藥物雜質(zhì)研究方法的建立及其應(yīng)用詳解演示文稿

藥物雜質(zhì)研究方法的建立及其應(yīng)用詳解演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)（優(yōu)選）藥物雜質(zhì)研究方法的建立及其應(yīng)用目前二頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)一雜質(zhì)研究概述雜質(zhì)研究是藥品研發(fā)的一項(xiàng)重要內(nèi)容，貫穿于藥品研發(fā)的整個(gè)過(guò)程，與工藝研究、質(zhì)量研究、穩(wěn)定性研究、藥理毒理及臨床研究間存在著密切關(guān)系，直接關(guān)系到上市藥品的質(zhì)量及安全性。它包括選擇合適的分析方法、準(zhǔn)確的分辨與測(cè)定雜質(zhì)的含量并綜合藥學(xué)、毒理及臨床研究的結(jié)果確定雜質(zhì)的合理限度。毒性雜質(zhì)—安全性普通雜質(zhì)，控制純度—有效性雜質(zhì)產(chǎn)生的原因—優(yōu)化工藝目前三頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)BP80：提出有關(guān)物質(zhì)（relatedsubstance）概念BP98：首次收載有關(guān)物質(zhì)及殘留溶劑檢查通則增加了雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則各論項(xiàng)下增加已知雜質(zhì)限度，并提供雜質(zhì)名稱，分子式，分子結(jié)構(gòu)。純度控制雜質(zhì)控制雜質(zhì)譜控制目前四頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)我國(guó)雜質(zhì)研究現(xiàn)狀研究基礎(chǔ)薄弱雜質(zhì)來(lái)源不清

雜質(zhì)種類，數(shù)量，來(lái)源，產(chǎn)生或引入過(guò)程以及降解途徑雜質(zhì)檢查方法缺乏針對(duì)性制定的限度依據(jù)不充分，未結(jié)合雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則要求及實(shí)測(cè)結(jié)果制定單個(gè)雜質(zhì)的限度。國(guó)內(nèi)有關(guān)物質(zhì)限度多采用自身對(duì)照法，僅限定單個(gè)雜質(zhì)和總雜質(zhì)。這種方法盡管對(duì)相對(duì)控制藥品的質(zhì)量起到了積極的作用，但與ICH的要求還有差距，并且對(duì)于控制復(fù)方制劑中的有關(guān)物質(zhì)則可能存在很大的風(fēng)險(xiǎn)。雜質(zhì)檢查結(jié)果難于評(píng)價(jià)

未與原發(fā)廠藥品進(jìn)行雜質(zhì)種類和含量的比較研究與分析目前五頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)實(shí)例1奧沙利鉑

奧沙利鉑屬于第三代鉑類抗腫瘤藥,由賽諾菲-安萬(wàn)特公司研發(fā)。1996年4月，法國(guó)批準(zhǔn)奧沙利鉑作為轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌二線治療藥，1998年4月作為一線治療藥。美國(guó)FDA于2004年批準(zhǔn)奧沙利鉑注射液與氟尿嘧啶/葉酸一起輸注聯(lián)合用藥治療晚期結(jié)腸癌或直腸癌。目前六頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)奧沙利鉑國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)奧沙利鉑WS1-(X-104)-2003Z注射用奧沙利鉑WS1-(X-090)-2003Z奧沙利鉑甘露醇注射液YBH38062005有關(guān)物質(zhì)甲醇-水=10：90甲醇-水=10：90甲醇-水=7：93檢測(cè)波長(zhǎng)250nm檢測(cè)波長(zhǎng)250nm檢測(cè)波長(zhǎng)249nm雜質(zhì)總和不得過(guò)1.0%雜質(zhì)總和不得過(guò)1.0%雜質(zhì)總和不得過(guò)1.0%左旋異構(gòu)體甲醇-乙醇=7：3無(wú)甲醇-乙醇=7：3檢測(cè)波長(zhǎng)250nm檢測(cè)波長(zhǎng)250nm不得過(guò)0.5%不得過(guò)0.5%Ag無(wú)無(wú)無(wú)目前七頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)EP6.0流動(dòng)相檢測(cè)波長(zhǎng)限度雜質(zhì)A乙腈：溶液（10ml320g/L四丁基氫氧化銨溶液，加1.36g磷酸二氫鉀，用水稀釋至1000ml，用磷酸調(diào)pH至6.0）=20：80。205nm0.1%雜質(zhì)B乙腈：溶液（1.36g磷酸二氫鉀和1g庚烷磺酸鈉溶解與1000ml水中，用磷酸調(diào)pH至3.0±0.05）=20：80215nm0.1%雜質(zhì)C溶液：乙腈（取0.6ml稀磷酸溶液，用水稀釋至1000ml，用氫氧化鈉溶液或磷酸調(diào)pH至3.0±0.05）=99：1210nm0.1%單一雜質(zhì)0.1%其他雜質(zhì)總和0.1%雜質(zhì)總和0.3%異構(gòu)體乙醇：甲醇=3：7（V/V）254nm0.1%Ag原子吸收5ppm目前八頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)樣品雜質(zhì)A雜質(zhì)C其他雜質(zhì)個(gè)數(shù)EPChPEPChPEPChP1檢出/檢出/5/2檢出/檢出/313檢出/檢出檢出314檢出/檢出/515檢出/檢出檢出616檢出/檢出檢出617檢出/檢出檢出31關(guān)于注射用奧沙利鉑有關(guān)物質(zhì)檢查方法的探討傅萍,蘭婉玲,張蕾；藥物分析雜志ChinJPharmAnal2009,29(11)目前九頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)問(wèn)題：簡(jiǎn)單地套用含量測(cè)定的色譜條件，將主藥的最大吸收波長(zhǎng)確定為檢測(cè)波長(zhǎng)，造成對(duì)雜質(zhì)含量的低估甚至漏檢，不能反映產(chǎn)品的真實(shí)質(zhì)量。目前十頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)二雜質(zhì)定義、分類2.1雜質(zhì)的定義任何影響藥品純度的物質(zhì)藥品雜質(zhì)分析指導(dǎo)原則藥物中存在的化學(xué)結(jié)構(gòu)與該藥物不一致的任何成分。ICHQ3A（R1)1)有毒副作用的物質(zhì)2)

本身無(wú)毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)3)

本身無(wú)毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)目前十一頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的雜質(zhì)按照國(guó)家有關(guān)藥品監(jiān)督管理部門依法審查批準(zhǔn)的規(guī)定工藝和規(guī)定原輔料生產(chǎn)的藥品中，由其生產(chǎn)工藝或原料帶入的雜質(zhì)，或在貯存過(guò)程中產(chǎn)生的雜質(zhì)。不包括：1）變更生產(chǎn)工藝和原輔料2）摻入或污染的外來(lái)物質(zhì)目前十二頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)理化性質(zhì)：有機(jī)雜質(zhì)、無(wú)機(jī)雜質(zhì)、殘留溶劑。來(lái)源：工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、其他雜質(zhì)和外來(lái)物質(zhì)等。按毒性：毒性雜質(zhì)和普通雜質(zhì)等。按結(jié)構(gòu)：幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體、其他甾體、其他生物堿等。2.2雜質(zhì)分類目前十三頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)三雜質(zhì)研究的主要內(nèi)容

原則：結(jié)合在研產(chǎn)品具體的工藝以及產(chǎn)品的特點(diǎn)開(kāi)展研究。格列美脲（國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS1-(X-054)-2004Z）有關(guān)物質(zhì)：雜質(zhì)1:4-[2-[3-乙基-4-甲基-2-氧-3-吡咯啉-1-甲酰胺基]乙基]苯磺酰胺甲酸乙酯雜質(zhì)2:4-[2-[3-乙基-4-甲基-2-氧-3-吡咯啉-1-甲酰胺基]乙基]苯磺酰胺。BP2008及USP31均未考察雜質(zhì)1，而是……甲酸甲酯，經(jīng)檢索，該雜質(zhì)與合成工藝有關(guān)，國(guó)內(nèi)合成中間體為……甲酸乙酯,故雜質(zhì)1設(shè)置合理。目前十四頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)雜質(zhì)譜分析結(jié)合生產(chǎn)工藝及產(chǎn)品特點(diǎn)分析產(chǎn)品中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)，對(duì)產(chǎn)品中雜質(zhì)的來(lái)源及結(jié)構(gòu)情況有較為全面的了解建立合適的分析方法在雜質(zhì)譜分析的基礎(chǔ)上，有針對(duì)性地選擇合適的分析方法，并對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證。制定合理的限度綜合藥學(xué)、藥理毒理及臨床研究結(jié)果確定合理的雜質(zhì)限度，保證藥品的質(zhì)量及安全性。目前十五頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.1雜質(zhì)譜的分析

ImpurityProfile（雜質(zhì)譜）:

Adescriptionoftheidentifiedandunidentifiedimpuritiespresentinadrugsubstance.

對(duì)存在于藥品中所有已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì)的總的描述。目前十六頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)A原料雜質(zhì)譜分析（1）分析起始原料引入的雜質(zhì)實(shí)例1：氟尿嘧啶系氟胞嘧啶合成的起始原料或中間體中國(guó)藥典（2010）采用HPLC法對(duì)氟尿嘧啶進(jìn)行控制目前十七頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)實(shí)例2奧沙利鉑的合成中，草酸作為反應(yīng)物EP6.0和BP2009均對(duì)其進(jìn)行了控制。目前十八頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)（2）反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物實(shí)例3奧沙利鉑合成過(guò)程中產(chǎn)生的雜質(zhì)目前十九頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)

分析藥物中的不穩(wěn)定基團(tuán)和活潑基團(tuán),初步推測(cè)藥物的降解途徑和降解產(chǎn)物。不穩(wěn)定結(jié)構(gòu):酯鍵(包括內(nèi)酯)酰胺鍵(包括內(nèi)酰胺)季銨鍵活潑基團(tuán):酚羥基噻吩基吡啶基醛基（3）降解產(chǎn)物目前二十頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)

依那普利的結(jié)構(gòu)中含有羧酸乙酯基，該基團(tuán)易發(fā)生水解反應(yīng)，生成羧基，即產(chǎn)生依那普利拉。依那普利的結(jié)構(gòu)中含有羧基，同時(shí)還含有氨基，它們易發(fā)生酰化反應(yīng)生成內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)，即產(chǎn)生依那普利二酮哌嗪。實(shí)例4依那普利降解產(chǎn)物目前二十一頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)B制劑中雜質(zhì)譜分析原料引入的雜質(zhì)

除降解產(chǎn)物及毒性雜質(zhì)外，原料藥中控制的雜質(zhì)，制劑中一般不再控制。制劑制備過(guò)程產(chǎn)生的雜質(zhì)考察制劑制備前后雜質(zhì)情況的變化原輔料配伍作用產(chǎn)生的雜質(zhì)

原料與輔料復(fù)方制劑各組分制劑貯藏條件下降解產(chǎn)物

穩(wěn)定性考察（加速/長(zhǎng)期試驗(yàn)）目前二十二頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)實(shí)例6鹽酸艾司洛爾注射液

本品化合物結(jié)構(gòu)主要為苯丙酸甲酯，酯類藥物易水解，其在水溶液中不穩(wěn)定，理論分析降解產(chǎn)物為苯丙酸和甲醇等。

目前二十三頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)實(shí)例7乳糖乳糖的結(jié)構(gòu)中含有半縮醛羥基，它可以轉(zhuǎn)化成醛式，這一結(jié)構(gòu)特征可與含有伯胺類結(jié)構(gòu)的化合物如苯胺類、氨基酸等發(fā)生縮和反應(yīng)，生成腙與糖脎等衍生物，可見(jiàn)，乳糖與含有伯胺類結(jié)構(gòu)的藥物存在著配伍禁忌。對(duì)于缺乏相關(guān)研究資料的情況，可以考慮進(jìn)行主藥與輔料/包材之間的相容性試驗(yàn)，例如，口服固體制劑，可以將主藥和輔料按一定比例混合后，進(jìn)行影響因素試驗(yàn)。

目前二十四頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)實(shí)例8奧沙利鉑甘露醇注射液雜質(zhì)A雜質(zhì)B雜質(zhì)C目前二十五頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)實(shí)例9復(fù)方阿司匹林片目前二十六頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)C仿制藥雜質(zhì)譜的分析

對(duì)擬仿藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析部分品種的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的中有已知雜質(zhì)檢查收入EP、BP、USP的品種，通過(guò)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，可得到更多的已知雜質(zhì)信息目前二十七頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)雜質(zhì)譜與擬仿品一致或雜質(zhì)種類較擬仿品少，各雜質(zhì)含量不超過(guò)擬仿品

試制品的雜質(zhì)控制達(dá)到了研究目標(biāo)雜質(zhì)譜與擬仿品一致或雜質(zhì)種類較擬仿品少，但雜質(zhì)含量超過(guò)擬仿品

改進(jìn)工藝，降低雜質(zhì)含量目前二十八頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)雜質(zhì)譜與擬仿品不一致，有超過(guò)鑒定限度的新雜質(zhì)；已知雜質(zhì)含量超過(guò)擬仿品

鑒定新雜質(zhì)結(jié)構(gòu)，分析產(chǎn)生新雜質(zhì)的原因，改進(jìn)工藝，降低雜質(zhì)含量至鑒定限度以下有明確安全性數(shù)據(jù)的雜質(zhì)，應(yīng)降低其含量至安全范圍，并在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行控制。超過(guò)質(zhì)控限度的未知安全性雜質(zhì)，應(yīng)提供其安全性論證資料。目前二十九頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.2分析方法的選擇選擇依據(jù)：待測(cè)藥品及雜質(zhì)的理化性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)的控制要求目標(biāo)：專屬、靈敏、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)捷。分析方法各有局限，注意不同原理分析方法間的相互補(bǔ)充和驗(yàn)證。

目前三十頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)A有機(jī)雜質(zhì)分析方法化學(xué)法、光譜法、色譜法質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中普遍采用的方法高效液相色譜法（HPLC）薄層色譜法(TLC)氣相色譜法(GC)毛細(xì)管電泳法（CE）目前三十一頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)由于各種分析方法均具有一定的局限性，因此在進(jìn)行雜質(zhì)分析時(shí)，應(yīng)注意不同原理的分析方法間的相互補(bǔ)充與驗(yàn)證HPLC與TLCHPLC與CE反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)HPLC不同檢測(cè)器單一方法不能滿足多個(gè)雜質(zhì)的檢測(cè)時(shí)，可采用兩種或兩種以上的方法互為補(bǔ)充，控制雜質(zhì)。目前三十二頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)HPLC法：專屬、靈敏、準(zhǔn)確、簡(jiǎn)捷外標(biāo)法（雜質(zhì)對(duì)照品法）

定量準(zhǔn)確，需雜質(zhì)對(duì)照品加校正因子的主成分自身對(duì)照法對(duì)校正因子進(jìn)行嚴(yán)格測(cè)定，僅適用于已知雜質(zhì)的控制不加校正因子的主成分自身對(duì)照法前提是假定雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)因子基本相同，有一定誤差峰面積歸一化法

因各雜質(zhì)與主成分響應(yīng)因子不一定相同、雜質(zhì)量與主成分量不一定在同一線性范圍內(nèi)、儀器對(duì)微量雜質(zhì)和常量主成分的積分精度及準(zhǔn)確度不相同等因素，可產(chǎn)生較大誤差。目前三十三頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)理想的定量方法：已知雜質(zhì)對(duì)照品法+未知雜質(zhì)不加校正因子的主成分自身對(duì)照法已知雜質(zhì)對(duì)主成分的相對(duì)響應(yīng)因子在0.9-1.1范圍內(nèi)時(shí)，可以用主成分的自身對(duì)照法計(jì)算含量；超出0.9-1.1范圍時(shí)，宜用雜質(zhì)對(duì)照品法計(jì)算含量，也可用加校正因子的主成分自身對(duì)照法。目前三十四頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)TLC法雜質(zhì)對(duì)照品法主成份自身對(duì)照法

雜質(zhì)斑點(diǎn)顏色與主成份斑點(diǎn)顏色一致的情況目前三十五頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)對(duì)于無(wú)機(jī)雜質(zhì)，各國(guó)藥典都收載了經(jīng)典、簡(jiǎn)便而又行之有效的檢測(cè)方法。對(duì)于成熟生產(chǎn)工藝的仿制，采用藥典收載的方法進(jìn)行質(zhì)量考察及控制。對(duì)于采用新生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的新藥，鼓勵(lì)采用離子色譜法及電感耦合等離子發(fā)射光譜－質(zhì)譜（ICP-MS）等分析技術(shù)B無(wú)機(jī)雜質(zhì)的分析方法目前三十六頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)不揮發(fā)性無(wú)機(jī)雜質(zhì)----------熾灼殘?jiān)幍渖形词蛰d的無(wú)機(jī)雜質(zhì)（如磷酸鹽、亞磷酸鹽、鋁離子、鉻離子等）的檢測(cè)，可根據(jù)其理化特性，采用離子色譜法、原子吸收分光光度法、比色法等檢測(cè)某些金屬陽(yáng)離子雜質(zhì)（銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、砷、鋅、鈷與鎳等）---------重金屬對(duì)某種（些）特定金屬離子或上述方法不能檢測(cè)到的金屬離子作限度要求，可采用專屬性較強(qiáng)的原子吸收分光光度法或經(jīng)典比色法（如藥典已收載的鐵鹽、銨鹽、硒等的檢查法）砷鹽檢測(cè)法硫酸根離子、氯離子、硫離子目前三十七頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.3分析方法的驗(yàn)證3.3.1波長(zhǎng)的選擇對(duì)產(chǎn)品中可能存在的雜質(zhì)的紫外吸收特性進(jìn)行研究。DAD檢測(cè)器根據(jù)各主要雜質(zhì)及主成分的紫外吸收特性，選取響應(yīng)值基本一致的波長(zhǎng)作為有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)波長(zhǎng)。對(duì)不同雜質(zhì)難于找到適宜的檢測(cè)波長(zhǎng)：

可選擇在不同波長(zhǎng)下分別測(cè)定采用加校正因子的主成分自身對(duì)照法目前三十八頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)常見(jiàn)問(wèn)題簡(jiǎn)單套用含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件，以主要的最大吸收波長(zhǎng)作為有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)波長(zhǎng)。雜質(zhì)在此波長(zhǎng)下的吸收可能偏低，甚至無(wú)吸收，造成雜質(zhì)含量的低估甚至漏檢。目前三十九頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)關(guān)于注射用奧沙利鉑有關(guān)物質(zhì)檢查方法的探討傅萍,蘭婉玲,張蕾；藥物分析雜志，2009,29(11)目前四十頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.3.2溶劑的選擇常用溶劑為甲醇，乙腈截止波長(zhǎng)甲醇：205nm乙腈：190nm目前四十一頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.3.3洗脫方式

等度洗脫梯度洗脫：

雜質(zhì)研究中值得借鑒的手段，有效檢出極性相差懸殊的系列雜質(zhì)。目前四十二頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)辛伐他汀-------等度洗脫新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)34冊(cè)WS1-(X-064)-2003Z色譜柱：AgilentExtendC18色譜柱，柱溫：35℃，流速：1.0ml/min流動(dòng)相：乙腈-0.025mol/L磷酸二氫鈉溶液（pH4.5）=65：35檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm，目前四十三頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)辛伐他汀------梯度洗脫中國(guó)藥典2010年版二部色譜柱：lunaC18（3μm,33*4.60mm）流速：3ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm流動(dòng)相：A：乙腈-0.1%磷酸溶液（50：50）B：含0.1%磷酸的乙腈梯度洗脫時(shí)間流動(dòng)相A（%）流動(dòng)相B（%）010004.510004.69558.0257511.5257511.61000131000目前四十四頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.3.4驗(yàn)證項(xiàng)目中國(guó)藥典2010二部附錄ⅪⅩA藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則目前四十五頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)A專屬性專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解物、輔料等）可能存在下，采用的分析方法能夠正確鑒定、檢出被分析物質(zhì)的特性。溶劑干擾，制劑要考慮輔料干擾反應(yīng)的中間體、立體異構(gòu)體、粗品、重結(jié)晶母液等作為測(cè)試品進(jìn)行系統(tǒng)適用性研究，考察產(chǎn)品中各雜質(zhì)峰及主成分峰相互間的分離度是否符合要求強(qiáng)制降解試驗(yàn)考察方法能否有效檢測(cè)出原料藥或制劑中的降解產(chǎn)物。目前四十六頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)酸降解:0.1－1mol/LHCl溶液堿降解:0.1－1mol/LNaOH溶液氧化降解:合適濃度的H2O2溶液必要時(shí)可以加熱或提高濃度高溫試驗(yàn):通常溫度高于加速試驗(yàn)溫度的10℃，如50℃、60℃等對(duì)于原料藥有時(shí)需考慮水溶液或混懸液的降解；考慮在不同的pH值條件下的降解光照試驗(yàn):可采用4500LX強(qiáng)制降解試驗(yàn)?zāi)壳八氖唔?yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)原料藥雜質(zhì)研究中，忽視了合成中間體、粗品在方法專屬性驗(yàn)證中的作用。合成中間體、雜質(zhì)殘存是原料藥雜質(zhì)的主要來(lái)源之一，如建立的方法不能將這類雜質(zhì)分開(kāi)，便不能用于產(chǎn)品雜質(zhì)的有效控制。強(qiáng)制降解試驗(yàn)破壞條件太劇烈主藥峰太低，甚至消失，無(wú)法觀察其分離情況（破壞10%左右）。關(guān)注目前四十八頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)10%50%目前四十九頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)強(qiáng)制降解試驗(yàn)峰純度可采用二極管陣列檢測(cè)器、質(zhì)譜檢測(cè)器等檢測(cè)峰的純度。以免因分離度不符合要求，導(dǎo)致分析結(jié)果的不準(zhǔn)確。如不具備檢測(cè)峰純度的試驗(yàn)條件，可通過(guò)適當(dāng)調(diào)整流動(dòng)相的組成或比例使各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間發(fā)生改變，用同一份經(jīng)加速破壞試驗(yàn)的供試品溶液進(jìn)樣，比較流動(dòng)相調(diào)整前后雜質(zhì)峰的個(gè)數(shù)也可采用TLC法比較同一份經(jīng)加速破壞試驗(yàn)的供試品溶液在不同展開(kāi)系統(tǒng)下的斑點(diǎn)個(gè)數(shù)及位置。遺漏了藥品敏感條件的破壞試驗(yàn)

如在影響因素穩(wěn)定性試驗(yàn)中表明某藥品易光解，但在破壞性試驗(yàn)中卻未考察主峰與光解產(chǎn)物的分離情況。目前五十頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)B靈敏度檢測(cè)限及定量限檢測(cè)限：被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不一定要準(zhǔn)確定量。（S/N=3：1）

該驗(yàn)證指標(biāo)的意義在于考察方法是否具備靈敏的檢測(cè)能力。因此對(duì)雜質(zhì)限度試驗(yàn)，需證明方法具有足夠低的檢測(cè)限，以保證檢出需控制的雜質(zhì)。

定量限：被分析物能夠被定量測(cè)定的最低量，其測(cè)定結(jié)果應(yīng)具有一定的準(zhǔn)確度和精密度。（S/N=10：1）體現(xiàn)了分析方法是否具備靈敏的定量檢測(cè)能力。雜質(zhì)定量試驗(yàn)，需考察方法的定量限，以保證含量很少的雜質(zhì)能夠被準(zhǔn)確測(cè)出。目前五十一頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)C精密度

在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一個(gè)均勻樣品經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度重復(fù)性在相同條件下由同一分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精密度中間精密度在同一實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備測(cè)定結(jié)果的精密度重現(xiàn)性在不同實(shí)驗(yàn)室由不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精密度目前五十二頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)D準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值或參考值接近程度已知雜質(zhì)：回收率未知雜質(zhì)：與另一成熟方法比對(duì)如藥典方法或經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的方法比對(duì)目前五十三頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)E線性在設(shè)計(jì)范圍內(nèi)，檢測(cè)響應(yīng)值與待測(cè)物質(zhì)量之間成正比例關(guān)系的程度。F范圍檢測(cè)方法能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性的高、低濃度或量的區(qū)間范圍應(yīng)在規(guī)定限度的±20%間或定量限至限度的+20%間，若含量測(cè)定和雜質(zhì)檢查同用一套色譜系統(tǒng)，則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)限度的-20%至含量限度（上限）的+20%間目前五十四頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)G耐用性耐用性系指測(cè)定條件發(fā)生小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。耐用性主要考察方法本身對(duì)于可變?cè)囼?yàn)因素的抗干擾能力。開(kāi)始研究分析方法時(shí)，就應(yīng)考慮其耐用性。如果測(cè)試條件要求苛刻，則建議在方法中予以寫明。HPLC：流動(dòng)相的組成比例及pH值、不同廠家或批號(hào)的色譜柱、柱效、柱溫、流速TLC：適當(dāng)改變展開(kāi)劑比例及pH值GC：載氣及流速、不同廠牌或批號(hào)的色譜柱、固定相、擔(dān)體、柱溫、進(jìn)樣口和檢測(cè)器溫度等。目前五十五頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)待測(cè)物質(zhì)與已知雜質(zhì)，待測(cè)組分與某一添加的指標(biāo)性成分（內(nèi)標(biāo)物質(zhì)或其它難分離物質(zhì)），采用適當(dāng)方法（如主成分降解破壞）制備系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液

關(guān)注1：雜質(zhì)分析時(shí)應(yīng)格外關(guān)注分離度，并應(yīng)在“色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)”項(xiàng)下對(duì)其作出具體規(guī)定。目前五十六頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)已知雜質(zhì)或輔料與主成份的分離度，不宜將同等濃度的雜質(zhì)與主成分混合，應(yīng)參照限度，一般將1%濃度量的雜質(zhì)加到100%濃度的主成分中，比較客觀科學(xué)地反映樣品中可能存在的雜質(zhì)實(shí)際情況。目前五十七頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)咖啡因目前五十八頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)關(guān)注2溶液濃度的確定供試品溶液濃度的確定是雜質(zhì)檢查中的一個(gè)重點(diǎn)濃度越高，越能反映樣品中雜質(zhì)的存在情況。問(wèn)題：若設(shè)定過(guò)高，超載現(xiàn)象若設(shè)定過(guò)低，達(dá)不到檢測(cè)目的，觀察不到雜質(zhì)量的變化。對(duì)策：從最低檢測(cè)限入手，采用“上推法”來(lái)確定。

最低檢測(cè)限→對(duì)照溶液→供試品溶液20~50倍200~5000倍目前五十九頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)四雜質(zhì)限度的確定完全除去雜質(zhì)是不可能的也沒(méi)有必要，將雜質(zhì)控制在安全合理的范圍內(nèi)，這個(gè)允許的范圍極為雜質(zhì)限度基本原則：在可行的范圍內(nèi)盡可能低目前六十頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于十九點(diǎn)報(bào)告限度（ReportingThreshold）：超出此限度的雜質(zhì)均應(yīng)在檢測(cè)報(bào)告中報(bào)告，并應(yīng)報(bào)告具體的檢測(cè)數(shù)據(jù)。鑒定限度（IdentificationThreshold）：超出此限度的雜質(zhì)均應(yīng)進(jìn)行定性分析，確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)。質(zhì)控限度（QualificationThreshold）：質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一般允許的雜質(zhì)限度，如制訂的限度高于此限度，則應(yīng)有充分的依據(jù)。ICHQ3A（R）；ICHQ3B（R）；化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則目前六十一頁(yè)\總數(shù)六十九頁(yè)\編于