱,形似古代酒器。有五棱、七棱、九棱等不同品種,中仁深紅或黃紅色。性苦寒,無毒。入心、肝、肺、胃經(jīng)。能清熱瀉火、涼血。主治熱病虛煩不眠、黃疸、淋病、消渴、目赤、咽痛、吐血、衄血、血痢、尿血、熱毒瘡瘍、扭傷腫痛。臨床用于急性黃疸型肝炎、止血、扭挫傷等疾病?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn),梔子屬植物中含有許多的化學(xué)成分,如黃酮類(梔子素類)、環(huán)烯醚萜類(梔子苷類)、三萜類(梔子花酸類)、有機(jī)酸酯類(綠原酸、藏紅花酸類等),另外還含有D-甘露醇、甾醇類、三萜皂苷類、長鏈烷烴、醇及色素等。在果實(shí)和莖葉花中還含有揮發(fā)油、多糖等成分。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，梔子多糖具有比較廣譜的抑瘤效應(yīng)，對腹水肝癌細(xì)胞和S-180肉瘤細(xì)胞具有較好的抑制作用；另外，還有解熱、抗微生物、鎮(zhèn)定、保肝、利膽、防止動(dòng)脈粥樣硬化及增強(qiáng)機(jī)體免疫力等作用，而梔子多糖是梔子中具有醫(yī)療保健作用的主要成分之一，因此對梔子多糖的研究極具價(jià)值，為了充分利用梔子多糖有效成分，本課題擬對梔子中多糖提取工藝條件進(jìn)行探索，預(yù)找出最佳工藝條件。1.1多糖研究的目的及意義多糖廣泛存在于自然界，是多種中草藥的有效成分之一，具有多種生物活性，是理想的免疫增強(qiáng)劑，它能促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、MΦ細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，還能促進(jìn)白介素、干擾素、腫瘤壞死因子等細(xì)胞因子的產(chǎn)生。目前對多糖的研究方興未艾，多糖的作用機(jī)理以及生物功能與結(jié)構(gòu)的關(guān)系的研究不斷深入，而且不斷有新的多糖物質(zhì)被發(fā)現(xiàn)。多糖是單糖通過糖苷鏈連接而成的天然高分子化合物，科學(xué)研究結(jié)果確認(rèn)多糖作為信息分子在受精、發(fā)育、分化、神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)衡態(tài)的維持等方面起著重要的作用?？茖W(xué)研究還證實(shí)，自身免疫疾病、衰老、癌細(xì)胞的異常增殖和轉(zhuǎn)移、艾滋病毒、病源體感染，各種炎癥等生理和病理過程都有多糖類介導(dǎo)。科學(xué)研究確認(rèn)在多細(xì)胞生物的細(xì)胞外表覆蓋著一層糖鏈，這些糖鏈參與了細(xì)胞面的粘附，在細(xì)胞表面形成分支的糖鏈宛如無線電天線，正是它們在細(xì)胞間傳遞信息，因此，多糖類物質(zhì)對生命現(xiàn)象的解釋，提供十分重要的可靠的依據(jù)。為此，當(dāng)前國際上先進(jìn)工業(yè)國家都投入巨資研發(fā)多糖，多糖的研究狀況成為反映一個(gè)國家生物高科技發(fā)展水平的衡量尺度。多糖最為突出而普遍的功能就是其對機(jī)體免疫功能的加強(qiáng)。多糖主要通過以下途徑而發(fā)揮促進(jìn)免疫功能:（1）提高巨噬細(xì)胞的吞噬能力，誘導(dǎo)白細(xì)胞介素和腫瘤壞死因子的生成，具有這種免疫促進(jìn)功能的多糖有香菇多糖、黑柄炭角多糖、裂裥菌多糖、細(xì)菌脂多糖、牛膝多糖、商陸多糖、樹舌多糖、海藻多糖等;（2）促進(jìn)t細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)其分泌白細(xì)胞介素，具有這類免疫促進(jìn)功能的多糖有中華獼猴桃多糖、豬苓多糖、人參多糖、刺五加多糖、枸杞子多糖、蕓芝多糖肽、香菇多糖、靈芝多糖、銀耳多糖、商陸多糖、黃芪多糖等;（3）促進(jìn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞活性，這類多糖有枸杞子多糖、黃芪多糖、刺五加多糖、鼠傷寒菌內(nèi)毒素多糖等;（4）提高b細(xì)胞活性，增加多種抗體的分泌，加強(qiáng)機(jī)體的體液免疫功能，這類多糖有銀耳多糖、香菇多糖、褐藻多糖、苜蓿多糖等;（5）通過不同途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng)，有些多糖是通過替代通路激活補(bǔ)體的，有些則是通過經(jīng)典途徑，這類多糖有酵母多糖、裂裥菌多糖、當(dāng)歸多糖、茯苓多糖、酸棗仁多糖、車前子多糖、細(xì)菌脂多糖、香菇多糖等。多糖對人類健康有舉足輕重的作用，它能控制細(xì)胞分裂和分化，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長與衰老。它還具有調(diào)節(jié)免疫的功能，是當(dāng)今已知的最佳的免疫增強(qiáng)劑、促進(jìn)劑和調(diào)節(jié)劑，在免疫障礙引起的疾病上用途廣泛，它不但能防止癌癥對免疫系統(tǒng)的嚴(yán)重?fù)p傷，而且能防治多種由于免疫缺損的疾病和慢性病毒性肝炎、反復(fù)呼吸道疾病、病毒性感冒和由耐藥細(xì)菌引起的久治不愈的結(jié)核病，臨床證明多糖還能顯著地防止經(jīng)鏈霉素一利福平治療后肺結(jié)核的復(fù)發(fā)。在生命科學(xué)研究領(lǐng)域里，糖生物學(xué)一直是該領(lǐng)域的研究前沿和熱點(diǎn)。國外近期的研究表明，參與細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)相互作用的主要細(xì)胞粘附分子絕大多數(shù)是糖綴合物，盡管目前對糖鏈在細(xì)胞識(shí)別和粘附分子中的作用仍未完全闡明，但生物體內(nèi)的這些細(xì)胞粘附分子的重要性和藥用潛力已展現(xiàn)出巨大的誘人前景。如1990年發(fā)現(xiàn)的E-Selectin，即血管內(nèi)皮細(xì)胞-白細(xì)胞粘附分子，能識(shí)別白細(xì)胞表面唾液酸化的四糖分子SLex,當(dāng)組織受到損傷或感染時(shí)，白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞粘附，然后沿壁滾動(dòng)穿過血管壁進(jìn)入受損組織以殺滅入侵的病原體。再如癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、病原體的感染等過程也是通過糖蛋白的介導(dǎo)，而糖鏈參與其識(shí)別和粘附。國外曾報(bào)道通過某些多肽或糖類化合物進(jìn)行阻斷實(shí)驗(yàn)性肺癌的轉(zhuǎn)移，取得了一些可喜進(jìn)展，當(dāng)然要達(dá)到臨床應(yīng)用尚有較大距離。國內(nèi)近20年來對大量中草藥來源的多糖及糖綴合物，如黃芪多糖、牛膝多糖、豬苓多糖以及枸杞子糖綴合物等近百種多糖進(jìn)行了化學(xué)和廣泛的活性研究，相繼報(bào)道了這些多糖及糖綴合物具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、降血糖等多方面的藥理作用，有的已在臨床應(yīng)用。１.2國內(nèi)(外)研究現(xiàn)狀及分析早在上世紀(jì)四十代，多糖就開始作為藥物，而到了六十年代，由于其作為廣泛的免疫促進(jìn)劑引起人們的極大興趣，開發(fā)多糖的保健食品與藥物也倍受重視。多糖不僅在許多方面具有藥用價(jià)值，而且作為藥物其毒性極少。對不同來源多糖的生理活性和提取純化的研究已取得了很大的成功，當(dāng)前國內(nèi)外正致力于活性多糖的作用機(jī)理和構(gòu)效關(guān)系的研究，并取得了一定進(jìn)展。近二十年來，由于分子生物學(xué)的發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識(shí)到糖及其復(fù)合物分子具有極其重要的生物功能，多糖與免疫功能的調(diào)節(jié)、細(xì)胞與細(xì)胞的識(shí)別、細(xì)胞間物質(zhì)的運(yùn)輸、癌癥的診斷與治療等，都有著密切的關(guān)系。多糖在醫(yī)藥上還是一種很好的佐劑。近年來又發(fā)現(xiàn)多糖的糖鏈在分子生物學(xué)中具有決定性作用。此外它還能控制細(xì)胞的分裂和分化、調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和衰老。多糖在食品工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)及石油工業(yè)上也有著廣泛的應(yīng)用。因此，在開展多糖資源的開發(fā)、多糖結(jié)構(gòu)的分析、多糖藥理作用等的研究方面，人們做了大量的工作。多糖是來自高等植物、動(dòng)物細(xì)胞膜、微生物細(xì)胞壁中的天然大分子物質(zhì)，是所有生命有機(jī)體的重要組成部分，并與維持生命所需的多種生理功能有關(guān)。但就其研究狀況而言，糖類盡管也取得了巨大的進(jìn)展，但與蛋白質(zhì)和核酸的飛躍式發(fā)展相比，顯得遠(yuǎn)遠(yuǎn)落伍。對多糖的研究，最早是在20世紀(jì)40年代，其中研究得較早且最多的，是從細(xì)菌中得到的各種莢膜多糖，它在醫(yī)藥上主要用于疫苗。但多糖作為廣譜免疫促進(jìn)劑而引起人們的極大重視則是在20世紀(jì)60年代。尤其是近二十年來，由于分子生物學(xué)的發(fā)展，人們逐漸認(rèn)識(shí)到糖及其復(fù)合物分子具有極其重要的生物功能，并且相繼多次召開了有關(guān)“糖生物學(xué)和糖工程”的專題會(huì)議，1984年，蘇聯(lián)人在荷蘭召開的第十二次國際碳水化合物討論會(huì)上報(bào)道了用全合成特定結(jié)構(gòu)的莢膜多糖作疫苗，受到與會(huì)者的極大興趣。爾后，有關(guān)真菌多糖的研究更為深入和廣泛，如酵母菌多糖、食用菌多糖，特別是食用菌多糖的研究，報(bào)道數(shù)量較高，其中以香菇多糖研究得較清楚。日本將香菇多糖、云芝多糖:ps—k投入市場之后，并取得了顯著的效益。1995年3月，亞洲分子生物學(xué)組織（ambo）還在日本舉辦了“糖生物學(xué)和糖工程”培訓(xùn)班，也就是說，“糖生物學(xué)的時(shí)代正在加速來臨”。多糖具有儲(chǔ)藏能量、結(jié)構(gòu)支持和抗原決定性等多種生物功能，多糖及糖結(jié)合物的分離，純化和組分測定及結(jié)構(gòu)分析有了長足進(jìn)展。同時(shí)，對多糖的生物學(xué)功能有了新的認(rèn)識(shí)。80年代以來，科學(xué)家們對植物多糖，特別是對中藥中的多糖研究產(chǎn)生了濃厚的興趣，至今已相繼報(bào)道了100多種具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒、抗感染、降血糖等多種生理活性的中藥多糖，有的已在臨床用于腫瘤、肝炎、心血管等疾病的輔助治療和康復(fù)，其中最重要的藥理作用當(dāng)推免疫促進(jìn)作用。已有的大量藥理和臨床應(yīng)用表明，這些功能確切的多糖，其原生藥大多屬于補(bǔ)益類中藥，如人參多糖、黃芪多糖的原生藥人參、黃芪均是知名的補(bǔ)氣中藥；當(dāng)歸多糖、阿膠多糖的原生藥當(dāng)歸、阿膠是最具傳統(tǒng)的補(bǔ)血中藥等等；還有牛膝多糖(Achyranthan,Abps)，近來的藥理研究和臨床應(yīng)用均表明其具有顯著的免疫增強(qiáng)作用，它的原生藥牛膝是具有“強(qiáng)筋骨、治腰膝酸麻”功效的傳統(tǒng)中藥，而這些功效無不與免疫功能有關(guān)。至今中藥免疫調(diào)節(jié)劑絕大多數(shù)是免疫促進(jìn)劑，而其有效成分為多糖或糖綴合物，包括糖肽、蛋白多糖等。我國研制的天然植物多糖提取技術(shù)——從多種中草藥才中提取活性多糖的純度已達(dá)98%以上，這是我國在生命科學(xué)的重要領(lǐng)域“活性多糖”的分離、純化，分子結(jié)構(gòu)確定及量效關(guān)系控制方面取得的重大突破，步入生命科學(xué)前沿達(dá)到世界領(lǐng)先水平。特別引起醫(yī)學(xué)界關(guān)注的是多糖類物質(zhì)能激活巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B細(xì)胞等，以加強(qiáng)抗體，達(dá)到抑制和消滅腫瘤細(xì)胞的效果。多糖還可促進(jìn)胰島素的分化，養(yǎng)活肝糖原的量，多糖被人體消化吸收，只需極少量的胰島素參與，絕不會(huì)加重胰島素的負(fù)擔(dān)。因此，多糖可防止糖尿病并發(fā)癥，1990年日本專門報(bào)道多糖可作為眼球晶體疾病并發(fā)癥的防治藥，可防治糖尿病引起的視網(wǎng)膜破裂；多糖也能明顯降低血脂、膽固醇、血壓。多糖所具有的活性和免疫性以及極少具有副作用，是理想的天然、安全、有效的藥品和保健食品，為人類健康展示了光明的領(lǐng)域，為此，科學(xué)家們稱21世紀(jì)為多糖世紀(jì)。目前全球至少有12種多糖分別用作抗腫瘤藥物正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。近年來又發(fā)現(xiàn)多糖的糖鏈在分子生物學(xué)中具有決定性作用。此外，多糖還能控制細(xì)胞的分裂和分化、調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和衰老。多糖在食品工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)及石油工業(yè)上也有著廣泛的應(yīng)用。因此，在開展多糖資源的開發(fā)、多糖結(jié)構(gòu)的分析、多糖藥理作用等的研究方面，人們做了大量的工作。目前，多糖的研究以日本、美國、德國、俄羅斯等國處于領(lǐng)先地位，我國的科學(xué)家們也做了不少工作。尤其是植物多糖方面，由于我國是中藥的起源之地，而糖類是中藥材中普遍存在的成分，在對各種中藥材的化學(xué)成分研究的過程中，人們都少不了對其中多糖的關(guān)注。當(dāng)前，國內(nèi)外正致力于活性多糖的作用機(jī)理和構(gòu)效關(guān)系的研究。隨著人們對環(huán)境保護(hù)意識(shí)的增強(qiáng)，回歸自然已經(jīng)成為人們?nèi)粘Ｉ钪械囊环N追求。亞健康狀態(tài)概念的提出，國家對醫(yī)療制度改革政策的出臺(tái)以及生活水平的提高，促進(jìn)了人們在觀念上的轉(zhuǎn)變，即由過去以治病為主的觀念逐漸向防病為主的觀念轉(zhuǎn)變，這為天然多糖的開發(fā)應(yīng)用提供了廣闊的前景。中藥是我國的醫(yī)藥寶庫，中藥現(xiàn)代化是中藥發(fā)展的必由之路，而天然多糖的研究無論是在藥學(xué)方面還是在藥理學(xué)方面都已取得了明顯的進(jìn)步，它的深入研究和開發(fā)將成為中藥現(xiàn)代化的一個(gè)典范。2實(shí)驗(yàn)部分2.1實(shí)驗(yàn)原料、儀器和藥品2.1.1實(shí)驗(yàn)原料山梔子（新疆石河子市中藥店）2.1.2實(shí)驗(yàn)儀器722N可見分光光度計(jì)、粉碎機(jī)、電熱套、萬分之一天平、循環(huán)水式多用真空泵、電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、微波提取器（松下電器）、過濾裝置、各種容量瓶、量器、各種移液管(各種規(guī)格)、分液漏斗、三角燒瓶、過濾裝置等。2.1.3實(shí)驗(yàn)藥品葡萄糖(AR,105℃干燥至恒重)、苯酚（RA）、濃硫酸（RA）乙醇（95%）、石油醚、乙酸乙酯、丙酮2.2實(shí)驗(yàn)方法和步驟2.2.1微波提取條件的確定2.2.1.1微波時(shí)間對梔子多糖提取的影響控制電流表讀數(shù)在60-80mA,水與梔子的液固比為10:1,微波一次，應(yīng)用不同的微波處理時(shí)間，對梔子多糖提取進(jìn)行研究，結(jié)果見圖1圖SEQ圖表\*ARABIC1微波加熱時(shí)間與梔子多糖溶液吸光度的關(guān)系由圖1可見，微波加熱時(shí)間≤21min時(shí)，隨著微波加熱時(shí)間的延長，梔子多糖溶液的吸光度增加；但是加熱時(shí)間≥21min后，隨著加熱時(shí)間的延長，梔子多糖的吸光度下降。這可能是較長時(shí)間的微波處理產(chǎn)生過高溫度，引起多糖的破壞。由吸光度可以看出，微波加熱21min梔子多糖含量較高。2.2.1.2微波次數(shù)對梔子多糖提取的影響控制電流表讀數(shù)在60-80mA,水與梔子的液固比為10:1，微波加熱時(shí)間為20min,應(yīng)用微波處理不同的次數(shù)，對梔子多糖提取進(jìn)行研究，結(jié)果見圖2。圖SEQ圖表\*ARABIC2微波次數(shù)與梔子多糖溶液吸光度的關(guān)系由圖2可以看出，隨著微波次數(shù)的增加，梔子多糖溶液的吸光度逐漸增加，但微波3次后就增加的不明顯了。綜合考慮成本，微波次數(shù)最好應(yīng)在2-3次。2.2.1.3水與梔子的液固重量比對梔子多糖提取的影響控制電流表讀數(shù)在60-80mA，微波加熱時(shí)間為20min，微波2次，研究不同的液固重量比對梔子多糖提取的影響，結(jié)果見圖3。圖SEQ圖表\*ARABIC3液固重量比與梔子多糖溶液吸光度的關(guān)系由圖3可以看出，在一定范圍內(nèi)，液固重量比越大，梔子多糖溶液的吸光度就越大，液固重量比在≥25:1后，增大不明顯。綜合考慮成本，液固重量比在以25:1-30:1為宜。2.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:精密稱取干燥恒重葡萄糖25.2mg，加適量水溶解，轉(zhuǎn)移至250ml容量瓶中，加水至刻度搖勻，配成為100.8μg/ml標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液備用。5%苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制取苯酚100g，加鋁片0.1g和NaHCO30.05g,蒸餾，182℃出現(xiàn)大量餾分。快速稱取7.5g餾分，加適量水配制成5%的苯酚溶液，置于深色瓶中放入冰箱內(nèi)備用。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備準(zhǔn)確量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置于干燥的大試管中，分別加水至1ml，再分別加入5%的苯酚1ml，搖勻，然后加濃H2SO45.0ml，充分搖勻，室溫放置30min至常溫，在490nm處測其最大吸光度值。序號(hào)1234567V(ml)0.10.20.30.40.50.60.7C(μg/ml)10.0820.1630.2440.3250.4060.4870.56A0.0780.1630.2450.2890.3650.4380.547數(shù)據(jù)處理得回歸方程：A=0.0074C+0.0069(r=0.9915)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線圖2.2.3換算因素的測定梔子粉碎后，稱取100g，置于錐形瓶中，依次用250ml石油醚、乙醚和80％乙醇超聲提取兩次，反應(yīng)時(shí)間各20min，減壓抽濾、殘?jiān)鼡]干溶劑后，繼續(xù)以水超聲提取兩次，40min／次，減壓過濾，合并濾液，將濾液減壓濃縮至一半體積，加入0.1%活性炭，脫色兩次，過濾。濾液加4倍量的95%乙醇，放置過夜，抽濾后的沉淀以100ml水溶解，重復(fù)沉淀一次，過濾，殘?jiān)靡颐?、無水乙醇反復(fù)洗滌。60℃干燥，即得梔子多糖。精確稱取60℃干燥恒重的梔子多糖20.00μg，水溶解后定容到100ml容量瓶中，搖勻做為多糖儲(chǔ)備液。精確量取多糖儲(chǔ)備液0.2ml，加水至1ml。按測定標(biāo)準(zhǔn)曲線同樣的方法測定其吸光度A=0.295按下式計(jì)算換算因素：f=W/CD式中，W為多糖重量（μg），C為多糖液中葡萄糖的濃度（μg/ml），D為多糖的稀釋因素?fù)Q算可得f=1.027。2.2.4正交實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)表1因素水平列表因素A微波時(shí)間（min）B微波次數(shù)/次C固液比（g/ml）11511:2022021:2532531:30根據(jù)此正交實(shí)驗(yàn)將對梔子中多糖的提取工藝進(jìn)行研究。2.2.5梔子多糖的提取稱取一定量的粉碎的梔子，根據(jù)前面所設(shè)計(jì)的正交實(shí)驗(yàn)，設(shè)計(jì)如表2中的九組實(shí)驗(yàn)。準(zhǔn)確稱取9份一定量的梔子粉，置于燒瓶中，用95%的乙醇浸泡，編號(hào)1、2、3、4、5、6、7、8、9。分別放入微波提取器，用一定量的95%乙醇回流15min,控制電流60-80mA。抽濾，提取器再用一定量乙醇回流15min,控制電流60-80mA。抽濾，充分洗滌，濾液移至500ml容量瓶中，定容、搖勻。再稀釋一定倍數(shù)，以測標(biāo)準(zhǔn)曲線同樣的方法測其吸光度A，按下式計(jì)算多糖含量：多糖含量（%）=CDf/W×100式中C為樣品溶液中葡萄糖的濃度(μg/ml),D為多糖的稀釋因素,f為換算因素,W為樣品的重量(μg)。表2(L933)正交實(shí)驗(yàn)最佳條件列表實(shí)驗(yàn)號(hào)ABC多糖含量（%）11115.6721226.2531336.9142126.7252237.6162316.0373135.7283215.6593325.64K118.8318.1117.35K220.3619.5818.61K317.0118.5820.24κ16.286.045.78κ26.796.536.20κ35.676.196.74極差值1.120.490.96因素主次ⅠⅢⅡ較優(yōu)水平6.796.536.743結(jié)果與討論梔子多糖微波輔助提取最佳提取工藝組合為：A2B2C3，即微波輔助時(shí)間為20min,微波次數(shù)為2次,固液比為1:30。微波提取中對梔子多糖含量影響次序?yàn)锳>C>B。各因素間影響差異無顯著性。中草藥的提取有許多種方法，但常用的提取方法(如煎煮法、回流法、浸漬法、滲漉法等)在保留有效成分，去除無效成分方面，存在著有效成分損失大、周期長、工序多、提取率不高等缺點(diǎn)。近10年來，在中藥提取方面出現(xiàn)了許多新技術(shù)、新方法，這些新技術(shù)和方法的應(yīng)用，使得中草藥提取既符合傳統(tǒng)的中醫(yī)理論，又能達(dá)到提高有效成分的收率和純度的目的。如：超臨界流體萃取技術(shù)、超聲提取技術(shù)、微波萃取技術(shù)

、

酶法、半仿生提取法

、破碎提取法等等。使用微波萃取技術(shù)主要是由于微波萃取工藝與傳統(tǒng)萃取的工藝比較有以下優(yōu)點(diǎn)：

1、可以選擇性的將能量作用于物質(zhì)的有效成份上，提高產(chǎn)品純度。

2、設(shè)備體積小，造價(jià)低廉。

3、能耗量低，僅為家用微波爐的6倍電耗。

4、減少操作步驟，縮短生產(chǎn)時(shí)間。

5、減少廢棄物的排放量。

6、加熱、控制能量的輸出迅速。

目前，微波萃取在對農(nóng)產(chǎn)品加工，中藥提純，香料萃取等已經(jīng)取得巨大的經(jīng)濟(jì)效益。可以毫不夸張的說，微波提取（萃?。閺V大化工、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)的高新技術(shù)企業(yè)及科技工作者開辟出廣闊的潛在市場。參考文獻(xiàn)[1]張曉靜，劉會(huì)東,植物多糖提取分離及藥理作用的研究進(jìn)展［Ｊ］,時(shí)珍國醫(yī)國藥,２００３,１４（８）:４９５．[2]王晨明,植物多糖的藥理作用［Ｊ］．中國藥業(yè),２００２，１１（１１）:７３－７４．[3]陰健,郭力弓,中藥現(xiàn)代研究及臨床應(yīng)用[M].北京:學(xué)苑出版社,1993:471-471.[4]郭霖,王桂云,王迪等,茜草科藥用植物藥理作用研究概述[J],中醫(yī)藥信息,1994,11(1):37-37.[5]楊基森,張永萍,謝珊,近年來中藥提取工藝研究概論[Ｊ].貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1999,21