枯草桿菌搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶培訓(xùn)課件_第1頁
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文檔簡介

枯草桿菌搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶(優(yōu)選)枯草桿菌搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶二、實驗原理酶可由動物(如胰蛋白酶、胃蛋白酶)、植物(如木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶)和微生物(細(xì)菌、霉菌、酵母)產(chǎn)生,其中工業(yè)酶制劑大多數(shù)由微生物發(fā)酵法生產(chǎn)。由于微生物世代時間短,繁殖快、容易培養(yǎng)和管理,可大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn),所以工業(yè)酶制劑大多由微生物發(fā)酵產(chǎn)生。產(chǎn)酶微生物的獲得:

1、從有關(guān)菌種保藏機(jī)構(gòu)購買

2、從自然界分離篩選產(chǎn)酶微生物的分離篩選方法1)樣品的采集:從富含酶作用底物的場所采集樣品。2)富集培養(yǎng):投其所好,取其所抗。3)分離獲得純培養(yǎng)(pureculture)的微生物。4)初篩:選出產(chǎn)酶菌種,以多為主。5)復(fù)篩:選出產(chǎn)酶水平相對較高的菌株,以質(zhì)為主。產(chǎn)酶工藝條件及其調(diào)節(jié)控制保藏細(xì)胞細(xì)胞活化細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵產(chǎn)酶分離純化酶固定化細(xì)胞原生質(zhì)體固定化原生質(zhì)體培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)無菌空氣酶制劑的發(fā)酵生產(chǎn)過程圖解30升全自動發(fā)酵罐發(fā)酵工藝參數(shù)的控制pH的調(diào)節(jié)控制溫度的調(diào)節(jié)控制溶解氧的調(diào)節(jié)控制泡沫的控制染菌的控制酶的提取與分離純化的工藝流程發(fā)酵液預(yù)處理(細(xì)菌絮凝)固液分離(離心、過濾)菌體(胞內(nèi)酶)動植物源酶液體(胞外酶)細(xì)胞破碎提取固液分離液體酶的比活力是酶純度的一個指標(biāo),是指在特定條件下,單位重量(mg)蛋白質(zhì)或RNA所具有的酶活力單位數(shù)。001g)可溶性淀粉(以絕干計)于燒杯中,用少量水調(diào)成漿狀物,邊攪拌邊緩緩加入70mL沸水中,然后用水分次沖洗裝淀粉的燒杯,洗液倒人其中,攪拌加熱至完全透明,冷卻定容至100mL。外觀:棕褐色液體溶解性:易溶于水在噴射液化工藝中瞬間溫度達(dá)105-110℃,仍能有效水解淀粉。發(fā)酵結(jié)束時,顯微鏡檢查每個發(fā)酵瓶是否污染,若無污染合并發(fā)酵液并測定發(fā)酵酶活力。00mL,用少量磷酸緩沖液充分溶解,將上清液小心傾入容量瓶中,若有剩余殘渣,再加少量磷酸緩沖液充分研磨,最終樣品全部移入容量瓶中,用磷酸緩沖液定容至刻度,搖勻。4)初篩:選出產(chǎn)酶菌種,以多為主。液體劑型酶制劑和固體劑型酶制劑。稱取1g~2g酶粉(精確至0.0條件下,1小時液化可溶性淀粉的克數(shù)。本產(chǎn)品適用于酒精、啤酒、味精、發(fā)酵工業(yè)的液化以及紡織退漿等。固液分離(離心、過濾)中溫α-液化型淀粉酶系用枯草芽孢桿菌(BacillusSubtilis)經(jīng)發(fā)酵提煉精制而成。酶活力測定的基本步驟:3、工藝條件:查資料,自行設(shè)計(搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)α-淀粉酶)(2)根據(jù)酶的動力學(xué)性質(zhì),確定酶催化反應(yīng)的溫度、pH值、底物濃度、激活劑濃度等反應(yīng)條件。0g碘化鉀,用少量水使碘完全溶解,定容至500mL,貯存于棕色瓶中。2、儀器耗材:恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、高壓滅菌鍋、無菌操作臺、搖床、托盤天平、分析天平、電爐、白色搪瓷杯、三角瓶、量筒、紗布、繩子、pH試紙、玻棒等。按產(chǎn)品的適用溫度分為:工業(yè)、食品、飼料濃縮(蒸發(fā)、超濾、沉淀)濃縮液配方干燥醫(yī)藥、分析、科研液體酶固體酶濃縮分離純化(離心、沉淀、膜分離、層析、電泳、萃取、結(jié)晶)配方、制劑干燥液體酶固體酶酶活力的測定酶活力:也稱酶活性,酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶活力大小可用在一定條件下,它所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的起始速率V0表示,即用反應(yīng)起始階段產(chǎn)物增加(或底物減少)的速率表示。v=-dS/dt=dP/dt酶活力測定方法酶活力測定的要求:快速、簡便、準(zhǔn)確。包括兩個階段:

1、將酶與反應(yīng)底物混合均勻,在一定條件下反應(yīng)一段時間;

2、測定反應(yīng)液中底物或產(chǎn)物的變化量。酶活力測定的基本步驟:(1)根據(jù)酶催化的專一性,選擇適宜的底物,并配制成一定濃度的底物溶液。(2)根據(jù)酶的動力學(xué)性質(zhì),確定酶催化反應(yīng)的溫度、pH值、底物濃度、激活劑濃度等反應(yīng)條件。(3)在一定的條件下,將一定量的酶液和底物溶液混合均勻,適時記下反應(yīng)開始的時間。(4)反應(yīng)到一定的時間,取出適量的反應(yīng)液,運用各種生化檢測技術(shù),測定產(chǎn)物的生成量或底物的減少量。注意:若不能即時測出結(jié)果的,則要及時終止反應(yīng),然后再測定。終止酶反應(yīng)的方法:加熱使酶失活;加入適宜的酶變性劑(如三氯醋酸);調(diào)節(jié)pH值;低溫終止反應(yīng)。酶活力測定方法根據(jù)測量操作過程終止反應(yīng)法:在恒溫反應(yīng)系統(tǒng)中進(jìn)行酶促反應(yīng),間隔一定時間取樣,終止反應(yīng),進(jìn)行測定。連續(xù)反應(yīng)法:基于反應(yīng)過程中光譜吸收、酸堿度等變化用儀器跟蹤反應(yīng)的進(jìn)程、記錄結(jié)果。酶活力測定方法根據(jù)底物或產(chǎn)物的物理化學(xué)性質(zhì)化學(xué)測定法、光學(xué)測定法、氣體測定法等。如化學(xué)滴定、比色法、紫外光吸收、熒光測定、同位素標(biāo)記底物或稱放射性化學(xué)法、酶偶聯(lián)法等。其中化學(xué)滴定、紫外、可見光比色法最為常用。酶的反應(yīng)速度的影響因素酶的反應(yīng)速度受到許多條件的影響:底物濃度、溫度、pH、金屬離子等要準(zhǔn)確地測定酶的活力,必須滿足這些前提條件。最適反應(yīng)條件:最適底物濃度、最適pH、最適溫度、最適離子強度、必要的輔助因子;保證測定的是V0,即線性部分酶活力單位國際單位:1961年國際生物化學(xué)與分子生物學(xué)聯(lián)合會規(guī)定:在特定條件下,每1min催化1μmol的底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的酶量定義為1個酶活力單位。這個單位稱為國際單位(IU)國際上另一個常用的酶活力單位是卡特(Kat)。在特定條件下,每秒催化1mol底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的酶量定義為1卡特(Kat)。酶的比活力酶的比活力是酶純度的一個指標(biāo),是指在特定條件下,單位重量(mg)蛋白質(zhì)或RNA所具有的酶活力單位數(shù)。酶活力:樣品中酶總共有多少個酶單位。比活力:每mg蛋白質(zhì)中有多少個酶單位。酶比活力=酶活力(單位)/mg(蛋白或RNA)可用以比較每單位質(zhì)量酶蛋白的催化能力。對同一種酶,比活力可以代表酶的純度,比活力愈高,表示酶愈純。在酶純化過程中,比活力增高。淀粉水解酶類凡是能催化淀粉(或糖元)分子及其分子片段中的α-葡萄糖苷鍵水解的酶,統(tǒng)稱為淀粉酶,包括α-淀粉酶,糖化酶,β-淀粉酶,異淀粉酶,環(huán)狀糊精生成酶,麥芽寡糖生成酶等。廣泛應(yīng)用于淀粉糖工業(yè)、酒精、啤酒、味精、釀造、烘焙、飼料、紡織退漿、醫(yī)藥等領(lǐng)域。中溫α-液化型淀粉酶系用枯草芽孢桿菌(BacillusSubtilis)經(jīng)發(fā)酵提煉精制而成。大規(guī)模液體深層發(fā)酵之前,首先在實驗室對保藏的目的菌種進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),制得生產(chǎn)種子。大規(guī)模液體深層發(fā)酵之前,首先在實驗室對保藏的目的菌種進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),制得生產(chǎn)種子。3、工藝條件:查資料,自行設(shè)計酶活力測定的基本步驟:5mL,搖勻后,置于60℃±0.2)富集培養(yǎng):投其所好,取其所抗。外觀:棕褐色液體溶解性:易溶于水枯草桿菌搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶5mL鹽酸溶液和5.n—樣品的稀釋倍數(shù)(可通過反應(yīng)時間和加入固定化酶的量來控制)。溶解性:易溶于水2℃(耐高溫α-淀粉酶制劑置于70℃±0.液體劑型酶制劑和固體劑型酶制劑。國際上另一個常用的酶活力單位是卡特(Kat)。按產(chǎn)品的適用溫度分為:2、測定反應(yīng)液中底物或產(chǎn)物的變化量。2、培養(yǎng)基的準(zhǔn)備:查資料,自行設(shè)計熱穩(wěn)定性:需Ca2+150ppm,最適作用溫度60-70℃,在70-90℃之間,隨著溫度升高,其反應(yīng)速度加快,但失活也加快,適用于最高達(dá)90℃的液化過程。000g(精確至0.α-淀粉酶alpha-amylase

能水解淀粉分子鏈中的α-1,4-葡萄糖苷鍵,將淀粉鏈切斷成為短鏈糊精和少量麥芽糖和葡萄糖,使淀粉粘度迅速下降的酶制劑。產(chǎn)品分類按產(chǎn)品的適用溫度分為:

中溫α-淀粉酶制劑和耐高溫α-

淀粉酶制劑。按產(chǎn)品形態(tài)分為:液體劑型酶制劑和固體劑型酶制劑。中溫α-淀粉酶中溫α-液化型淀粉酶系用枯草芽孢桿菌(BacillusSubtilis)經(jīng)發(fā)酵提煉精制而成。用途:本產(chǎn)品適用于酒精、啤酒、味精、發(fā)酵工業(yè)的液化以及紡織退漿等。產(chǎn)品特性:[物理特性]

外觀:棕褐色液體溶解性:易溶于水比重:1.15-1.25g/ml[化學(xué)物性]

熱穩(wěn)定性:需Ca2+150ppm,最適作用溫度60-70℃,在70-90℃之間,隨著溫度升高,其反應(yīng)速度加快,但失活也加快,適用于最高達(dá)90℃的液化過程。

pH6.0-7.0較為穩(wěn)定;最適作用pH6.0,pH5.0以下失活嚴(yán)重。產(chǎn)品規(guī)格:1,中溫α-淀粉酶分為固體和液體兩種劑型。固體分為2000、4000u/g,6000u/g三種。液體為2000u/ml2,酶活力定義:1ml酶液(1g酶粉)在60℃,pH6.0條件下,1小時液化可溶性淀粉的克數(shù)。耐高溫α-淀粉酶耐高溫α-淀粉酶采用地衣芽孢桿菌經(jīng)深層培養(yǎng),提取等工序精制而成,能隨機(jī)水解淀粉、糖原及其降解物內(nèi)部的α-1,4葡萄糖苷健使得膠狀淀粉溶液的粘度迅速下降,產(chǎn)生可溶性糊精和寡聚糖,過度的水解可產(chǎn)生少量葡萄糖和麥芽糖。用途:耐高溫α-淀粉酶具有極好的耐熱性,能廣泛應(yīng)用于淀粉、酒精、啤酒、味精、釀造、紡織退漿等工業(yè)上。產(chǎn)品特性:(物理特性)

外觀:棕褐色液體溶解性:易溶于水比重:1.15-1.25g/ml[化學(xué)物性]鈣離子對酶活穩(wěn)定性的影響:較低濃度的鈣離子存在,本品即可有很好的穩(wěn)定性,對于淀粉的水解,推薦加入50-100ppm鈣離子。pH范圍:5.5-7.0最適6.0溫度范圍:90-95℃在噴射液化工藝中瞬間溫度達(dá)105-110℃,仍能有效水解淀粉。產(chǎn)品規(guī)格:

1,耐高溫α-淀粉酶為液體酶制劑。酶活力:20000u/ml。

2,酶活力定義:1ml酶液在70℃,pH6.0條件下,1分鐘液化可溶性淀粉的毫克數(shù)。α-淀粉酶制劑的理化要求α-淀粉酶制劑的衛(wèi)生要求三、實驗內(nèi)容微生物發(fā)酵法是酶制劑生產(chǎn)的主要方法。發(fā)酵生產(chǎn)中多用液體深層發(fā)酵法制備酶。大規(guī)模液體深層發(fā)酵之前,首先在實驗室對保藏的目的菌種進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),制得生產(chǎn)種子。擴(kuò)大培養(yǎng)多采用搖瓶培養(yǎng),即在錐形瓶中加入一定量的液體培養(yǎng)基,在搖床上以一定轉(zhuǎn)速搖動進(jìn)行恒溫培養(yǎng)。搖瓶培養(yǎng)也是實驗室模擬生產(chǎn)上進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)酶的一種模擬實驗。(搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)α-淀粉酶)發(fā)酵液酶活力的測定。(一)搖瓶發(fā)酵產(chǎn)酶儀器和試劑1、菌種:枯草芽孢桿菌2、儀器耗材:恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、高壓滅菌鍋、無菌操作臺、搖床、托盤天平、分析天平、電爐、白色搪瓷杯、三角瓶、量筒、紗布、繩子、pH試紙、玻棒等。實驗步驟1、菌種:枯草桿菌(已活化好,每組1支)2、培養(yǎng)基的準(zhǔn)備:查資料,自行設(shè)計3、工藝條件:查資料,自行設(shè)計4、菌種的制備:將斜面菌種在無菌條件下接種至液體種子培養(yǎng)基中,在一定溫度、轉(zhuǎn)速下培養(yǎng)。5、發(fā)酵:將搖床培養(yǎng)好的種子培養(yǎng)液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中,接種量為5mL,共接3瓶(100ml/250ml瓶),做好標(biāo)記。實驗步驟發(fā)酵結(jié)束后:檢查是否染菌固液分離:方法自定;

發(fā)酵結(jié)束時,顯微鏡檢查每個發(fā)酵瓶是否污染,若無污染合并發(fā)酵液并測定發(fā)酵酶活力。(二)酶活測定原理:α-淀粉酶制劑能將淀粉分子鏈中的α-1,4-葡萄糖苷鍵隨機(jī)切斷成長短不一的短鏈糊精、少量麥芽糖和葡萄糖,而使淀粉對碘呈籃紫色的特性反應(yīng)逐漸消失,呈現(xiàn)棕紅色,其顏色消失的速度與酶活性有關(guān),據(jù)此可通過反應(yīng)后的吸光度計算酶活力。酶活定義

中溫a一淀粉酶活力:

1g固體酶粉(或1mL液體酶),于60℃、pH=6.0條件下,1h液化1g可溶性淀粉所需的酶量,即為1個酶活力單位,以u/g(u/mL)表示。耐高溫a-淀粉酶活力:

1g固體酶粉(或1mL液體酶),于70℃、pH=6.0條件下,1min液化1mg可溶性淀粉所需的酶量,即為1個酶活力單位,以u/g(u/mL)表示。固液分離(離心、過濾)其中化學(xué)滴定、紫外、可見光比色法最為常用。2、測定反應(yīng)液中底物或產(chǎn)物的變化量。3、工藝條件:查資料,自行設(shè)計0g碘化鉀,用少量水使碘完全溶解,定容至500mL,貯存于棕色瓶中。其中化學(xué)滴定、紫外、可見光比色法最為常用。中溫a一淀粉酶活力:酶比活力=酶活力(單位)/mg(蛋白或RNA)外觀:棕褐色液體溶解性:易溶于水本產(chǎn)品適用于酒精、啤酒、味精、發(fā)酵工業(yè)的液化以及紡織退漿等。碘、碘化鉀、α-淀粉酶制劑、磷酸氫二鈉、檸檬酸、鹽酸、可溶性淀粉(湖州展望化學(xué)藥業(yè)有限公司)。X1=c×n2、測定反應(yīng)液中底物或產(chǎn)物的變化量。5mL,搖勻后,置于60℃±0.1,中溫α-淀粉酶分為固體和液體兩種劑型。要準(zhǔn)確地測定酶的活力,必須滿足這些前提條件。國際上另一個常用的酶活力單位是卡特(Kat)。外觀:棕褐色液體溶解性:易溶于水001g)可溶性淀粉(以絕干計)于燒杯中,用少量水調(diào)成漿狀物,邊攪拌邊緩緩加入70mL沸水中,然后用水分次沖洗裝淀粉的燒杯,洗液倒人其中,攪拌加熱至完全透明,冷卻定容至100mL。3、工藝條件:查資料,自行設(shè)計實驗儀器及試劑儀器:分光光度計、恒溫水浴鍋(控溫精度±0.1℃)、移液管、試管、燒杯、容量瓶、玻璃棒、秒表。試劑及溶液試劑:碘、碘化鉀、α-淀粉酶制劑、磷酸氫二鈉、檸檬酸、鹽酸、可溶性淀粉(湖州展望化學(xué)藥業(yè)有限公司)。溶液配制:原碘液:稱取11.0g碘和22.0g碘化鉀,用少量水使碘完全溶解,定容至500mL,貯存于棕色瓶中。稀碘液:吸取原碘液2.00mL,加20.0g碘化鉀用水溶解并定容至500mL,貯存于棕色瓶中。試劑及溶液溶液配制:可溶性淀粉溶液(20g/L):稱取2.000g(精確至0.001g)可溶性淀粉(以絕干計)于燒杯中,用少量水調(diào)成漿狀物,邊攪拌邊緩緩加入70mL沸水中,然后用水分次沖洗裝淀粉的燒杯,洗液倒人其中,攪拌加熱至完全透明,冷卻定容至100mL。溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。磷酸緩沖液(pH=6.0):稱取45.23g磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)和8.07g檸檬酸(C6H8O7·H2O),用水溶解并定容至1000mL。用pH計校正后使用。鹽酸溶液:c(HCI)=0.1mol/L。實驗方法待測酶液的制備:稱取1g~2g酶粉(精確至0.0001g)或準(zhǔn)確吸取酶液1.00mL,用少量磷酸緩沖液充分溶解,將上清液小心傾入容量瓶中,若有剩余殘渣,再加少量磷酸緩沖液充分研磨,最終樣品全部移入容量瓶中,用磷酸緩沖液定容至刻度,搖勻。用四層紗布過濾,濾液待用。注:待測中溫a-淀粉酶酶液酶活力控制酶濃度在3.4u/mL~4.5u/mL范圍內(nèi),待測耐高溫淀粉酶活力控制酶濃度在60u/mL~65u/mL范圍內(nèi)。酶活力測定吸取10.0mL可溶性淀粉溶液于試管中,加入磷酸緩沖液2.5mL,搖勻后,置于60℃±0.2℃(耐高溫α-淀粉酶制劑置于70℃±0.2℃)恒溫水浴中預(yù)熱8min;加入0.5mL稀釋好的待測酶液,立即計時,搖勻,準(zhǔn)確反應(yīng)5min;立即用移液管吸取1.0mL反應(yīng)液,加到預(yù)先盛有0.5mL鹽酸溶液和5.00mL稀碘液的試管中,搖勻,并以0.5mL鹽酸溶液和5.00mL稀碘液為空白,于660nm波長下,用10mm比色皿迅速測定其吸光度(A)。根據(jù)吸光度查表A.1,求得測試酶液的濃度。0g碘化鉀,用少量水使碘完全溶解,定容至500mL,貯存于棕色瓶中。n—樣品的稀釋倍數(shù)(可通過反應(yīng)時間和加入固定化酶的量來控制)。大規(guī)模液體深層發(fā)酵之前,首先在實驗室對保藏的目的菌種進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),制得生產(chǎn)種子。原理:α-淀粉酶制劑能將淀粉分子鏈中的α-1,4-葡萄糖苷鍵隨機(jī)切斷成長短不一的短鏈糊精、少量麥芽糖和葡萄糖,而使淀粉對碘呈籃紫色的特性反應(yīng)逐漸消失,呈現(xiàn)棕紅色,其顏色消失的速度與酶活性有關(guān),據(jù)此可通過反應(yīng)后的吸光度計算酶活力。(搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)α-淀粉酶)0mL可溶性淀粉溶液于試管中,加入磷酸緩沖液2.中溫α-液化型淀粉酶系用枯草芽孢桿菌(BacillusSubtilis)經(jīng)發(fā)酵提煉精制而成。2、測定反應(yīng)液中底物或產(chǎn)物的變化量。發(fā)酵結(jié)束時,顯微鏡檢查每個發(fā)酵瓶是否污染,若無污染合并發(fā)酵液并測定發(fā)酵酶活力。要準(zhǔn)確地測定酶的活力,必須滿足這些前提條件。大規(guī)模液體深層發(fā)酵之前,首先在實驗室對保藏的目的菌種進(jìn)行活化和擴(kuò)大培養(yǎng),制得生產(chǎn)種子。酶活力測定的要求:快速、簡便、準(zhǔn)確。5mL,搖勻后,置于60℃±0.2)富集培養(yǎng):投其所好,取其所抗。凡是能催化淀粉(或糖元)分子及其分子片段中的α-葡萄糖苷鍵水解的酶,統(tǒng)稱為淀粉酶,包括α-淀粉酶,糖化酶,β-淀粉酶,異淀粉酶,環(huán)狀糊精生成酶,麥芽寡糖生成酶等。5、發(fā)酵:將搖床培養(yǎng)好的種子培養(yǎng)液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中,接種量為5mL,共接3瓶(100ml/250ml瓶),做好標(biāo)記。發(fā)酵生產(chǎn)中多用液體深層發(fā)酵法制備酶。微生物發(fā)酵法是酶制劑生產(chǎn)的主要方法。5mL鹽酸溶液和5.中溫α-液化型淀粉酶系用枯草芽孢桿菌(BacillusSubtilis)經(jīng)發(fā)酵提煉精制而成。耐高溫α-淀粉酶采用地衣芽孢桿菌經(jīng)深層培養(yǎng),提取等工序精制而成,能隨機(jī)水解淀粉、糖原及其降解物內(nèi)部的α-1,4葡萄糖苷健使得膠狀淀粉溶液的粘度迅速下降,產(chǎn)生可溶性糊精和寡聚糖,過度的水解可產(chǎn)生少量葡萄糖和麥芽糖。外觀:棕褐色液體溶解性:易溶于水5mL,搖勻后,置于60℃±0.中溫a一淀粉酶活力:1、菌種:枯草芽孢桿菌液體為2000u/ml要準(zhǔn)確地測定酶的活力,必須滿足這些前提條件。如化學(xué)滴定、比色法、紫外光吸收、熒光測定、同位素標(biāo)記底物或稱放射性化學(xué)法、酶偶聯(lián)法等。酶的比活力是酶純度的一個指標(biāo),是指在特定條件下,單位重量(mg)蛋白質(zhì)或RNA所具有的酶活力單位數(shù)。按產(chǎn)品的適用溫度分為:能水解淀粉分子鏈中的α-1,4-葡萄糖苷鍵,將淀粉鏈切斷成為短鏈糊精和少量麥芽糖和葡萄糖,使淀粉粘度迅速下降的酶制劑。在噴射液化工藝中瞬間溫度達(dá)105-110℃,仍能有效水解淀粉。磷酸緩沖液(pH=6.2、培養(yǎng)基的準(zhǔn)備:查資料,自行設(shè)計1,耐高溫α-淀粉酶為液體酶制劑。酶比活力=酶活力(單位)/mg(蛋白或RNA)固液分離(離心、過濾)固液分離(離心、過濾)可用以比較每單位質(zhì)量酶蛋白的催化能力。酶制劑的發(fā)酵生產(chǎn)過程圖解如化學(xué)滴定、比色法、紫外光吸收、熒光測定、同位素標(biāo)記底物或稱放射性化學(xué)法、酶偶聯(lián)法等。3、工藝條件:查資料,自行設(shè)計c—測試酶樣濃度,u/mL或u/g能水解淀粉分子鏈中的α-1,4-葡萄糖苷鍵,將淀粉鏈切斷成為短鏈糊精和少量麥芽糖和葡萄糖,使淀粉粘度迅速下降的酶制劑。2、儀器耗材:恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、高壓滅菌鍋、無菌操作臺、搖床、托盤天平、分析天平、電爐、白色搪瓷杯、三角瓶、量筒、紗布、繩子、pH試紙、玻棒等。液體為2000u/ml2、測定反應(yīng)液中底物或產(chǎn)物的變化量。要準(zhǔn)確地測定酶的活力,必須滿足這些前提條件。(2)根據(jù)酶的動力學(xué)性質(zhì),確定酶催化反應(yīng)的溫度、pH值、底物濃度、激活劑濃度等反應(yīng)條件。本產(chǎn)品適用于酒精、啤酒、味精、發(fā)

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