高中生物-動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體制備教學(xué)課件設(shè)計(jì)

生物組2.2.2動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體材料1:1970年，有兩位科學(xué)家做了一個(gè)人—鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn)，以證明細(xì)胞膜的流動(dòng)性。那么，如何實(shí)現(xiàn)人—鼠細(xì)胞的融合，動(dòng)物細(xì)胞融合后還有什么用途呢？(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交過程示意圖一、動(dòng)物細(xì)胞融合過程：動(dòng)物細(xì)胞A動(dòng)物細(xì)胞B誘導(dǎo)融合2個(gè)完整的雜交細(xì)胞AB誘導(dǎo)方法單核細(xì)胞4有夢(mèng)想，才會(huì)有創(chuàng)造！生物種間雜交想像圖

已成功的動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)例有很多，如人—小鼠、人—兔、人—雞、鼠—兔、雞—鼠等上百種融合細(xì)胞。甚至已成功完成了酵母菌—雞、人—胡蘿卜等細(xì)胞的融合。

想了解更多信息，可通過網(wǎng)絡(luò)、電視、雜志等途徑關(guān)注細(xì)胞融合和單克隆抗體的最新信息。材料2：在基因工程中,采用抗原-抗體雜交法檢測基因表達(dá)產(chǎn)物需用到純度很高的抗體。材料3：傳統(tǒng)獲得抗體的方法：把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中分離出所需抗體。

思考：1、抗體由哪種細(xì)胞產(chǎn)生的？2、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法的缺陷是什么？3、能否通過相應(yīng)效應(yīng)B細(xì)胞體外培養(yǎng)的方式大量獲得抗體?材料4：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞在體內(nèi)只能由B淋巴細(xì)胞增殖分化而來,不再進(jìn)行分裂,在體外培養(yǎng)的條件下，也很難分裂。提示：1.什么細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體？2.什么細(xì)胞可以無限增殖？思考：用什么方法才能讓B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖?材料5：

1975年,米爾斯坦和柯勒首先將抗原注射入小鼠體內(nèi)，然后從小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，得到多種雜交細(xì)胞。在特定的選擇性培養(yǎng)基中可篩選出雜交瘤細(xì)胞。經(jīng)過再次篩選和抗體檢測,得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。但純度達(dá)不到100%。對(duì)單一雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆培養(yǎng),獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，在體外培養(yǎng)或注射到小鼠體內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中，可提取出大量抗體。（由于產(chǎn)生抗體的細(xì)胞來自一個(gè)雜交瘤細(xì)胞,故產(chǎn)生的抗體稱為單克隆抗體.）請(qǐng)根據(jù)以上材料,討論設(shè)計(jì)單克隆抗體制備過程圖.討論：免疫小鼠培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射特定抗原蛋白選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽性專一抗體檢驗(yàn)陽性注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)單克隆抗體克隆雜交細(xì)胞分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，檢驗(yàn)陽性細(xì)胞多種雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？本過程利用的那些技術(shù)？動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)注射抗原（只考慮兩兩融合）培養(yǎng)液中細(xì)胞有幾種類型？幾種融合細(xì)胞？兩次篩選的目的分別是什么？2、單克隆抗體制備過程與傳統(tǒng)制備的抗體相比具有什么特點(diǎn)？10單克隆抗體的應(yīng)用信息材料6：①診斷疾病（識(shí)別作用，如同位素標(biāo)記單克隆抗體，可診斷腫瘤、心血管畸形等）優(yōu)點(diǎn)：單克隆抗體的應(yīng)用②用于治療疾病和運(yùn)載藥物（主要用于癌癥治療，如單克隆抗體+藥物=“生物導(dǎo)彈”）優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡易、快速位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小

閱讀教材P54相關(guān)內(nèi)容，試說明單克隆抗體有何應(yīng)用？優(yōu)點(diǎn)是什么？兩個(gè)過程動(dòng)物細(xì)胞融合過程單克隆抗體制備過程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法一個(gè)新細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)課堂小結(jié)1你記住了嗎？－－滅活的病毒－－雜交瘤細(xì)胞－－單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)13B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合選擇培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞克隆化培養(yǎng)抗體檢測產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體多種雜交細(xì)胞1、該過程中用到了兩種技術(shù)小結(jié)2單克隆抗體的制備過程：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)2、單克隆抗體的制備過程的三個(gè)“一”：一種誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法，產(chǎn)生了一種新細(xì)胞，得到了一種優(yōu)勢(shì)抗體。滅活病毒誘導(dǎo)融合雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體優(yōu)勢(shì)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

1.右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案制備單克隆抗體不能，沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞。(1).該實(shí)驗(yàn)方案的目的是：________________(2).該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？為什么？課堂練習(xí)15B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

(3).A是從小鼠的脾臟中取得__________該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______。(4).圖中B為________________過程，常用_________________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。B淋巴細(xì)胞抗體細(xì)胞融合滅活的病毒雙親細(xì)胞產(chǎn)生專一抗體無限增殖課堂練習(xí)16B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群