臨床微生物標(biāo)本的正確采集及運(yùn)送

臨床微生物標(biāo)本的正確采集及運(yùn)送5/23/2023第一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四一、臨床微生物標(biāo)本正確采集的重要意義二、各種類型標(biāo)本的正確采集和送撿主要內(nèi)容2第二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)標(biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。因此正確采集和運(yùn)送微生物標(biāo)本，直接影響到微生物培養(yǎng)鑒定結(jié)果?？煽康臋z驗(yàn)結(jié)果可以指導(dǎo)臨床診斷治療，為臨床科學(xué)用藥和成功的感染控制提供依據(jù)，是正確、合理使用抗菌藥物，延緩細(xì)菌耐藥，減少抗菌藥物濫用和監(jiān)測醫(yī)院感染的第一步，也是最重要的一步。為此應(yīng)正確采集各種細(xì)菌學(xué)標(biāo)本。臨床微生物標(biāo)本正確采集和運(yùn)送的重要意義第三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四

血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四1、血液培養(yǎng)的送檢指征①發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）②寒戰(zhàn)③白細(xì)胞增多（>10×109/L,特別是有“核左移”）④粒細(xì)胞減少（<1×109/L）⑤血小板減少⑥皮膚、黏膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭⑨血壓降低⑩呼吸加快以及肝脾腫大；關(guān)節(jié)疼痛；C反應(yīng)蛋白和降鈣素原升高等

患者出現(xiàn)以上一種或同時具備幾種臨床表現(xiàn)時可作為血培養(yǎng)的重要指征血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第五頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四2、血培養(yǎng)標(biāo)本的采集時間盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)使用抗生素進(jìn)行治療，應(yīng)在下一次用藥前采血血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第六頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四3、血培養(yǎng)標(biāo)本的采集⑴皮膚消毒程序：嚴(yán)格執(zhí)行以下3步法：①75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上，②再用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑3cm以上；③最后用75%酒精脫碘。如對碘過敏的患者，可用75%酒精消毒60s，待酒精揮發(fā)干燥后采血。注意：不允許在消毒后按壓靜脈，除非戴有無菌手套血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第七頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四⑵血培養(yǎng)瓶消毒程序：用75%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s；用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞子表面殘余酒精，然后注入血液。注入血液后，應(yīng)輕輕顛倒混勻防止血液凝固。血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第八頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四4、血培養(yǎng)采血量

由于每毫升血量中含菌量很小，血培養(yǎng)的陽性率直接與血樣本容量有關(guān)，據(jù)報(bào)道每增加1ml血樣本可使血培養(yǎng)陽性率上升3%，所以采血量要足夠。通常采血量與培養(yǎng)基之比以1:5~1:10為宜，成人一次采血10~20ml平均注入兩個血培養(yǎng)（需氧、厭氧瓶）中，嬰幼兒采血量為全血量的1%（1~2ml），兒童采血量3~5ml。當(dāng)發(fā)生菌血癥時，通常成人血液中含有的菌量小于1CFU/ml,而兒童血液中含有的菌量常超過100CFU/ml，所以嬰幼兒、兒童采血量少于5ml時，不會影響培養(yǎng)的陽性率。血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第九頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四5、血培養(yǎng)采集的次數(shù)⑴對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時或短時間間隔（10分鐘內(nèi)）從不同部位（如雙臂）采集2套血培養(yǎng)標(biāo)本，做到“雙瓶雙側(cè)”。如有必要，可同時或短時間間隔內(nèi)從下肢靜脈采血接種第3套培養(yǎng)瓶。在采集血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)，不需要重復(fù)采集血培養(yǎng)。當(dāng)采血量不能滿足推薦的采血量時，應(yīng)首先接種需氧瓶。⑵嬰幼兒患者，需要同時采集2次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。

血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四有研究表明，只做1套血培養(yǎng)，病原菌的檢出率僅為65%；2套血培養(yǎng)為80%；3套血培養(yǎng)為96%。對于成年患者的血培養(yǎng)，只采集單瓶是不允許的，因?yàn)閱纹康呐囵B(yǎng)結(jié)果很難解釋是致病菌還是污染菌。血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四6、血培養(yǎng)標(biāo)本的運(yùn)送⑴

血培養(yǎng)采集后應(yīng)立即送到微生物室（常規(guī)運(yùn)送時間少于2h）⑵如果不能立即送到微生物室，需室溫保存或置于35℃-37℃孵箱中，切勿冷藏（因?yàn)橛行┛琉B(yǎng)菌遇冷很容易死亡）。血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四

痰液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四1、痰標(biāo)本的采集時間及頻率⑴在抗生素應(yīng)用前采集；⑵最好在清晨采集；多數(shù)患者在清晨痰較多，且含菌量也多，即使對痰量少的患者，也以清晨最為容易；⑶對于細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2-3天；不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀形狀出現(xiàn)改變；⑷懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。⑸采集痰標(biāo)本前應(yīng)先進(jìn)行口腔清潔。因?yàn)楸旧砣梭w口腔內(nèi)含有很多微生物，致使痰液咳出時易受到污染。痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四2、痰標(biāo)本的采集方法⑴自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口3次（或硼酸漱口），以除去口腔內(nèi)大部分雜菌，之后用力咳出呼吸道深部的痰液吐至無菌的廣口瓶內(nèi)，蓋好蓋子。患者痰液較深不易咳出時，可在咳痰前捶背、協(xié)助排痰。采集痰量不能少于1ml。痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十五頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四⑵下呼吸道肺泡灌洗，支氣管刷洗，氣管抽吸：將抽吸物或灌洗液直接放入痰杯內(nèi)，刷出物放入1ml無菌生理鹽水的痰杯中。⑶誘導(dǎo)咳痰：刷完牙齦和舌頭后讓患者用水漱口，借助霧化器使患者吸入約25ml3-5%的無菌鹽水誘導(dǎo)咳痰。痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十六頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四3、痰標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后需盡快（<2h）送至微生物室，不及時運(yùn)送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。如不能及時送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本置于4℃冰箱保存，以免雜菌生長，但不超過24h。痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送第十七頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四

鼻咽拭子標(biāo)本采集及運(yùn)送第十八頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四鼻咽拭子標(biāo)本采集采集標(biāo)本時患者先用清水漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，用無菌鼻咽拭子由口腔進(jìn)入，越過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)采集鼻咽紅腫處，取材后小心退出，立即放入無菌試管內(nèi)，避免觸及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。鼻咽拭子標(biāo)本采集第十九頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四

化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四采集方法⑴未破裂膿腫：在采集標(biāo)本前，對患者病灶局部的皮膚或黏膜表面，用2.5%—3%碘酊消毒、75%酒精脫碘，用無菌注射器將膿腫內(nèi)容物吸出,然后切開膿腫、引流，采集的膿液（>1ml）,并取部分膿腫壁置于厭氧運(yùn)送裝置或接種于厭氧培養(yǎng)基中立刻送檢。注意不主張用拭子采集標(biāo)本?；摵蛣?chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四⑵開放性病灶和膿腫：首先用無菌生理鹽水清洗病灶表面的污染雜菌，用無菌棉拭子先蘸少許生理鹽水，以保持標(biāo)本的濕度，然后采取膿液及病灶深部的分泌物（最好從膿腫底部或膿腫壁取樣）后置于無菌的容器中送檢。最好采集2個拭子，其中一個用于細(xì)菌培養(yǎng)，另一個用于涂片革蘭染色?；摵蛣?chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四⑶膿皰或水皰：用酒精消毒使之干燥，對于患兒用23號針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰液和基底部標(biāo)本。化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四膿腫標(biāo)本采集及運(yùn)送過程中的注意事項(xiàng)⑴應(yīng)盡可能在使用抗生素前采集標(biāo)本，若患者在采集標(biāo)本前已用抗生素，應(yīng)在檢驗(yàn)申請單上注明應(yīng)用的抗生素，并在下次用抗生素前采集；⑵在采集標(biāo)本時，應(yīng)注意無菌操作，以防帶入與感染無關(guān)的皮膚定植菌；⑶采集標(biāo)本時應(yīng)注意標(biāo)本的性狀、色澤及氣味，為分離鑒定致病菌提供依據(jù)；⑷標(biāo)本采集后應(yīng)在室溫2h內(nèi)送檢，若不能及時送檢，可保存在4℃冰箱中，但不應(yīng)超過24h。化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四

尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十五頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四1、尿液培養(yǎng)的送檢指征⑴有典型的尿路感染癥狀：如尿急、尿頻、尿痛⑵肉眼膿尿或血尿⑶尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細(xì)胞或亞硝酸鹽陽性⑷不明原因的發(fā)熱，無其它局部癥狀⑸留置導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱⑹膀胱排空功能受損⑺尿道口有膿性分泌物⑻泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十六頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四2、尿標(biāo)本采集方法：盡量取早晨第一次尿液⑴清潔中段尿采集法①女性：采集前先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口，用滅菌紗布擦拭，用手指將陰唇分開排尿，留取中段尿送檢②男性：用肥皂水翻轉(zhuǎn)包皮沖洗，用0.1%新潔爾滅消毒尿道口，用滅菌紗布擦拭，取中段尿送檢尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十七頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四⑵導(dǎo)尿法①直接導(dǎo)尿：將會陰局部清洗后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。但有可能將下尿道細(xì)菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡用。②留置導(dǎo)尿：通過專門的采樣端口采集，不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后收集尿液。采樣端口用酒精消毒；必要時可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過30分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽吸出尿液。注意：不能從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本，集尿袋內(nèi)的尿液也不能用于培養(yǎng)。尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十八頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四⑶膀胱穿刺采集法采用恥骨上膀胱穿刺取尿。這種方法是評估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法。因有一定的痛苦，患者難以接受。尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第二十九頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四3、尿液標(biāo)本運(yùn)送收集中段尿5—10ml，及時送檢室溫保存下不得超過2h，否則應(yīng)置于4℃冷藏保存時間不得超過8h。尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送第三十頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四女性生殖道標(biāo)本采集第三十一頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四⑴陰道及宮頸分泌物采集⑵宮腔內(nèi)標(biāo)本采集羊膜腔感染時可經(jīng)腹壁羊膜穿刺抽取羊水或經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。但經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)易受陰道或子宮頸部位細(xì)菌污染，臨床應(yīng)用價值有限。懷疑有急性宮腔內(nèi)感染時，原則上不采取宮腔分泌物，以免引起感染播散；必要時用滅菌導(dǎo)管抽取，導(dǎo)管外套一層保護(hù)膜，經(jīng)子宮頸插入宮腔后再刺穿保護(hù)膜抽取分泌物。女性生殖道標(biāo)本采集第三十二頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四

穿刺液標(biāo)本的采集及運(yùn)送第三十三頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四1、標(biāo)本采集由臨床醫(yī)生采集（無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本）膽汁采集分三種方法：⑴十二指腸引流法（以B膽汁—來自膽囊，做細(xì)菌培養(yǎng)意義較大）。⑵膽囊穿刺法⑶手術(shù)采取法。取標(biāo)本約2ml裝入無菌密封容器送檢。其它穿刺液的采集：由臨床醫(yī)生采集標(biāo)本5—10ml注入無菌密封容器內(nèi)送檢（為防止凝固，可先加入滅菌肝素），也可將標(biāo)本直接加入血培養(yǎng)瓶中送檢。心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液采樣量為1—5ml。穿刺液標(biāo)本的采集及運(yùn)送第三十四頁，共三十七頁，編輯于2023年，星期四2、標(biāo)本運(yùn)送采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄露或容器外部留有殘留物。