第5章胺類藥物的分析

第一節(jié)芳胺類藥物的分析1.對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)2.酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)當(dāng)前第1頁\共有55頁\編于星期六\13點1.對氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)鹽酸丁卡因局部麻醉當(dāng)前第2頁\共有55頁\編于星期六\13點對乙酰氨基酚2.酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)鹽酸利多卡因局部麻醉鹽酸普魯卡因胺當(dāng)前第3頁\共有55頁\編于星期六\13點一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）具有芳伯氨基或潛在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測定含量，可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色。

（二）酯鍵或酰胺鍵易水解芳胺類當(dāng)前第4頁\共有55頁\編于星期六\13點（三）具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測定含量。（四）游離堿易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水。芳胺類當(dāng)前第5頁\共有55頁\編于星期六\13點（七）IR（六）UV結(jié)構(gòu)中有苯環(huán)，在UV區(qū)有特征吸收（五）某些特征取代基（如酚羥基）的反應(yīng)

FeCl3芳胺類當(dāng)前第6頁\共有55頁\編于星期六\13點二、鑒別試驗

（1）重氮化—偶合反應(yīng)

芳香第一胺類鑒別反應(yīng)

當(dāng)前第7頁\共有55頁\編于星期六\13點直接：鹽酸普魯卡因?qū)Π被畻钏徕c

鹽酸普魯卡因胺間接：對乙酰氨基酚、貝諾酯

非那西丁C2H5-

重氮化—偶合反應(yīng)鑒別當(dāng)前第8頁\共有55頁\編于星期六\13點鹽酸普魯卡因Ch.P[鑒別]本品顯芳香伯胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

直接當(dāng)前第9頁\共有55頁\編于星期六\13點對乙酰氨基酚Ch.P[鑒別]取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。

間接當(dāng)前第10頁\共有55頁\編于星期六\13點（2）三氯化鐵反應(yīng)對乙酰氨基酚鑒別藍(lán)紫色當(dāng)前第11頁\共有55頁\編于星期六\13點(3)羥肟酸鐵鹽反應(yīng)

當(dāng)前第12頁\共有55頁\編于星期六\13點（4）與重金屬離子反應(yīng)鑒別當(dāng)前第13頁\共有55頁\編于星期六\13點（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)

1.鹽酸普魯卡因Ch.P[鑒別]取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。

鑒別當(dāng)前第14頁\共有55頁\編于星期六\13點鑒別當(dāng)前第15頁\共有55頁\編于星期六\13點（五）UV

鑒別藥物溶劑濃度(μg/mL)Λmax(nm)對乙酰氨基酚0.4%NaOH8257鹽酸丁卡因pH6PBS10310鹽酸普魯卡因胺水5280當(dāng)前第16頁\共有55頁\編于星期六\13點（六）IR

當(dāng)前第17頁\共有55頁\編于星期六\13點（七）HPLC鑒別當(dāng)前第18頁\共有55頁\編于星期六\13點1.乙酰氨基酚中對氨基酚

反應(yīng)原理:

檢查方法:對照法三、雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)來源:

中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物

當(dāng)前第19頁\共有55頁\編于星期六\13點取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加堿性亞硝基鐵氰化鈉試液1m1，搖勻，放置30min；如顯色，與對乙酰氨基酚對照品1.0g加對氨基酚50g用同一方法制成的對照液比較，不得更深（0.005％）。當(dāng)前第20頁\共有55頁\編于星期六\13點2.鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查

雜質(zhì)來源水解產(chǎn)生當(dāng)前第21頁\共有55頁\編于星期六\13點取本品，加乙醇稀釋使成為每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液，作為供試品溶液。取對氨基苯甲酸對照品，加乙醇制成每1ml中含30g的溶液，作為對照品溶液。取上述兩種溶液各10l，分別點于含有CMC的硅膠薄層板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶4）為展開劑，展開后，取出晾干，用對二甲氨基苯甲醛溶液（2％對二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）噴霧顯色。供試品溶液如顯與對照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，其顏色與對照品溶液主斑點比較，不得更深。當(dāng)前第22頁\共有55頁\編于星期六\13點（一）亞硝酸鈉滴定法

1.原理具芳伯氨基的藥物四、含量測定

當(dāng)前第23頁\共有55頁\編于星期六\13點具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測定具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對乙酰氨基酚等）經(jīng)水解芳香族硝基化合物（如氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測定

亞硝酸鈉滴定法H當(dāng)前第24頁\共有55頁\編于星期六\13點水解還原當(dāng)前第25頁\共有55頁\編于星期六\13點2.主要測定條件（1）加入適量KBr催化劑加速反應(yīng)當(dāng)前第26頁\共有55頁\編于星期六\13點NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機(jī)理為：當(dāng)前第27頁\共有55頁\編于星期六\13點當(dāng)前第28頁\共有55頁\編于星期六\13點（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2加入KBr，可增大被測溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度當(dāng)前第29頁\共有55頁\編于星期六\13點2.主要測定條件（2）酸的種類及其濃度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3當(dāng)前第30頁\共有55頁\編于星期六\13點鹽酸1:2.5～6；加入鹽酸：①重氮化反應(yīng)速度加快；②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影響測定結(jié)果測定條件當(dāng)前第31頁\共有55頁\編于星期六\13點（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點時方改為慢速滴定（3）室溫條件下滴定10～30℃3.指示終點的方法（1）永停滴定法Ch.P（2005）、BP（1998）測定條件當(dāng)前第32頁\共有55頁\編于星期六\13點（2）外指示劑法KI—淀粉糊劑或試紙2NaNO2+2KI+4HCl→2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O

（3）內(nèi)指示劑法中性紅不可逆指示劑當(dāng)前第33頁\共有55頁\編于星期六\13點4.測定方法

鹽酸普魯卡因Ch.P（2005）取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl當(dāng)前第34頁\共有55頁\編于星期六\13點（三）紫外分光光度法

對乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測定。

（二）非水溶液滴定法

脂烴胺側(cè)鏈，具弱堿性當(dāng)前第35頁\共有55頁\編于星期六\13點對乙酰氨基酚Ch.P（2005）取本品約40mg，精密稱定，置250ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長處測定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計算，即得。分光光度法A=ECL當(dāng)前第36頁\共有55頁\編于星期六\13點原料藥

吸收系數(shù)法

當(dāng)前第37頁\共有55頁\編于星期六\13點（四）熒光法——熒光探針技術(shù)

使熒光衍生化試劑與本身無熒光或熒光效率低的化合物反應(yīng)，其產(chǎn)物具有強(qiáng)熒光，從而使檢測靈敏度大大提高。λex400nm（激發(fā)波長）、λem485nm（發(fā)射波長）處測定熒光強(qiáng)度，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。當(dāng)前第38頁\共有55頁\編于星期六\13點（五）HPLC法

鹽酸普魯卡因注射液Ch.P（2005）可同時測定鹽酸普魯卡因及其降解產(chǎn)物對氨基苯甲酸離子抑制色譜法內(nèi)標(biāo)法定量當(dāng)前第39頁\共有55頁\編于星期六\13點第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析

苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)*當(dāng)前第40頁\共有55頁\編于星期六\13點常見的苯乙胺類藥物當(dāng)前第41頁\共有55頁\編于星期六\13點鹽酸克侖特羅Clenbuterol硫酸沙丁胺醇Salbutamol萊克多巴胺Ractopamine萊克多巴胺Ractopamine當(dāng)前第42頁\共有55頁\編于星期六\13點一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

1.脂烴胺基側(cè)鏈R2，顯弱堿性

2.酚羥基，易氧化變色，可發(fā)生三氯化鐵反應(yīng)3.具手性碳原子，具旋光性*當(dāng)前第43頁\共有55頁\編于星期六\13點

4.溶解性游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水5.UV6.IR7.取代基：具芳伯氨基的鹽酸克侖特羅可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測定含量。當(dāng)前第44頁\共有55頁\編于星期六\13點1.三氯化鐵反應(yīng)2.氧化反應(yīng)(I2、H2O2)——呈色3.UV與IR二、鑒別試驗當(dāng)前第45頁\共有55頁\編于星期六\13點藥物溶劑濃度(mg/mL)Λmax(nm)鹽酸異丙腎上腺素水0.05280鹽酸克倫特羅0.1MHCl0.03243,296硫酸沙丁胺醇水0.08274鹽酸偽麻黃堿水0.5251,257,263鑒別苯乙胺類UV特征吸收當(dāng)前第46頁\共有55頁\編于星期六\13點IR鑒別當(dāng)前第47頁\共有55頁\編于星期六\13點三、雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)來源原料殘存

檢查方法比較法（含量測定法）

（一）酮體的檢查當(dāng)前第48頁\共有55頁\編于星期六\13點

檢查原理利用酮體在310nm波長處有最大吸收，而藥物本身在此波長處幾乎沒有吸收，規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長處的吸收度限制酮體的量。當(dāng)前第49頁\共有55頁\編于星期六\13點（二）有關(guān)物質(zhì)檢查硫酸沙丁胺醇等藥物

檢查方法：

TLC對比法當(dāng)前第50頁\共有55頁\編于星期六\13點四、含量測定原料藥：

脂烴胺基側(cè)鏈，顯弱堿性

（一）非水溶液滴定法當(dāng)前第51頁\共有55頁\編于星期六\13點鹽酸克侖特羅栓：具芳伯氨基，可發(fā)生重氮化—偶合反應(yīng)（二）