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文檔簡介
一、 酶的特性有哪些?酶的催化效率高,比一般的酶高106-1013倍;酶的專一性,一種酶作用于一種或一類分子結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì);酶的催化條件溫和;易變性,大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),因而會(huì)被高溫、酸、強(qiáng)堿等破壞;酶在生物體內(nèi)參與每一次反應(yīng)后,它本身的性質(zhì)和數(shù)量都不會(huì)發(fā)生改變;二、 國際酶學(xué)委員會(huì)推薦的分類和命名規(guī)則的主要依據(jù)是什么?答:根據(jù)酶所催化的化學(xué)反應(yīng)性質(zhì)和底物的化學(xué)本質(zhì)三、 酶對(duì)食品科學(xué)的重要性表現(xiàn)在哪些方面?控制酶活力改善食品原料風(fēng)味和質(zhì)地結(jié)構(gòu);利用酶催化活性進(jìn)行食品加工和保藏;四、 a-淀粉酶、p-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶(或糖化酶)和異淀粉酶的作用機(jī)理有何不同?淀粉酶以隨機(jī)方式作用于淀粉、糖原任意的a(1—4)糖苷鍵;淀粉酶作用于a(1—4)的非還原性末端,將麥芽糖單位水解;糖淀粉酶作用于a(1—4)和a(1—6)糖苷鍵的非還原性末端,將葡萄糖單位水解,但對(duì)a(1一6)糖苷鍵作用速度慢;異淀粉酶專一性的水解支鏈淀粉a(1—6)糖苷鍵;五、 由淀粉生產(chǎn)葡萄糖、麥芽糖和果葡糖漿各用到什么酶?分別描述各工藝中淀粉水解過程酶法葡萄糖生產(chǎn)主要使用a-淀粉酶和糖化酶。首先a-淀粉酶在pH6.0?6.5,溫度85?90°C時(shí),作用45min左右將淀粉漿液化成糊精。當(dāng)采用高溫a-淀粉酶時(shí),液化溫度可提高至105?115C,可大大縮短液化時(shí)間,提高液化效率。液化完成后,將液化淀粉液冷卻至55?60C,調(diào)pH至4.5?5.0,加入糖化酶保溫,使糊精轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟?。酶法麥芽糖生產(chǎn)主要使用p-淀粉酶、脫支酶;酶法生產(chǎn)果葡糖漿是葡萄糖異構(gòu)酶催化葡萄糖異構(gòu)化生成部分果糖而得到的葡萄糖與果糖的混合糖漿。主要使用a-淀粉酶、糖化酶、葡萄糖異構(gòu)酶。六、 一些乳制品中為什么添加乳糖酶?答:乳糖的溶解度比較低,在冷凍乳制品中容易析出,使得產(chǎn)品帶有顆粒狀結(jié)構(gòu),乳糖部分水解可以防止出現(xiàn)這種情況。七、 果膠酶分為幾種?分別描述他們的作用機(jī)理和實(shí)際應(yīng)用。答:酶分為兩類,一類能催化果膠解聚,一類能催化果膠分子中的酯水解;1、催化果膠物質(zhì)解聚的酶作用于果膠的酶A、 聚甲基半乳糖醛酸酶(PMG)內(nèi)切-PMG(EC3,2,1,41);外切-PMGB、 聚甲基半乳糖醛酸裂解酶(PMGL)或果膠裂解酶.以隨機(jī)方式解聚高度酯化的果膠,使溶液的粘度快速下降。只能裂解貼近甲酯基的糖苷鍵。pH6.0,只有霉菌中有。內(nèi)切-PMGL(EC4,2,2,10);外切-PMGL作用于果膠酸的酶A、聚半乳糖醛酸酶(PG).此類能水解半乳糖醛酸中a-1,4鍵(優(yōu)先對(duì)甲酯含量低的水溶性果膠酸作用)。a.內(nèi)切PG(endo-PG):從分子內(nèi)部無規(guī)則的切斷a-1,4鍵,可使果膠或果膠酸的粘度迅速下降。b.外切(exo-PG):從分子末端逐個(gè)切斷a-1,4鍵,生成半乳糖醛酸,粘度下降不明顯。pH5.0,鈣激活。B、聚半乳糖醛酸裂解酶(PGL)或果膠酸裂解酶.解聚低甲氧基果膠或果膠酸,產(chǎn)物為半乳糖醛酸二聚體,只能裂解貼近游離羧基的糖苷鍵。pH8.0~9.5,Ca2+是絕對(duì)需要的。細(xì)菌中含量高。2、果膠酯酶(PE),果膠、果膠?;饷福‥C3,1,1,11)。果膠酯酶能使果膠中的甲酯水解,生成果膠酸。霉菌果膠酯酶的最適pH一般在酸性范圍,它的熱穩(wěn)定性較低。細(xì)菌果膠酯酶的最適pH在(7.5~8.0)。八、 脂肪酶和脂肪氧化酶有什么不同?答:脂肪酶:水解脂肪,產(chǎn)生甘油、甘油一酯和脂肪酸。脂肪氧化酶:催化順,順-1,4-戊二烯的不飽和脂肪酸及酯的氫過氧化作用。九、 過氧化物酶為什么可以做為一些水果和蔬菜制品熱燙程度的指標(biāo)?答:過氧化物酶屬于最耐熱的酶類,當(dāng)果蔬中的過氧化物酶在熱加工過程中失活時(shí),其他的酶以活性形式存在的可能性很小。十、蛋白酶根據(jù)最適pH和活性基團(tuán)分為哪幾種?答:按活性基團(tuán)分:絲氨酸蛋白酶:活性部位有絲氨酸殘基;巰基蛋白酶:活性部位含有一個(gè)或多個(gè)巰基;金屬蛋白酶:蛋白酶中金屬離子;酸性蛋白酶:活性部位有兩個(gè)羧基;按最適PH分:中性:PH6-8,1398枯草桿菌蛋白酶;堿性:PH9-11,2709枯草桿菌蛋白酶;酸性:PH1-3,胃蛋白酶;十一、為什么蛋白質(zhì)水解后有鮮味和苦味?答:風(fēng)味來源與氨基酸的組成有關(guān),十二、蛋白酶可以應(yīng)用到哪些食品中,舉一個(gè)例子說明添加蛋白酶有什么作用。答:肉制品:以木瓜蛋白酶為主要成分的嫩化劑對(duì)肉類有嫩化效果;啤酒加工:除去啤酒中的蛋白質(zhì),減少啤酒冷渾濁;綠茶飲料:添加木瓜蛋白酶,除去綠茶提取液中的蛋白質(zhì),穩(wěn)定綠茶飲料,防止渾濁;十三、硫酸銨沉淀、瓊脂糖凝膠過濾和離子交換法等純化酶的機(jī)理各是什么?硫酸銨沉淀:在高鹽濃度條件下,水的濃度顯著下降,導(dǎo)致溶質(zhì)-溶劑相互作用減弱,從而使溶解度下降;瓊脂糖凝膠過濾:不同試樣通過凝膠時(shí),能進(jìn)入顆粒狀凝膠的微孔的小分子被阻滯,不能進(jìn)入微孔的大分子未被阻滯,改變顆粒狀凝膠的微孔大小可能改變凝膠分子量分級(jí)分離范圍;離子交換法:改變PH或提高溶液離子強(qiáng)度,根據(jù)酶結(jié)合到離子交換劑上的能力將混合物中的蛋白質(zhì)分離開;十四、超濾純化酶的機(jī)理是什么?答:小分子和離子在施加壓力的情況下通過透析膜,從而導(dǎo)致酶液的濃縮,一般采用4個(gè)大氣壓。十五、酶的發(fā)酵生產(chǎn)對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的要求有哪些?答:1.培養(yǎng)基:含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、產(chǎn)沒促進(jìn)劑;培養(yǎng)條件:適宜的溫度、PH、溶解氧;十六、酶制劑保存考慮哪些條件?溫度:低溫保存;PH緩沖劑:調(diào)節(jié)PH;酶蛋白濃度:濃度高,穩(wěn)定;濃度低,易解離、吸附,發(fā)生表面變性;易氧化:穩(wěn)定劑:如加入鈣離子可以保護(hù)淀粉酶,錳離子保護(hù)溶菌酶,二巰基乙醇保護(hù)巰基酶;十七、動(dòng)力學(xué)研究包括哪些內(nèi)容?圖示競(jìng)爭(zhēng)性抑制、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制及反競(jìng)爭(zhēng)性抑制的區(qū)別。內(nèi)容:以化學(xué)動(dòng)力學(xué)為基礎(chǔ),對(duì)酶促反應(yīng)速率進(jìn)行測(cè)定,研究各種因素對(duì)酶促反應(yīng)的影響,十八、Km的含義及應(yīng)用價(jià)值?含義:反應(yīng)速度達(dá)到反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度;應(yīng)用價(jià)值:是酶的特性常數(shù),只與酶本身性質(zhì)有關(guān);用于判斷酶的專一性和天然底物,Km值最小的底物稱為酶的最適底物或天然底物;可以作為酶和底物結(jié)合緊密程度的指標(biāo),用來表示酶和底物的親和力大?。灰阎趁傅腒m,可以計(jì)算在某以一底物在不同濃度下的反應(yīng)速率;可以推斷具體條件下某一反應(yīng)的方向;十九、可逆抑制和不可逆抑制有哪些區(qū)別?答:不可逆抑制是酶與抑制劑以共價(jià)鍵結(jié)合,不能用透析、超濾等物理方法去除抑制劑而使酶復(fù)活;可逆抑制是酶與抑制劑以非共價(jià)鍵方式結(jié)合,能用物理方法去除抑制劑而使酶復(fù)活;二十、簡述溫度、pH和激活劑等因素對(duì)酶促化學(xué)反應(yīng)速度的影響。溫度:溫度對(duì)酶反應(yīng)的影響是雙重的:①隨著溫度的上升,反應(yīng)速度也增加,直至最大速度為止。②在酶促反應(yīng)達(dá)到最大速度時(shí)再升溫,反應(yīng)速度隨溫度的增高而減小,高溫時(shí)酶反應(yīng)速度減小,這是酶本身變性所致。PH:pH值的變化對(duì)酶的反應(yīng)速度則影響較大,即酶的活性隨著介質(zhì)的pH值變化而變化。每一種酶只能在一定pH值范圍內(nèi)表現(xiàn)出它的活性。激活劑:激活劑為無機(jī)離子或簡單有機(jī)化合物,能對(duì)酶促反應(yīng)其激活作用。二十一、固定化酶的定義及優(yōu)點(diǎn)?定義:定化酶,是指在一定空間內(nèi)呈閉鎖狀態(tài)存在的酶,能連續(xù)地進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)后的酶可以回收重復(fù)使用。優(yōu)點(diǎn):①極易將固定化酶與底物、產(chǎn)物分開;②可以在較長時(shí)間內(nèi)進(jìn)行反復(fù)分批反應(yīng)和裝柱連續(xù)反應(yīng);③在大多數(shù)情況下,能夠提高酶的穩(wěn)定性;④酶反應(yīng)過程能夠加以嚴(yán)格控制;⑤產(chǎn)物溶液中沒有酶的殘留,簡化了提純工藝;⑥較游離酶更適合于多酶反應(yīng);⑦可以增加產(chǎn)物的收率,提高產(chǎn)物的質(zhì)量;⑧酶的使用效率提高,成本降低。二十二、酶的固定化方法有哪些?各有什么優(yōu)缺點(diǎn)?答:吸附、包埋、共價(jià)鍵結(jié)合、交聯(lián)法吸附:優(yōu)點(diǎn),操作簡單,條件溫和,酶活力不易喪失;缺點(diǎn),結(jié)合不牢固,使用過程易脫落,離子吸附法易受離子濃度、PH、底物濃度等影響;包埋:優(yōu)點(diǎn),操作簡單,防止酶滲出,酶回收率高;缺點(diǎn),只適合小分子底物和產(chǎn)物的酶,對(duì)小分子擴(kuò)散的阻力使固定化酶動(dòng)力行為改變或活力降低;共價(jià)鍵結(jié)合:優(yōu)點(diǎn),固定相當(dāng)牢固,穩(wěn)定性好,可連續(xù)使用;缺點(diǎn),載體活化難度大,操作復(fù)雜,反應(yīng)條件劇烈,空間結(jié)構(gòu)改變,易導(dǎo)致酶活性降低;交聯(lián)法:優(yōu)點(diǎn),固定牢固,穩(wěn)定性高;缺點(diǎn),成本高,操作復(fù)雜;二十三、酶固定化后,酶活力降低的原因?酶活性中心殘基與水不溶性載體結(jié)合;構(gòu)象改變;酶與底物相互作用受到空間位阻限制;二十四、溶菌酶的作用機(jī)理是什么?答:溶菌酶是一種專門作用于微生物細(xì)胞壁的水解酶,稱包胞壁質(zhì)酶或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶,它專一地作用于肽多糖分子中N-乙酰胞壁酸與N-乙酰氨基葡萄糖之間的P-1,4鍵,從而破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁,使之松馳而失去對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用,最終使細(xì)菌溶解死亡。二十五、固定化酶的穩(wěn)定性增強(qiáng)主要表現(xiàn)在哪些方面?答:操作穩(wěn)定性、貯藏穩(wěn)定性、熱穩(wěn)定性二十六、脂肪氧化酶對(duì)食品的質(zhì)量有哪些影響?(1) 對(duì)食品風(fēng)味的影響在一些水果和蔬菜中,構(gòu)成期望的風(fēng)味成分;在冷凍蔬菜和其他加工食品中,產(chǎn)生不良的風(fēng)味。在谷類保藏過程中產(chǎn)生的不良風(fēng)味。直接或間接地和肉類酸敗及高蛋白質(zhì)食品的不良風(fēng)味有關(guān)。(2) 脂肪氧合酶對(duì)食品營養(yǎng)的影響作用的產(chǎn)物對(duì)維生素A及維生素A原的破壞;減少了食品中必需不飽和脂肪酸的含量;作用的產(chǎn)物同蛋白質(zhì)的必需氨基酸作用,從而降低了蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值及功能性質(zhì)。二十七、葡萄糖氧化酶和超氧化物歧化酶的作用機(jī)理是什么?葡萄糖氧化酶:是一種需氧脫氫酶,能專一地氧化8-D-葡萄糖成為葡萄糖酸和過氧化氫。超氧化物歧化酶:是一類含金屬的酶,催化超氧陰離子的歧化反應(yīng)。02一+02一+2H+ O2+H2O2二十八、什么是糖酶?常見的糖酶有哪幾種?(四種以上)答:糖酶是裂解多糖中將單糖結(jié)合在一起的化學(xué)鍵,使多糖降解為較小的分子的酶。淀粉酶、果膠酶、轉(zhuǎn)化酶、乳糖酶、纖維素酶。二十九、抑制劑類型對(duì)酶參數(shù)Km的影響有何不同?競(jìng)爭(zhēng)性抑制:抑制劑與底物競(jìng)爭(zhēng)與酶的同一活性中心結(jié)合,從而干擾了酶與底物的結(jié)合,使酶的催化活性降低,Km值增大,Vm值不變;反競(jìng)爭(zhēng)性抑制:抑制劑不能與游離酶結(jié)合,但可與ES復(fù)合物結(jié)合并阻止產(chǎn)物生成,使酶的催化活性降低,Km減小,Vm降低;非競(jìng)爭(zhēng)性抑制:抑制劑既可以與游離酶結(jié)合,也可以與ES復(fù)合物結(jié)合,使酶的催化活性降低,Km值不變,Vm值降低;三十、最常見的微生物產(chǎn)酶發(fā)酵類型是液體深層發(fā)酵還是固體發(fā)酵?答:液體深層發(fā)酵,因?yàn)?.它不僅適用于微生物細(xì)胞,也可用于各種植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)和發(fā)酵;2.機(jī)械化程度高,技術(shù)管理較嚴(yán),酶產(chǎn)率高,質(zhì)量較好,產(chǎn)品回收率較高;3.易于人為控制;三十一、培養(yǎng)基中碳源的作用有哪些?答:1.作為碳源;2.調(diào)節(jié)滲透壓;3.起誘導(dǎo)作用,如淀粉可以作為淀粉酶的誘導(dǎo)物,秸稈、麥麩作為木聚糖酶誘導(dǎo)物;4.作為化能異氧微生物的能量來源;5.構(gòu)成菌體的重要碳源;三十二、底物濃度和酶反應(yīng)速度的關(guān)系分為幾個(gè)階段?當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí),反應(yīng)速度的增加與底物濃度的增加成正比(一級(jí)反應(yīng));隨底物濃度的增加,反應(yīng)速度的增加量逐漸減少(混合級(jí)反應(yīng));當(dāng)?shù)孜餄舛仍黾拥揭欢繒r(shí),反應(yīng)速度達(dá)到一最大值,不再隨底物濃度的增加而增加(零級(jí)反應(yīng))。三十三、酶活力的定義是什么?答:酶活力指在一定條件下,酶所催化的反應(yīng)速度。即一定時(shí)間內(nèi)底物分解量或產(chǎn)物生成量,用單位數(shù)表示。三十四、根據(jù)酶和雜蛋白的性質(zhì)差異,它們的分離方法可分為哪幾種?離心、凝膠過濾、透析和超過濾,以大小和質(zhì)量為依據(jù);離子交換色譜、電泳、等電聚焦,以電荷為依據(jù);鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法,以溶解度為依據(jù);三十五、多酚氧化酶致褐變的機(jī)理和防止褐變的方法有哪些?答:機(jī)理:食物中多酚類在多酚氧化酶的催化下氧化生成無色鄰醌,然后鄰醌在酚羥基酶催化下生成三羥基化合物。鄰醌具有較強(qiáng)的氧化能力,可將三羥基化合物進(jìn)一步氧化成羥基醌,羥基醌易聚合而生成黑色素。食品發(fā)生酶促褐變,必須具備3個(gè)條件:組織中有多酚類底物和多酚氧化酶存在以及與空氣接觸。因此,防止褐變的方法:加熱處理、調(diào)節(jié)PH、加抑制劑處理、驅(qū)除或隔絕空氣;########################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################################酶的特性:酶的催化效率高酶作用的專一性(鍵專一性基團(tuán)專一性絕對(duì)專一性立體異構(gòu)專一性)酶的分類和命名的依據(jù):以酶所催化的化學(xué)反應(yīng)性質(zhì)培養(yǎng)基的成分:碳源、氮源、水、無機(jī)鹽、生長因子產(chǎn)酶促進(jìn)劑(碳素是構(gòu)成菌體成分的主要元素,也是細(xì)胞貯藏物質(zhì)和生產(chǎn)各種代謝產(chǎn)物的骨架,還是菌體生命活動(dòng)的能量的主要來源。當(dāng)前酶制劑生產(chǎn)上使用的菌種大都是只能利用有機(jī)碳的異養(yǎng)型微生物,主要來源:農(nóng)副產(chǎn)品中如甘薯、麩皮、玉米、米糠等淀粉質(zhì)原料;野生的如土茯苓、橡子、石蒜等淀粉質(zhì)原料。此外,以石油產(chǎn)品中12-16碳的成分來作碳源,如以某些嗜石油微生物生產(chǎn)蛋白酶、脂酶,均已獲得成功。)目前工業(yè)主要發(fā)酵技術(shù):液液發(fā)酵技術(shù)分離純化的依據(jù):酶和雜蛋白在性質(zhì)上的差異凝膠過濾原理:根據(jù)溶質(zhì)分子的大小進(jìn)行分離它們的分離方法可分為:(1)根據(jù)分子大小而設(shè)計(jì)的方法(2)根據(jù)溶解度大小分離的方法(3)按分子所帶正負(fù)電荷多少分離的方法(4)按穩(wěn)定性差異建立的分離方法(5)按親和作用的差異建立的分離方法原理:a.小分子由于擴(kuò)散作用進(jìn)入凝膠內(nèi)部被截留;大分子被排阻在顆粒外,在顆粒間迅速通過。b.1.蛋白質(zhì)混合物上柱,2.洗脫開始,小分子擴(kuò)散進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)大分子被排阻在顆粒外,3.小分子被截留,大分子向下移動(dòng),大小分子分開,4.大小分子完全分開,5.大分子行程較短,已洗脫出層析柱,小分子尚在行進(jìn)中。酶保存的因素:(1)溫度:在低溫條件下(0-4°C)使用、處理和保存。有的需要更低的溫度,加入甘油或多元醇有保護(hù)作用。(2)pH與緩沖液:pH應(yīng)在酶的pH穩(wěn)定范圍內(nèi),采用緩沖液保存。(3)酶蛋白濃度:一般酶濃度高較穩(wěn)定,低濃度時(shí)易于解離、吸附或發(fā)生表面變性失效。(4)氧:有些酶易于氧化而失活。(5)為提高酶穩(wěn)定性,常加入穩(wěn)定劑酶活力:指酶催化反應(yīng)的能力,它表示樣品中酶的含量。比活力:指單位蛋白質(zhì)(毫克蛋白質(zhì)或毫克蛋白氮)所含有的酶活力(單位/毫克蛋白)。比活力是酶純度指標(biāo),比活力愈高表示酶愈純,即表示單位蛋白質(zhì)中酶催化反應(yīng)的能力愈大。固定化酶是指在一定的空間范圍內(nèi)起催化作用,并能反復(fù)和連續(xù)使用的酶。固定化酶的優(yōu)點(diǎn):(1)同一批固定化酶能在工藝流程中重復(fù)多次地使用;(2)固定化后,和反應(yīng)物分開,有利于控制生產(chǎn)過程,同時(shí)也省去了熱處理使酶失活的步驟;(3)穩(wěn)定性顯著提高;(4)可長期使用,并可預(yù)測(cè)衰變的速度;(5)提供了研究酶動(dòng)力學(xué)的良好模型。酶的固定化主要方法:吸附法、包埋法、共價(jià)鍵結(jié)合法和交聯(lián)法。吸附法和共價(jià)鍵結(jié)合法又可統(tǒng)稱為載體結(jié)合法。固定化酶的穩(wěn)定性增強(qiáng)主要表現(xiàn)在:(1)操作穩(wěn)定性(2)貯藏穩(wěn)定性(3)熱穩(wěn)定性(4)對(duì)蛋白酶的穩(wěn)定性(5)酸堿穩(wěn)定性糖酶分類:淀粉酶乳糖酶纖維素酶果膠酶淀粉酶:作用底物是淀粉、糖原和多糖衍生物a-淀粉酶:作用方式:以隨機(jī)的方式作用于淀粉而產(chǎn)生還原糖。以直鏈淀粉為底物時(shí),反應(yīng)一般按兩個(gè)階段進(jìn)行:首先,直鏈淀粉快速分解,產(chǎn)生寡糖,粘度及與碘返生呈色反應(yīng)的能力很快下降;第二階段,寡糖緩慢水解生成最終產(chǎn)物葡萄糖和麥芽糖。以支鏈淀粉為底物時(shí),產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖和一系列a-限制糊精(由4個(gè)或更多葡萄糖基構(gòu)成的寡糖,含a-1.6糖苷鍵)作用機(jī)制:水解支鏈淀粉時(shí),由于不能水解分支點(diǎn)的a-1,6-糖苷鍵,因此產(chǎn)物中不僅有a-麥芽糖和少量的葡萄糖,還產(chǎn)生異麥芽糖。異麥芽糖是支鏈淀粉分子的分支點(diǎn),是由兩個(gè)葡萄糖以a-1,6-糖苷鍵相連的雙糖。一般a-淀粉酶在pH5.5?8比較穩(wěn)定,當(dāng)pH4以下時(shí)易失活,酶的最適pH在5?6。a-淀粉酶的用途:1)酶法生產(chǎn)葡萄糖(2)飴糖與淀粉糖漿的生產(chǎn)(3)酒精生產(chǎn)(4)其它發(fā)酵工業(yè)酶法葡萄糖生產(chǎn)主要使用a-淀粉酶和糖化酶。首先a-淀粉酶在pH6.0?6.5,溫度85?90°C時(shí),作用45min左右將淀粉漿液化成糊精。當(dāng)采用高溫a-淀粉酶時(shí),液化溫度可提高至105?115C,可大大縮短液化時(shí)間,提高液化效率。液化完成后,將液化淀粉液冷卻至55?60C,調(diào)pH至4.5?5.0,加入糖化酶保溫,使糊精轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟?。面包焙烤工業(yè),作為保鮮劑:麥芽a一淀粉酶和微生物a一淀粉酶被廣泛用于焙烤工業(yè)。這些酶用于面包工業(yè),使這些產(chǎn)品體積更大,顏色更好,顆粒更柔軟.在現(xiàn)代化連續(xù)焙烤過程中,在面粉中添加a一淀粉酶不僅可以增加發(fā)酵率,降低生面團(tuán)粘度(改進(jìn)產(chǎn)品的體積和質(zhì)地),增加生面團(tuán)中糖的含量,改良面包的口感、外皮顏色和焙烤質(zhì)量,還可以延長焙烤食品的保鮮時(shí)間。8-淀粉酶:a-1,4-葡聚糖麥芽糖水解酶,EC3.2.1.2,又稱糖化酶。作用:外切酶,從淀粉分子的非還原性末端裂解a-1,4-糖苷鍵,依次將麥芽糖單位水解下來,產(chǎn)物構(gòu)型如型轉(zhuǎn)變成8型。不能裂解支鏈淀粉中的a-1,6-糖苷鍵,也不能繞過分支點(diǎn)繼續(xù)作用于a-1,4-糖苷鍵一對(duì)支鏈淀粉的作用是不完全的。主要產(chǎn)物:麥芽糖和8-限制糊精。淀粉酶的分類及特性系統(tǒng)名稱常用名作用特性水解產(chǎn)物a-1.4葡聚糖-4-葡聚糖水解酶a-淀粉酶或液化酶不規(guī)則的分解淀粉、糖原類a-1.4鍵以直鏈淀粉為底物時(shí),產(chǎn)生葡萄糖和麥芽糖。以支鏈淀粉為底物時(shí),產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖和一系列a-限制糊精a-1.4葡聚糖糖化型淀粉酶或從非還原性未端以葡萄以直鏈淀粉為底物時(shí),產(chǎn)-葡萄糖水解酶葡萄糖淀粉酶糖為單位順次分解淀粉糖原類的a-1.4鍵,對(duì)a-1.3、a-1.6也有效物葡萄糖以支鏈淀粉為底物時(shí),不完全,有葡萄糖,可能還有8-限制糊精,a-1.4葡聚糖-4-麥芽糖水解酶8-淀粉酶從非還原性未端以麥芽糖為單位,分解淀粉糖原類的a-1.4鍵以直鏈淀粉為底物時(shí),麥芽糖外,還有麥芽三糖和葡萄糖(奇數(shù)糖基)。以支鏈淀粉為底物時(shí),麥芽糖、8-限制糊精支鏈淀粉-6-葡聚糖水解酶異淀粉酶對(duì)a-1.6鍵分解速度快,分解支鏈淀粉、糖原中a-1.6鍵直鏈淀粉葡萄糖淀粉酶外切酶,商業(yè)酶制劑由霉菌產(chǎn)生。作用于淀粉時(shí),從非還原性末端逐次切下一個(gè)葡萄糖單位,并將C(1)構(gòu)型從a轉(zhuǎn)變?yōu)?型。底物專一性低,不僅分解a-1,4-糖苷鍵,也能分解a-1,6-糖苷鍵,只是速度很慢。以直鏈淀粉為底物時(shí),產(chǎn)物葡萄糖。以支鏈淀粉為底物時(shí),不完全,有葡萄糖,可能還有8-限制糊精。異淀粉酶只能水解構(gòu)成分支點(diǎn)的a-1.6-糖苷鍵;不能水解直鏈分子中的a-1.6-糖苷鍵。蛋白酶按最適作用條件分為酸性蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶 木瓜蛋白酶的用途:1、作為肉類嫩化劑:用于肉類嫩化劑的蛋白酶必須具有較高的耐熱性。因?yàn)槟刍瘎┑淖饔弥饕l(fā)生在當(dāng)肉類被燒煮,溫度逐漸升高,而酶尚未失活之前的這個(gè)階段。燒煮導(dǎo)致肉類結(jié)締組織中膠原蛋白質(zhì)和強(qiáng)性蛋白質(zhì)變性,而蛋白酶較易作用于變性的膠原蛋白質(zhì)和彈性蛋白質(zhì)。木瓜蛋白酶在60~65度時(shí)使膠原蛋白質(zhì)增溶的速度最快。2、綠茶飲料渾濁:混濁物質(zhì)主要是由蛋白質(zhì)(15~65%)和多酚類化合物(10~35%),通稱茶乳酪,是綠茶飲料生產(chǎn)中的關(guān)鍵,添加木瓜蛋白酶除去綠茶浸提液中的蛋白質(zhì),對(duì)穩(wěn)定綠茶飲料十分有利。3、解除啤酒渾濁:啤酒在0°C左右時(shí)存放一定的時(shí)間后,因溫度低,會(huì)出現(xiàn)一些較小顆粒懸浮在酒液中,使啤酒失光,如時(shí)間繼續(xù)延長便會(huì)出現(xiàn)較大凝聚物蛋白質(zhì)的沉淀。啤酒制造過程中,當(dāng)過濾除去酵母后,啤酒中已不存在蛋白酶的活力,通常可以在啤酒巴氏殺菌之前加入蛋白酶,經(jīng)常使用的是木瓜蛋白酶。溶菌酶:溶菌酶又稱為胞壁質(zhì)酶,是一種專門作用于微生物細(xì)胞壁的水解酶.作用機(jī)制:溶菌酶是一種專門作用于微生物細(xì)胞壁的水解酶,稱包胞壁質(zhì)酶或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶,它專一地作用于肽多糖分子中N-乙酰胞壁酸與N-乙酰氨基葡萄糖之間的8-1,4鍵,從而破壞細(xì)菌的細(xì)胞壁,使之松馳而失去對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用,最終使細(xì)菌溶解死亡。脂肪酶和酯酶的區(qū)別是什么?①酯酶,催化酯水解的酶。脂肪酶催化脂肪水解為甘油和脂肪酸的酶(即三?;视王;饷?,它催化天然底物油脂水解,生成脂肪酸、甘油和甘油單酯或二酯)。②作用底物的碳鏈長短不同(酯酶優(yōu)先水解短鏈脂肪酸,脂肪酶優(yōu)先水解長鏈脂肪酸)③作用底物的物理狀態(tài)不同(酯酶水解水溶性底物,脂肪酶水解油水界面的底物過氧化物酶冷凍增活效應(yīng):蔬菜熱燙后,會(huì)有一些殘余活力或再生活力被允許留在被保藏的產(chǎn)品中,殘余酶活力在冰凍保藏后,質(zhì)量比酶完全失活時(shí)要高。過氧化物酶(PDA)在食品加工中的應(yīng)用(1)氧化吲哚乙酸,參與植物生長調(diào)節(jié)。(2)過氧化物酶是果蔬成熟和衰老的指標(biāo)。(3)過氧化物酶的活力與果蔬產(chǎn)品,特別是非酸性蔬菜在保藏期間形成的不良風(fēng)味有關(guān)。(4)過氧化物酶屬于最耐熱的酶類,在果蔬加工中常被當(dāng)作熱處理是否充分的指標(biāo)。多酚氧化酶如何控制果蔬褐變?酶促褐變是在有氧條件下,由于多酚氧化酶(PPO)的作用,果蔬組織中的酚類物質(zhì)氧化為醌,醌很快聚合成為褐色素而引起組織褐變。PPO是發(fā)生酶促褐變的主要酶,存在于大多數(shù)果蔬中。酶促褐變的結(jié)果不僅僅是顏色的變化,還會(huì)產(chǎn)生令人不快的味道,并造成營養(yǎng)的流失。而鮮切果蔬的褐變主要是酶促褐變引起的[2]。酶促褐變的產(chǎn)生必須具備三個(gè)條件:酚類物質(zhì)、多酚氧化酶(PPO)、和氧氣,只有這三個(gè)因素同時(shí)具備褐變才會(huì)發(fā)生??刂破渲幸豁?xiàng)內(nèi)容就可防止酶促褐變發(fā)生。影響酶促褐變的主要因素包括溫度、pH值、氧以及抑制劑。酶促褐變抑制規(guī)則按如下所?。海?)抑制或降低多酚氧化酶活性;(2)去除或隔離底物;(3)去除氧;(4)除掉反應(yīng)中間產(chǎn)物。氧氣的存在是酶促褐變產(chǎn)生的一個(gè)很重要的因素,因此排除氧氣是阻止酶促褐變的重要環(huán)節(jié)。采用沸水燙漂或抽真空的方法可去除果蔬自身的溶解氧,蘋果、梨等果肉組織間隙中含氣體較多的水果最適宜采用抽真空的方法。也可利用抗壞血酸形成無氧條件,即采用高濃度的抗壞血酸溶液浸泡,形成阻氧擴(kuò)散層,以防止褐變的發(fā)生。脂肪氧化酶對(duì)食品顏色、風(fēng)味和營養(yǎng)的影響1) 對(duì)食品風(fēng)味的影響:在一些水果和蔬菜中,構(gòu)成期望的風(fēng)味成分;在冷凍蔬菜和其他加工食品中,產(chǎn)生不良的風(fēng)味。在谷類保藏過程中產(chǎn)生的不良風(fēng)味。
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