紅細胞血型檢測

第二章紅細胞血型檢測江西醫(yī)學高等專科學校11級檢驗班01

李金輝1紅細胞血型檢測目錄第一節(jié)輸血前免疫學檢查第二節(jié)鹽水介質試驗技術第三節(jié)酶處理試驗技術第四節(jié)抗球蛋白試驗技術第五節(jié)聚凝胺介質試驗技術第六節(jié)微柱凝集試驗技術第七節(jié)吸收放散技術第八節(jié)凝集試驗技術第九節(jié)紅細胞血型分子生物學檢測技術2紅細胞血型檢測學習要求：1.輸血前主要包括哪些內容？2.受血標本接受時的注意事項有哪些？3.ABO血型和RhD血型鑒定時的注意事項有哪些？4.交叉配血試驗的影響因素有哪些？5.抗球蛋白試驗的臨床應用有哪些方面？6.紅細胞血型分子生物學檢測技術主要有哪些？3紅細胞血型檢測第一節(jié)輸血前免疫學檢查目的：是輸入的血液成分在受血者的體內發(fā)揮其有效作用.

在正常情況下，輸入的紅細胞在受血者體內不溶血，輸入的的血漿成分不破壞受血者的紅細胞。主要程序：患者的病史和標本等的檢查、核對及處理;ABO血型和RhD血型定型；紅細胞同種抗體篩查和堅定；交叉配血試驗；血小板輸注前的抗體檢查和配合試驗；不規(guī)則抗體的篩選和鑒定；交叉配血結果的報告和發(fā)血等。4紅細胞血型檢測一、受血者標本的處理（一）標本的采集輸血除了需要達到預期的治療效果外，必須確保輸血安全。血樣由臨床護士完成，因嚴格遵守一次只能為一位受血抽取標本，標本不得從輸液管或輸液側筋脈中抽取。（二）標本的接收

輸血科技師接收血樣標本時，應認真核對受血者的相關信息，盡可能了解受血者有無輸血史、藥物史、妊娠史等情況。如果有輸血史，這有必要進一步了解最后一次輸血的日期，若3個月內輸過血，那么供血者的紅細胞沒有完全代謝消失，可能依然存在于血液循環(huán)中，導致血型定型試驗中出現(xiàn)混合凝集的結果。5紅細胞血型檢測（三）標本的要求1.對輸血前檢查的血液標本應嚴格要求能代表受血者當前的免疫學狀況，標本還需經(jīng)鑒定和標記，保證其準確無誤地來自受血者和供血者，應和血液申請單上的內容一致。2.防止受血者血液標本稀釋和（或）溶血，若采集過程中發(fā)生溶血則不能使用。3.受血者配血試驗對的血液標本必須是輸血前3天采集的。4.若受血者使用右旋糖酐、PVP等治療，應注意洗滌被檢紅細胞。5.每次輸血后，受血者和供血者的標本必須保存于2~8℃至少7天。6紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型

（一）、原理

根據(jù)紅細胞膜表面上有無A抗原或B抗原，將血型分為A型、B型、AB型、O型4種。A型人血清中含有抗-B抗體，B型人血清中含有抗-A抗體，O型人血清中含有抗-A抗體和抗-B抗體，AB型人血清中不含ABO抗體。正定型：用抗-A及抗-B試劑與被檢紅細胞反應，檢測紅細胞表面是否存在A抗原或B抗原。反定型：用標準A細胞及B細胞與被檢血清反應，檢測血清中是否存在抗體。由于ABO血型系統(tǒng)抗體多數(shù)為IgM類，在室溫鹽水介質中就能出現(xiàn)明顯的凝集反應。7紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型8紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型

1.ABO定型最適的反應溫度為4℃，但在室溫反應良好，所以常規(guī)的ABO定型試驗僅在室溫進行。(1)定型方法：正、反定型的試管離心方法目前仍被認為是最可信賴的ABO定型方法。1)定型試劑：有些ABO血型診斷試劑是以人的血清匯聚而制成的，但必須具備以下條件：第一，高效價(1：128)的IgM抗A或抗B。第二，具較好的親和性并不含冷凝集素。第三，必需具有檢測A2，A2B血型的能力。第四，血清必須通過HIV，HCV，HBV等檢查或經(jīng)病毒滅活。另外一些ABO定型試劑是由來自培養(yǎng)細胞株的單克隆抗體所制成。9紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型2)ABO亞型的鑒定：ABO亞型的鑒定通常使用下列試劑：抗A、抗B、抗A1、抗H、抗AIA1紅細胞、A2紅細胞、B型紅細胞和O型紅細胞。有些工作者在定型試驗中，常規(guī)地選擇應用抗AB抗血清，以避免錯誤地把弱反應性A或B型紅細胞分類為O型。一般抗AB試劑對Ax型紅細胞可增加凝集反應的強度。10紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型(一)ABO定型試驗中的常見問題：造成這種正反定型不一致的原因主要有：1)技術和管理錯誤：這是ABO定型中產(chǎn)生異常結果的主要原因，包括：標本或試劑搞錯；器材不潔；試劑污染或失效；離心過度或不足；陽性反應產(chǎn)生溶血現(xiàn)象未能識別；漏加試劑；結果記錄或判斷錯誤；細胞與血清間比例不適當。2)血清異常：血清蛋白引起緡錢狀形成，影響反定型結果。3)紅細胞致敏：受免疫球蛋白致敏的紅細胞，在含高蛋白介質的試劑中，可發(fā)生凝集。4)異?；蛐停篈BO亞型的檢查中，A、B抗原可能為弱抗原，難以檢出。11紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型5)近期輸血：試驗前曾輸入過其它ABO血型不一致的血液，使血液標本成為混合血型的紅細胞懸液，定型時顯示“混合外觀凝集”現(xiàn)象。6)嵌合體血型：這種血型者體內有兩類血型紅細胞群體，定型時可以出現(xiàn)“混合外觀凝集”現(xiàn)象。7)疾病因素導致抗原減弱：某些白血病患者和難治性貧血患者中，ABO血型系統(tǒng)的抗原性可受到抑制，檢出困難。8)紅細胞多凝集現(xiàn)象：紅細胞因遺傳或獲得性的表面異常，發(fā)生多凝集現(xiàn)象。9)獲得性B：由于革蘭陰性桿菌的作用，紅細胞可獲得“類B”的活性。12紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型10)血型特異性物質過高：一些卵巢囊腫病例，血型物質的濃度很高，可中和抗A和抗B定型試劑，要得到正確的正定型結果，必須洗滌紅細胞多次。11)近期內進行大量的血漿置換治療：由于使用大量的非同型的血漿作置換治療，標本血清中含有所輸供體提供的抗A或抗B抗體，造成反定型錯誤。12)異常的血漿蛋白：受檢者血漿中異常的白蛋白、球蛋白比例和高濃度的纖維蛋白原等導致緡錢狀形成，造成假凝集現(xiàn)象。13)不規(guī)則抗體的存在：受檢者血漿中，含有ABO血型抗體以外的不規(guī)則抗體，與試劑紅細胞上其他血型抗原系統(tǒng)的抗原起反應。13紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型14)低丙種球蛋白血癥：低丙種球蛋白血癥(丙種球蛋白量減低)病例，可能會因免疫球蛋白水平下降而使血清定型時不凝集或弱凝集反應。15)藥物等因素：藥物、右旋糖醉及靜脈注射某些造影劑可引起紅細胞凝集或類似凝集。16)年齡因素：免疫系統(tǒng)尚未健全的嬰兒、由母親被動獲得抗體的嬰兒，或抗體水平下降的老人，試驗時可出現(xiàn)異常的結果。17)防腐劑因素：患者體內可能含有對防腐劑中的成分或對混懸介質的抗體，導致ABO定型差錯。14紅細胞血型檢測二、受血者和供血者ABO和Rh定型（二）Rh(D)定型和定型試驗中應注意的問題：Rh定型主要鑒定D抗原（IgG抗D和IgM抗D）。Rh系統(tǒng)是最為復雜得多一個系統(tǒng)，涉及臨床的主要有D、C、c、E、e五個抗原，其中D抗原的免疫原性最強，僅次于A或B抗原。Rh血型鑒定方法有：玻片法、試管法、微量板法、微柱凝膠法等，試管法最為經(jīng)典。目前大部分醫(yī)院都使用微柱凝膠卡式血型鑒定，方法簡便快捷，準確度較高。15紅細胞血型檢測二、絡受血邊者和跳供血溪者AB城O和Rh定型16紅細俊胞血叫型檢咽測二、添受血醋者和震供血色者AB慈O和Rh定型(1袋)導致Rh血型貞鑒定替可能消出現(xiàn)煉假陽輝性的減原因寧：1)受檢陳細胞域已被豪免疫前球蛋島白致時敏，將或標面本血甲清中絞含有賺引起屬紅細桌胞凝紅集的謙因子擋。2)受檢商細胞卡與抗捉血清分孵育極的時小間過末長，懶含高把蛋白鍛的定繩型試雜劑會季引起爸緡錢槐狀形紫成。3)標本這抗凝嶺不當新，受擇檢過終程中逗出現(xiàn)隱凝血再或小懇的纖岡維蛋爭白凝較塊，膜誤判腔為陽慶性。4)定型樸血清嬌中含改有事忍先未款被檢裙測的讀其它等特異美性抗毀體，初造成之假陽灰性定枝型結掀果。5)多凝祥集細邊胞造苗成定列型的遷假陽樹性。6)鑒定懲用器鴿材或闖抗血詳清被洲污染棋，造濤成假庸陽性遲。17紅細彎胞血泥型檢芒測二、久受血牛者和翠供血刺者AB浙O和Rh定型(2盛)可能棒出現(xiàn)憑假陰曬性的誰原因1)受檢象細胞智懸液艷濃度乏太高授，與駕抗血毛清比協(xié)例失辟調。2)漏加泉或錯鎖加定羞型血確清。3)定型中血清喜的使鍬用方生法錯夕誤，屠沒有邁按說丸明書列進行厲。4)離心援后重暖懸細槐胞扣女時，舉搖動后用力撿過度薦，搖本散微霜弱的吸凝集委。5)抗血壤清保媽存不邪當，炎導致讀失效摔。18紅細叮胞血替型檢齡測二、暮受血梢者和獨供血卵者AB親O和Rh定型(三)弱D型(D鑼u型)血型撤及其權鑒定湊：Du型抗逢原是Rh突O(勸D)的弱致抗原斜，這扔種抗株原通紡常與舞大部翅分鹽秒水抗D試劑催不產(chǎn)級生直派接凝仙集反渠應，決而與犬部分液的Ig拿G抗D血型常用間日接抗許球蛋陶白試霉驗反阻應陽說性。稱因此美當我題們初懂次得鄰到Rh陰性偵結果服時，榨必須甚進行屑作Rh陰性取確認辨試驗飾，即劉用三圓種不激同批聾號的Ig裁G抗D定型爆，如蓋果全遍部陰勒性方凱可認櫻為該員被檢透者為Rh陰性膀，否隸則，饒只要劑有一濾批為怪陽性橡，則厘可認依為是Du型。若D人群禾作為央獻血師者按捏照Rh浩D陽性直對待蛋，其展血液獨只能想給Rh陽性喝受血零者輸葉注；犁作為設受血弄者按盞照Rh美D陰性況對待即，只辨能接胖受Rh燙D陰性充血液錯。19紅細桂胞血捏型檢煙測三、高不規(guī)旱則抗藥體篩呆選和墓鑒定一、概念測：不院規(guī)則授抗體轟是指島血清喇中抗-A、抗-B以外夫的其踢他血陣型抗圈體，比也稱微意外朱抗體它。不規(guī)籃則抗減體包幫括同絮種抗清體和歌自身僑抗體矮。自身德抗體揀：受再血者塞體內賠產(chǎn)生觸的抗放體，糖針對匙自己介本身報的紅頸細想胞抗沈原。同種凝抗體忙：不撥只針帽對自誕身抗項原，座也會唉同種釣異型回抗原郵發(fā)生劍反適應傷。20紅細戶胞血影型檢中測三、遷不規(guī)王則抗參體篩策選和癢鑒定二、蝦不規(guī)弟則抗反體的陵篩查飄方法抗體境篩選透試驗買的原帶則是貪讓受摔檢的沙血清縮慧與已雨知血窯型的續(xù)試劑無紅疑細胞盟即篩界選紅罵細胞戀起反出應，頃以發(fā)趴現(xiàn)在37但℃中有尺反應丸的抗融體1.鹽水草介質速法：銹主要攝用于Ig園M類抗造體的腹篩查頃。劣優(yōu)敘點是稻：方掛法簡料單、箭操作偵簡單謊、成欣本低許廉。缺點綁是：時靈敏袖度低2.聚凝果胺法槳優(yōu)點窯：與頑水鹽月介質棕法比丟靈敏垮度有斧所提雹高。3.抗球溫蛋白蠟試驗鑰：缺包點：尾操作霞繁瑣御、工踐作量息大、妥耗時疾等。4.酶法蓋：能封暴露盼隱蔽攤抗原尤，增啟強一翁些稀緣瑞有抗微原檢妄測。雅但可迷能曾會跨破壞匆有些巴抗原貢，影蝕響檢葛測。減目前泡臨床位是已濟不用旺。21紅細費胞血光型檢巧測三、涂不規(guī)外則抗僑體篩匙選和共鑒定5.微柱裳凝膠充卡式定檢測稼法三、叢不規(guī)館則抗鍛體的挪鑒定抗體辜篩選騾試驗怪用的輝試劑朱篩選辜紅細矮胞，魯通常悉是2或3個人漏份的O型紅至細胞偵成為聽一套銀試劑憑，每您套試幕劑篩斃選紅豪細胞府中至吃少有刮以下孔常見餐的抗鈴原：D、C、E、c、e、M、N，條會件不錯足的蛙實驗塑室不污一定漠具備Lu節(jié)a、V、Cw、Kp完a、Js拌a類的似抗原愿。一旦長抗體器被檢筐出，賄應作嗽抗體但鑒定等試驗鏡，以雅確定膠其特顧異性歸。抗順體鑒黎定實堪驗包召含以蓋下主督要內愈容：(1鍬)自身境細胞反檢查：觀染察患自者(受者)的血父清與者患者(受者)自身管細胞講的反求應情剃況，攀確定和血清穿內是尊否有語自身酒抗體始或自汗身抗選體和途同種光抗體豪二者舍同時伏存在沒。(2若)普紅歸細胞：使堅用試描劑細算胞中擱的譜正細胞眾，應幅用各壞種抗紀體檢報查技厚術，禾檢測公患者團的血具清，青確定畝其抗動體的澡特異筍性。22紅細著胞血源型檢舌測三、逮不規(guī)議則抗痛體篩禿選和鄙鑒定抗體怪鑒定披試驗厲結果纖的解鞋釋及犬處理么：1.與譜虛細胞衣反應緒明顯撈，確臭定為丹單一婚抗體班或無授法確譽定為蛾單一蘆抗體蒙，應再加以國鑒別愛。2.與譜和細胞治呈弱膀反應薪，結傻果不冠明確（1）分捉析結遼果：①裕是否徑符合古劑量朝效應②挑譜細每胞是五否新斜鮮（2）改耳變試笨驗方筒法：①使纖用高仰靈敏丑度的遺方法宇重復熄試驗②添杜加試辜劑后車重復磚實驗③帶全抗體騙增強缸后重飄復試價驗23紅細現(xiàn)胞血攻型檢術測三、予不規(guī)農則抗助體篩訂選和盞鑒定3.與所遍有譜央細胞執(zhí)反應巷，自哪身細灰胞陰山性（1）強犯度不拒一致哪：可顯能存鞠在混麥合抗去體（2）強豪度一生致：抗確體可謙能為娛專于O細胞邊反應發(fā)的抗壇體（如冤：麗抗-I、抗-H、抗-H昆I）可唱能針肚對高濫頻抗哄原的燦抗體可躺能針料對譜旱細胞系的抗宇體4.與所喚有譜敲細胞終反應仙，自嚇身細槽胞陽顛性（1）存叫在自展身抗禿體（2）同慕種和齒自身徹抗體播同時屑存在（3）冷魂凝集比：在勁冷凝敗集素伐的作作用下得存在載凝集影紅細盒胞24紅細搬胞血格型檢澡測三、挺不規(guī)衣則抗交體篩堆選和鼻鑒定（4）假核凝劑顯：在蛾干擾劑因子牲的作宵用下侮一可渴造成剝紅細失胞假堤凝集（5）酶素引起鐮的多穿凝集（6）補困體的浪影響6.與譜吊細胞軟不反渡應，賞自身卻細胞張陽性可能昂是自證身抗皮體或C?陽性25紅細當胞血飽型檢祝測三、狹不規(guī)慣則抗久體篩獲選和嗎鑒定四、慮抗體籠篩查鴿和鑒揉定的翠影響腹因素1.抗體途篩查杠和鑒幸定細勺胞的朱質量篩涂查細貪胞不役包括梯低頻爆率抗戰(zhàn)原，測不能徑檢出態(tài)低頻黃率抗崖原。譜拐細胞撤：用跌于抗懇體鑒航定的舅試劑涌紅細載胞。在拌選擇汽不規(guī)助則抗匙體篩蚊查或糧鑒定卸細胞瓶時，經(jīng)應符飾合本揀地禿區(qū)淘不規(guī)己則抗載體分眨布的辜特點侍。2.試驗梅方法攀法Ig肆M抗體洪在4℃，凝麥集強瓶度明參顯大循于室橋溫，37奸℃會有憂減弱3.抗體趣的特妻異性度抗體塘篩查奶試驗熄為陰蠅性，明并不布意味填著被響檢血雷清中膠一定氏沒有長抗體篩政查細擺胞漏仔檢AB裂O亞型膜抗體秧（如徐抗-A?）26紅細王胞血藥型檢漏測三、婦不規(guī)備則抗遵體篩孫選和狼鑒定五紛不規(guī)雅則抗流體鑒漫定時懲遇見依的的稠問題1.不規(guī)魯則抗巡壽體篩武查陰陶性，吼輸血鞏后發(fā)懂現(xiàn)溶游血（1）交懲叉配類血假毯陰性（2）抗隔球蛋脅白試蘿驗不守規(guī)則范抗體你篩查冠假陰雷性試綁劑保疫存不橫當融洗央滌不揭充分實莫驗操魔作④紅俯細胞猶濃度扭過高器造成裁凝集斷減弱套或紅細胞束濃度視過低磨造成音凝集農不易臣被觀朝察到2.不規(guī)李則抗鄉(xiāng)豐體篩吐查陽濟性，是抗體壯特異穗性難怠以鑒掌定（1）抗訪體篩作查假側陽性至：①離幻玉心不夢當②焦試管陡污染③硅役膠管仆引起霸的凝末集（2）譜趟細胞凱單一漂：應提采用3個以涉上不騾同供烤應商汪的譜警細胞永系，稅排查灣抗體酬的特坡異性捏。27紅細圾胞血肺型檢圾測四、敘交叉糠配血極試驗（一裂）要策求和斥內容交叉貓配血違的要獸求：主側葬配血焦要求類：絕對告不可召以有梢凝集伯或溶雕血現(xiàn)等象。次測斃配血陸要求難：供血盾者血遞清加雨受血袖者紅疫細胞寬在允洋許范西圍內介，可測以有繩凝集嚷現(xiàn)象似，但刪不可漂以有械溶血。凝集不凝集28紅細峽胞血甚型檢誤測四、氏交叉到配血極試驗交叉宏配血蘿試驗冒的內喂容患者獻血者主側次側主側倦配血用患恨者血騙清與靈供者紅吸細胞梯進行壯試驗次測咸配血供血雷者血膽清與跪患者紅新細胞唐進行爺試驗29紅細輝胞血冊型檢怕測四、抵交叉駱配血總試驗交叉影配血筋的目友的交叉暮配血辨試驗終是輸遣血前遼必要光的步獅驟，擁主要留是檢句查受利血者田血清沈中有覆無能從破壞掀供血跟者紅敏細胞駐的抗隔體。原主要坐目的凡是為姓了防咸止輸雞血后影產(chǎn)生板溶血膜性反籃應。盡可判能確膽保對鹽人和娘一個捧病人卷來說處，輸督了供窗血者繳的血躬不會荷引起碼有害宇反應惑，并攝且使揚紅細獲胞在公輸注藏后能蟲保持輩最長旨的存像活時殲間。30紅細垃胞血年型檢尿測四、端交叉抹配血戲試驗（二世）結派果的窗解釋暮及處容理1.抗體素篩查橫陰性騙，交姓叉配凳血相爛容：絕大陪部分神標本幼抗體燦篩查某陰性業(yè)，交燈叉配羊血也荒是相絲式容的揀。2.抗體癢篩查當陰性貸，主故側交能叉配拼合試鄰驗陽只性（1）復膏查血鉗型（2）主稼側凝銀集類B抗原（3）血勁清中催可能憂含有括一種AB明O抗體阻，必局要時曬可以幻玉做AB佩O亞型問鑒定31紅細荷胞血灶型檢挽測四、擔交叉亂配血知試驗3.抗體慈篩查泥試驗廣陽性然，主鄉(xiāng)豐側交龜叉配掠合試窄驗陽館性（1）自恨身對鳥照試挪驗陰規(guī)性：卸受血贈者體穗內有綁同種篩不規(guī)核則抗僅體。（2）自兇身對德照試肚驗陽家性：煮受血刮者血胸清內晴可能帽有自慰身抗打體或同時算存在偶不規(guī)爭則抗帖體。（三腥）影業(yè)響因郊素①離子陵干擾②溫鳳度③操臥作不宵規(guī)范④離心手不當32紅細丙胞血往型檢壤測第二趟節(jié)航鹽水娛介質加實驗紋技術鹽水沸介質悔試驗姓技術鄭常用雄于血魯型鑒俱定、勾血清熔中Ig塑M類抗抽體的坡篩查艇和鑒音定、縮慧鹽水妙介質疫的交劫叉配鋸血等溝?；久７椒?.平板醬法泡用兇于AB麗O血型宇和Rh凈D抗原纖的定延型特點優(yōu)：簡國單、戚快速竹，但偵易污投染環(huán)決境。2.試管秧法陷為斗定型絲式試驗筋方法棉，也衡可于僅半定犧量試街驗。驕是輸狗血前檢碑驗最承常用恢的試嚇驗方復法。特點烏：簡仁單、栗快速允、易慘學，挨結果閣準確肺、可秘靠。3.微孔陷板法跨為定驕性試棕驗方庫法。33紅細善胞血訓型檢邀測第二聚節(jié)饒鹽水南介質努實驗翁技術鹽水盜介質榆配血勁方法患者獻血者主側次側離心看結窮果陽性陰性34紅細珍胞血族型檢挨測第二繁節(jié)字鹽水舌介質慨實驗揀技術35紅細脈胞血蚊型檢疼測第三逐節(jié)鐘酶喇處理廣實驗違技術原理章：在雜酶的岡作用珍下切鑒斷帶面有負輔電荷牢的羧超基基煤團的太唾液剖酸，歌降低Ze貫ta電位賺，縮墾短紅膽細胞橋之間幫的距西離。駱增強Ig繳G抗體嫁對紅逐細胞紫的凝芬集。常用延對的俗酶：卵菠蘿酬酶，葬無花代果酶豆，木龜瓜酶36紅細堂胞血宏型檢祝測第三翻節(jié)之酶墳處理姿實驗蕩技術酶介避質配限血方均法患者獻血者主側次側主次剝側均加就酶酶上海市血液中心血37紅細椒胞血膽型檢蕩測第三刃節(jié)劇酶膀處理賄實驗才技術37快℃水浴毀30悶分鐘37域℃離心看結鑼果陽性陰性38紅細捷胞血穗型檢虛測第三臺節(jié)品酶扎處理法實驗雄技術結果跡的判查斷（1）陽貞性對琴照管薯凝集健，陰虧性對非照管炮凝集騾，被洋檢管讓凝集母為陽性，做不出兩現(xiàn)凝尸集判愿定為叫陰性認。（2）陽企性對筒照管掃不凝刻集和襪（或索）陰而性對祖照管慢凝集倡，實絡驗失敗分撕析原張因，刺重新她實驗傾。39紅細傍胞血植型檢嬸測第四佛節(jié)抗賢球蛋躲白實秋驗技諷術一、君基本堵原理抗球扎蛋白匪試驗解（Co從om仍bs實驗陰）主韻要用軌于檢決測血妨清中拋的不禿完全設抗體喂如：虹Ig擱G、軌Ig談A和鏈（或稅）補覆體如吼：C扣3、蟻C4卡。在鹽末水介貞質中卷，不宏完全制抗體怨只能盤致敏爪紅細棋胞，鑒而不阻能使辱紅細液胞出員現(xiàn)可蒜見的汁凝集勤反應餡，加塌入抗晝球蛋教白試絕劑后津，抗秒球蛋序白分妨子的Fa纏b片段觀與紅絹細胞階表面遷的受物體結訂合，臣而產(chǎn)束生紅菌細胞眉凝集也，因晃此采聚用此檢方法合可以屑檢測間出血窮清中奏是否習存在尼不完綢全抗討體。40紅細棵胞血問型檢通測第四豬節(jié)抗敞球蛋良白實擁驗技凍術抗球州蛋白鑰試驗題原理喪圖41紅細拼胞血碼型檢臥測第四惰節(jié)抗我球蛋弄白實鍬驗技耽術二、帆分類男及應泄用抗球蛋白試驗直接間接致敏紅細胞的不完全抗體、補體血清中的不完全抗體應用HDN的診斷、AIHADE的診斷、藥物誘發(fā)型溶血病的診斷交叉配血及血型鑒定、器官移植、等42紅細答胞血留型檢引測第四啞節(jié)抗處球蛋也白實草驗技潛術抗球攜蛋白貨配血頃方法患者獻血者主側次側37℃37℃水浴30分鐘三洗43紅細毯胞血坦型檢征測第四懇節(jié)抗黎球蛋擊白實癢驗技緞術抗球喉蛋白村方法倍配血長方法加抗球蛋白抗球蛋白試劑上海市血液中心血離心看結航果陽性陰性44紅細勒胞血忘型檢診測第四拾節(jié)抗想球蛋花白實剛驗技絮術三、結果魔的判酬斷直接皂抗球丘蛋白貸試驗碼：（1女）陽罷性對嶄照管漲凝集王，陰廁性對農照管渡不凝此集，族被檢須管凝平集，判定撲為陽啞性。（2陳）陽稠性對舊照管夾凝集尖，陰避性對漂照管異不凝躺集，霉被檢雷管不礦凝集，亦須做影陰性親確認慢后判巡壽定結堆果。（3間）陽腐性對森照管丑不凝賓集和范（或吃）陰默性對摔照管狡凝集御，結粱果不可信疼不能痰發(fā)出天報告章，分鍵析原冠因后虜重做處試驗納。45紅細棒胞血理型檢非測第四吼節(jié)抗笛球蛋活白實圈驗技撇術間接煎抗球嶄蛋白屋試驗辨：（1揭）陽賤性對始照管市呈現(xiàn)始凝集早反應漆，陰松性對爸照管楚不呈好現(xiàn)凝球集反竹應，香被檢悠管呈蠅現(xiàn)凝籌集反聯(lián)應為方陽性輔結果章，表童示被簡檢者睛血清中怒含有咐抗體扒。（2驅）陽罰性對儀照管叢不凝食集和蠟（或止）陰捕性對養(yǎng)照管刻出現(xiàn)憂凝集負，實熊驗失謝敗，參分析括原因除重做域試驗吼。46紅細愧胞血始型檢踏測第四匹節(jié)抗郵球蛋挽白實共驗技育術四、注意羽事項（一爪）直符接抗孟球蛋乓白試再驗1.耗抗線球蛋燥白血從清應喂按說常明書郵使用駐最適妖稀釋食度，弓避免循出現(xiàn)肌前帶蔽現(xiàn)象景而誤生判為箱陰性零。2.蓬結軋果判咸讀時滔應轉殊動拖鄰拉，柔細胞為扣搖捷散后培，如蘇肉眼蝕未見例凝集濤，應謙將反澡應物廊涂于仔玻片訓上，弱在在滅顯微冷鏡下被觀察濁確認雖陰性日。3.紙被犯檢標隙本需橋用E傲DT曲A抗覆凝，幼避免篇出現(xiàn)您假陽場性；奇標本劉不宜郊久置湯，防該止紅編細胞爬上已陶致敏尚的抗肚體游省離到骨血漿掏中，挺造成慮假陰復性或抓陽性橡程度畏降低林。4.傾紅幣細胞門表面請存在制蛋白潤質就庸會與賓抗球亞蛋白鎮(zhèn)結合女。因步此受殖檢紅遭細胞椒一定垮要充辯分洗里滌，揚除去次血清嫂蛋白儀，避母免假久陰性境的產(chǎn)旋生。5.例如逝需進熟一步退分析薄體內悅致敏內紅細糖胞的畝免疫常球蛋型白的源類型漫，可阻以分軟別以東抗I搞gG質、抗征C3敗單價彈抗球績蛋白配血清繳進行始試驗商。47紅細支胞血團型檢笨測第四讓節(jié)抗肅球蛋蕩白實判驗技腥術（二姐）間接抗論球蛋商白試揉驗1.嬌紅憂細胞弊洗滌美過程年中不帽宜中劈燕途?；刂?，揮每次叨加生柜理鹽如水前潔要是夏紅細孫胞完退全懸走浮；錫洗滌移過程梁中防取止交筒叉污駱染；獵應充益分洗法滌，帶避免囑殘留鑒抗體舟部分哪中和約抗球妙蛋白戰(zhàn)試劑物而產(chǎn)倦生假鞋陰性梨。2.泰振及搖試起管不溉宜用頌力過醬大，蛋避免滋將松俊散紅刃細胞違凝塊紙搖散乏，使慶強陽念性結婚果誤鄉(xiāng)豐判為垂弱陽印性結北果，馬弱陽泛性結緩果誤麥判為微陰性財，對凳于弱默陽性鋸結果孟觀察重細胞偏扣是甲否出戀現(xiàn)缺手口來吉判讀垃。3.遞離老心后虧應立迷即看蹤蝶結果小，不隱宜久墨置。4.籌致免敏時托間：槳30蝦-6鋼0分耗鐘，特不超疲過9陸0分踢鐘48紅細倍胞血叨型檢伴測第四示節(jié)抗巷球蛋奇白實園驗技抄術三、臭抗球永蛋白遞實驗購的影皮響因射素一、身親和迎力親和停力?？鋽?shù)越耗高，渡抗原綁抗體寺反應耕致敏熄階段伙的抗井體水衣平越淚高二、仁孵育車時間煌和溫樂度鼠3忽7℃孵狀育3爐0-追60袋分鐘三、困離子杠強度在單涼純的鄙離子障強度仔溶液閘中，搏可增瘦強抗簡體的苦結合被作用眠，孵燭育時間惱將縮并短到15～30分鐘四、懂抗原鮮、抗乳體的樂比例2滴弄血清板對1欄滴2翁％～5奏％的紅炊細胞雅懸液五、督洗滌應盡沒量去播除上煙清液昏，降某低未蔬結合晉的免嶄球蛋嘴白。六、棒體外帖補體裂致敏七、熱紅細修胞自選身凝墓集49紅細狹胞血絕型檢削測第五代節(jié)喪聚鄭凝胺鐵介質軍實驗詞技術聚凝喂胺實君驗技所術是蠶一種再快速疼、簡鈔便檢丙測紅挨細胞籮不完棕全抗蠟體的嶼方法伶，可謠用來負檢測陣Ig獎G抗念體，況但I佛gG列抗體藥的抗婆-K魔抗體乞除外交。一、星實驗敬原理凝聚欺胺（塊po危ly彎ma租tc獨hi屢ng滿）法欺首先倍利用陰低離周子介映質降漂低溶階液的磨離子刷強度閑，減鞭少紅浙細胞織周圍似的陽懶離子淋云，眠促進松血清闖（漿張）中拼的抗岔體與沃紅細傷胞相某應抗倉原結歐合，否再加頓入帶完亞電蒸荷的肚高價撲陽離嗎子多宋聚物賢-凝賄聚胺綿溶液堵，中哀和紅煉細胞險表面秩的負處電荷蘿，縮測短細付胞間秤距，盯形成始可逆慕的非狀特異抬性聚襖集，故并使勝Ig杯G型毛抗體漏直接妹凝集顧紅細靠胞。念加入存中和建液后假，僅校由凝判聚胺暖引起胳的非夾特異滑性聚潤集，袖會因裁電荷解中和流而分守散，臨而由蔽抗體墨介導減的特躁異性殺凝集僑則不校會分寨散50紅細醫(yī)胞血膊型檢著測第五騙節(jié)啊聚李凝胺摩介質書實驗芬技術聚凝胃胺(Po息ly瘡br齊en賴e)配血旨方法患者獻血者主側次側室溫放置1分鐘主次側均加聚凝胺Polybrene上海市血液中心血51紅細免胞血夸型檢故測第五躍節(jié)片聚剩凝胺餡介質庸實驗爺技術聚凝責胺(Po竊ly哀br基en基e)配血書方法離心聚凝胺引起紅細胞非特異性凝集重懸液上海市血液中心血主次側均加重懸液看結果陽性陰性52紅細糕胞血剃型檢捕測第五撕節(jié)間聚誰凝胺寧介質襖實驗忍技術二、跌應蓋用范敢圍血型圣鑒定謝、抗撤體篩票查及房誠交叉鉗配血回試驗三、溝特點植靈疫敏、屠速度雖快、匙準確廳、操候作要企求高脾。四、千注意張事項1.煙不勵能用洞含有角枸櫞捐酸鈉落和肝頭素抗司凝標疫本2.足用樸聚凝卡胺試辨驗技煤術交殺叉配飯血，雁出現(xiàn)卻不配冠合時哥，要蜻用抗擴球蛋鄭白試房誠驗重鉤做，黑結果廊不一呈致時很，以筑抗球轎蛋白南試驗橡為主探。3.胸聚凝辟胺只沿能是局正常狡紅細劃胞發(fā)團生凝容集，炒對缺竊乏唾奏液酸反的細沈胞（如催：T委細胞彈及B樣細胞嬸）無血作用劑。53紅細末胞血廣型檢勇測第六躍節(jié)侍微鞠柱凝六集試許驗技富術一、索實驗鴿原理凝膠掛具有巡壽分子鴿篩效慨應和傷親和鉆效應兇，在薯微柱坦凝膠裝介質這中紅如細胞咐抗原老與相拳應的科抗體短結合碰，利愉用凝再膠的完空間璃位阻跪經(jīng)低默速離執(zhí)心，字凝集沃的紅轉細胞淺懸浮踏在凝并膠的不上層榆，而擔未和回抗體疫結合搭的紅炒細胞伙則沉京于凝肢膠的深底部遙（管挖底尖飛部）懼。54紅細盆胞血煎型檢雅測第六唱節(jié)盤微饒柱凝側集試尺驗技巖術一、微柱鹽凝膠酒試驗島原理將紅會細胞相和抗貨血清厚加在攪凝膠跟上部辨反應寸，離楊心后涼觀察罰凝集股的紅講細胞跑，被摘阻擋裂在小溉柱中國凝膠戚的上爸部或甚中央安，證瞎明發(fā)聲生凝厲集反塞應，爺判斷牢凝集徒反應務陽性,游離頓的紅煩細胞搖，被田擠過廈裝有窗過濾辛介質鴉的小梯柱，圣而到男達小深柱的戀底部罷，證釀明未奴發(fā)生象凝集敲判斷嶼陰性.操作編及結芹果的多判定55紅細緞胞血荒型檢驕測第六許節(jié)撓微始柱凝陷集試昌驗技里術二、縮慧應用1.使抗球斜蛋白憲試驗崇直傷接抗隔球蛋澇白試堂驗和露間勤接抗康球蛋酸白試拌驗。2.慶AB據(jù)O血齊型鑒幅定罵可做匪單純叛正定岡型，忍也可技同時阻做正價反定廢型。3.吸其他抽血型它系統(tǒng)輸檢測爪如R躲h其龜他抗駐原（貝Cc嘉Ee辜）定桑型三、意特征冤及優(yōu)干點1.針簡便2.逗準確虹結歡果清襲晰明挑確妙，可籍重復為性強的。3.促敏感4.堡結果冷保存持時間仍長5.醒標本淺用量朋少6.額標準棉化7.購安全56紅細哀胞血跪型檢謎測第六貼節(jié)塞微養(yǎng)柱凝淚集試負驗技公術四、誕微柱額凝集寫試驗漸中可硬能存忙在的彎問題1.店抗鼠凝劑筆不足畏或不斯含抗太凝劑扔的血乎漿標游本常林出現(xiàn)糠假陽扔性。2.獻實崖驗室搞溫度名較低嶄時，率易出本現(xiàn)假泥陽性線結果碼。3.?？姑钤?、鴉抗體值過少等、過龍弱；啦抗原賭、抗技體比嶼例不阻當時致易出常現(xiàn)假私陰性喘。4.壓離憲心力衫過大置時，歉容易造使弱肆陽性軟成為舟陰性按格局軟。5.栽溶血量反應或：①反飯應液己是低秩滲溶曲液②溫火度過蜻冷或敏過熱③紅射細胞隆或抗固體被克污染④其他錘可使位紅細索胞破壞壞的臉理化厲因素57紅細寬胞血碼型檢韻測第六你節(jié)戒微乒柱凝萍集試來驗技滲術五、負局限鞋性與瓦發(fā)展癢前景微柱度凝集姿抗人舊球蛋碗白試寬驗及否微柱鞠膠免桐疫檢讓測技負術的搞本質美是血集凝試這驗，爪這理仇論上錘位制仗備抗體原抗掃體包囑被的搶紅細今胞為耽指示恥紅細腿胞，診以間球接血東凝試導驗來脈檢測廚紅細披胞抗康原抗也體以凡外的苦其他魄血液怨紅細圈胞、公中路則標志蔽、病剃原微吸生物使，以美及人真體中狂其他其可溶餐性抗厭體，鈴如對剝藥物吳抗體遲、自星身抗侮體的完檢測越等提慢供了妨比傳脈統(tǒng)血墻凝檢請驗更節(jié)為敏陰感、只準確伴、簡止單易崇行的醋方法熱。微柱逢凝集魂試驗裁技術粒獎在廊臨床懸各個盤領域快有更伯為廣妥闊的盛發(fā)展綱。58紅細喝胞血悲型檢刃測第七撕節(jié)循吸借收放趟射試殲驗一、驗概念1.霉吸收惜試驗吵:抗慘原與能抗體賄的結董合是誦特異蓄性的款，因瓦此具剩有抗改體活尤性的貸血清肆加入趴相應很抗原牌后，亡抗體湖的活懼性下鴉降或映消失校，這夾種作創(chuàng)用稱誘為吸菊收試航驗。2.夢放散某試驗羨是抗薯原與耳抗體賀的結周合是男可逆弟的，蠻在物悅理條脂件改誤變時餐，抗宋體又看會從活抗原慨抗體酷復合還物上號分離疫下來膠，將思抗體蹲由抗每原抗卻體復配合物岔上分黎離下個來的隊試驗趁稱為嗓放散遣試驗59紅細搶胞血堂型檢成測第七勞節(jié)絕吸尋收放肥射試貸驗（一巷）相飽關的如概念抗體最可與稻相應電的抗腔原在秘適當扔條件理下可勿發(fā)生萬凝集都或致朵敏，允這種搜結合咐是可閣逆的徐，如親改變襯某些榮實驗裁條件博，抗車體可莖從紅騎細胞宣解離闖下來友，然狗后檢鏈測解捐離下現(xiàn)來的攜抗體忠。這繪種實辨驗稱復為吸潛收放辜散實盟驗?！渥皂樕砜估w：理論膊上講蔬凡是37逐℃與自助身紅包細胞奏不反聞應，拌而只龍有在冶低于37慕℃環(huán)境酬下才喉能和溪自身版紅細羞胞反余應的駐抗體統(tǒng)均可尺稱為山冷自劫身抗裙體。悶實際搞上，諒冷自伯身抗蒸體大咳多數(shù)瓦只能轟在很旅低的寬溫度止下(例如4℃江)與自燭身細論胞反唉應?！鶞刈缘鹕砜构んw：溫自聯(lián)身抗訂體是懂指在37遵℃條件杯下能喪和自規(guī)身紅烤細胞咳反應詳?shù)目官M體。少當患憑者血丹清中壓含有央溫自賤身抗幼體時焦，患數(shù)者一繡般均騾有些翁貧血腦或溶膏血癥露狀。辣溫自蟻身抗況體可話分為敢兩類:大多堵數(shù)情禁況下訴為lg倘G類溫數(shù)自身安抗體影，極權少數(shù)匯情況鍋下也的會存估在Ig骨M性質禾的溫始自身滑抗體。60紅細我胞血低型檢也測第七摸節(jié)搞吸兼收放亮射試哲驗（二題）吸牢收實清驗冷抗洋體在4℃反應破最強踐，通真常用劉冷吸幼收技排術（友自身隸抗體玻用自民身紅愉細胞靜吸收詢；同蹈種抗攔體用吃對應宅紅細憑胞吸濾收）部。Ig桃M抗體垃通常錦在4℃條件躲下比22胖℃或37械℃更容倚易吸容收，勤且容冠易完極全吸亮收。Ig賢G抗體晝通常豪在37吩℃的吸調收效查果最矛好，請但難捧以完坦全吸雀收。1.冷抗圍體吸碎收實釘驗應用筆范圍屋：①自身趣冷抗欄體的娘吸收最②其名他冷煤抗體缸的吸辜收2.溫抗娛體吸境收實騾驗應用虛范圍甜：①自身惰冷抗遠體的額吸收鉗②其騙他冷阻抗體怪的吸趟收61紅細均胞血擊型檢馳測第七喬節(jié)木吸爺收放蹈射試驕驗（三偷）放昨散實稿驗放散點實驗跡是把咸結合勇到紅指細胞蜘膜上于的抗琴體解疑離下棒來，障用于偽其他度目的駛。通想過放葡散實親驗得舍到的沈含有捉或不局含有那抗體洋的溶倦液稱掛為放略散液負。※放散換的目腳的：得到痛紅細糕胞上丹致敏僑的抗頁體或暖沒有訪抗體奸吸附簽的紅律細胞過，前豎者得獲到的遷是自舅身抗觀體，而用于演自身濕吸收忌；后平者得源到的設是紅饅細胞銳，用砍于血饒型鑒出定和挨交叉恥配血?！派⑺薜姆近c法：熱放開散技卻術、古乙醚槽放散噴技術播、磷燒酸氯頁喹放夾散技租術、蛙凍融蠟放散度技術類、檸捏檬酸灰放散賴技術賄、二林甲苯迅放散紅技術摟等。62紅細躁胞血外型檢很測第七真節(jié)叢吸羨收放撿射試作驗1.熱放秧散技概術§應用燥范圍AB熊O抗體山的放彼散（稼新生店兒溶螞血病勒實驗補）§注意拘事項溫度杠過高甚，抗斥體可梯能變辯性；蝦溫度挎過低準，容和易使抗體潑從紅羨細胞載上解濾離不百完全2.乙醚吼放散鮮技術§乙醚側為有怖機溶巴劑，聰可以默破壞淹紅細憐胞膜剖，解端離Ig外G抗體柜，該梁方法傻制備壯的放繞散液第，抗偉體回改收率暴高?！爝m用案范圍主要壁用于媽紅細非胞上呀的各居種Ig處G抗體迅的擴條散。3.磷酸門氯喹真放散壩技術§主要副用于梅得到哄沒有呢任何訴抗體縣附著楊的紅殖細胞迅。此扁方法州不能亞將補筆體從旦紅細損胞膜全上解紐奉離下墨來。63紅細聲胞血已型檢坦測第七秀節(jié)尺吸柱收放開射試侍驗4.凍融匯放散悶技術§適用塑范圍AB尿O抗體塵的放例散，榨如新禾生兒娘溶血數(shù)病的哀相關凈檢測什實驗輛。5.檸檬黑酸放武散技議術§適用遷范圍奏用于昂解離穿紅細較胞膜狡上致洽敏的Ig筑G抗體獸對紅扇細胞松進行篩抗原的鑒控定，犁但Ke炮ll系統(tǒng)胡的鑒趨定除碌外?！熳⒁獬马椓碓摲綕{法可絕破壞Ke伙ll系統(tǒng)辦抗原費，特慕別是K抗原而，因忍此本厭方法放散虎后的匹細胞叉不能齡進行Kl季l系統(tǒng)住定型喂試驗社。64紅細未胞血轎型檢杯測第七旋節(jié)摟吸潮收放院射試煩驗（四兼）吸應收放步散試曠驗的假應用☆迅證實疲存在滋于紅直細胞臂上的捧若抗訓原☆分助離、亭鑒定礎混合吉液體☆除筆去血遙清中摟不需號要的漂抗體☆濃育縮低繪效價選抗體☆核貍實抗攝體特撕異性☆利宏用吸積收放貢散技厭術鑒絮定引下起新地生溶浸血病皂和免阻疫性龜輸血事反應盾的抗旗體☆研資究鑒單別免箱疫性胞溶血陽性貧排血的督抗體65紅細足胞血都型檢散測第八天節(jié)推凝準集抑努制試茅驗一、概述請：抗體有能與銷有相拘應抗機原的委紅細辟胞發(fā)納生特豈異性珠凝集嬸，體稠液中些的可綠溶性裕抗原文物質愉能與裙該抗摸體發(fā)衛(wèi)生特月異的獅中和寶，抑邪制了季抗體識凝集宏紅細諒胞的很作用憤。用煮這種朋可溶逢性物辯質來站抑制躍抗體惹與紅早細胞巖凝集說的試仰驗，國稱為鬼凝集卻抑制位試驗謠。常待用于建AB慕H或享Le于wi劫s分葡泌狀吐態(tài)的策檢查寫，幫符助A調BO醋亞型曾的確目認以還及特賭殊情驢況下紫（紅偵細胞針標本佳完全圾溶血奪）飯AB梳O血咬型的努鑒定塌。66紅細鏈胞血修型檢命測第八耍節(jié)壺凝拜集抑弟制試漢驗二、狹抑制近物處議理及徐抗體膊標化☆收多集液陰體唾液穗標本戴作為臥抑制咽物，易煮沸飄使酶綁失活厭?！顦肆司幵纯怪i血清抗體紋需通耗過倍謙比稀例釋，載找出娃可也培凝集映紅細噴胞至康“﹢﹢子﹢”的斜最高枝稀釋悔度，賭并按貞照該耳稀釋躁度進拔行稀揪釋。67紅細窗胞血腿型檢睜測第八勾節(jié)但凝拾集抑巧制試爬驗三、襪唾液太中可貧溶性AB具H血型芳物質滲的檢冊測（一文）結