實(shí)驗(yàn)三細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響

實(shí)驗(yàn)三細(xì)菌的分布與外界因素對(duì)細(xì)菌的影響第一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?掌握皮膚消毒方法．２.掌握標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（Ｋ－Ｂ）的原理、操作方法、結(jié)果的判讀與解釋及臨床意義．３.掌握紙片擴(kuò)散法的質(zhì)量控制方法．４.熟悉人體皮膚、咽喉部細(xì)菌檢查方法．５.熟悉紫外線滅菌方法．６.了解空氣、水中細(xì)菌的檢查方法．７.了解高壓蒸汽滅菌方法．第二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二試驗(yàn)內(nèi)容一、細(xì)菌的分布檢查１.空氣中細(xì)菌的檢查２.水中細(xì)菌的檢查３.皮膚消毒試驗(yàn)４.飛沫中細(xì)菌的檢查二、外界因素對(duì)細(xì)菌的影響１.高壓蒸汽滅菌法２.紫外線殺菌試驗(yàn)３.藥物敏感試驗(yàn)第三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二一、細(xì)菌的分布檢查

了解微生物在自然界及正常人體的分布，對(duì)于在醫(yī)療實(shí)踐及某些科學(xué)實(shí)驗(yàn)中樹立無菌觀念有著重要的意義。

第四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二材料

普通瓊脂平板血瓊脂平板

MH瓊脂平板３７℃溫箱無菌棉簽等普通瓊脂平板血瓊脂平板第五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二空氣中細(xì)菌的檢查（示教）

左邊培養(yǎng)皿菌落是未被過濾空氣中的細(xì)菌，右邊是經(jīng)過濾空氣中留有的少量細(xì)菌第六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二水中細(xì)菌的檢查（示教）取水樣1ml

注入無菌空平皿內(nèi)加15mL已融化并冷卻至約45℃的培養(yǎng)基混勻倒置于３７℃溫箱培養(yǎng)18-２４h后觀察結(jié)果第七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二

1.分區(qū)標(biāo)記

2.接種

3.培養(yǎng)皮膚細(xì)菌的檢查：空白對(duì)照消毒后消毒前常用的皮膚消毒劑第八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二飛沫中細(xì)菌的檢查

用咳碟法將咽喉部細(xì)菌接種于血平板第九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二二、外界因素對(duì)細(xì)菌的影響當(dāng)外界環(huán)境條件發(fā)生巨大改變，可導(dǎo)致微生物的主要代謝活動(dòng)發(fā)生障礙，生長停頓，甚至死亡。第十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二1.高壓蒸汽滅菌法（示教）原理：利用密閉的金屬鍋，密閉加熱使鍋內(nèi)蒸汽壓力增大，溫度隨之升高，殺菌力增強(qiáng)。第十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二高壓蒸汽滅菌器手提式高壓蒸汽滅菌器第十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二高壓蒸汽滅菌器構(gòu)造：高壓蒸汽滅菌器是一個(gè)雙層的金屬圓筒，兩層之間盛水，外層堅(jiān)厚，其上方或前方有金屬厚蓋。蓋旁附有螺旋，借以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢，因而蒸汽壓力升高，其溫度亦相應(yīng)的增高。

第十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二1.加水至外筒內(nèi)，被滅菌物品放入內(nèi)筒。2.蓋上滅菌器蓋，擰緊螺旋使之密閉。3.加熱，同時(shí)打開排氣閥門，排凈其中冷空氣，關(guān)閉排氣閥。繼續(xù)加熱，待壓力表漸漸升至所需壓力時(shí)(103.4kPa,121.3℃)，保持壓力和溫度維持15～30min。4.待壓力自行降至零時(shí)，慢慢打開排氣閥，排除余氣，開蓋取物。切不可在壓力尚未降低為零時(shí)突然打開排氣閥門，以免瓶內(nèi)液體等沖出外溢。

使用方法第十四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二用途凡耐高溫和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應(yīng)用本法滅菌。

第十五頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二2、紫外線殺菌試驗(yàn)原理：通過紫外線的照射，破壞及改變微生物的DNA結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌當(dāng)即死亡或不能繁殖后代，達(dá)到殺菌的目的。

第十六頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二優(yōu)點(diǎn)簡單便捷、廣譜高效、無二次污染、便于治理和實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)穿透能力弱特點(diǎn)第十七頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二材料普通瓊脂平板18-24h細(xì)菌培養(yǎng)物紫外線燈等第十八頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二方法細(xì)菌接種于普通瓊脂平板上

打開皿蓋，放置于紫外燈下約30cm處，用蓋子蓋住半邊做對(duì)照，照射半小時(shí)后蓋好蓋子。

培養(yǎng)第十九頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二藥物敏感試驗(yàn)?zāi)壳芭R床微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行藥敏試驗(yàn)的方法主要有紙片擴(kuò)散法、稀釋法、抗生素濃度法、自動(dòng)化儀器等第二十頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法（Ｋ－Ｂ）原理：將含有定量抗生素的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上，紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散，隨著擴(kuò)散距離的增加抗生素的濃度呈對(duì)數(shù)減少,在藥物濃度到達(dá)的范圍內(nèi)對(duì)此藥敏感的細(xì)菌不能生長而形成透明的抑菌圈，不同細(xì)菌形成的抑菌圈各不相同，抑菌圈的大小反映了測試菌對(duì)該藥的敏感程度，并與該藥物對(duì)測試菌的最低抑菌濃度（MIC）呈負(fù)相關(guān)。第二十一頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二材料菌種：葡萄球菌、大腸桿菌菌液培養(yǎng)基：水解酪蛋白瓊脂（MH瓊脂）試劑：各種抗菌藥物紙片（PEN、GEN、STR、CHL)第二十二頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二方法

用滅菌棉試蘸取試驗(yàn)菌涂抹在MH培養(yǎng)基表面，要均勻涂抹3次，室溫下待干燥

以無菌鑷子(燒灼滅菌，注意鑷子要冷卻）取各抗生素紙片貼于表面

培養(yǎng)各紙片中心距>24mm,紙片距平板邊緣應(yīng)>15mmPENGENSTRCHL第二十三頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二結(jié)果判斷

用毫米尺量取抑菌圈直徑，參考試驗(yàn)指導(dǎo)表3-6的標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果，按敏感（S）、中介（I）、耐藥（R）報(bào)告。

第二十四頁，共二十六頁，編輯于2023年，星期二材料分配分組兩人一組菌種金葡菌、大腸桿菌各一支培養(yǎng)基2塊普通平板/組（皮膚細(xì)菌的檢查、紫外線殺菌試驗(yàn)）2塊MH平板/組（藥物敏感試驗(yàn)）1塊血平板/組（咽喉部細(xì)菌的檢查）第二十五頁，共二十六