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徒手切片的制作第一頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二徒手切片法是指手拿刀片把植物新鮮材料切成薄片,所作的切片通常不經(jīng)染色或經(jīng)簡(jiǎn)單染色后,制成臨時(shí)的水裝片用于觀察,亦可以通過(guò)脫水與染色制成永久制片。優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)單、方便;不需要復(fù)雜設(shè)備;不經(jīng)化學(xué)藥物處理,基本上保留了植物活體的狀態(tài)。第二頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二用光學(xué)顯微鏡觀察的樣品必須是透明的薄片,因此待觀察的植物材料只有被切成很薄的切片后,才能在顯微鏡下觀察。顯微鏡的制片分永久制片和臨時(shí)制片,永久制片的制作方法和步驟.比較復(fù)雜,有興趣者可查閱有關(guān)植物制片技術(shù)的書(shū)籍,在植物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程中,指導(dǎo)教師已預(yù)先準(zhǔn)備了所需用的永久制片。在教學(xué)過(guò)程中,要求同學(xué)做的主要是臨時(shí)制片。
第三頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二臨時(shí)制片種類很多,包括涂片、壓片等等第四頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二作徒手切片不需要復(fù)雜的設(shè)備,只需要一把鋒利的剃刀或雙面刀片就可以進(jìn)行,方法簡(jiǎn)單,而且易于保持細(xì)胞的生活狀態(tài)。徒手切片法所作的切片通常不經(jīng)染色或經(jīng)簡(jiǎn)易染色后,封藏于水中即可觀察。用剃刀切片,材料不能太大,一般以表面不超過(guò)3-5mm為宜。切片最要緊的是平而薄,無(wú)需很完整,比如莖的橫切面,無(wú)需切片整圓形,只需一角就夠了。所有切片前的準(zhǔn)備工作,如截取材料、削平切面,都應(yīng)使用解剖刀或用過(guò)的刀片,不可用剃刀,以保持剃刀的鋒利。第五頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二操作過(guò)程為了成功切片,應(yīng)掌握正確的用刀方法。一般用左手的大拇指、食指和中指3個(gè)手指拿住材料,使材料略突出在指尖之上,避免切片時(shí)割傷手指;用右手平穩(wěn)地拿住刀片,把刀口放在經(jīng)解剖刀削平的材料平面中間,輕輕地壓住它,以均勻的動(dòng)作,從刀片刀口下方起,斜著向后拉切。切時(shí)用臂力而不是腕力,且不必太用力,否則就不易切薄。在切的過(guò)程中,決不能以刀片直接擠壓材料,或以刀片來(lái)回拉割材料,并且要始終保持材料與刀片在水平狀態(tài),否則會(huì)由于切面偏斜而影響觀察。
第六頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二切下的切片應(yīng)該薄而透明,形狀則不要求非常完整,可以用刀不同的部位一次作幾個(gè)切片,然后用蘸水的毛筆取下切片,置于盛水的培養(yǎng)皿中。
第七頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二有些較柔嫩的器官,例如幼葉,難以直接拿住進(jìn)行切片,因而需借助一些維持物,一般用胡蘿卜根或土豆塊莖作為維持物,把要切的材料夾于其中,進(jìn)行切片,以利于把握操作。
第八頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二將切下的薄片放在載玻片上時(shí),要先在玻片中央加一滴水,把材料放到水滴中,然后用鑷子夾住蓋玻片,將蓋片的一側(cè)先接觸到載玻片中央的水滴,然后用鑷子頂住蓋片的另一側(cè),慢慢放下,使蓋玻片與載玻片之間充滿水,如有氣泡,要掀起蓋片,重新放置。
第九頁(yè),共十頁(yè),編輯于2023年,星期二徒手制作的切片可以直接在光鏡下觀察,也可以經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)易的組織化學(xué)染色,以使結(jié)構(gòu)看得更清楚,同時(shí)可觀察到細(xì)胞各部分的化學(xué)成分。常用的染料有:0.1%亞甲基藍(lán)、0.5%~1%中性紅或1%番紅水溶液等。染色的方法是將切片放在載玻片上后,用吸水紙吸
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