分子生物學(xué)新技術(shù)在中醫(yī)外科上的應(yīng)用

分子生物學(xué)新技術(shù)在中醫(yī)外科上的應(yīng)用第一頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五提綱繼承，創(chuàng)新

1.摘要

2.角蛋白的特性

3.角蛋白相關(guān)的遺傳性皮膚病

4.展望

第二頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五前言

近幾年對(duì)于人類(lèi)角蛋白的基礎(chǔ)生物學(xué)和一些特異性的單基因疾病的病因?qū)W及發(fā)病機(jī)制研究取得了重大進(jìn)展，至今已發(fā)現(xiàn)共有19種角蛋白基因突變與特異性疾病相關(guān)。本文總結(jié)了角蛋白的特性、相關(guān)疾病基因突變特點(diǎn)及相關(guān)的遺傳性皮膚病分子遺傳學(xué)研究現(xiàn)狀。繼承，創(chuàng)新第三頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五角蛋白（keratin）

繼承，創(chuàng)新是一種抗機(jī)械、抗化學(xué)刺激的蛋白質(zhì)，是角質(zhì)形成細(xì)胞的主要結(jié)構(gòu)蛋白，是組成中間纖維蛋白的主要成分。人類(lèi)角蛋白的基因達(dá)于所有的上皮細(xì)胞中，包括很多內(nèi)在器官（單上皮）的單層上皮細(xì)胞，還有很多復(fù)雜的多層上皮（復(fù)層上皮）細(xì)胞.角蛋白基因的正確表達(dá)以及角蛋白網(wǎng)的功能正常是表皮細(xì)胞穩(wěn)定和正常分化的基礎(chǔ)。編碼角蛋白基因的突變可造成角蛋白結(jié)構(gòu)的異常。目前已發(fā)現(xiàn)10余種遺傳性皮膚病與角蛋白基因突變有關(guān)：先天性大皰性魚(yú)鱗病樣紅皮病、單純性大皰性表皮松解癥、Siemens魚(yú)鱗病、表皮松解性掌跖角皮癥、念珠狀毛發(fā)、先天性厚甲癥、白色海綿狀痣等。第四頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五角蛋白特性

繼承，創(chuàng)新結(jié)構(gòu)

角蛋白的分子結(jié)構(gòu)都是類(lèi)似的，分為螺旋桿狀區(qū)、非螺旋的頭區(qū)和尾區(qū)以及連接區(qū)。桿區(qū)由約310個(gè)氨基酸組成，有4個(gè)α螺旋片段即1A、1B、2A、2B，片段之間為3個(gè)非α螺旋的連接區(qū)L1、L12、L2。在1A起始區(qū)及2B結(jié)尾區(qū)有兩個(gè)高度保守的區(qū)域,稱(chēng)為螺旋起始區(qū)(HIP)及螺旋結(jié)尾區(qū)(HTP),分別與頭區(qū)和尾區(qū)相連。第五頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五角蛋白的特性:分類(lèi)10余種構(gòu)成毛發(fā)和甲的毛發(fā)角蛋白或“硬”α角蛋白。功能分類(lèi)

繼承，創(chuàng)新20余種構(gòu)成表皮和許多內(nèi)臟器官或體腔上皮的角蛋白或“軟”α角蛋白第六頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五角蛋白的特性:分類(lèi)Ⅱ型角蛋白為中性或堿性蛋白質(zhì)分子生物學(xué)分類(lèi)

繼承，創(chuàng)新Ⅰ型角蛋白為酸性蛋白質(zhì)第七頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五角蛋白特性:遺傳學(xué)

繼承，創(chuàng)新角蛋白基因主要簇集于染色體的兩個(gè)區(qū)域,編碼1型角蛋白的基因，除了K18，均位于染色體17q12－21。所有編碼2型角蛋白的基因，包括編碼K18的基因均位于染色體12q13。角蛋白的大部分基因主要是通過(guò)使用生化、免疫和cDNA克隆方法確認(rèn)的。所有的角蛋白，包括很多多態(tài)性的可變區(qū)都是有單拷貝基因編碼的。在人類(lèi)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了至少49種編碼角蛋白的基因。角蛋白基因的表達(dá)具有組織和細(xì)胞特異性。其中22種在不同的上皮細(xì)胞中表達(dá)，15種是毛細(xì)胞特異性，5種為毛根內(nèi)鞘角蛋白角蛋白.基因突變一般以顯性方式遺傳,主要為錯(cuò)義突變,少數(shù)為無(wú)義突變、剪接位點(diǎn)的突變等。第八頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五角蛋白繼承，創(chuàng)新角蛋白相關(guān)的遺傳性皮膚病第九頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五1.先天性大皰性魚(yú)鱗病樣紅皮病(BCIE)繼承，創(chuàng)新BCIE又稱(chēng)表皮松解性角化過(guò)度，是一種罕見(jiàn)的常染色體顯性遺傳性皮膚病，以形成紅斑、水皰及角質(zhì)層增厚為特征。

第十頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五先天性大皰性魚(yú)鱗病樣紅皮病(BCIE)繼承，創(chuàng)新第十一頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五先天性大皰性魚(yú)鱗病樣紅皮病(BCIE)繼承，創(chuàng)新BCIE是由K1和K10基因的中央保守區(qū)發(fā)生突變所致，其突變大多位于1A和1B區(qū)的α螺旋末端序列。1A和1B區(qū)是與角蛋白絲聚集相關(guān)的高度保守區(qū)域,在維持細(xì)胞的完整性上有重要作用。此區(qū)域的突變雖然不影響二聚體的形成，但導(dǎo)致角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)的張力絲排列異常，使角蛋白聚集成塊，細(xì)胞內(nèi)水腫，導(dǎo)致表皮松懈。第十二頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五2.白色海綿狀痣（WSN）繼承，創(chuàng)新

WSN是一種良性的常染色體顯性遺傳疾病，主要累及非角化層鱗狀上皮細(xì)胞。它主要表現(xiàn)為口腔的白色海綿狀斑，偶爾累及食管和肛門(mén)生殖器黏膜。

有報(bào)道本病出現(xiàn)K4和K13突變。

第十三頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五白色海綿狀痣（WSN）繼承，創(chuàng)新第十四頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五3.念珠狀毛發(fā)（monilethrix）繼承，創(chuàng)新

monilethrix為常染色體顯性遺傳疾病，主要表現(xiàn)為不同程度的禿發(fā)和呈串珠狀的間斷性的橢圓形結(jié)節(jié)和縮窄。顯示毛發(fā)的結(jié)構(gòu)蛋白－絲泡角蛋白為此疾病的主要候選基因。絲泡角蛋白基因或者位于1型角蛋白簇基因的17q12-21，或者位于2型角蛋白簇基因的染色體12q13。第十五頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五念珠狀毛發(fā)（monilethrix）繼承，創(chuàng)新第十六頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五4.先天性厚甲癥(PC)

PC是一組常染色體顯性遺傳性外胚葉發(fā)育不良的疾病，主要臨床表現(xiàn)為營(yíng)養(yǎng)不良性甲肥厚伴角化過(guò)度。PC主要類(lèi)型為PC1型和PC2型。PC1為K16或K6a基因突變所致，PC2則與K17或K6b基因突變相關(guān)。繼承，創(chuàng)新第十七頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五先天性厚甲癥(PC)

繼承，創(chuàng)新第十八頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五其他疾病繼承，創(chuàng)新單純性大皰性表皮松解癥(EBS)

表皮松解性掌跖角皮癥(EPPK)

大皰性魚(yú)鱗病(IBS)

第十九頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五展望繼承，創(chuàng)新

展望第二十頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五展望繼承，創(chuàng)新

角蛋白對(duì)于維持細(xì)胞的穩(wěn)定和功能正常具有重要的作用，因此，我們?nèi)孕枰M(jìn)一步研究。對(duì)于研究工作來(lái)說(shuō)，關(guān)于疾病修飾基因在角蛋白疾病中的作用是一個(gè)潛在的發(fā)展領(lǐng)域，可以對(duì)涉及控制中間絲動(dòng)力學(xué)的分子進(jìn)行深入研究，了解治病基因的調(diào)控機(jī)制以及角蛋白分子間的相互作用機(jī)制。基因治療將是今后研究的熱點(diǎn)，但由于角蛋白突變的顯性負(fù)作用，基因治療仍然是這組疾病中的一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。

第二十一頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五大腸癌應(yīng)用生物治療的展望第二十二頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五摘要

惡性腫瘤的生物治療已被列為除手術(shù)、放療、化療之后第四種治療惡性腫瘤新的重要手段，它是指通過(guò)宿主自身免疫機(jī)制的作用或給予動(dòng)物的物質(zhì)來(lái)達(dá)到抗腫瘤的目的，雖然有一些重新組合的生物治療物質(zhì)被公認(rèn)為某些惡性腫瘤的標(biāo)準(zhǔn)治療，但從整體而言，實(shí)體瘤的生物治療尚處于探索和試驗(yàn)階段，療效還不理想，有許多問(wèn)題尚未解決。大腸癌的情況基本相仿。本文就大腸癌對(duì)當(dāng)前常用的幾種生物治療，包括干擾素、白介素（IL-α）和單克隆抗體導(dǎo)向治療等逐一進(jìn)行扼要的介紹和評(píng)述。繼承，創(chuàng)新第二十三頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五1.干擾素（IFN）繼承，創(chuàng)新干擾素對(duì)各種腫瘤具有抗腫瘤作用，包括白血?。℉CL）、慢性髓性白血病（CML）、表皮T細(xì)胞淋巴瘤和Kaposi肉瘤。白血病和淋巴瘤是最敏感的腫瘤．單獨(dú)應(yīng)用干擾素或與化療聯(lián)合應(yīng)用其療效均極明顯。其它實(shí)體瘤如結(jié)腸癌、乳房癌、肺癌、骨肉瘤中單獨(dú)用干擾素的效應(yīng)小于10％。干擾素與5－FU聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，可增強(qiáng)5-FU的抗癌效應(yīng)，尤其對(duì)以往未經(jīng)任何治療的病人，其有效率明顯提高，可達(dá)64％，治療方便、花費(fèi)低，毒副作用小。聯(lián)合治療時(shí)，給藥劑量、用藥強(qiáng)度、輸注速度和時(shí)間控制都對(duì)藥物抗腫瘤的活性起著作用。第二十四頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五2.白細(xì)胞介素一2（IL－2）激活T淋巴細(xì)胞刺激單核細(xì)胞吞噬腫瘤細(xì)胞輔助B淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)和分化并誘發(fā)釋放淋巴因子IL-2作用繼承，創(chuàng)新第二十五頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五白細(xì)胞介素繼承，創(chuàng)新許多基礎(chǔ)和臨床研究已證明：IL－2與LAK細(xì)胞聯(lián)合用于臨床治療轉(zhuǎn)移性黑色素瘤和腎細(xì)胞癌。IL－2與化療聯(lián)合應(yīng)用的療效更顯著，目前已進(jìn)入臨床研究。鑒于IL－2在T細(xì)胞激活和增生中的重要地位和它在免疫反應(yīng)中所扮演的關(guān)鍵性角色，它可能是任何治療癌腫的成功的免疫療法的主角。作為輔助治療，IL－2可能對(duì)絕大多數(shù)實(shí)體腫瘤有效。在臨床應(yīng)用IL－2的時(shí)候，更需注意它可引起幾種全身性劑量限制的副作用，最常見(jiàn)是的血小板減少癥，其次有抵抗力的降低、可逆性心肌炎、心律紊亂伴低血壓和心肌梗死、低血壓。IL－2的累積劑量尚可引起腎功能減退和液體滯留。其他副作用有惡心、嘔吐、腹瀉、胃炎、肝功能損害、膽汁郁滯性高膽紅素血癥、發(fā)熱、寒戰(zhàn)等，都是可逆的。

第二十六頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五3.單克隆抗體導(dǎo)向治療繼承，創(chuàng)新單克隆抗體導(dǎo)向治療的機(jī)理：?jiǎn)慰寺】贵w（MCAB）導(dǎo)向治療的基本原理是將細(xì)胞毒性與補(bǔ)體和免疫系統(tǒng)的效應(yīng)細(xì)胞結(jié)合，對(duì)細(xì)胞增生起調(diào)節(jié)作用，以及抗遺傳性型疫苗。MCAB通過(guò)補(bǔ)體串聯(lián)或激起抗體依賴(lài)細(xì)胞的細(xì)胞毒性（ADCC）可作為一種免疫治療劑。

第二十七頁(yè)，共二十九頁(yè)，編輯于2023年，星期五單克隆抗體導(dǎo)向治療繼承，創(chuàng)新單克隆抗體導(dǎo)向治療的應(yīng)用：加強(qiáng)MCAB效能的策略就是將抗體和細(xì)胞毒性物質(zhì)結(jié)合起來(lái)，授予特異性，并降低單獨(dú)應(yīng)用這種毒性物質(zhì)的毒性。臨床上試行免疫結(jié)合的細(xì)胞毒性物質(zhì)包括毒素、化療藥物和放射性同位素。免疫毒素是將MCAB與高度致死的細(xì)胞毒素結(jié)合在一起。有許多植物和細(xì)胞的毒素