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“高中生物穎韜工作室”整理·PAGE3·課時(shí)作業(yè)(三十七)1.(2013·新課標(biāo)全國(guó)Ⅱ)臨床使用抗生素前,有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí),首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性。回答下列問題:(1)為了從樣本中獲取致病菌菌落,可用________法或________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用________法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使其均勻生長(zhǎng),布滿平板。(3)為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時(shí)間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素A________;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素B________;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明_____________________________;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落,在排除雜菌污染的情況下,判斷此菌落很可能是抗生素D的________。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選擇抗生素________。解析本題考查微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用。(1)分離菌種常用稀釋涂布平板法或劃線法。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用涂布法接種于固體培養(yǎng)基表面,適宜溫度下培養(yǎng)。(3)含抗生素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)該抗生素有敏感性,周圍沒有透明圈的說明對(duì)該抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越強(qiáng)。(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果抗生素A對(duì)該致病菌的作用效果最好。答案(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A弱耐藥菌(4)A2.(2014·新課標(biāo)全國(guó)Ⅱ)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌的分離等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是______________________________________________;然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過________滅菌,在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是__________________________________________________________。(3)示意圖A和B中,________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng),另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的________的含量,同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高_(dá)_______的利用率。解析(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格,微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)一般會(huì)設(shè)置空白對(duì)照:隨機(jī)取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成;利用平板菌落計(jì)數(shù)法的計(jì)算公式估算水樣中的活菌數(shù):C/V×M(接種計(jì)數(shù)結(jié)果平均值/接種體積×稀釋倍數(shù))=38/0.1mL×100×1000=3.8×107L。(2)接種時(shí)接種環(huán)需要灼燒滅菌;在第二次及以后劃線時(shí),總是從上一次的末端開始劃線,這樣做的目的是:通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少,以便得到單菌落。(3)由題圖可知B圖為稀釋涂布平板法接種的結(jié)果(菌落相對(duì)均勻分布)。(4)震蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量,促進(jìn)好氧型微生物的生長(zhǎng);另外震蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。答案(1)檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)B(4)溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)3.(2014·新課標(biāo)全國(guó)Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝袉栴}:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí),CR可與纖維素形成________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí),培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):成分酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++-++培養(yǎng)基乙+++-++-注:“+”表示有,“-”表示無。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是_____________________________;培養(yǎng)基乙________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是_________________________________________________________________________________________。解析(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,是含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用,如下圖:(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,紅色復(fù)合物無法形成,出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)分離和鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,且需以纖維素為唯一碳源。答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能分離單菌落不能乙培養(yǎng)基中沒有纖維素,不會(huì)形成CR-纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌4.(2014·四川)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長(zhǎng)期使用會(huì)污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機(jī)制的實(shí)驗(yàn)過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所需的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、________四類,該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是___________________________________________________。(2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和________,這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配置成________保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時(shí),通常使用的劃線工具是________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌,第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有_______________________________________________________________________________。(4)為探究苯磺隆的降解機(jī)制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)的假設(shè)是________,該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是否合理?為什么?_____________________________。解析(1)微生物生長(zhǎng)所需要的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括:碳源、氮源、水和無機(jī)鹽。使用選擇培養(yǎng)基是因?yàn)樗窃试S特定的微生物生長(zhǎng),同時(shí)又能抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。(2)植物組織培養(yǎng)常需要添加的植物激素有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。MS培養(yǎng)基的成份一般先分別配制成母液備用。(3)平板劃線法接種時(shí)常使用接種環(huán)劃線。第二區(qū)域只有第一條線無菌落,而其他的劃線卻有菌落,很可能是因?yàn)榻臃N環(huán)在灼燒后未冷卻,第一次劃線時(shí)將菌種燙死,而后接種環(huán)冷卻,能正常劃線,也可能是第一次劃線時(shí)劃線未從第一區(qū)域末端開始,使接種環(huán)上無菌種。(4)題中實(shí)驗(yàn)為:取得菌種培養(yǎng)液過濾后離心得上清液,加入蛋白酶處理后,測(cè)得其對(duì)苯磺隆的降解率。意為假設(shè)菌種能產(chǎn)生降解苯磺隆的蛋白質(zhì)類酶,若用蛋白酶處理后,可使該酶分解,苯磺隆降解率下降,則假設(shè)成立。但由于缺乏空白對(duì)照,不能比較蛋白酶處理與否對(duì)苯磺隆降解率的影響,該實(shí)驗(yàn)不能得出相應(yīng)結(jié)論。答案(1)氮源和無機(jī)鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長(zhǎng)和繁殖(2)細(xì)胞分裂素母液(3)接種環(huán)①接種環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端開始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理,缺少空白對(duì)照5.酒精濃度過高會(huì)抑制酵母菌的生長(zhǎng)繁殖,影響酒精產(chǎn)量。為此,研究人員將酒精耐受基因轉(zhuǎn)入野生型酵母菌中,經(jīng)篩選得到了耐高濃度酒精的酵母菌。過程如圖甲所示,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:(1)通過篩選得到耐高濃度酒精酵母菌的技術(shù)是________。②、③過程需要重復(fù)幾次,目的是_____________________________。某同學(xué)嘗試過程③的操作,其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是________。(2)為證明分離純化得到的酵母菌能提高酒精產(chǎn)量,可將等量的________和耐高濃度酒精的酵母菌分別接種于含等量葡萄糖的A、B兩組發(fā)酵裝置中,在________℃條件下________(填“密閉”或“充氣”)培養(yǎng)。一段時(shí)間后取樣,用________檢測(cè),若實(shí)驗(yàn)結(jié)果為________,則說明耐高濃度酒精的酵母菌能提高酒精產(chǎn)量。解析(1)由圖中過程,可以看出獲得耐受高濃度酒精酵母菌的過程為:導(dǎo)入酒精耐受基因,構(gòu)建重組質(zhì)粒,導(dǎo)入酵母菌,篩選,故該過程屬于基因工程;②、③過程為篩選、接種和接種到新的培養(yǎng)基,重復(fù)該過程,是為了進(jìn)一步分離純化獲得耐酒精能力強(qiáng)的酵母菌;由圖乙中的菌落分布特點(diǎn)為均勻分布,知該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法。(2)為證明分離純化得到的酵母菌能提高酒精產(chǎn)量,需要有對(duì)照組,對(duì)照組選擇野生型酵母菌;酵母菌生長(zhǎng)的最適溫度在20℃左右,所以將發(fā)酵裝置放在18-25℃條件下;酒精發(fā)酵須在無氧條件下進(jìn)行,所以需要密閉培養(yǎng);酸性重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)出現(xiàn)灰綠色,顏色越深酒精越多。答案(1)基因工程(轉(zhuǎn)基因或基因拼接技術(shù))進(jìn)一步分離純化獲得耐酒精能力強(qiáng)的酵母菌稀釋涂布平板法(2)野生型酵母菌18-25密閉重鉻酸鉀B組的灰綠色比A組深6.胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可以預(yù)防白內(nèi)障、有助于保護(hù)眼睛晶狀體的纖維部分,還可以促進(jìn)眼內(nèi)感光色素的生成,加強(qiáng)視力的形成;還可以預(yù)防夜盲癥,加強(qiáng)眼睛辨色的功能??煞謩e從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取,獲得流程圖如下,請(qǐng)根據(jù)其提取過程及胡蘿卜素的性質(zhì),回答下列問題。(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí),可選用________或平板劃線法接種。(2)培養(yǎng)酵母菌R時(shí),培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長(zhǎng)提供________和________。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),干燥過程應(yīng)控制好________和________以防止胡蘿卜素分解;萃取過程中宜采用________方式加熱;萃取液濃縮前需進(jìn)行________。(4)紙層析法可用于鑒定所提取胡蘿卜素的純度,鑒定過程中需用胡蘿卜素________作為________。(5)玫瑰精油的提取方法是________法,該方法________(填“適合”或“不適合”)胡蘿卜素的提?。粰幟史枷阌偷闹苽渫ǔS胈_______法。(6)工業(yè)上提取天然β-胡蘿卜素的原料來源有三種即:________、________、________。解析(1)微生物培養(yǎng)常用的接種方法有:稀釋涂布平板法和平板劃線法。(2)蔗糖可為酵母菌提供碳源,硝酸鹽可為酵母菌提供氮源。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)為防止胡蘿卜素分解,干燥過程應(yīng)控制好溫度和時(shí)間;萃取過程中宜采用水浴方式加熱;萃取液濃縮前需進(jìn)行過濾,除去萃取液中的不溶物。(4)用紙層析法鑒定所提取胡蘿卜素純度時(shí),需用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照。(5)玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,能隨水蒸汽一同蒸餾,所以玫瑰精油的提取方法是水蒸汽蒸餾法;胡蘿卜素化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,不溶于水,溶于有機(jī)溶劑,但萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑需要有較高的沸點(diǎn),所以水蒸汽蒸餾法不適合胡蘿卜素的提??;檸檬芳香油的制備通常用壓榨法。(6)工業(yè)上提取天然β-胡蘿卜素的方法有三種:從植物中提取、從大面積種植的巖藻中獲取、利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。答案(1)稀釋涂布平板法(2)碳源氮源(3)時(shí)間溫度水浴過濾(4)標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照(5)水蒸氣蒸餾不適合壓榨(6)植物大面積種植的巖藻微生物發(fā)酵7.莠去津是一種含氮農(nóng)藥,在土壤中不易降解,為修復(fù)被其污染的土壤,可按下面程序選育能降解莠去津的細(xì)菌(目的菌)。請(qǐng)據(jù)圖回答:(已知莠去津在水中溶解度低,含過量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明)(1)由圖推斷,從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的過程稱為________,目的是________________________________________。(2)在將C瓶菌種接種到固體培養(yǎng)基之前通常要
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