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關(guān)于淋巴細胞結(jié)果的解讀第1頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月淋巴細胞分化圖第2頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月按T細胞所處的活化階段初始T細胞(naiveTcell)效應(yīng)T細胞(effectorTcell)記憶性T細胞(memoryTcell)按T細胞表面受體(TCR)分類
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T細胞
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T細胞按T細胞CD4和CD8分子表型
CD4+T細胞
CD8+T細胞按T細胞的功能分類
Th(輔助T細胞)
TS(抑制T細胞)
Tr(調(diào)節(jié)T細胞)T淋巴細胞的分類方法第3頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月外周血中各亞群占淋巴細胞總數(shù)的比例60-80%27-51%15-44%T淋巴細胞CD4T淋巴細胞CD8T淋巴細胞第4頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月淋巴細胞監(jiān)測注重數(shù)量、比例、功能相結(jié)合血液分析常規(guī)檢測依據(jù)白細胞、淋巴細胞比例及計數(shù)綁定機體免疫狀況,無法精確判斷。T淋巴細胞亞群比例檢測臨床常用,但較片面T淋巴細胞亞群數(shù)量觀察免疫細胞數(shù)值變化,評估免疫狀況,通常采用流式細胞儀法,特別針對CD4的檢測,已成為“金標準”。功能、數(shù)量、比例結(jié)合更精確評估機體免疫狀態(tài)1234第5頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月目前臨床主要可以做以下項目的檢測
淋巴細胞亞群(T+B+NK)的比例和計數(shù)T細胞亞群(CD4+細胞、CD8+細胞、CD4+/CD8+比值)MHLA-DR(單核細胞HLA-DR)CD4CD25Treg(調(diào)節(jié)細胞)及Th17細胞(我們工作)目前國內(nèi)絕大多數(shù)醫(yī)院沒有開展淋巴細胞計數(shù)項目第6頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月項目百分含量(%淋巴細胞)TotalBlymphocyte(CD19+)5-18%NKcell(CD3-/CD16+56+)7-40%TotalTlymphocyte(CD3+)50-84%Thelper/inducercell(CD3+/CD4+)27-51%Tsupressor/cytotoxiccell(CD3+/CD8+)15-44%CD4/CD80.71-2.78(BD)健康中國人參考范圍項目百分含量(%T淋巴細胞)絕對含量(cells/L)TotalTlymphocyte(CD3+)770-2041Thelper/inducercell(CD3+/CD4+/CD8-)34-70%414-1123Tsupressor/cytotoxiccell(CD3+/CD4-/CD8+25-54%238-874CD3+CD4+CD8+cell0.5-4.0%6-56第7頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月CD4+、CD8+T淋巴細胞的計數(shù)方法一(FCM)取100μl全血,加三種不同熒光素標記的鼠抗人CD3、CD4、CD8McAb,陰性對照。加紅細胞裂解液,溶血,離心,棄上清。用PBS洗1次,PBS重懸細胞,上機檢測。FCM分析電子計算機自動計算出陽性細胞百分率及總細胞計數(shù)。簡單、快速、相對精確第8頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月CD3+T細胞正常范圍為:50-84%CD4+T細胞正常范圍為:27-51%
CD8+T細胞正常范圍為:15-44%CD19+B細胞正常范圍為:5-18%與血細胞計數(shù)儀聯(lián)用,得出各淋巴細胞百分比后乘以淋巴細胞數(shù)量,得出各淋巴細胞的絕對濃度。CD4T淋巴細胞的計數(shù)方法二(推算)不精確、繁瑣省錢舉例如下第9頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月患者血常規(guī)中淋巴細胞計數(shù)為0.63×109/L,淋巴細胞比例測定結(jié)果CD3為64.9%,CD4為32.5%,CD8為31.1%CD3細胞計數(shù)為0.63×109/L×64.9%≈0.41×109/LCD4細胞計數(shù)為0.63×109/L×32.5%≈0.20×109/LCD8細胞計數(shù)為0.63×109/L×31.1%≈0.19×109/L推算第10頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月第11頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月單核細胞人類白細胞抗原DR(CD14/HLA-DR)CD14為LPS復(fù)合物受體,主要分布在單核細胞,HLA-DR為活化標志。CD14/HLA-DR可反映人體細胞免疫功能,<30%提示免疫麻痹。也有人認為HLA-DR濃度如果連續(xù)兩天低于8000AB/C可認為存在免疫麻痹。廣泛應(yīng)用于臨床。第12頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月T淋巴細胞亞群研究研究逐年增多第13頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月淋巴細胞亞群變化的常見臨床意義CD4淋巴細胞減少:見于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷病、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑的患者CD8淋巴細胞增多:見于自身免疫性疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、艾滋病初期、慢性活動性肝炎、腫瘤及病毒感染等CD4/CD8比值異常:
比值降低:一般被稱為“免疫抑制”狀態(tài),常見于免疫缺陷病、惡性腫瘤、再生障礙性貧血、白血病、某些病毒感染等比值增高:表明細胞免疫功能處于“過度活躍”狀態(tài),容易出現(xiàn)自體免疫反應(yīng)。此外還可用于監(jiān)測器官移植的排斥反應(yīng),若移植后CD4/CD8較移植前明顯增加,則可能發(fā)生排異反應(yīng)第14頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月15Theshiftfromapro-in-flammatorytoananti-inflammatoryimmuneresponsepredominantatthesystemiclevellikelyoccursbefore24hafterdiagnosisofshock.膿毒癥休克期存在免疫麻痹第15頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月存在免疫麻痹的Septic患者死亡率大大增加100名septic患者28天死亡無免疫麻痹免疫麻痹第16頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月膿毒癥休克患者T淋巴細胞凋亡、存在免疫紊亂第17頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月存活與死亡Septic中T淋巴細胞亞群的變化一項對院內(nèi)感染的老年膿毒癥患者的前瞻性對照研究第18頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月Injury,Int.J.CareInjured(2007)38,1346—1357嚴重多發(fā)傷患者免疫細胞的變化特點CD4/CD8降低MHLA-DR降低T細胞及單核細胞凋亡增加第19頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月燒傷患者早期外周血淋巴細胞亞群的變化特點燒傷患者白細胞低于正常組早期CD3、CD4、CD8細胞計數(shù)均明顯下降。HLA-DR表達降低。CD4/CD8比值下降。第20頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月CD4T細胞亞群新分類:Th1、Th2、Treg、Th17我們的研究第21頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月抗炎細胞Treg及其分泌的抗炎介質(zhì)IL-10;促炎細胞Th17及分泌的促炎介質(zhì)IL-17、IL-6在人體的炎性免疫穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用。第22頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月23中國呼吸與危重監(jiān)護雜志,2010,09(04):416-418.結(jié)論一:膿毒癥患者中Treg明顯升高,表明抗炎反應(yīng)的增強第23頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月24
結(jié)論二:在膿毒癥患者中Th17表達明顯升高吳鐵軍,亢翠翠,中華急診醫(yī)學雜志,2012,21(04):378-380.膿毒癥組對照組膿毒癥患者中Th17表達明顯升高,提示促炎反應(yīng)的增強。第24頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月25重癥膿毒癥患者淋巴細胞增殖能力低下、凋亡淋巴細胞Ag-NoR在健康組中的表達
淋巴細胞Ag-NoR在Sepsis組中的表達吳鐵軍,張麗娜中國呼吸與危重監(jiān)護雜志,2010,09(04):416-418.膿毒癥組對照組第25頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月重癥膿毒癥患者存在免疫麻痹中國急救醫(yī)學雜志,2011,31(9):836-838.CD14^+單核細胞人類白細胞抗原-DR(HLA-DR)表達情況對照組膿毒癥組第26頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月27第27頁,課件共29頁,創(chuàng)作于2023年2月T淋巴細胞亞群的研究越來越多某種T細胞亞群過高或過低,都提示存在免疫功能紊亂,主要用于了解惡性腫
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