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文檔簡介
關(guān)于高中生物選修一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)人教版第1頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月微生物包括哪五類:病毒細(xì)菌放線菌真菌原生動(dòng)物
原核生物界
原生生物界真菌界病毒界第2頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月1、培養(yǎng)基可以分為哪兩類?2、培養(yǎng)基一般都含有哪些營養(yǎng)物質(zhì),此外還要滿足哪些要求?3、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么?4、避免雜菌污染的方法主要包括哪四個(gè)方面5、什么是消毒、滅菌,常用方法有哪些?6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟7、如何倒平板?第3頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月(1)按物理狀態(tài)來分:培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。(2)按功能來分,可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。(3)按成分來分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。1、培養(yǎng)基分類:一、培養(yǎng)基第4頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月2、選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基:
分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:
分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基:
分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:
分離自養(yǎng)型微生物加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基:
分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞第5頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月不管哪種培養(yǎng)基,一般都含有水、碳源、和氮源、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì),例如:生長因子(即細(xì)菌生長必需,而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。3、培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)(1)培養(yǎng)基一般都含有哪些營養(yǎng)物質(zhì),此外還要滿足哪些要求?第6頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月(2)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么?(3)避免雜菌污染的方法主要包括哪四個(gè)方面(4)什么是消毒、滅菌,常用方法有哪些?第7頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月消毒與滅菌消毒:指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。滅菌:指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有微生物,包括芽孢和孢子。滅菌與消毒技術(shù)是微生物有關(guān)工作中最普通也是最重要的技術(shù)。二、無菌技術(shù)第8頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月消毒的方法:1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化學(xué)藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線或化學(xué)藥物消毒第9頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月滅菌的方法:1、灼燒滅菌2、干熱滅菌:160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸汽滅菌:100kPa、121℃下維持15-30min.第10頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟7、如何倒平板?第11頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月三、實(shí)驗(yàn)操作1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基第12頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月1、培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?
答:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。2、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?
答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。問題討論:第13頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月3、平板冷凝后,為什么要將平板倒置?4、在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?
答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。
答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。第14頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月2、純化大腸桿菌接種方法有:平板劃線法和稀釋涂布平板法第15頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月
平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作,將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面.
在數(shù)次畫線后,可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落.第16頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月第17頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月微生物的恒溫培養(yǎng)第18頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月
1、為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?
答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。問題討論:第19頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月
2、在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。
3、在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?
答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。第20頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月第21頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月第22頁,課件共25頁,創(chuàng)作于2023年2月
涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?
應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。問
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