細(xì)胞蠟塊-課件

穿刺涂片、TCT結(jié)合細(xì)胞蠟塊在病理診斷中的應(yīng)用淮安市第一人民醫(yī)院病理科劉海燕1ppt課件細(xì)胞病理學(xué)是一種常用的病理學(xué)檢查方法，與組織病理學(xué)檢查相比，傳統(tǒng)細(xì)針吸取方法（fineneedleaspiration,FNA）FNA涂片有著不可忽視的缺陷：樣本量少，并且很難還原組織學(xué)結(jié)構(gòu)，不可重復(fù)切片，以及較難進(jìn)行特殊染色等，這些缺陷直接影響了病理醫(yī)生的診斷準(zhǔn)確性。2ppt課件細(xì)胞學(xué)在很多的情況下，僅僅作為篩查或只能給出傾向性的診斷結(jié)果。尤其在針吸細(xì)胞學(xué)是唯一診斷手段的情況下，這些缺陷給患者的診斷及后續(xù)治療帶來(lái)了相當(dāng)大的困難，如胸、腹水的細(xì)胞學(xué)定性，轉(zhuǎn)移癌與間皮瘤的鑒別等。3ppt課件我科采用北京首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院病理科余小蒙醫(yī)師創(chuàng)立的“酒精凝固-甲醛固定法”細(xì)胞蠟塊技術(shù)（及改進(jìn)技術(shù)）制作FNA細(xì)胞蠟塊，其具有操作方便、快捷、微創(chuàng)，可重復(fù)切片用于免疫組化及特殊染色，很好地彌補(bǔ)了傳統(tǒng)FNA檢查中的不足，能夠方便患者，快捷并更準(zhǔn)確地做出診斷，滿足臨床診斷需求。4ppt課件

細(xì)針穿刺細(xì)胞標(biāo)本的采集通過(guò)穿刺吸取或非吸取法，可從充滿液體的器官或?qū)嶓w性器官中采集細(xì)胞標(biāo)本，如腫瘤、心包膜腔積液、胸膜腔積液、腹膜腔積液和腦脊液等。影像學(xué)技術(shù)能對(duì)小而深、移動(dòng)且難以觸摸的病變部位進(jìn)行定位，有助于穿刺采集標(biāo)本。5ppt課件涂片制備直接涂片是將新鮮標(biāo)本直接涂在載玻片上。間接涂片是將各種液體標(biāo)本進(jìn)行濃縮處理后再涂片。涂片制備方法見(jiàn)圖8-1，圖8-2。滲出液、灌洗液和尿液等標(biāo)本不易黏附在載玻片上，宜采用蛋白類（如牛血清清蛋白）或離子類（如多聚賴氨酸）黏附劑，增強(qiáng)細(xì)胞和載玻片之間的黏附力，最大限度的保存標(biāo)本中的細(xì)胞。6ppt課件三、標(biāo)本固定

1．濕固定是通過(guò)使細(xì)胞的胞質(zhì)脫水、蛋白質(zhì)凝固而達(dá)到固定的目的。常用的固定液為乙醇類液體，常用方法有浸潤(rùn)法和包被法。濕固定可引起細(xì)胞皺縮，Carnoy固定液（乙醇-氯仿-冰乙酸固定液）能溶解紅細(xì)胞，適用于處理明顯血性的標(biāo)本。聚乙二醇固定液能在涂片表面形成一層保護(hù)性蠟質(zhì)膜，適用于標(biāo)本的長(zhǎng)途轉(zhuǎn)運(yùn)和大規(guī)模人群篩檢。7ppt課件2．空氣干燥固定是通過(guò)空氣蒸發(fā)的方法達(dá)到固定目的。最好是逆著氣流方向盡快將涂片干燥。與濕固定相比，空氣干燥固定有使細(xì)胞增大的趨勢(shì)（圖8-3）。圖8-3標(biāo)本固定方法比較（A.呈圓形未固定的細(xì)胞，B.平鋪在載玻片上，C.濕固定，D.空氣干燥固定）8ppt課件

四、標(biāo)本濃縮技術(shù)（一）傳統(tǒng)技術(shù)

1．離心法和細(xì)胞離心法①離心法：適用于大量液體的標(biāo)本。②細(xì)胞離心法：適用于少量液體、中等量細(xì)胞的標(biāo)本。

2．濾膜過(guò)濾法濾膜過(guò)濾法適用于大量液體、少量細(xì)胞的標(biāo)本。

3．細(xì)胞塊法適用于大多數(shù)懸液標(biāo)本。制備方法有血漿凝血酶法和瓊脂法等。9ppt課件

（二）液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)液基細(xì)胞學(xué)（LBC）技術(shù)是一種半自動(dòng)或全自動(dòng)標(biāo)本處理技術(shù)，其優(yōu)點(diǎn)是：①涂片上細(xì)胞分布均勻、分布范圍小、背景清晰。②篩檢簡(jiǎn)便、快速。③能提高診斷的靈敏度和特異度。④能顯著降低標(biāo)本的不滿意率。⑤可用于原位雜交和免疫細(xì)胞化學(xué)染色。10ppt課件

LBC技術(shù)是對(duì)傳統(tǒng)技術(shù)的有效補(bǔ)充，但對(duì)某些非婦科標(biāo)本，因LBC涂片缺乏背景成分，會(huì)影響細(xì)胞學(xué)的診斷。目前，常用的LBC技術(shù)有ThinPrep法和SurePathPrep法。LBC技術(shù)與傳統(tǒng)技術(shù)比較見(jiàn)表8-3。11ppt課件12ppt課件五、染色方法

Papanicolaou染色法適用于濕固定的涂片。

Romanowsky染色法適用于空氣干燥固定的涂片，在非婦科標(biāo)本染色中常用。蘇木素和伊紅染色法是組織切片最常用的染色方法，也是許多細(xì)胞病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的染色方法。不同染色技術(shù)均適用于婦科或非婦科標(biāo)本的永久性染色。13ppt課件六、細(xì)胞病理學(xué)診斷細(xì)胞病理學(xué)診斷是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，但不能過(guò)分強(qiáng)調(diào)最終結(jié)論的重要性。因?yàn)榧?xì)胞學(xué)檢查的影響因素很多（表8-4），當(dāng)涂片上有大量保存良好的細(xì)胞時(shí)，會(huì)提高診斷的準(zhǔn)確性，而缺乏背景資料、涂片不佳、染色模糊等則會(huì)導(dǎo)致誤診。14ppt課件15ppt課件

（一）細(xì)胞形態(tài)學(xué)判斷的基本原則

1．細(xì)胞數(shù)量和類型細(xì)胞數(shù)量和類型提供了靶組織或器官的重要信息，足夠量的標(biāo)本是提高結(jié)果可靠性的重要因素。

2．結(jié)構(gòu)特征在細(xì)胞學(xué)涂片中常常缺乏結(jié)構(gòu)特征。正常上皮細(xì)胞常保持細(xì)胞極性和細(xì)胞間黏附性典型的惡性上皮細(xì)胞的極性差，細(xì)胞間相互重疊，有時(shí)三維狀聚集呈圓形。分化差的癌細(xì)胞黏附性更差，多散在分布。16ppt課件3．細(xì)胞核特征細(xì)胞核特征是判斷良性與惡性細(xì)胞的關(guān)鍵。正常細(xì)胞核體積相對(duì)較小，呈圓形或卵圓形，邊界光滑，染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀。涂片上同一類型細(xì)胞之間的差別很小，稱為單形性。細(xì)胞核變化與特征見(jiàn)表8-5。17ppt課件18ppt課件4．細(xì)胞質(zhì)特征細(xì)胞質(zhì)由Golgi體、核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和代謝物等組成，是影響細(xì)胞染色性的重要因素之一。正常細(xì)胞或分化好的腫瘤細(xì)胞常見(jiàn)黏液球、泡沫狀微空泡、微絨毛刷狀緣和纖毛。鄰近細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)鑄?，F(xiàn)象。少數(shù)細(xì)胞有吞噬現(xiàn)象，見(jiàn)于良性或惡性疾病，后者更常見(jiàn)。細(xì)胞質(zhì)變性包括水腫性和空泡樣變化等，質(zhì)膜完整性喪失使細(xì)胞內(nèi)容物溢出，即細(xì)胞溶解。19ppt課件胸腹水病理細(xì)胞學(xué)制作蠟塊技術(shù)就是將送檢的胸腹水，通過(guò)病理技術(shù)流程的處理，制作成細(xì)胞學(xué)常規(guī)蠟塊，將其細(xì)胞成分保存在蠟塊中，從而切片進(jìn)行常規(guī)顯微鏡下診斷，判別細(xì)胞的性質(zhì)、類型，達(dá)到較為精確的腫瘤細(xì)胞的診斷。20ppt課件臨床意義:1、增加了細(xì)胞涂片的數(shù)量、密度，并對(duì)細(xì)胞做了很好保存，既能重復(fù)多切片，又能輔助腫瘤免疫組化檢測(cè)，提高了胸腹水中腫瘤診斷的陽(yáng)性率。21ppt課件2、查到腫瘤細(xì)胞時(shí)，對(duì)細(xì)胞類型能夠做很好的分型，為腫瘤規(guī)范治療提供更多參考依據(jù)。3、此項(xiàng)技術(shù)較以前脫落細(xì)胞學(xué)普通涂片準(zhǔn)確性更高，保存更方便，對(duì)疾病的診斷更加明確。22ppt課件制作的方法：1.接到胸腹水后，將其靜止沉淀1小時(shí)，然后吸取底部液體置入塑料離心管中;2.加入10%福爾馬林液5ml，離心3500/5min，傾去上清液;23ppt課件3.加入10%福爾馬林液5ml，離心;4.重復(fù)1次并靜置，等待取材;5.取材時(shí)用濾紙包裹即可，并通過(guò)脫水—浸蠟—包埋—切片—顯微鏡下診斷—報(bào)告發(fā)出等過(guò)程，對(duì)胸腹水做出疾病診斷；