免疫組織技術(shù)化學(xué)-概述

病理檢驗(yàn)技術(shù)

免疫組織化學(xué)技術(shù)概述免疫組織化學(xué)技術(shù)

概述

免疫組織化學(xué)技術(shù)是在常規(guī)HE染色和組織化學(xué)染色的基礎(chǔ)上，根據(jù)抗原抗體反應(yīng)原理而發(fā)展起來(lái)的染色技術(shù)，廣泛應(yīng)用于病理學(xué)研究和臨床病理診斷，是臨床病理診斷中重要的輔助技術(shù)之一，對(duì)于判斷腫瘤的來(lái)源、分類(lèi)、預(yù)后和鑒別診斷以及指導(dǎo)和評(píng)估臨床治療起著重要作用。許多在常規(guī)HE染色和組織化學(xué)染色難以診斷的疾病，通過(guò)應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)大部分可得到確診。故免疫組織化學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，有助于提高臨床病理診斷水平。概念免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistrytechnique)又稱(chēng)免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistrytechnique)，簡(jiǎn)稱(chēng)免疫組化,是把組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)、生物化學(xué)和免疫學(xué)結(jié)合起來(lái)的一門(mén)技術(shù),利用免疫學(xué)反應(yīng)和化學(xué)反應(yīng)在組織切片或細(xì)胞涂片上原位顯示組織細(xì)胞中的抗原以及抗原的分布和含量,以了解相關(guān)抗原在組織和細(xì)胞中的變化及其意義，即將形態(tài)和功能結(jié)合起來(lái)研究組織細(xì)胞的生理和病理改變及其機(jī)制。免疫組織化學(xué)技術(shù)

一、抗原1.抗原(antigen,Ag)抗原是指一種引起免疫反應(yīng)的物質(zhì),即能刺激人或動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體或致敏淋巴細(xì)胞(具有抗原性),并且能夠與由它刺激所產(chǎn)生的這些產(chǎn)物在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)(具有反應(yīng)原性)。完全抗原的基本性質(zhì)是具有免疫原性和反應(yīng)原性；只具有反應(yīng)原性而沒(méi)有免疫原性的物質(zhì),稱(chēng)為半抗原。正常和病變的組織細(xì)胞中存在各種不同的抗原,在臨床病理診斷中用特異性的抗體通過(guò)免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)這些相應(yīng)的抗原是否表達(dá),通過(guò)觀察檢測(cè)結(jié)果和分析比較來(lái)輔助病理診斷。免疫組織化學(xué)技術(shù)

具備以上兩種特性者免疫原性

lmmunogenicity抗原性antigenicity完全抗原半抗原只具有反應(yīng)原性而無(wú)免疫原性者TT蛋白質(zhì)載體特性免疫組織化學(xué)技術(shù)

一、抗原2.抗原決定簇(antigenicdeterminant)抗原決定簇是抗原表面特有的具有活性的分子結(jié)構(gòu),與相應(yīng)抗體結(jié)合引起免疫反應(yīng),是抗原抗體特異性結(jié)合的基礎(chǔ)。一種抗原可以有多個(gè)抗原決定簇,抗原決定簇多少,決定與抗體結(jié)合的多少。充分暴露組織細(xì)胞的抗原決定簇是提高抗原抗體結(jié)合敏感性的重要手段之一。免疫組織化學(xué)技術(shù)

二、抗體1.抗體(antibody)抗體是指人或動(dòng)物機(jī)體在抗原物質(zhì)誘導(dǎo)下產(chǎn)生的,并能夠與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合發(fā)生免疫反應(yīng)的免疫球蛋白。所有抗體都是免疫球蛋白,但并非所有的免疫球蛋白都是抗體。每種抗體僅識(shí)別特定的目標(biāo)抗原。免疫組織化學(xué)技術(shù)

2.抗體的種類(lèi)在臨床病理診斷中,免疫組織化學(xué)技術(shù)主要是用特異性抗體在組織切片或細(xì)胞涂片中檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原,這些特異性抗體直接與組織細(xì)胞中的抗原結(jié)合,稱(chēng)為第一抗體,都是人工制備和商品化的抗體。雖然很多抗體都能自己制備和標(biāo)記,但其特異性和敏感性常引起懷疑而很少應(yīng)用在病理診斷中,通常采用的是商品化抗體。免疫組織化學(xué)技術(shù)

克隆(clone)是指由一個(gè)細(xì)胞分裂增殖形成具有相同遺傳特征的細(xì)胞群。常用的商品化抗體單克隆抗體多克隆抗體免疫組織化學(xué)技術(shù)

免疫組織化學(xué)技術(shù)

單克隆抗體多克隆抗體

3.免疫組化檢測(cè)系統(tǒng)為了提高檢測(cè)抗原的敏感性,在特異性抗體與組織細(xì)胞中的抗原結(jié)合后,往往再加入另外一種抗體稱(chēng)為第二抗體(二抗),與抗原-抗體結(jié)合物中的第一抗體結(jié)合,接著也可以繼續(xù)加入第三種抗體(三抗)與二抗結(jié)合,以進(jìn)一步放大抗體與抗原結(jié)合物,達(dá)到提高檢測(cè)抗原敏感性的目的。免疫組化檢測(cè)系統(tǒng)(試劑盒)就是配有這些二抗、三抗試劑和其他一些輔助試劑的試劑組合。免疫組織化學(xué)技術(shù)

三、免疫組織化學(xué)技術(shù)的基本概念免疫組織化學(xué)技術(shù)是利用免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)的原理,用標(biāo)記的特異性抗體(或抗原)對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原(或抗體)進(jìn)行檢測(cè)的一種技術(shù),借助光學(xué)顯微鏡(免疫酶組織化學(xué)技術(shù))、熒光顯微鏡(免疫熒光組織化學(xué)技術(shù))和電子顯微鏡(免疫電鏡技術(shù))可觀察組織細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記物顯示出的特異性的抗原-抗體結(jié)合物即陽(yáng)性反應(yīng)。在臨床病理診斷中應(yīng)用的免疫組織化學(xué)技術(shù)主要是免疫酶組織化學(xué)技術(shù)和免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)。免疫組織化學(xué)技術(shù)

四、免疫組織化學(xué)技術(shù)的特點(diǎn)免疫組織化學(xué)技術(shù)

1.特異性強(qiáng)2.敏感性高3.定性、定位、定量準(zhǔn)確4.方法相同5.應(yīng)用范圍廣

五、常用的免疫組織化學(xué)技術(shù)及其機(jī)制在臨床病理診斷中應(yīng)用的免疫組織化學(xué)技術(shù)主要有以下兩種：1.免疫酶組織化學(xué)技術(shù)通過(guò)酶標(biāo)記抗體或酶與抗體結(jié)合→與相應(yīng)組織抗原結(jié)合→通過(guò)酶組化反應(yīng)來(lái)顯色定位→顯微鏡觀察。2.免疫熒光技術(shù)將抗體標(biāo)