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文檔簡介
第四節(jié)酶活性濃度的測定技術概述1.量氣法:此法很少采用2.分光光度法:其最大優(yōu)點在于擴大了測定范圍,波長范圍更寬。結合各種工具酶的偶聯反應,如應用NAD(PH和NAD(P)+吸收光譜差異建立的測定各種脫氫酶活性濃度的方法,使分光光度法得到了進一步發(fā)展,幾乎可應用于各種血清酶活性的測定。隨著各種自動生物化學儀和配套用試劑盒的普及應用,這一方法在臨床酶學測定中起著十分重要的作用3.熒光法和放射性核素法對于一些酶濃度很低的標本,可考慮改用靈敏度較高的熒光法或放射性核素法。熒光法取決于酶促反應生成熒光物質的速率,此速率與酶濃度成正比,并通過熒光光度計進行測定,根據熒光強弱的變化換算出酶的活性。例如,還原型的NAD(P)H有強烈的熒光,故所有以NAD(P)+為輔酶的氧化還原酶類均可用熒光法進行測定。核素法因有污染且操作煩雜,目前應用較4.其他方法:酶活性濃度的測定測定酶的催化活性濃度是臨床酶學分析最為常用的方法,具有迅速、靈敏、成本低等特點??筛鶕复俜磻M程曲線,采用合理的方法進行酶活性濃度的測定(-)酶促反應進程反應統(tǒng)數一鱖[S]時圖62癲促反應時閶進程曲緄(s為底物,為產物)底物耗盡吸光度/線性反應期延滯期零級反應期△A斜率=速度卜廷遲時閉一
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