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文檔簡介

第十一章基因芯片技術生物芯片（biochip）概念：指采用光導原位合成或微量點樣等方法，將大量生物大分子有序地固化于支持物表面，組成密集二維分子排列，然后與已標記的待測生物樣品中靶分子雜交，通過特定的儀器對雜交信號的強度進行快速、并行、高效地檢測分析，從而判斷樣品中靶分子的數量。由于常用玻片/硅片作為固相支持物，且在制備過程模擬計算機芯片的制備技術，所以稱之為生物芯片技術。特點：高通量、微型化和自動化。

根據芯片上固定的探針不同

組織芯片：組織切片基因芯片：寡核苷酸探針或DNA蛋白質芯片：肽或蛋白細胞芯片：細胞元件型微陣列芯片通道型微陣列芯片生物傳感芯片根據芯片的原理不同生物芯片的分類：第一節(jié)基因芯片概述一、基因芯片的概念

是指通過寡核苷酸陣列原位合成或顯微打印,將數以萬計的DNA探針片段有序地固化于支持物上,產生二維DNA探針陣列,然后與標記的樣品進行雜交。通過檢測雜交信號來實現對生物樣品的快速、高效檢測或診斷。由于固定于支持物上的每個分子的位置及序列為已知,當熒光標記的靶分子與芯片上的探針分子結合后,可通過激光共聚焦熒光掃描或電荷偶聯攝影相機對熒光信號的強度進行檢測,從而對雜交結果進行定量分析。二、基因芯片技術的原理1.基因芯片技術的基本原理：-----反向斑點雜交(reversedot-blothybridization，RDB),即在固相支持物上固定已知序列核苷酸,和待檢測樣品標記后進行雜交,根據檢測信號的有無和強弱,確定樣品中該已知序列片段的有無及含量高低。2.雜交信號檢測：信號的強弱不同：樣品與探針嚴格配對的雜交分子----最強不完全雜交的雙鏈----弱不能雜交的雙鏈----無信號通過激光共聚焦顯微鏡、激光掃描儀或熒光顯微鏡等檢測熒光信號,由計算機記錄下來,經過專門設計的軟件對每個熒光信號的強度進行定量分析、處理,并與探針陣列位點進行比較,即可得到待測樣品的遺傳信息。第二節(jié)基因芯片技術的基本步驟①基因芯片設計：提出問題，確定研究目標，選擇一組特定的基因對象。②基因芯片制備：設計探針序列，確定探針及探針在芯片上的分布，制備基因芯片。③靶基因制備：將樣品進行特定的生物處理，獲取其中DNA、RNA等信息分子并加以標記。④雜交：選擇合適的反應條件使生物分子間反應處于最佳狀況中，減少生物分子之間的錯配比率，從而獲取最能反映生物本質的信號。⑤雜交信號檢測和結果分析：目前最常用的芯片信號檢測方法是將芯片置入芯片掃描儀中，通過采集各反應點的熒光強弱和熒光位置，經相關軟件分析圖像，即可以獲得有關生物信息。第三節(jié)

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