判斷推理修改濕地植物提取物對致病性細(xì)菌的抑制作用

YangZhouM.S.MasterInhibitoryEffectsofWetland ntExtractonPathogenicBacteriaCandidate:JiaqiGeMajor:中抗生素是人類在領(lǐng)域取得的偉大成就之一，它對人類健康水平的提高和生命安全疾病的方法和藥物成為當(dāng)務(wù)之急。選用蘆葦（Phragmitesaustralis）、空心蓮子草Roxb.natansferoxnatansL.）、藻（CeratophyllumdemersumL.）、鴨舌草（Monochoriavaginalis）、黑藻（Hydrillaverticillata）、水鱉（Hydrocharisdubia）、水芹（Oenanthejavanica）、水芙繁縷（Slariamedia）、黃花酢漿草（Oxalispescaprae）、茭白（Zizanialatifolia）、馬Rottb.）、牛筋草（Eleusineindica）、活血丹（Glechomalongituba）、節(jié)節(jié)草（Equisetum。、金黃色葡萄球菌有一定的抑制作用。菱、芡實、、茜草植物乙醇提取物對沙門氏菌有一定的抑制作用?？招纳徸硬?、菱、鴨舌草、、茜草、馬齒莧、綬草、毛茛、活血丹藻、水芙蓉對嗜水氣單胞菌有抑制作用?？招纳徸硬?、菱、茜草、綬草、金錢草、活血丹、馬齒莧、毛茛、辣蓼對溫和氣單胞菌有一定的抑菌作用?？招纳徸硬?、菱、、茜草、馬齒莧、毛茛、活血丹、金錢草有對副溶血弧菌有抑菌作用。、、活血丹水提取對溫和氣單胞菌有抑菌作用。空心蓮子草、菱、綬草、、繁縷、活血丹、菱、茜草、芡實、乙醇提取物各萃取物致病菌的抑菌活性中，菱乙醇提取的乙酸乙酯萃取物的抑菌效果明顯，濃度在00mg/mL,對金黃色葡萄球菌的抑菌直徑為26.38mm1.00%25.7mm27mm，1.00%25.25mm。大于抗生素對照組。以上結(jié)果說明，菱、芡實、辣蓼、水芙蓉、、茜草、綬草、毛茛、空心蓮子7InhibitoryEffectsofWetland ntExtractonPathogenicBacterM.S.Candidate:JiaqiGeAntibioticsareoneofthegreatachievementsofmankindinthefieldofmedicine.Itysanextremelyimportantroleintheimprovementofhumanhealthandtheguaranteeoflifesafety.However,inrecentyears,antibioticclinicalresearchprocess,thereistheamountofdrugs,thenumberofmedication,withdrawalperiodofneglectandanimalanddrugresiduesandotherissues,leadingtobacterialandtheuseofantibioticeffectchangePoor,sideeffectsandotherdefects,theseproblemsareonthepublichealthcausedapotentialharm.Inordertosolvethemanyproblemscausedbyantibiotics,tofindnew,natural,canreceantibioticstocontrolinfectiousdiseasesmethodsanddrugs eatoppriority.Nelumbonucifera、TrapabispinosaRoxb.、Vallisnerianatans、Euryaleferox、PolygonumhydropiperP.lapathifoliumLP.jucundumMeisn.AcoruscalamusL.Potamogetoncrispus、P.malaianusSalvinianatansL.CeratophyllumdemersumL.MonochoriavaginalisHydrillaverticillata、Hydrocharisdubia、Oenanthejavanica、Pisitiastratiotes、HerbaTaraxaci、CommelinacommunisLinn.、SolanumnigrumL.、DichondrarepensForst.、RubiacordifoliaLinn.SlariamediaOxalispes-capraeZizanialatifoliaPortulacaoleraceaL.Ranunculussieboldii、KyllingabrevifoliaRottb.、Eleusineindica、Glechomalongituba、ramosissimum.Atotalof36species.Usingntextractiontechnology,screeningforbacterialdiseaseshaveastronginhibitoryeffectofntextracts,andfurtherextractionandseparation,screeningoutthestrongestantibacterialextract.AddittoProcambarusclarkiifeed,theeffectsofthecontrolonthelethalityofProcambarusclarkiiwereprovidedforthedevelopmentofntdrugsandnaturalntfeedadditivesforthecontrolofbacterialdiseases.Belowarekeyresearch⑴TrapabispinosaRoxb.、Euryaleferox、Polygonumhydropiper、SolanumnigrumL.、cordifoliaLinn、Ranunculussieboldii、SpiranthessinensisntsethanolextracthasacertaininhibitoryeffectonE.Coli.TrapabispinosaRoxb.、Euryaleferox、PolygonumhydropiperSolanumnigrumL.、RubiacordifoliaLinn、Ranunculussieboldii、Spiranthessinensis、Pisitiastratiotes.ntsethanolextracthasacertaininhibitoryeffectonStaphylococcusaureus.TrapahasacertaininhibitoryeffectonSalmonellapullorum.Alternantheraphiloxeroides、TrapabispinosaRoxb.Monochoriavaginalis、SolanumnigrumL.、RubiacordifoliaLinn、PortulacaoleraceaL.、Spiranthessinensis、Ranunculussieboldii、Glechomalongituba、CeratophyllumdemersumL.、PisitiastratiotesntsethanolextracthasacertaininhibitoryeffectonAeromonashydrophila.Alternantheraphiloxeroides、TrapabispinosaRoxb.、Polygonumhydropiper、SolanumnigrumL.、RubiacordifoliaLinn、Spiranthessinensis、PortulacaoleraceaL.、Ranunculussieboldii、Glechomalongituba、DichondrarepensForst.ntsethanolextracthasanigrumL.、DichondrarepensForst.、RubiacordifoliaLinn、PortulacaoleraceaL.Ranunculussieboldii、Glechomalongituba.ntsethanolextracthasacertaininhibitoryeffectonVibrio⑵Theantibacterialeffectofntextractwaterextractionislessthanthatofntethanolextract.SpiranthessinensiswaterextractionofE.colihasantibacterialeffect,theconcentration200mg/ml,inhibitionzonediameterof12.38mm.Alternantheraphiloxeroides、Euryaleferox、HerbaTaraxaci、SolanumnigrumL.、S lariamedia、Spiranthessinensis ntswaterextracthasacertaininhibitoryeffectonAeromonashydrophila.Alternantheraphiloxeroides、MonochoriavaginalisHerbaTaraxaciS lariamediaGlechomalongitubaSpiranthessinensisntswaterextracthasacertaininhibitoryeffectonA.sobria.Alternantheraphiloxeroides、Monochoriavaginalis、Spiranthessinensis、Slariamedia、Glechomalongituba、nigrumL.ntswaterextracthasacertaininhibitoryeffectonVibrio⑶TrapabispinosaRoxb.、Euryaleferox、SolanumnigrumL.、RubiacordifoliaLinnEthanoleachextractonthepathogenicbacteriaintheantibacterialactivity，Ethylacetateextracthasobviousinhibitoryeffect.Concentrationof200mg/ml,Staphylococcusaureusantibacterialdiameterof26.38mm,1%chloramphenicolinhibitionzonediameterofbacteriostaticdiameterofVibrioparahaemolyticuswas27mm,andthediameteroftheinhibitionzoneof1%chloramphenicolwas25.25mm.⑷TrapabispinosaRoxb.ethylacetateextractcanimprovethesurvivalrateofProcambarusclarkii.After15daysoffeeding,thesurvivalrateoftheethylacetateextractgroupwassignificantlyhigherthanthatofotherfeedgroups.nigrumL.、RubiacordifoliaLinnEthanol、Ranunculussieboldiihadsomebacteriostaticeffectontheseventestedstrains.Buttheethanolextractantibacterialperformanceishigherthanwaterextract.Theethanolextractofethylacetateextracthadthebestantibacterialactivity,andtheadditionofethylacetateextractofethanolextractcouldincreasethesurvivalrateofProcambarusclarkii.中 文獻(xiàn)綜 本項目研究的目的與意 材料與方 實驗材 實驗方 結(jié) 五討 不同植物提取物對動物致病菌的抑菌作 參考文 致 揚州大學(xué)性 使用 文獻(xiàn)綜細(xì)菌性疾病物與人類之間廣泛（韓果方,2003），造成的危害損失日益加劇。龍等(2010)通過濟(jì)損失巨大（,2015）。雞大腸桿菌是一種條件原微生物，機(jī)體抵抗力下降時細(xì)菌的致病性使的雞發(fā)病并成為某些傳染病的并發(fā)病或繼發(fā)?。ǘ庞缿c,2015）。水產(chǎn)養(yǎng)上（等,2013）。世界第一的水產(chǎn)養(yǎng)殖國家，每年的養(yǎng)殖產(chǎn)量為世界養(yǎng)殖總產(chǎn)量的70%左右,細(xì)菌性疾病在密集型的養(yǎng)殖體系中的極高，這已經(jīng)嚴(yán)重影響我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展（月,2015）。危害我國水產(chǎn)養(yǎng)殖動物最嚴(yán)重的疾病就是細(xì)菌性耐藥性增強(qiáng)，防治難度大的特點（奎,2007）。本文選取弧菌、氣單胞、葡萄球菌、大的重要問題之一。2001年，大連地區(qū)凡納濱對蝦（Litopenaeusvannamei）暴發(fā)體病，造成80%的損失（Fan,2006）。2007年地區(qū)南美白對蝦（Penaeusvanname)紅體病的達(dá)到95%，率達(dá)100%，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失（,2009）。Himmel是全身性，以肝胰腺最為嚴(yán)重（EavesandKetterer,1994）。Thune等（1991）研究，擬態(tài)弧菌(V.mimicus)可引起淡水龍蝦的直接大面積。等（1993）研究證實，河流弧菌(Vfluvialis)是鰱（Silurusspp）、鳙（Aristichthysnobilis）等魚類細(xì)japonicus）爛鰓、爛尾病的病原菌為鰻弧（Vanguillarum)水中,附著于海洋生物的體表生長繁殖,如海產(chǎn)品魚、蟹等,人進(jìn)食污染副溶血弧菌而未煮透的食物后即可,可引起胃腸黏膜的急性炎癥反應(yīng)（等,2008）。臨床反應(yīng)包括腹絞痛、腹瀉、、發(fā)燒、寒顫等（HondaandIida,1993）。（Jandam,2010）。廣泛分布于水體環(huán)境中，是常見的人畜魚共患病原菌。其對水產(chǎn)動物于其它細(xì)菌性疾病，成為我國淡水水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要（,2007）。吳雅麗等（2013）認(rèn)為中華鱉（Trionyxsinensis）爆發(fā)性敗血癥，草魚（Ctenopharyngodonidellus）的細(xì)菌性腸炎都是與氣單胞菌的密不可分嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌（Aaiae）物的病原菌，給水產(chǎn)養(yǎng)殖帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。嗜水氣單胞菌發(fā)現(xiàn)多存在淡水環(huán)境中，與魚類和甲殼類的疾病有關(guān)，同時可引起人類的疾?。╱lidastal.,2008）。gilo等（2006）為嗜水氣單包菌。irvnichpil等（2009）從信號小龍（Paifatacusleniuulu）中分離出嗜水氣單胞菌，通過收集有較強(qiáng)致病能力的胞外產(chǎn)物（xterllularproduts，EP），并將其注射至淡水龍蝦體內(nèi)，淡水龍蝦6h后開始出現(xiàn)大量的，通過組織結(jié)構(gòu)觀察，被的小龍蝦許多組織中具有壞死斑，肝胰腺細(xì)胞完全裂解。鱉腐皮病、溶血性腹水病等均是由溫和氣單胞菌引起的（祥和,2002）。其和（2002）的研究表明溫和氣單胞菌能夠引起羅非魚(Oreochromisniloticus)性敗血鰓蓋等身體表面，并使其大量。除了動物外，該菌亦可以使人患病，可引癥，造成血管內(nèi)產(chǎn)生大量氣體而致死（Yukioetal2003）氧或兼性厭氧革蘭陽性球型細(xì)菌，營養(yǎng)要求不高，對不良環(huán)境抵抗力較強(qiáng)。振國（2009）金黃色葡萄球菌產(chǎn)生毒素和酶，其致病性強(qiáng)，危害大，會引起化膿性疾病和人、動物食入被葡萄球菌產(chǎn)生的腸毒素而污染的食物及飼料引起的毒素性疾病。由金黃色葡萄球菌引起的食物屢見不鮮，金黃色葡萄球菌的檢測率較高，如河北為21.2%（108/510）Suotal,208)，則為21.2%（44/204），生奶生肉與水產(chǎn)品檢出率高，均超過30%，在4427株，占61%（Zhangetal.,2004）。和（2007）將分離的葡萄球菌注射到健康雞的肌肉中，20h后注射部位見到炎性腫脹，破潰后流出大量滲出液，24h后開始。大腸桿菌在自然界廣泛存在，是人和動物腸道中最主要且數(shù)量最多的一種細(xì)菌，主要寄生在大腸內(nèi)。它是環(huán)境常在菌，當(dāng)機(jī)體處于健康狀態(tài)時，機(jī)體可以抵御大腸桿菌的侵襲而不發(fā)病，但機(jī)體的抵抗力下降或有其他誘因時，侵入一些部位時，可引起感染，如腹膜炎、膽囊炎、炎及腹瀉等。人在大腸桿菌后的癥狀為胃痛、、腹瀉和發(fā)熱，甚至于它的可能是致命性的。由于大腸桿菌型多，且多耐藥。賀等（2013）研究中采用瓊脂稀釋法測定了不同動物來源的大腸桿菌對15種抗菌藥物的敏感性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大腸桿菌耐藥嚴(yán)重，對大部分藥物的耐藥率超過70.0%，其中氨芐西林、復(fù)方新諾明和四環(huán)素的耐藥率均達(dá)到了80.0%以上。大腸桿菌在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的耐藥性嚴(yán)重影響畜禽疾病的防治，嚴(yán)重著人類的健康。等（2009）研究表明動物源大腸桿菌的耐藥性更為廣泛，而且耐藥強(qiáng)度也比人源大腸桿菌強(qiáng)。對雞場工作人員和村民分離的E.oliE.oli藥性可以相互。有研究也曾提禽、家畜中帶耐藥性腸道菌可以通過動物肉類及其制品到，使于耐藥菌株引起的中。植物提取物應(yīng)用于疾病的防治及其對水生動物免疫機(jī)制的到了極其重要的作用。但是，我國抗生素不合理使用、的問題日益嚴(yán)重。用量、用藥2004業(yè)。我國的植物提取物目前的用途非常廣泛主要用于藥品、食品、煙草、化妝品種以上。植物提取物對細(xì)菌性、真菌性疾病的防治為菊科（Asceae）二年生草本植物,分布范圍廣（等,1990）,且具有醫(yī)用抗菌活性（萬水紅等,1999廣玉MagnoliagandifoaLinn.對多種氣體及煙塵抗性強(qiáng)，葉可入藥,主治高血壓花葉可提取香料很少有?。▍墙B球等,2001兩者98%（丁恒山等1982（2005的研究發(fā)現(xiàn)蕨類水提取物（llif-r（胡林峰2012（Pillafuten（韋保耀2005止（,1983蘇子具有降氣消平喘潤腸等功（王玉萍,2003）。鴨跖草（omlinaomunisL）全草，在我國主要具有清熱解毒，利尿消腫的功效紫蘇鴨跖草石油醚和乙酸乙酯葉提取物志賀氏（Shigellaalani枯草桿（Baillusubtili有較強(qiáng)的抑菌作用陸（2009紫茉（MiabilisjalapaL.）根甲醇提取物與莖甲醇提取物對梨黑斑病菌和西瓜炭疽病菌菌絲生長具有較好的抑制作對水生致病菌的藥用植物篩選試驗很多，吳德峰（2001）報道楓香樹（Liquidambarformosana）葉進(jìn)行水煎煮投灑或混合餌料飼喂魚可防治赤霉菌。菜（Gracilarialemaneiformis）乙酸提取物的可以降低鏈球菌，提高羅非魚的存活率和治療作用。在水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)中，唇形科的植物用于控制魚類的疾病效果明顯（Bulfonetal.,2014）。植物提取物對水生動物免疫機(jī)制的研水生動物的免疫系統(tǒng)主要是由細(xì)胞免疫和體液免疫組成。(2010)研究表明甲殼ron(1992)的研究表明對于大多數(shù)硬骨魚類來說,它們主要依靠的是非特異性免疫在對抗外來病菌的侵襲。在細(xì)胞免疫中大部分水生動物的血細(xì)胞是細(xì)胞免疫防御功能的重要組成部分2000植物中的某些藥物成分不僅具有抗微生物作用還具有免疫作用,能改善機(jī)體的免疫狀態(tài),提高機(jī)體自身的抗病能力（金立志,2010能在我國已有上千年的應(yīng)用歷史?，F(xiàn)代中藥研究表明，植物有效成分主要包括黃酮類、鞣質(zhì)、苷類、蒽醌類、生物堿、揮發(fā)油、有機(jī)酸、微量元素等活性成分（等,2009）。這些活性成分可以提高動物的特異和非特異性免疫功能，其作用主要是通過激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，使白介素含量顯著提高，提高抗體和補(bǔ)體水平，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，激活T、B淋巴細(xì)胞和自然細(xì)胞，誘導(dǎo)產(chǎn)生多種細(xì)胞因子等途徑來提高機(jī)體的免疫力，增強(qiáng)動物抗病能力（ntal,2015黃酮類化合物（flavonoidscompounds）存在于自然界中最廣泛的一類多酚化合物。也是重要的植物次生代謝物（Morimotoetal.2003）。延璽等（2008）文章中表明黃酮類具有高復(fù)雜性的特點，種類繁多，有抗氧化的功效、抗菌、抗、抗炎、抗過敏等功分，在抗菌、抗氧化、抗、降壓方面具有療效，在飼料中添加黃芩苷有利于提高羅非魚總抗氧化能力、堿性磷酸酶及溶菌酶活性,的、增強(qiáng)免疫力（Yinetal.,2006）。赤楠葉黃酮提取物對金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽性菌具有較強(qiáng)的抑菌效果（等,2008）。作為自由基的抗氧化劑之一，黃酮類化合物可以有效的細(xì)胞損傷的現(xiàn)象，從而通過不同的途徑達(dá)到防癌、抗癌的功效（張氽等,2003）?？?、豆科、鼠、百合科等（趙盼盼等,2016）。Asma等（2010）研究表明，蘆薈凝膠蒽醌類化合物提取物中對由細(xì)菌引起的皮膚可起到抑制作用，并且與抗生素相比，其抑菌效果更顯著?？滴乃嚨龋?009）DPPH法對從茜草提取物中分離得能提高羅氏沼蝦的總抗氧化活性、堿性磷酸酶、溶菌霉活性，對其免疫能力有顯著性提高（Linetal.,2010）。揮發(fā)油類物質(zhì)在方面應(yīng)用比較廣泛，愈來愈受到人們的重視（黃羅生,2009）。何秀云和（2006）發(fā)現(xiàn)丁香（Syringaoblat）揮發(fā)油對腸炎沙門菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌有抑制作用，同時有抗、清除氧自由基的功能。張薇等（2008）的研究利用水蒸氣蒸餾法提取魚腥草揮發(fā)油，對金黃色葡萄球菌和流感抑制作用明顯。藥物質(zhì)量濃度在31.25mg/mL時即能達(dá)到抑制的增殖,濃度在250mg/mL時對雞胚內(nèi)流感有4倍的抑制作用。公衍玲等（2009）的研究利用水蒸氣蒸餾法提取郁金揮發(fā)油，以減。球菌、大腸埃希菌、產(chǎn)氣桿菌、枯草桿菌均有明顯抑制作用和（2007）Blanco.。本項目研究的目的與高,使傳統(tǒng)倍受青睞。另一方面,我國加人WTO后,中國市場融入國際市場的在植物源、、獸藥、水產(chǎn)、食品添加劑等方面有著良好的開發(fā)。因此其的開發(fā)及其利用成為主要研究領(lǐng)域之一。本實驗是通過篩選大量的濕地植物，運用浸材料與實驗材供試植本選用36種植物（表1）。蘆葦、苦草、菖蒲、菹草，槐葉蘋、藻、水鱉、水芹、茭白采于揚州鳳凰島生態(tài)區(qū)?？招纳徸硬?、荷、鴨舌草、蒲公英、鴨跖草、、金錢草、茜草、馬齒莧、毛茛、水蜈蚣、綬草、牛筋草、節(jié)節(jié)草采于揚州大學(xué)路校水葫蘆、黃花酢漿草、看麥娘、活血丹采于揚州市公道鎮(zhèn)。眼子菜、黑藻、水芙蓉購于宿遷室內(nèi)水植物栽培館。將選用的植物后置于自然條件干備用。1361.Phragmites21.Potamogeton2.Alternanthera3.EichhorniaSolanumnigrum4.Nelumbo24.Dichondrarepens5.Trapabispinosa25.Rubiacordifolia6.Vallisneria26.Slaria7.EuryaleOxalispes-8.Polygonumhydropiper28.Zizania9.P.lapathifolium29.Alopecurusaequalis10.P.jucundum30.Spiranthes11.Acoruscalamus31.Portulacaoleracea12.Salvinianatans32.毛Ranunculus13.Ceratophyllum33.Kyllingabrevifolia14.Monochoria34.Eleusine15.Hydrilla35.Glechoma16.Hydrocharis36.Equisetum17.Oenanthe18.Pisitia19.Herbamelinacommunis供試菌嗜水氣單胞菌（Aeromonashydrophila）、溫和氣單胞菌（A.sobria）由江蘇省淡水水產(chǎn)提供，副溶血弧菌（VibrioParahemolyticus）、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus）、大腸桿菌（Escherichiacoli）、銅綠假單胞菌（Pseudomonasaeruginosa）、沙門氏菌（Salmonellapullorum）由揚州大學(xué)江蘇省人畜共患病提供。實驗動實驗儀植 儀R系列旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) SHB-3循環(huán)水真空 SHELLAB水浴 SW-CJ-2HD超凈工作 GHX9160B-1培養(yǎng) QYC2102恒溫?fù)u 超低溫冰 ThermoScientific公司FA2004電子天平 5417R型高速冷凍離心機(jī) Eppendoff公司普通PCR儀 ABI公司7500實時熒光定量PCR ABI公司GHX9160B-1培養(yǎng) 精密科學(xué)儀實驗試劑及其配0.5g0.2g1g，pH7.4，超100mL。10g，pH7.4500mL。Luria-Bertani1g0.5g0.5g，pH7.2，100mL。Luria-Bertani5g2.5g2.5g，pH7.2，500mL。實驗方植物提取物及萃取提取物20g1:2024h24h3-4次，合并濾液，減壓萃取物的50g1:10的比例用蒸餾水溶解，然后按照極性4植物提取物抑菌活性的測菌懸液和提取物及抗生素溶液的上28℃，1500rpm搖床培養(yǎng)18-22h，再用麥?zhǔn)媳葷岱y出液體培養(yǎng)基的濃度，將濃度稀釋106cfu/ml。1g/ml的溶液。然后再用二甲基亞砜依次稀體外抑菌活性的測6mm的圓形紙片，12120min，60℃烘干，用無菌鑷子分別24h15μL菌懸液涂布于平板上，制成含菌平板。再將晾干的帶藥濾紙片均勻貼于含菌平板上，29℃18-22h后，用十字交叉法測量抑菌圈直徑，每個抑菌圈量4次，取平均值。最小抑菌濃度的測定含藥瓊脂的1g/ml1ml90mm50°C水浴19ml（樣品液:培養(yǎng)基1:19（5%以內(nèi),對細(xì)菌生長無影響）。0.51:100進(jìn)行稀釋,15μl（106cfu/ml）最小殺菌濃度的測定MIC的濃度的培養(yǎng)基表面用無菌水沖洗，將沖洗液接種到正常的瓊脂29℃36h，觀察并記錄實驗結(jié)果。若無菌生萃取物對克氏原螯蝦攻毒實驗飼料的0.50%，氯霉素按基礎(chǔ)飼料的1.00%添加至預(yù)先的上述配合飼料中，然后重新制成含有不同濃度實驗設(shè)0.50%050%照1.00%氯霉素空白對照組每組35只克氏原螯蝦不同的處理飼喂不同添加濃（15~20g14015天。攻毒實15d108cfu/ml0.1ml2-3行肌肉注射0.1ml/尾。于2，4，6，8，10，12，24，36小時進(jìn)行觀察，統(tǒng)計率數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分采用SPSS16.00.05表示具有顯著性差異。所有的結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（X±SD）植物粗提取物對動物致病菌的抑菌活植物粗提物對金黃色葡萄球菌的抑菌活36（表2）。菱、芡實、辣蓼、水芙蓉、、茜草、綬草、毛茛8種植物的乙醇提取物對金28200mg/mL萄球菌均未檢測出抑菌活性，36200mg/mL時也未見有明顯的抑菌效果。當(dāng)濃度為200mg/mL時，菱、、茜草、毛茛的抑菌活性強(qiáng)，抑菌圈直徑分別17.00mm、16.88mm、16.5mm、16.63mm，顯著大于其他提取物組(P<0.05)（1）。辣200mg/mL8.38mm7.04mm，顯著低于其他實驗組（P<0.05)（2）。Table2InhibitionzonediameterofthealcoholextractsagainstStaphylococcus

nt nt 芡 辣 水芙 Solanumnigrum 茜 綬 毛 EuryalePolygonumhydropiperPisitiastratiotesRubiacordifoliaLinn.SpiranthessinensiRanunculus注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.1InhibitionzonediameterofTrapabispinosaRoxb.、Pisitiastratiotes、Rubia菱TrapabispinosaEthanol

RubiacordifoliaLinnEthanolextract

PistiaEthanol

RanunculusEthanolFig.2InhibitionzonediameterofPolygonumhydropiper、Pisitia辣 Polygonum PisitiaEthanol Ethanol植物粗提物對大腸桿菌的抑菌活3629200mg/mL菌活性菱和毛茛的抑菌活性最強(qiáng)濃度為200mg/mL時抑菌圈直徑分別別15.38mm15.88mm，綬草水提物濃度為200mg/mL時，抑菌圈直徑為12.38mm（圖3）。其他35種3植物乙醇提取物對大腸桿菌的抑菌圈直徑Table3InhibitionzonediameterofthealcoholextractsagainstEscherichiant

芡 辣 Solanumnigrum 茜 綬 毛 EuryaleferoxPolygonumRubiacordifoliaLinn.SpiranthessinensisRanunculussieboldii注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.3InhibitionzonediameterofRanunculussieboldii、TrapabispinosaRoxb.EthanolSpiranthessinensiswaterRanunculusEthanol

TrapabispinosaEthanol

Spirantheswater植物粗提物對沙門氏菌的抑菌、36種不同植物提取物對沙門氏菌的抑菌圈的直徑抑制作用（表4）。菱、芡實、、茜草4種植物乙醇提取物和綬草水提物對沙門氏菌有抑制32200mg/mL時，對沙門氏菌均未檢測出抑菌活實茜草乙醇提取物的抑菌圈直徑分別別11.75mm11.81mm13.25mm13.78mm。200mg/ml11.5mm（4）。、4植物乙醇提取物對沙門氏菌的抑菌圈直徑Table4InhibitionzonediameterofalcoholextractsagainstSalmonella

濃度 ntnt Solanumnigrum 茜 EuryaleRubiacordifolia注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.4InhibitionzonediameterofTrapabispinosaRoxb.、Pisitiastratiotes、RubiacordifoliaLinn.、EuryaleferoxEthanolextract，SpiranthessinensisWaterextractPisitiaEthanol

TrapabispinosaEthanol

TrapabispinosaEthanolRubiacordifoliaLinn.Ethanolextract

SpiranthessinensisWaterextract植物粗提物對銅綠假單胞菌的抑菌活、、采用打孔法和紙片法測定36種不同植物提取物對銅綠假單胞菌的抑菌圈的直徑（表5）。菱、芡實、辣蓼、茜草、綬草毛茛7種植物對銅綠假單胞菌有抑制作用。其余29種植物提取物在濃度為200mg/mL時，對銅綠假單胞菌均未檢測出抑菌活性。36種植物水提取物對銅綠假單胞菌未檢測出抑菌活性。菱和毛茛乙醇提取物的抑菌活性200mg/mL15.63mm、17.87mm顯著大于其他提取物組(P<0.05)的乙醇提取物抑菌活性較強(qiáng)濃度為200mg/mL時抑菌圈直徑為13.75mm。200mg/mL7.88mm顯著低、、5植物乙醇提取物對銅綠假單胞菌的抑菌圈直徑Table5InhibitionzonediameterofthealcoholextractsagainstPseudomonasnt

濃度 芡 辣 Solanumnigrum 茜 毛 EuryaleferoxPolygonumRubiacordifoliaRanunculus注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.5InhibitionzonediameterofTrapabispinosaRoxb.、Pisitiastratiotes、Ranunculussieboldii、PolygonumhydropiperEthanolextractTrapabispinosaEthanol

RanunculussieboldiiEthanol

PisitiaEthanolPolygonumEthanol植物粗提物對嗜水氣單胞菌的抑菌活、、36種不同植物提取物對嗜水氣單胞菌的抑菌圈的直徑（表1125種植物乙醇、、提取物在濃度為200mg/mL時，對嗜水氣單胞菌均為檢測出抑菌活性。毛茛的抑菌活性強(qiáng)濃度為200mg/mL抑菌圈直徑分別為20.63mm顯著大于其他提取物組(P<0.05)。菱、、茜草和馬齒莧、活血丹的抑菌活性較強(qiáng)。濃度為200mg/mL時，抑菌圈直徑分葵、綬草、繁縷、蒲公英6種水提物對嗜水氣單胞菌有抑菌作用（表7）。其他29種植物200mg/mL時，抑菌圈直徑為20mm和17.75mm。的抑菌活性較強(qiáng)，抑菌圈直徑為14.75mm。繁縷和蒲200mg/mL11.13mm11.88mm（圖濃度nt 空心蓮子 濃度nt 空心蓮子 鴨舌 Solanumnigrum AlternantheraphiloxeroidesTrapabispinosaRoxb.MonochoriaRubiacordifolia綬 綬 金錢 毛 活血 水芙 RanunculussieboldiiGlechomalongitubaCeratophyllumdemersumL.Pisitia注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig6InhibitionzonediameterofTrapabispinosaRoxb.、Pisitiastratiotes、Ranunculussieboldii、PortulacaoleraceaL.、RubiacordifoliaLinn.、GlechomalongitubaEthanolextractPisitiastratiotesEthanolextrac

RubiacordifoliaEthanol

RanunculusEthanolSpiranthesEthanol

GlechomaEthanol

TrapabispinosaRoxb.EthanolextractTable7InhibitionzonediameterofthewaterextractsagainstAeromonasnt

Euryale Solanumnigrum Spiranthes laria Herba 注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.7InhibitionzonediameterofSpiranthessinensis、Euryaleferox、Slariamedia、HerbawaterSlaria

Spiranthes

EuryaleHerba植物粗提物對溫和氣單胞菌的抑菌活采用打孔法和紙片法測定36種不同植物提取物對溫和氣單胞菌的抑菌圈的直徑（表26200mg/mL時，對溫和氣單胞菌均未檢測出抑菌活性。、茜草、綬草、活血丹、毛茛的抑菌200mg/mL17.75mm19.26mm17.63mm18.25mm、18.88、19.75mm，顯著大于其他提取物組(P<0.05)（7）?？招纳徸硬荨Ⅷ喩嗖?、綬草、7種水提物對溫和氣單胞菌有抑菌作用（9）30種植物水200mg/mL時，17.75mm15.38mm（8）。Table8Inhibitionzonediameterofthealcoholextractsagainstnt

濃度 空心蓮子 空心蓮子 Solanumnigrum 茜 綬 金錢 活血 RubiacordifoliaLinn.SpiranthessinensisDichondrarepensForst.Spiranthes馬齒 馬齒 毛 辣 注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.8InhibitionzonediameterofSolanumnigrumL.Ranunculussieboldii、Pisitiastratiotes、RubiacordifoliaLinn.、GlechomalongitubaEthanolextractRubiacordifoliaLinn.Ethanolextract

SolanumnigrumLEthanolextract

RanunculusEthanolGlechomaEthanol

RanunculusEthanolTable9InhibitionzonediameterofthewaterextractsagainstntAlternantheraMonochoriaSpiranthes

濃度 Herba lariaGlechoma注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.9InhibitionzonediameterofSpiranthessinensis、Alternantheraphiloxeroides、HerbaTaraxaci、Glechomalongituba、SolanumnigrumL.waterextractHerbaEthanol

SolanumnigrumL.Ethanolextract

GlechomaEthanolAlternantheraEthanol

SpiranthesEthanol植物粗提物對副溶血弧菌的抑36種不同植物提取物對溫和氣單胞菌的抑菌圈的直徑（表10）?？招纳徸硬荨⒘?、、茜草、綬草金錢草、活血丹、馬齒莧8種植物乙醇提取28200mg/mL。和毛茛的乙醇提取物抑菌活性強(qiáng)，濃度為200mg/mL22.75mm2.75mm(P0.05)200mg/mL時，抑菌圈直徑分別為13.25mm、15.8mm、16.5mm、1.63m?？招纳徸硬?、菱、綬草、繁縷、、活6種水提物對副溶血弧菌有抑菌作用（1）30種植物水提取未檢測出抑菌200mg/mL19.00mm200mg/mL10mm。10植物乙醇提取物對副溶血弧菌的抑菌圈直徑Table10InhibitionzonediameterofthealcoholextractsagainstVibrio

ntntAlternanthera菱TrapabispinosaSolanumnigrumRubiacordifoliaPortulacaoleraceaRanunculusGlechomaDichondrarepens注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.10InhibitionzonediameterofRanunculussieboldii、Alternantheraphiloxeroides、RubiaGlechomaEthanol

SolanumnigrumL.Ethanolextract

RubiacordifoliaEthanol菱菱TrapabispinosaEthanol

RanunculusEthanol

AlternantheraEthanolTable11InhibitionzonediameterofthewaterextractsagainstVibrio

濃度ntntAlternanthera菱TrapabispinosaSpiranthesSolanumnigrum laria注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.Fig.11InhibitionzonediameterofSpiranthessinensis、Slariamedia、Glechomalongituba、TrapabispinosaRoxb.waterextract菱TrapabispinosaRoxb.waterextract

Spiranthessinensiswaterextract

SlariamediawaterextractGlechomawater1.00%葡萄球菌的抑菌圈直徑和最低抑菌濃度和最小殺菌濃度(121314)200mg/mL時的抑菌圈直26.38mm（P＜0.055mg/mL1.00%2.5mgL。12植物乙醇提取物萃取物及抗生素對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑（Mean±SD)Table12InhibitionzonediameteroftheextractsandChloramphenicoagainstStaphylococcusaureu

濃度ExtractantandEuryaleferox.ethanolextractofpetroleumetherextract21.00±2.6519.13±2.0214.88±2.0610.87±1.117.75±0.65Euryaleferox.EthanolExtractEthylAcetateExtract22.38±1.8915.13±0.858.63±0.856.00±0.00Euryaleferox.EthanolextractN-butanolextract6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.00TrapabispinosaRoxb.ethanolextractofpetroleumether17.63±1.3113.00±0.919.88±0.856.00±0.006.00±0.00TrapabispinosaRoxb.EthanolExtractEthylAcetateExtract26.38±1.621.25±1.1915.75±1.3211.25±1.328.25±0.87TrapabispinosaRoxb.extractN-butanol6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.0019.25±1.0414.25±1.0410.88±1.117.38±0.856.00±0.00RubiacordifoliaLinn.ethanolextractofpetroleumetherextracRubiacordifolia 21.13±1.13ExtractEthylAcetate16.88±1.259.88±0.488.00±0.41Rubiacordifolia 6.00±0.00extractN-butanol6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.00SolanumnigrumL.ethanol 16.13±1.44ofpetroleumether12.25±1.049.00±0.416.00±0.006.00±0.00SolanumnigrumL.Ethanol 20.00±2.27EthylAcetate13.88±1.447.00±0.416.00±0.00SolanumnigrumL.Ethanol 6.00±0.00N-butanol6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.001.00% 25.73±0.4220.63±1.3817.75±0.6513.63±0.4811.5±1.08注:抑菌圈直徑包括6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level.13植物乙醇提取物萃取物及抗生素對金黃色葡萄球菌最小抑菌濃度Table13ntethanolextractextractandantibioticsonStaphylococcusaureusminimuminhibitory

Extractantand 5 -﹢﹢﹢Extractantand 5 -﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢TrapabispinosaRoxb.ethanolextractofpetroleum ﹢﹢﹢﹢TrapabispinosaRoxb.EthanolExtractEthyl -﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢RubiacordifoliaLinn.ethanolextractofpetroleum ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢TrapabispinosaRoxb.EthanolextractN-butanol ﹢﹢﹢﹢Solanumnigrum ﹢﹢﹢﹢SolanumnigrumL.ethanolextractofpetroleum ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢ --﹢﹢RubiacordifoliaLinn.EthanolextractN-butanolSolanumnigrumL.EthanolExtractEthylAcetateExtractSolanumnigrumL.EthanolextractN-butanolextract1.00%注：“-”表示細(xì)菌生長受到完全抑制；“+”表示平板上有細(xì)菌生長.Note：meansnoantibacterialactivity;meansgrowthofbacteria.14植物乙醇提取物萃取物及抗生素對金黃色葡萄球菌最小殺菌濃度 ntethanolextractextractandantibiotictoStaphylococcusaureusminimumbactericidal

Extractantand 5Extractantand 5Euryaleferox.ethanolextractofpetroleum -﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢TrapabispinosaRoxb.ethanolextractof ﹢﹢﹢﹢etherTrapabispinosaRoxb.EthanolExtractEthyl -﹢﹢﹢TrapabispinosaRoxb.EthanolextractN- ﹢﹢﹢﹢RubiacordifoliaLinn.ethanolextractof ﹢﹢﹢﹢etherRubiacordifoliaLinn.EthanolExtractEthyl ﹢﹢﹢﹢RubiacordifoliaLinn.EthanolextractN- ﹢﹢﹢﹢SolanumnigrumL.ethanolextractofpetroleum ﹢﹢﹢﹢SolanumnigrumL.EthanolExtractEthyl ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢SolanumnigrumL.EthanolextractN-butanolextract1.00%

注：“-”表示細(xì)菌生長受到完全抑制；“+”表示平板上有細(xì)菌生長.Note：meansnoantibacterialactivity;meansgrowthofbacteria.植物乙醇提取物萃取物及抗生素對大腸桿菌的抑菌活分別采用打孔法和瓊脂稀釋法測定植物乙醇提取物的萃取物及1.00%氯霉素對大腸桿菌的抑菌圈直徑和最低抑菌濃度和最小殺菌濃度(151617)。菱乙醇提取物乙酸200mg/ml18.75mm。從5mg/ml，茜草乙醇提取物乙酸乙酯萃取物最低抑菌濃度和最小殺菌濃度均為10mg/mL。1.00%氯霉5mg/ml。15植物乙醇提取物萃取物及抗生素對大腸桿菌的抑菌圈直徑（Mean±SE)Table15InhibitionzonediameteroftheextractsagainstEscherichiacoli萃取物及氯霉

Extractantand12芡實乙醇提取物石油醚萃取Euryaleferox.ethanolextractpetroleumether6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.00芡實乙醇提取物乙酸乙酯萃Euryaleferox.EthanolExtractAcetate6.00±0.006.00±0.006.00±0.00芡實乙醇提取物正丁醇萃取Euryaleferox.EthanolextractN-6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.00菱乙醇提取物石油醚萃取TrapabispinosaRoxb.ethanolextractpetroleumether6.00±0.006.00±0.00菱乙醇提取物乙酸乙酯萃取TrapabispinosaRoxb.EthanolEthylAcetate6.00±0.006.00±0.00菱乙醇提取物正丁醇萃取TrapabispinosaRoxb.Ethanolextractbutanol6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.00茜草乙醇提取物石油醚萃取RubiacordifoliaLinn.ethanolextractpetroleumether6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.00茜草乙醇提取物乙酸乙酯萃RubiacordifoliaLinn.EthanolEthylAcetate6.00±0.006.00±0.006.00±0.00茜草乙醇提取物正丁醇萃取RubiacordifoliaLinn.Ethanolextractbutanol6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.00SolanumnigrumL.ethanolextractofpetroleumetherextrac乙醇提取物乙酸乙酯萃

6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00SolanumnigrumSolanumnigrumL.EthanolExtract 115±06.00±0.006.00±0.00Acetate提取物正丁醇萃SolanumnigrumLEthanolextractN- butanolextract6.00±0.006.00±0.006.00±0.006.00±0.001.00%氯霉注:6mm的瓊脂孔;標(biāo)有相同字母的數(shù)據(jù)表示沒有顯著差異，標(biāo)有不同字母的數(shù)據(jù)表Note:Theresultsincludethediameteroftheagarwell(6mm);Thesamesuperscriptlettermarkedinthetablemeansnosignificantdifferenceamongthemandthedifferentsuperscriptlettermarkedinthetablemeanssignificantdifferenceat0.05or0.01level. ntethanolextractextractandantibioticsonEscherichiaminimuminhibitory

Extractantand 5Extractantand 5Euryaleferox.ethanolextractofpetroleum ﹢﹢﹢﹢Euryaleferox.EthanolExtractEthyl ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢TrapabispinosaRoxb.ethanolextract ﹢﹢﹢﹢petroleumetherTrapabispinosaRoxb.EthanolExtract ﹢﹢﹢﹢AcetateTrapabispinosaRoxb.EthanolextractN- ﹢﹢﹢﹢RubiacordifoliaLinn.ethanolextractof ﹢﹢﹢﹢etherRubiacordifoliaLinn.EthanolExtract ﹢﹢﹢﹢AcetateRubiacordifoliaLinn.EthanolextractN- ﹢﹢﹢﹢ ﹢﹢﹢﹢SolanumnigrumL.ethanolextractofpetroleumetherextracSolanumnigrumL.EthanolSolanumnigrumL.EthanolExtractEthyl ﹢﹢﹢﹢SolanumnigrumL.EthanolextractN- ﹢﹢﹢﹢ -﹢﹢﹢1.00%注：“-”表示細(xì)菌生長受到完全抑制；“+”表示平板上有細(xì)菌生長.Note：meansnoantibacterialactivity;meansgrowthofbacteria.17植物乙醇提取物萃取物及抗生素對大腸桿菌最小殺菌濃度 ntethanolextractextractandantibiotictoEscherichiacoliMinimumbactericidal

Extractantand 5Extractantand 5Euryaleferox.ethanolextractofpetroleum ﹢﹢﹢﹢Euryaleferox.EthanolExtractEthyl