大小鼠實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般操作技術(shù)

要求：四人一組動(dòng)物：小鼠30g左右（每人1只）每組♂、♀各半大鼠150g左右（兩人1只）每組♂、♀各半材料:一次性1ml、5ml注射器、大小灌胃針頭（兩人一套）大小鼠固定器（兩人一套）棉簽棉球剪刀血色素吸管紗手套一次性膠手套染液頭皮針（4號(hào)半或5號(hào)）小鼠籠（每組2個(gè)）、搪瓷托盤（每組一個(gè)）試劑：75%酒精生理鹽水實(shí)驗(yàn)所需的試劑、材料和動(dòng)物量1當(dāng)前第1頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般操作技術(shù)（一）―――大鼠、小鼠2當(dāng)前第2頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)3R原則體外替代實(shí)驗(yàn)（目前在國際上被承認(rèn)的體外替代實(shí)驗(yàn)的方法）皮膚刺激實(shí)驗(yàn)眼刺激實(shí)驗(yàn)等體外替代實(shí)驗(yàn)3當(dāng)前第3頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)1.了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的目的和意義2.了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇和染毒途徑。3.掌握大、小鼠實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?當(dāng)前第4頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)5當(dāng)前第5頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和固定3.性別鑒定4.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物編號(hào)標(biāo)記5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒途徑和方法（灌胃、腹腔注射、尾靜脈注射）6.生物標(biāo)本的采集（鼠尾取血、眼眶取血）7.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死二.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：6當(dāng)前第6頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)實(shí)驗(yàn)流程7當(dāng)前第7頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)動(dòng)物物種選擇基本原則：

動(dòng)物的選擇8當(dāng)前第8頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)健康動(dòng)物首先看外觀：體形豐滿，被毛濃密有光澤、緊貼體表，眼睛明亮，反應(yīng)行動(dòng)靈活。有無明顯疾病癥狀體重、年齡小鼠3周體重約為10~15g，大鼠3~4周體重約為50~70g外觀觀察9當(dāng)前第9頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)動(dòng)物的抓取和固定注意抓取動(dòng)物的手法抓取固定時(shí)力量大小適宜10當(dāng)前第10頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)未成熟鼠生殖器發(fā)育不明顯，肛門與生殖器之間的距離來區(qū)分。遠(yuǎn)——♂、近——♀。成年鼠：雄性臥位可見睪丸，雌性可見腹部有12個(gè)乳頭。性別鑒定11當(dāng)前第11頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)常用標(biāo)記，兩種染料（苦味酸和中性紅或品紅）動(dòng)物的編號(hào)標(biāo)記12當(dāng)前第12頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)原則：同一實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡盡可能一致，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重大致相近；同組、同性別動(dòng)物體重差異應(yīng)小于平均體重的10%；不同組間同性別動(dòng)物體重均值差異小于5%；♀♂動(dòng)物各半，且♀♂實(shí)驗(yàn)結(jié)果分開統(tǒng)計(jì)、分析。稱重編號(hào)隨機(jī)分組

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組13當(dāng)前第13頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)經(jīng)口染毒（喂飼、灌胃、吞咽膠囊等）經(jīng)呼吸道染毒（靜式、動(dòng)式和氣管內(nèi)注入）經(jīng)皮膚染毒注射染毒（皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)、腹腔和鼠尾靜脈注射等）其它（直腸內(nèi)、鼻腔等）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物染毒途徑和方法14當(dāng)前第14頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)灌胃抓取老鼠時(shí)應(yīng)是鼠

成豎直線灌胃成功時(shí)，所遇阻力較小灌胃時(shí)注意胃容量15當(dāng)前第15頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)腹下1/3外側(cè)，避免損傷實(shí)質(zhì)器官扎入時(shí)有“落空感”，回抽無尿液或血液腹腔注射16當(dāng)前第16頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)從遠(yuǎn)端進(jìn)針注意拽鼠尾時(shí)不要用力過大，以免損傷鼠尾或使小鼠致死尾靜脈注射17當(dāng)前第17頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)血液采集（斷尾采血、眼眶采血、動(dòng)脈采血等）尿液采集膽汁采集糞便采集生物標(biāo)本的采集18當(dāng)前第18頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)眼眶后靜脈叢采血19當(dāng)前第19頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)脊椎脫臼法（斷髓處死）：大、小鼠斷頭法；急性大失血法；（摘取眼球法）擊打頭部法；麻醉后急性放血法；開放性氣胸法。動(dòng)物的處死20當(dāng)前第20頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)報(bào)告要求書寫整潔，過程明了內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，主要的?shí)驗(yàn)內(nèi)容，各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的主要的操作手法及注意事項(xiàng)（內(nèi)容可和后面的討論一起寫，按照每一個(gè)小問題來答題）實(shí)驗(yàn)討論：大動(dòng)物要求：某公司現(xiàn)研發(fā)出一種新型農(nóng)藥要做產(chǎn)品登記，請(qǐng)根據(jù)今天所學(xué)的內(nèi)容設(shè)計(jì)一個(gè)簡要的一般毒性試驗(yàn)方案（主要是操作思路和關(guān)鍵手法）。1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.實(shí)驗(yàn)過程：包括（1）動(dòng)物的選擇和分組；（2）選取兩種染毒方式；（3）關(guān)鍵的操作步驟。3.實(shí)驗(yàn)心得體會(huì)。小動(dòng)物要求：1、大、小鼠的抓取和性別判斷；2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的標(biāo)記方法；3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組方法；4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的染毒途徑和方法（灌胃，腹腔注射和尾靜脈注射方法）；5、動(dòng)物的處死方法。（還可包括實(shí)驗(yàn)中你覺得那些操作的手法自己不適合，或那些實(shí)驗(yàn)步驟需要改進(jìn)等，還可有其他的關(guān)于這堂課相關(guān)的擴(kuò)展知識(shí)都可上）三、實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫和實(shí)驗(yàn)討論：21當(dāng)前第21頁\共有22頁\編于星期三\3點(diǎn)1.抓取與操作動(dòng)物時(shí)小心不要被咬傷，如果被咬傷需立即用清水沖洗并用碘酒消毒。2.抓取動(dòng)物時(shí)用力要恰當(dāng),防止動(dòng)物窒息死亡。3.抓取動(dòng)物時(shí)要小心其身