生物樣品的制備 （溶劑萃取法自動化固相萃取技術固相微萃取技術微萃取技術）

（三）自動化固相萃取技術（自動化SPE技術）優(yōu)點：①節(jié)約時間，400個/hr，確保了較高的工作效率；②減少了操作誤差，提高準確度和精密度；③安全性好，可避免人對有毒樣品的接觸。缺點：①殘留物對測定的影響；②在采用連續(xù)測定時，要考慮樣品理化性質(zhì)的穩(wěn)定性對測定的影響。

三、溶劑萃取法（四）固相微萃取法（SPME）SPME裝置簡單，類似于氣相色譜微量注射器，其基本裝置如圖。

1.壓桿2.簡體3.壓桿卡持螺釘4.Z形槽5.簡體視窗6.調(diào)節(jié)針頭長度的定位器7.拉伸彈簧8.密封隔膜9.注射針管10.熔融石英纖維11.熔融石英纖維

三、溶劑萃取法固相微萃取方法分為萃取過程和解吸過程兩步：①萃取過程—具有吸附涂層的萃取纖維暴露在樣品中進行萃?。虎诮馕^程—將已完成萃取過程的萃取器針頭插入氣相色譜進樣裝置的氣化室內(nèi)，使萃取纖維暴露在高溫載氣中，并使萃取物不斷地被解吸下來，進入后序的氣相色譜分析。（四）固相微萃取法（SPME）

三、溶劑萃取法SPME操作方法SPME的特點：①集采樣、萃取、濃集、進樣于一體，避免引入多步操作誤差；②無需萃取溶劑，樣品量小、空白值??；③萃取選擇性高；④纖維涂層（萃取頭）可重復用上百次；⑤適用于分析揮發(fā)性和非揮發(fā)性物質(zhì)；⑥與GC及HPLC、MS等聯(lián)用，自動化分析。 目前SPME使用的固相涂層種類限制了它的應用，但該法極具前途。（四）固相微萃取法（SPME）

三、溶劑萃取法6.微透析技術（Microdialysis,MD）

——膜分離技術利用膜透析原理，微量地對細胞液進行流動性連續(xù)采樣的新型采樣和色譜樣品制備技術。微透析技術可以用來研究生物體在活動時體液組成的一些變化。微透析系統(tǒng)組成如圖。

三、溶劑萃取法MD的原理:

用與細胞間液非常接近的生理溶液以慢速度（0.5~5L/min）灌注由膜制成的微透析探針（置于需要取樣的部位），膜內(nèi)外待測組分的濃度梯度使其由膜外（生物體內(nèi)）進入膜內(nèi)（探針內(nèi)），隨灌注液（透析液）流出體外、進入儀器分析系統(tǒng)—如毛細管電泳、微柱HPLC。

5/13/2023體內(nèi)藥物分析66.微透析技術（Microdialysis,MD）

三、溶劑萃取法微透析技術是對清醒、自由活動動物的在體取樣，具有以下的顯著特點：①時間分辨性——可連續(xù)跟蹤體內(nèi)多種化合物量隨時間的變化。

②空間分辨性——取樣真實代表取樣位點目標化合物的濃度。③同時取樣——不同部位同時植入探針研究目標化合物的體內(nèi)分布。

6.微透析技術（Microdialysis,MD）

三、溶劑萃取法微透析技術是對清醒、自由活動動物的在體取樣，具有以下的顯著特點：④目標分辨性——提供不含蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的游離態(tài)小分子化合物，對藥物研究具有重要意義。⑤不需處理——因樣品不含蛋白質(zhì)、酶等大分子物質(zhì)，可

不經(jīng)預處理直接用于測定。6.微透析技術（Microdialysis,MD）

三、溶劑萃取法MD的應用：藥物分布研究——勿需處死動物，可獲得完整的濃度-時間資料藥物代謝研究——可獲得藥物代謝中間過程的信息藥代動力學研究——勿需采血，避免因血容量減少對藥物分布及消除的影響，藥動學資料更準確分析方法——色譜、GC