抗腫瘤的生物技術(shù)藥物

抗腫瘤的生物技術(shù)藥物第一頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六2007年全球醫(yī)藥市場達到6750億美元左右，增速為5-6%，其中生物制藥市場收入為450億美元，增速為13-14%。生物制藥占醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)8.8-10%，其中美國市場占62%，歐洲占25%，日本占7%。美國已產(chǎn)業(yè)化的基因工程藥物200種，占藥品總銷售額的10%。我國生物技術(shù)藥物研究和開發(fā)起步較晚，已有20多種基因工程藥物和疫苗上市，正在進行臨床試驗的品種近100種。2005年我國醫(yī)藥生物技術(shù)產(chǎn)品總銷售額達到350億元。第二頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六至2008年底，F(xiàn)DA共批準99種生物技術(shù)藥物上市2007年29/110種生物技術(shù)藥物的銷售額超過10億美元2007年銷售額超過40億美元的藥物有16種，基因工程藥物占據(jù)7種：1.治療非霍奇金淋巴瘤的anti-CD20抗體Rituxan2.治療乳腺癌的anti-EGFRII抗體Herceptin3.治療腫瘤放化療后出現(xiàn)的白細胞減少的G-CSF4.治療肺癌、乳腺癌和結(jié)直腸癌的anti-VEGF抗體Avastin5.治療類風濕關(guān)節(jié)炎的anti-TNFα抗體Enbrel、Remicade單克隆抗體藥物第三頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六TypeProductMarketerApprovedChimericRituxanNon-Hodgkin'slymphoma

Genentech

November1997

ChimericSimulectOrganrejectionprophylaxis

NovartisMay1998ChimericRemicadeRheumatoidarthritis,Crohn'sdiseaseohnson&JohnsonAugust1998CDR-graftedZenapax

OrganrejectionprophylaxisRocheDecember1997CDR-graftedSynagis

RespiratorysyncytialvirusMedimmuneJune1998CDR-graftedHerceptin

MetastaticbreastcancerGenentechSeptember1998CDR-graftedMylotarg

AcutemyeloidleukemiaAmericanHomeProductsMay2000MonoclonalAntibodiesontheMarket第四頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六TypeProductMarketerApprovedMurine

RadiolabeledZevalin

Non-Hodgkin'sLymphomaIDECPharmaceuticalsandScheringAGMarch2002PhageDisplayHumira

RheumatoidarthritisAbbottLaboratoriesDecember2002CDR-graftedXolair

ModeratetoseverepersistentasthmaGenentechandNovartisJune2003Murine

RadiolabeledBexxar

CD20positive,follicular,Non-Hodgkin'sLymphomaCorixaandGlaxoSmithKlineJune2003CDR-graftedRaptiva

Chronicmoderate-to-severepsoriasisGenentechandXomaOctober2003ChimericErbitux

ColorectalcancerImcloneandBristol-MyersSquibbFebruary2004CDR-grafted

Avastin（Bevacizumab）colonandrectumcancer

GenentechFebruary2004第五頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六1979-1980國內(nèi)個別單位開始單抗的研制1984年以前基本是技術(shù)方法的建立和完善1985年以后單抗為基礎的診斷試劑用于研究和臨床

1987年以后單抗的體內(nèi)診斷和治療制劑被列入863計劃1992年我國第一個單抗衍生物被SDA批準進入臨床2005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131

美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于治療原發(fā)性肝癌的單抗導向同位素藥物.

單克隆抗體技術(shù)在我國的發(fā)展.第六頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六由分化成熟的終末B細胞--漿細胞合成、分泌的一類能與相應抗原（antigen，Ag）特異性結(jié)合的具有免疫功能的糖蛋白。什么是抗體（Antibody，Ab）？Ag1234B抗體，Ab

一個

B細胞只能生產(chǎn)一種抗體，對付某一抗原決定基。第七頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六B1B2B3B4

多克隆抗體Ag2341B4B4B4

單克隆抗體第八頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六第九頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的組成和排列順序高度可變，稱為HVR，或互補決定區(qū)（CDR）。VL區(qū)和VH區(qū)各存在個3CDRFR1~4為骨架區(qū)，穩(wěn)定HVR的結(jié)構(gòu)。Fab段：抗原結(jié)合片段Fc段：可結(jié)晶段FabFc第十頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六第十一頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六抗體的發(fā)展過程單克隆抗體基因工程抗體多克隆抗血清抗體庫第十二頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六傳統(tǒng)抗血清抗原免疫所有抗體混合123412341234多克隆抗體第十三頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六單克隆抗體1975年建立了單克隆抗體技術(shù)（淋巴細胞雜交瘤技術(shù)）。1984年獲得諾貝爾醫(yī)學和生理學獎。第十四頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六B淋巴細胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞融合第十五頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六B淋巴細胞骨髓瘤細胞雜交瘤BBB瘤瘤瘤HAT選擇培養(yǎng)液（黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶）選擇培養(yǎng)骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶而死亡第十六頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六檢測到所需的X抗體分離單個細胞進行克隆化培養(yǎng)檢測到所需的X抗體第十七頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六注入小鼠腹腔擴大培養(yǎng)體外培養(yǎng)大量單克隆抗體第十八頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六第十九頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六鼠單抗人單抗大鼠小鼠產(chǎn)量高、操作比小鼠麻煩少用易操作、多用HAMA反應人人雜交瘤人B細胞、骨髓瘤細胞融合人鼠雜交瘤人B細胞、鼠骨髓瘤細胞融合細胞雜交瘤技術(shù)第二十頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六單克隆抗體的不足：目前單克隆抗體均是鼠源性抗體，應用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體（humanantimouseantibody,HAMA)人體的排斥反應人體內(nèi)半衰期只有5-6小時到達靶組織的藥量僅有1％21第二十一頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六基因工程抗體鼠單抗100%鼠源鼠/人嵌合單抗(66-75%人源)人源化單抗(90-95%人源)100%人源為了降低免疫原性，降低相對分子量，增加穿透力，開發(fā)了新的基因工程抗體。恒定區(qū)人源化可變區(qū)人源化第二十二頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六Pr鼠VH人CHPr鼠VL人CL免疫球蛋白基因載體的構(gòu)建H鏈嵌合載體L鏈嵌合載體共轉(zhuǎn)染細胞啟動子人-鼠嵌合抗體基因工程改造策略第二十三頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六鼠VH鼠VL人CL人CH抗體分泌細胞第二十四頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六CDR序列CDR序列鼠單克隆抗體人抗體人源化抗體CDR移植第二十五頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六小分子抗體第二十六頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六小分子抗體的優(yōu)點：分子質(zhì)量小，免疫原性低。易于進入實體瘤周圍的微循環(huán)。無Fc片段，不易與具有Fc受體的非靶細胞結(jié)合，用于免疫診斷時成像清晰。構(gòu)建較簡單，易于操作和改造?？稍诩毦斜磉_，易于大量生產(chǎn)。小分子抗體的缺點：與抗原結(jié)合活性相對較弱。半衰期短。第二十七頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六抗體庫抗體庫技術(shù)：用基因克隆技術(shù)克隆全套抗體的重鏈和輕鏈的可變區(qū)基因，然后重組到特定的表達載體中，轉(zhuǎn)化特定的宿主細胞表達有功能的抗體分子，并通過親和篩選獲得特異性抗體可變區(qū)基因的技術(shù)。利用抗體庫技術(shù)篩選到的抗體可變區(qū)基因可被用于構(gòu)建基因工程抗體。第二十八頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六噬菌體抗體庫第二十九頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六抗體庫的優(yōu)點：越過了細胞融合的步驟，省時省力。擴大了篩選容量，易于獲得高親和力抗體。不需進行人工體內(nèi)免疫。第三十頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六單克隆抗體藥物：Trastuzumab商品名：赫賽汀英文名：Herceptin通用名：注射用曲妥珠單抗

(Trastuzumab)針對HER2的特異性單克隆抗體，用于治療HER2過度表達的轉(zhuǎn)移性乳腺癌

重組DNA衍生的人源化單克隆抗體可單藥使用,不良反應輕，耐受性好,可在門診治療療效顯著，中位緩解時間長第三十一頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六HER2人類表皮生長因子受體-2

HumanEpidermalgrowthFactorReceptor-2

分子量185kDa的糖蛋白:細胞外區(qū)（配體結(jié)合區(qū)）跨膜區(qū)（傳導信號）細胞內(nèi)區(qū)（激酶活性）HER2細胞內(nèi)細胞外細胞膜第三十二頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六Cellmembrane基因轉(zhuǎn)錄提高細胞運動抑制凋亡細胞生長和增殖轉(zhuǎn)移化療耐藥腫瘤生長EGFEGFREGFRTGFTGFEGFRHER2HER2HER3NRGNRGHER2HER4HER2HER2信號級聯(lián)放大核膜Intracellular第三十三頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六1=-

基因拷貝數(shù)2=-

mRNA

轉(zhuǎn)錄3=-

細胞表面受體蛋白表達4=-

細胞外受體功能域釋放A=HER2DNAB=HER2信使RNAC=HER2受體蛋白細胞核細胞質(zhì)細胞膜1234CBAHER2陽性：過度表達/擴增HER2正常表達細胞(HER2–)(~2萬個受體）HER2過表達的細胞(HER2+)(100–200萬個受體）第三十四頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六正常HER2表達HER2基因擴增導致HER2過表達HER2過表達導致腫瘤增殖促進細胞的生長和增殖------腫瘤發(fā)生抑制細胞的凋亡誘導血管新生提高細胞運動能力,增強腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移作用第三十五頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六HER2在癌癥中過表達：30％以上的人類腫瘤中存在HER2基因的擴增/過度表達（如乳腺癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、輸卵管癌、胃癌和前列腺癌等。20％－30％的原發(fā)性浸潤性乳腺癌有HER2基因的擴增/過度表達。Herceptin即為一種針對HER2受體的人源化單克隆抗體，是乳腺癌治療領(lǐng)域的第一個分子靶向性藥物，具有高效、低毒、選擇性強的特點。2010年，歐洲和美國先后批準化療聯(lián)合使用曲妥珠單抗治療HER2陽性胃及胃食管交界癌患者。第三十六頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六刺激刺激HER2タンパクがん細胞増殖刺激刺激HER2タンパク癌細胞増殖抑制Heceptin作用Heceptin癌細胞表面存在著Her-2蛋白，受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。Heceptin與Her-2結(jié)合阻斷和抑制細胞的增殖，用于

轉(zhuǎn)移性乳腺癌病人的治療。第三十七頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六HER2檢測流程免疫組織化學原位雜交第三十八頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六440mg 凍干粉針劑20ml 無菌注射用水赫賽汀?用法用量所需溶液的體積=體重（Kg）劑量（4mg/Kg負荷量或2mg/Kg維持量）

21（mg/ml，配置好溶液的濃度）每周方案三周方案用法用量首劑

4mg/kg，90分鐘內(nèi)靜脈滴注，觀察2小時維持劑量

2mg/kg，每周一次，30分鐘靜脈滴注首劑

8mg/kg，90分鐘內(nèi)靜脈滴注，觀察2小時維持劑量

6mg/kg，每三周一次，30分鐘靜脈滴注療程建議轉(zhuǎn)移性乳腺癌至少6個月輔助治療一年第三十九頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六

曲妥珠單抗輔助治療可以選擇的方案第四十頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六單克隆抗體藥物：Rituximab商品名：美羅華英文名：Mabthera通用名：利妥昔單抗(Rituximab)針對CD20的特異性單克隆抗體，通過基因重組技術(shù)生產(chǎn)的一種嵌合鼠/人的單克隆抗體,用于治療非霍奇淋巴瘤。第四十一頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六非霍奇淋巴瘤（non-hodgkin’s

lymphoma，NHL）瘤細胞成分單一，大多起源于B淋巴細胞，部分來自T淋巴細胞，只有少數(shù)來自組織細胞。故目前多傾向于根據(jù)細胞形態(tài)結(jié)合免疫功能分類：B細胞淋巴瘤（臨床多見）T細胞淋巴瘤CD20抗原在從前B細胞到活化B細胞的各個階段都表達,但在正常造血干細胞、分化成熟的漿細胞及其他類型造血細胞系卻未見表達，且CD20在超過90%的B細胞性NHL中均有表達。因此CD20成為腫瘤治療的一個較好的靶點。

第四十二頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六

Rituximab：通過ADCC，CDC促凋亡與化療藥物協(xié)同作用第四十三頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六淋巴瘤治療單克隆抗體Rituxi-CD20CD20第四十四頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六Epratuzumab：人源性IgG1抗CD22單抗60%－80％的B-NHL細胞表達CD22濾泡性淋巴瘤、套細胞淋巴瘤和邊緣區(qū)B細胞性淋巴瘤高表達CD22Anti-CD22與CD22結(jié)合后迅速內(nèi)在化抗CD22單抗其他針對B,T細胞的單抗第四十五頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六

復發(fā)濾泡性淋巴瘤劑量組總有效率（CR＋PR）中位TTP360mg/m243％23.7月480mg/m227％彌漫大B細胞淋巴瘤240mg/m233％8.1月360mg/m215％480mg/m220％EpratuzumabI/II期臨床試驗結(jié)果第四十六頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六抗CD30單抗CD30在霍奇金淋巴瘤的RS細胞和間變大細胞淋巴瘤高度表達，是治療淋巴瘤的理想靶點嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中第四十七頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六抗CD40抗體CD40在惡性T和B淋巴細胞中表達，CD40被認為與細胞的增殖及分化相關(guān)。SGN-40是一種人源化IgG1型抗CD40抗體，臨床前研究表明其對淋巴瘤細胞具有明顯的殺傷效應。目前正在DLBCL中進行兩項II期臨床試驗，一項為SGN-40單用，另一項為SGN-40與細胞毒性藥物聯(lián)合應用。第四十八頁，共五十四頁，編輯于2023年，星期六抗CD80抗體CD80為淋巴瘤治療中的另一靶點，其表達在不同時期的B細胞和霍奇金淋巴瘤細胞表面，其參與T和B淋巴細胞的激活。Galiximab是一種人-靈長類嵌合型抗CD80抗體，臨床研究表明在復發(fā)FL中具有較好的安全性和有效性。目前正在復發(fā)FL中進行III期臨床試驗，