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文檔簡介

《生物產(chǎn)品的分析與檢驗》有機(jī)酸的分析與檢驗-----檸檬酸含量的測定生物技術(shù)及應(yīng)用專業(yè)教學(xué)資源庫測定方法二、褪色光度法測定檸檬酸含量（一）測定原理

在HAc-NH4Ac介質(zhì)中，鐵（III）-磺基水楊酸生成紫紅色配合物，再向該溶液中加入一定量的檸檬酸溶液，該配合物顏色退至橙紅色。在470nm波長處，其吸光度的減少與檸檬酸的含量在一定條件下成正比，從而可求得檸檬酸的含量。（二）儀器設(shè)備與試劑

主要儀器設(shè)備紫外-可見分光光度計、酸度計試劑10g/L的檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液1g/L的檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.01mol/L的鐵（III）溶液0.01mol/L的磺基水楊酸溶液HAc-NH4Ac緩沖溶液0.025mol/L的HCIO4溶液（三）操作步驟1.磺基水楊酸鐵配合物吸光度的測定往25mL比色管中依次加入1.0mL鐵（III）溶液，4.0mL磺基水楊酸溶液，4.0mLHAc-NH4Ac緩沖溶液，加水定容至刻度。10min后，在470nm處用1.0cm比色皿以蒸餾水作參比測得吸光度A0（三）操作步驟2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

另取6支25mL比色管，同（1）操作，僅在定容前分別加入0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別測得吸光值A(chǔ)，計算△A=A-A0，以檸檬酸的含量mg/(25mL)為橫坐標(biāo)，△A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（三）操作步驟3.樣品的測定

精確稱取0.1g樣品，用水溶液定容至100mL，另取1支25mL比色管，同（1）操作，僅在定容前加入0.5mL樣品溶液，測得吸光度Ax，計算：△Ax=Ax-A0。（四）結(jié)果記錄與計算1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制記錄表溶液中檸檬酸的含量/[mg/(25mL)]吸光度A參比吸光度A0△A=A0-A0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

（四）結(jié)果記錄與計算（四）結(jié)果記錄與計算式中：w---樣品中檸檬酸的含量，%m1--從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得25mL樣品溶液中檸檬酸的含量，mg；m--待測樣品質(zhì)量，mg；10-3---將mg換算為g的系數(shù)；100---配制的樣品溶液

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