新冠核酸檢測(cè)技術(shù)PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件

經(jīng)典word整理文檔，僅參考，轉(zhuǎn)Word此處可刪除頁(yè)眉頁(yè)腳。本資料屬于網(wǎng)絡(luò)整理，如有侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系刪除，謝謝！新冠核酸檢測(cè)技術(shù)PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室管理程序標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）起草人：批準(zhǔn)人：生效日期：年月日新冠核酸檢測(cè)技術(shù)PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件目錄臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置····································································3臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部管理規(guī)章·························································11臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室人員管理、配置及培訓(xùn)··············································15臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施和環(huán)境·························································18臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室清潔制度規(guī)章·························································19臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備管理規(guī)章···················································21Roche480II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀操作規(guī)程、維護(hù)方法、校準(zhǔn)（）未修改·26Finnpipette可調(diào)式移液器的使用與維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作(SOP-2)······························35Finnpipette可調(diào)式移液器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)管理程序(SOP-3)····································39溫度計(jì)及濕溫度計(jì)的校正標(biāo)準(zhǔn)管理程序(SOP-4)··········································40離心機(jī)使用與維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP-5)··················································41超凈工作臺(tái)使用與維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP-6)·············································45恒溫水浴箱使用、維護(hù)與校正（）·················································46旋渦振蕩器使用與維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）·········································49冰箱的使用與維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）··············································50可移動(dòng)紫外燈標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）···················································52儀器故障時(shí)標(biāo)記、放置標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）·······································53儀器設(shè)備發(fā)生故障時(shí)的應(yīng)急處理程序（）·······································54臨床標(biāo)本的收集管理標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）··········································57檢驗(yàn)標(biāo)本的驗(yàn)收和保存標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）·······································58新冠核酸檢測(cè)技術(shù)PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件樣本編號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP-15)··························································63PCR標(biāo)本管理標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）···················································65標(biāo)本前處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）······················································67核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）····································68乙型肝炎病毒基因擴(kuò)增檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP-19）·································70基因擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP-20)·····································75實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性判斷標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）··········································78室內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP-22)·······················································79實(shí)驗(yàn)室試劑耗材購(gòu)買(mǎi)、驗(yàn)收和貯存的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）·····················85試劑質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP-24）·························································91實(shí)驗(yàn)室耗材質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）················································94手套使用及左右手分開(kāi)的原則（）················································97實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑貯存使用、廢棄物處理及生物防護(hù)（）·····················98抱怨的處理程序（SOP-28）·································································101實(shí)驗(yàn)室記錄管理規(guī)章標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）·········································105檢驗(yàn)報(bào)告單管理標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）···············································108實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面擺放順序程序（）·····················································112實(shí)驗(yàn)室常用溶液配置標(biāo)準(zhǔn)操作程序（）·········································113****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：依照實(shí)驗(yàn)室設(shè)置規(guī)范實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室配置合理，以保證實(shí)驗(yàn)工作健康有序及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性2范圍：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室及相關(guān)工作人員，并明確各項(xiàng)規(guī)章制度3操作人：****4實(shí)驗(yàn)室設(shè)置規(guī)章：4.1依據(jù)：號(hào)）中臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室的條件進(jìn)行設(shè)置，并嚴(yán)格按照《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》（衛(wèi)檢字2002第8號(hào)）的要求開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增工作(擬開(kāi)展基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目見(jiàn)附表1)4.2實(shí)驗(yàn)室設(shè)置:4.2.1擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)(PCR-Ⅲ）三個(gè)工作室組成。這三區(qū)各自獨(dú)立，每個(gè)區(qū)設(shè)有緩沖間。其布局見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室平面圖（見(jiàn)附圖4.2.2擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)本室工作人員不得進(jìn)入”標(biāo)記。4.2.3建立實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理，并放在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的明顯位置（如置于緩沖區(qū)的墻上；內(nèi)務(wù)管理應(yīng)有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)的工作流程、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的要求、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)4.2.4三個(gè)工作區(qū)各配備專(zhuān)用的設(shè)備、儀器、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公用品、專(zhuān)用工作服，并有明顯的區(qū)分標(biāo)識(shí)：試劑準(zhǔn)備區(qū)—藍(lán)色，標(biāo)本制備區(qū)—紫色，PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)—黑色。各區(qū)的實(shí)驗(yàn)物品不得混用（實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)備一覽表見(jiàn)表4.2.5進(jìn)入各區(qū)的工作流程為：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)4.2.6進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須更換有本室標(biāo)識(shí)的工作服及清潔鞋套，工作人員離開(kāi)某4.3各區(qū)實(shí)驗(yàn)設(shè)備及用品配置：4.3.1試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：車(chē)、固定紫外線燈，混勻器，專(zhuān)用工作服，一次性用品（手套、帶濾心的吸4.3.2標(biāo)本制備區(qū)：器、可調(diào)式移液器（覆蓋作服，一次性用品（手套、帶濾心的吸頭、鞋套、吸水紙、耐高壓處理的離4.3.3PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)：Line-Gene全自動(dòng)熒光定量PCR核酸擴(kuò)增儀、紫外消毒車(chē)、固定紫外線記號(hào)筆等。4.4實(shí)驗(yàn)室人員設(shè)置：實(shí)驗(yàn)室人員配置：我院PCR實(shí)驗(yàn)室配備有3名工作人員，其中1人具檢驗(yàn)師職稱(chēng)，2人具主管檢驗(yàn)師職稱(chēng)。已全部經(jīng)過(guò)安徽省臨床檢驗(yàn)中心培訓(xùn)，并取得培訓(xùn)合格證（實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表見(jiàn)表年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)附表1擬開(kāi)展臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)項(xiàng)目一覽表****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表2臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表所學(xué)畢業(yè)從事本備注專(zhuān)業(yè)時(shí)間專(zhuān)業(yè)時(shí)間格證號(hào)1×××√∥2×××√∥3×××√∥主管檢驗(yàn)82．7主管檢驗(yàn)81．7檢驗(yàn)師檢驗(yàn)95．7****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表3臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備一覽表儀器設(shè)備生產(chǎn)廠家儀器型號(hào)名稱(chēng)備注公司樣本浙江大學(xué)凈化****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)儀器設(shè)備生產(chǎn)廠家儀器型號(hào)名稱(chēng)備注公司12恒溫醫(yī)療器械S.HH.W21.42001006水浴廠箱微型上海醫(yī)科13混勻大學(xué)儀器XW-80AQ/DAALC-20002003-2-15準(zhǔn)備區(qū)樣本準(zhǔn)備區(qū)樣本準(zhǔn)備區(qū)樣本準(zhǔn)備區(qū)PCR擴(kuò)增全新擴(kuò)增Magnetic****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)儀器設(shè)備生產(chǎn)廠家儀器型號(hào)名稱(chēng)備注有限公司江陰市光電儀器有限公司械廠區(qū)PCR擴(kuò)增區(qū)全新19線消毒車(chē)****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室平面圖圖1****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：依照實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范實(shí)現(xiàn)全面質(zhì)量管理，實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室有專(zhuān)人負(fù)責(zé)，以保證實(shí)驗(yàn)工作健康有序及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性2范圍：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室及相關(guān)工作人員，并明確了各項(xiàng)規(guī)章制度3操作人：**4規(guī)章：4.1實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理規(guī)章：4.1.1本接收時(shí)同時(shí)進(jìn)行以下記錄：在標(biāo)本與化驗(yàn)單上同時(shí)進(jìn)行標(biāo)本的唯一性編號(hào)，在標(biāo)本接收登記本上記錄患者的姓名、年齡，標(biāo)本接收日期，標(biāo)本的特性、狀態(tài)，接收者簽名。經(jīng)驗(yàn)收合格后接收的標(biāo)本直接運(yùn)送至標(biāo)本制備區(qū)。4.1.2實(shí)驗(yàn)過(guò)程中須嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)的工作流程：試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)的唯一流向制度。4.1.3開(kāi)啟實(shí)驗(yàn)區(qū)前逐一打開(kāi)設(shè)在緩沖區(qū)外墻上的紫外線燈開(kāi)關(guān)（控制實(shí)驗(yàn)區(qū)30分鐘。4.1.4工作開(kāi)始前，在緩沖區(qū)換好本實(shí)驗(yàn)區(qū)工作衣，戴上一次性口罩、帽子，套上一次鞋套，關(guān)閉紫外燈。打開(kāi)緩沖的排風(fēng)裝置，開(kāi)啟實(shí)驗(yàn)區(qū)門(mén)鎖，工作時(shí)反鎖隔離門(mén)。4.1.5進(jìn)行測(cè)定前的準(zhǔn)備和工作記錄（實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備和工作記錄見(jiàn)表a)記錄冰箱溫度、紫外線消毒時(shí)間；b)消毒液、清潔液、75%酒精配制；c)查看加樣器、擴(kuò)增儀、離心機(jī)、滅菌的吸頭等是否在有效期限內(nèi)；d)校正水浴鍋溫度；e)試劑準(zhǔn)備：試劑是否在有效期范圍內(nèi)，根據(jù)標(biāo)本量確定準(zhǔn)備模板的數(shù)量及陰陽(yáng)性對(duì)照數(shù)量；4.1.6實(shí)驗(yàn)過(guò)程的記錄（見(jiàn)SOP4.1.7檢測(cè)結(jié)果的記錄（見(jiàn)SOP****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)4.1.8實(shí)驗(yàn)完成后實(shí)驗(yàn)室清潔消毒處理及記錄：實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、加樣器、離心機(jī)、超凈工作臺(tái)、振蕩器、擴(kuò)增儀、實(shí)驗(yàn)室空間、實(shí)驗(yàn)室地面等（詳見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室清潔4.1.9工作結(jié)束，內(nèi)務(wù)整理完畢，關(guān)閉排風(fēng)裝置及實(shí)驗(yàn)區(qū)，加鎖。4.1.10唯一流向制度同樣運(yùn)用于實(shí)驗(yàn)室物流管理及內(nèi)務(wù)管理。4.2質(zhì)量控制規(guī)章：4.2.1制定各種SOP文件并嚴(yán)格執(zhí)行。4.2.2參加室間質(zhì)評(píng)。4.2.3開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)控工作。4.3人員行為規(guī)章：4.3.1要有強(qiáng)烈的時(shí)間觀念，按時(shí)上下班，不遲到、早退。4.3.2實(shí)驗(yàn)室人員須保持儀表整潔。4.3.3嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范，不得隨意更改操作步驟。4.3.4實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員必須嚴(yán)格按照PCR實(shí)驗(yàn)室操作程序進(jìn)行，包括實(shí)驗(yàn)室擦洗、臺(tái)面消毒，離心管、吸頭的無(wú)菌滅活準(zhǔn)備，儀器使用和廢棄物的處理等。4.3.5進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室唯一流向制度，無(wú)必要盡量減少進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的次數(shù)。4.3.6實(shí)驗(yàn)室內(nèi)嚴(yán)禁飲食、吸煙。4.3.7非本室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。4.3.8語(yǔ)言有禮貌、舉止講文明，對(duì)待來(lái)訪病人或電話應(yīng)和藹禮貌，解釋明確耐心，不得推脫或生硬回絕。4.3.9晚上下班要關(guān)門(mén)、窗，檢查空調(diào)和儀器的電源是否關(guān)閉。4.4儀器管理規(guī)章：4.4.1實(shí)驗(yàn)人員必須熟悉儀器性能方允許操作，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。4.4.2所有儀器（如PCR擴(kuò)增儀）須有專(zhuān)人負(fù)責(zé)，有使用維修記錄。4.4.3儀器使用前必須檢查是否完好，一旦發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，及時(shí)向負(fù)責(zé)人反映，不得擅自拆裝。4.4.4注意保持儀器衛(wèi)生整潔，嚴(yán)禁在室內(nèi)抽煙，吃零食，非儀器操作員應(yīng)盡量少入。4.4.5每天了解儀器運(yùn)轉(zhuǎn)情況，負(fù)責(zé)儀器的整潔，安全，檢查電源，水龍頭。4.4.6定期校正和維護(hù)PCR儀、離心機(jī)、水浴箱、冰箱等儀器、設(shè)備，并建立儀器質(zhì)量認(rèn)證檔案。4.5試劑管理規(guī)章：4.5.1實(shí)驗(yàn)室根據(jù)需要，定期提交試劑申購(gòu)單，并做到及時(shí)盤(pán)存清點(diǎn)，入庫(kù)做****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)到心中有數(shù)。4.5.2所購(gòu)試劑一律按試劑和耗材的SOP進(jìn)行，并做到來(lái)源渠道正規(guī)，質(zhì)量保證。4.5.3實(shí)驗(yàn)室對(duì)試劑庫(kù)存定期檢查，不使用過(guò)期變質(zhì)的試劑。4.5.4自配試劑須經(jīng)嚴(yán)格校正后方可使用。4.5.5試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定存放，確保有效期內(nèi)能有效使用，杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象。4.5.6易燃易爆試劑應(yīng)分開(kāi)存放，遠(yuǎn)離火源和電源。4.5.7試劑外借一律須經(jīng)負(fù)責(zé)人同意方可。5．本制度的變動(dòng)程序：本制度的變動(dòng)，可由任一使用該文件的工作人員向主管負(fù)責(zé)人提出，主管負(fù)責(zé)人則召集與本制度相關(guān)的所有人員進(jìn)行討論，根據(jù)討論結(jié)果是否通過(guò)，如通過(guò)則公布實(shí)施。批準(zhǔn)人****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表4年月日目緩沖區(qū)處在排風(fēng)狀態(tài)冰箱溫度記錄實(shí)驗(yàn)室紫外線照射30分鐘更換新配制的消毒液清潔液配制10%84液擦洗75%乙醇清潔在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)所用模板數(shù)量所用陽(yáng)性對(duì)照所用陰性對(duì)照表4年月日目緩沖區(qū)處在排風(fēng)狀態(tài)冰箱溫度記錄實(shí)驗(yàn)室紫外線照射30分鐘更換新配制的消毒液清潔液配制10%84液擦洗75%乙醇清潔在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)在有效期內(nèi)所用模板數(shù)量所用陽(yáng)性對(duì)照所用陰性對(duì)照****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1．目的：保證實(shí)驗(yàn)室具備開(kāi)展該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的能力。2．適用范圍：臨床核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)人員。3．負(fù)責(zé)人：**4．內(nèi)容：4.1人員要求：4.1.1由于PCR檢測(cè)干擾因素較多，結(jié)果分析復(fù)雜。因此，PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)具備較廣泛的分子生物知識(shí)。4.1.2PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)取得上崗培訓(xùn)合格證書(shū)，臨床PCR檢驗(yàn)過(guò)程須在具培訓(xùn)合格證書(shū)的技術(shù)人員監(jiān)督指導(dǎo)下完成，檢驗(yàn)報(bào)告須由具培訓(xùn)合格證書(shū)的技術(shù)人員審核簽。4.1.3工作人員上崗前必須學(xué)習(xí)掌握PCR實(shí)驗(yàn)管理文件及要求，并由實(shí)驗(yàn)室主任核查。4.2人員配置：4.2.1根據(jù)衛(wèi)生部臨檢中心對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員的在求選擇人員；4.2.2我科PCR實(shí)驗(yàn)室配備3名工作人員（PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽見(jiàn)表4.2.3實(shí)驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室全面管理、解決技術(shù)疑難及與臨床溝通、組織人員參加培訓(xùn)，室主任不在崗時(shí)，應(yīng)指定代理人負(fù)責(zé)。4.2.3資深檢驗(yàn)技師及青年技師負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)管理及臨床標(biāo)本的檢驗(yàn)。4.3人員管理：a)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)規(guī)章制度；b)嚴(yán)格執(zhí)行年度考核制度：1)日常工作質(zhì)量的評(píng)價(jià)；2)室內(nèi)質(zhì)控的評(píng)測(cè)；3)室間質(zhì)控的評(píng)測(cè)；4)年度考試；5)在日常抱怨工作中的應(yīng)變能力。c)科年度獎(jiǎng)勵(lì)制度：1)參加室間質(zhì)評(píng)優(yōu)秀；2)年度在CN級(jí)刊物上在論文發(fā)表；****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)3)在本地刊物有多篇論文發(fā)表；4)考試成績(jī)優(yōu)秀；5)受到有關(guān)部門(mén)或群眾特別嘉獎(jiǎng)。d)科主任建立實(shí)驗(yàn)室工作人員業(yè)績(jī)檔案。4.4人員培訓(xùn)計(jì)劃：4.4.1本室現(xiàn)有人員已參加安徽省臨床檢驗(yàn)中心基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)班，并取得上崗證。見(jiàn)附件14.4.2自學(xué)及考核：室主任督促指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室人員通過(guò)繼續(xù)教育或自學(xué)提高業(yè)務(wù)素質(zhì)。工作人員根據(jù)自身情況，每年完成一篇學(xué)術(shù)論文、綜述或經(jīng)驗(yàn)總結(jié)提交室主任，室主任以此作為年度考核技術(shù)人員的一項(xiàng)依據(jù)。4.4.3室主任每年必須參加臨床檢驗(yàn)中心的PCR質(zhì)控總結(jié)會(huì)議。4.4.4室成員每年至少有一個(gè)月脫產(chǎn)的理論和技能的學(xué)習(xí)。4.4.5經(jīng)常同其它PCR室的同道進(jìn)行理論和技術(shù)交流。4.4.6訂閱與分子生物學(xué)及PCR技術(shù)有關(guān)的文獻(xiàn)、雜志。4.4.7每年底對(duì)下一年的人員培訓(xùn)做出具體安排。4.4.8實(shí)驗(yàn)室主任對(duì)技術(shù)人員的技術(shù)檔案每?jī)赡晷拚a(bǔ)充一次。5.該程序的變動(dòng)程序：本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：檢驗(yàn)科主任、室技術(shù)負(fù)責(zé)人注:所引用表格:1.實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表見(jiàn)表22.實(shí)驗(yàn)室工作人員檔案記錄見(jiàn)表5****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表5畢業(yè)學(xué)校及所學(xué)專(zhuān)業(yè)****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的保證環(huán)境良好，工作有序，結(jié)果可靠2范圍PCR實(shí)驗(yàn)室及相關(guān)工作人員3操作人****4規(guī)章：4.1擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)（備區(qū)（PCR-Ⅰ）——標(biāo)本制備區(qū)（PCR-Ⅱ）——PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)（PCR-4.2每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門(mén)上有本區(qū)的標(biāo)識(shí)及非本室人員不得進(jìn)入字樣。4.3每個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)配有溫度調(diào)控設(shè)備、溫濕度計(jì)，可移動(dòng)及固定紫外燈。4.4PCR擴(kuò)增儀配有UPS多功能穩(wěn)壓電源。4.5工作人員在操作過(guò)程中嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理，嚴(yán)格執(zhí)行操作程序。4.6實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入本工作區(qū)時(shí)須穿該區(qū)具有標(biāo)識(shí)專(zhuān)用工作服，同時(shí)配備其它保護(hù)性裝備如手套、口罩、帽子、鞋套并遵守實(shí)驗(yàn)室的唯一流向制度。4.7嚴(yán)禁將本區(qū)的物品和工作服帶離本區(qū)，以防擴(kuò)增產(chǎn)物污染擴(kuò)增前區(qū)。4.8在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用過(guò)的廢棄槍頭等材料應(yīng)立即浸泡于裝有84消毒液的容器4.9標(biāo)本蓋子的開(kāi)閉及移取應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行，操作時(shí)應(yīng)，關(guān)閉抽風(fēng)機(jī)，操作時(shí)小心謹(jǐn)慎，防止液體外濺。4.10每天實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，打開(kāi)紫外燈及紫外消毒車(chē)照射30分鐘。4.11工作結(jié)束后，對(duì)該區(qū)的工作臺(tái)用84消毒液消毒30分鐘后，再用該區(qū)專(zhuān)用的清潔干凈的抹布用自來(lái)水擦拭兩遍。對(duì)地面用該區(qū)專(zhuān)用的拖把用84消毒液消毒30分鐘后，再用該區(qū)專(zhuān)用的拖把用自來(lái)水拖擦兩遍。用紫外消毒車(chē)距實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和實(shí)驗(yàn)儀器30cm照射1小時(shí)，同時(shí)打開(kāi)該區(qū)紫外消毒燈消毒1小時(shí)。批準(zhǔn)人****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的保證實(shí)驗(yàn)室日常內(nèi)務(wù)管理及清潔工作順利進(jìn)行2范圍PCR實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面、地面及儀器、設(shè)備等3操作人****4規(guī)章：4.1實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面和地面清潔4.1.1每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后由專(zhuān)人負(fù)責(zé)并記錄，各區(qū)的清潔工具不得混用。4.1.2實(shí)驗(yàn)臺(tái)面選用84液擦拭;擴(kuò)增區(qū)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面用75%的酒精清潔;實(shí)驗(yàn)室地面用先用10%的84液清潔，再用自來(lái)水清潔。4.1.3清潔完成后,按各區(qū)要求紫外線照射消毒。同時(shí)可移動(dòng)擴(kuò)增區(qū)紫外線燈照實(shí)驗(yàn)臺(tái)30-60分鐘。4.1.4實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中出現(xiàn)血液/痰液等不慎泄露至實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)，用10%84液浸住污染區(qū)域，再用濾紙片覆蓋可繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，30分鐘左右后可用軟布蘸10%84液溶液反復(fù)清洗，再用75%酒精擦拭；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用紫外線燈照30-60分鐘。4.2高速離心機(jī)清潔4.2.1每次實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，用75%的酒精擦拭離心的心機(jī)外表。4.2.2每次實(shí)驗(yàn)完畢后，先用10%84消毒液浸過(guò)的軟布擦洗離心機(jī)的轉(zhuǎn)頭及內(nèi)壁,再用潔凈的濕布擦洗,待干后蓋上機(jī)蓋。4.2.3如果離心時(shí)及時(shí)發(fā)現(xiàn)離心管破裂，必須先停止實(shí)驗(yàn)，將有破裂管的離心管放入盛有10%84消毒液缸內(nèi)，取備用離心管繼續(xù)下一步操作。4.3超凈工作臺(tái)清潔4.3.1每次使用后用10%84消毒液擦拭工作臺(tái)面，再用潔凈的濕布擦洗。75%酒精棉球擦拭紫外燈；4.3.2每星期清潔凈化工作臺(tái)的周?chē)h(huán)境，去除塵埃。4.3.3如果操作過(guò)程中出現(xiàn)液體不慎泄露，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)，用10%84液浸住污****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)染區(qū)域，再用濾紙片覆蓋可繼續(xù)實(shí)驗(yàn)，30分鐘左右后用軟布蘸10%84消毒液溶液反復(fù)清洗，再用潔凈的濕布擦洗，然后用75%酒精擦拭。4.4加樣器清潔4.4.1每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用75%的酒精擦拭。4.4.2當(dāng)懷疑加樣器有可能污染時(shí)在121C及1巴壓力下消毒20分鐘。各區(qū)的加04.5工作服清潔4.5.1每周將工作服交院洗衣房洗滌消毒，不同實(shí)驗(yàn)區(qū)的工作服隔天洗滌。4.5.2如在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中疑有污染，立即用10%84液浸泡消毒。4.6擴(kuò)增儀的清潔：見(jiàn)儀器的維護(hù)。4.7實(shí)驗(yàn)室空間消毒：實(shí)驗(yàn)結(jié)束及后續(xù)工作（如地面及儀器清潔）完成后，將固定紫外燈打開(kāi)照射60分鐘。5.本制度的變動(dòng)程序：本制度的變動(dòng)，可由任一使用該文件的工作人員向主管負(fù)責(zé)人提出，主管負(fù)責(zé)人則召集與本制度相關(guān)的所有人員進(jìn)行討論，根據(jù)討論結(jié)果是否通過(guò)，如通過(guò)則公布實(shí)施。（注：實(shí)驗(yàn)室清潔消毒見(jiàn)表6）批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的保證PCR實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備得到妥善管理，控制在用儀器設(shè)備的工作狀態(tài)2范圍PCR實(shí)驗(yàn)室所有的儀器、設(shè)備3操作人****4操作：4.1儀器設(shè)備的管理，維護(hù)，保養(yǎng)等的具體事項(xiàng)由實(shí)驗(yàn)室設(shè)備管理人員負(fù)責(zé)執(zhí)行；4.2由PCR實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織執(zhí)行和監(jiān)督管理；5內(nèi)容：5.1建檔管理：儀器設(shè)備的檔案管理應(yīng)包括以下內(nèi)容（實(shí)驗(yàn)室主要儀器設(shè)備相關(guān)文件一覽表見(jiàn)表5.1.1儀器設(shè)備的一般情況：a)名稱(chēng)b)制造商，型號(hào)，序號(hào)c)d)目前存放地點(diǎn)，接受人員簽字等。e)校準(zhǔn)和檢定的日期、結(jié)果及下次校準(zhǔn)和檢定的日期、結(jié)果。f)迄今為止所進(jìn)行的維護(hù)及今后維護(hù)計(jì)劃。5.1.2儀器設(shè)備的相關(guān)文件：儀器設(shè)備的說(shuō)明書(shū)，操作手冊(cè)等，有關(guān)文件（或復(fù)印件）的文件序號(hào)，名稱(chēng)，保存方式，管理負(fù)責(zé)人等。5.1.3儀器設(shè)備的損壞，故障，修理須作如下記錄(相關(guān)表格見(jiàn)表7)：日期，設(shè)備名稱(chēng)，設(shè)備標(biāo)記號(hào)，維修內(nèi)容（損壞或故障的表現(xiàn)、損壞故障的5.1.4正常運(yùn)轉(zhuǎn)的儀器設(shè)備貼上綠色正常使用標(biāo)識(shí)牌。有問(wèn)題的儀器設(shè)備加貼明顯的紅色停用標(biāo)識(shí)，標(biāo)識(shí)上應(yīng)有停用日期及原因；可搬動(dòng)的儀器移至設(shè)備處報(bào)修，不可移動(dòng)的設(shè)備原地使用布罩封存待修，直至修復(fù)校驗(yàn)后重新標(biāo)識(shí)正常使用。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)5.1.5儀器設(shè)備的報(bào)廢處理（報(bào)廢申請(qǐng)表見(jiàn)表因使用壽命，損壞，故障導(dǎo)致儀器設(shè)備不能滿足檢測(cè)需要時(shí)，該設(shè)備即行報(bào)廢。由管理人員填寫(xiě)報(bào)廢申請(qǐng)，科質(zhì)量負(fù)責(zé)人核實(shí)，設(shè)備科批準(zhǔn)后由質(zhì)量負(fù)責(zé)人在設(shè)備檔案中簽名注銷(xiāo)。5.2儀器設(shè)備實(shí)行嚴(yán)格的分區(qū)專(zhuān)用。5.3使用的儀器設(shè)備應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)和檢定，具體見(jiàn)SOP文件。5.4為保持儀器設(shè)備工作狀態(tài)的穩(wěn)定，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行定期的、必要的維護(hù)和保養(yǎng)，具體見(jiàn)SOP文件。5.5為了使擴(kuò)增儀處于穩(wěn)定的工作狀態(tài)，在該電腦上不得使用非本室的外來(lái)軟盤(pán)，不能在電腦內(nèi)加載其它程序和軟件；在使用本室軟盤(pán)進(jìn)行資料備份時(shí)，需在報(bào)告系統(tǒng)電腦上預(yù)先殺毒方可使用。5.6非本室工作人員不得使用儀器。6該程序的變動(dòng)程序：本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動(dòng)，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：檢驗(yàn)科主任、室技術(shù)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表7臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室主要儀器設(shè)備相關(guān)文件一覽表文件負(fù)備責(zé)人注明書(shū)√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√√原件√原件√原件√原件√原件√原件√原件√原件√原件Line-Gene擴(kuò)增儀江陰市光學(xué)儀有限PCR擴(kuò)公司增區(qū)17紫外線消毒車(chē)****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表8質(zhì)量負(fù)責(zé)人簽名放置地點(diǎn)****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表9備注****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)校準(zhǔn)（）未修改1目的：確保Line-Gene型核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)儀正確及正常使用。2適用范圍：Line-Gene型核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)儀。3操作人****4標(biāo)準(zhǔn)操作方法：4.1在打開(kāi)電源以前，先確認(rèn)以下內(nèi)容：4.1.1確認(rèn)電源線插頭已插入電源插座中。4.1.2Line-Gene與計(jì)算機(jī)及電源的連接是否可靠。4.2．核酸擴(kuò)增儀操作方法：4.2.1依次打開(kāi)電腦顯示器和電腦主機(jī)的電源開(kāi)關(guān),進(jìn)入“熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)”界面；4.2.2模板制好后，按模擬模板反應(yīng)孔的樣式放入擴(kuò)增儀反應(yīng)槽，注意陰陽(yáng)性、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品位置，標(biāo)本不夠用空白管填補(bǔ)；4.2.3打開(kāi)PCR儀電源開(kāi)關(guān),預(yù)熱5分鐘；4.2.4點(diǎn)擊“運(yùn)行”鍵，打開(kāi)“運(yùn)行”文件中“達(dá)安”試劑程序；4.2.3點(diǎn)擊工具欄中的“樣本資料”按鈕，輸入樣本資料，并清空缺省樣本號(hào)；點(diǎn)擊“確認(rèn)”保存樣本資料信息，保存的文件名為：年月日+批次（批次用a、b、c表示）如20030516a文件自動(dòng)形成后綴名為*.flr4.2.44.2.5檢測(cè)結(jié)果分析：a.程序運(yùn)行結(jié)束后，系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入分析界面并將檢測(cè)結(jié)果自動(dòng)保存，在熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)界面單擊“數(shù)據(jù)分析”鍵，進(jìn)入結(jié)果分析界面。b.定量分析：1）單擊“分析模式”菜單中的“定量分析”命令，在分析方法選擇中可選擇樣點(diǎn)擬合法。2）樣點(diǎn)數(shù)選擇：樣點(diǎn)為循環(huán)數(shù)/熒光強(qiáng)度對(duì)數(shù)曲線中基線以上各循環(huán)的點(diǎn)，****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)系統(tǒng)根據(jù)選擇的樣點(diǎn)數(shù)，將被選中的樣點(diǎn)擬合成直線，該直線與域值的交叉點(diǎn)即為CT的起始循環(huán)至終止循環(huán)熒光強(qiáng)度的平均值為零點(diǎn)設(shè)置時(shí)盡可能選擇樣本熒光強(qiáng)度穩(wěn)定（用“達(dá)安”試劑在Line-Gene熒光定量擴(kuò)增儀對(duì)標(biāo)本及控制品4）檢測(cè)，通常起始及終止為在各樣本噪聲的上方并盡可能的底，對(duì)同一種試劑在各個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析時(shí)基線設(shè)置盡可能相同。同一實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，基線設(shè)置不同CT值不同。的截距控制在42±2、斜率控制在-2.7±0.2、相關(guān)系數(shù)小于-0.98。設(shè)置完成后界面顯示分析結(jié)果。（在每進(jìn)一批試劑的時(shí)候，用本批試劑測(cè)定上一批穩(wěn)定的試劑已測(cè)定過(guò)的控制品及陰陽(yáng)對(duì)照，根據(jù)上批試劑測(cè)定的結(jié)果求出本批試劑在這種結(jié)果下本室其它人員判斷結(jié)果，這些參數(shù)必須控制在此范圍，這樣結(jié)果判斷在本室才具一致性。每進(jìn)購(gòu)一批試劑后，在SOP文件中，這些參數(shù)也需調(diào)4.3分析結(jié)果打印。4.4Line-Gene基因擴(kuò)增儀使用過(guò)后要及時(shí)記錄（Line-Gene基因擴(kuò)增儀的使用記錄見(jiàn)表9）5維護(hù)方法及注意事項(xiàng)：5.1PCR儀屬于精密電子儀器，應(yīng)放在水平臺(tái)上，PCR儀在運(yùn)行的時(shí)候，室溫應(yīng)當(dāng)控制在15℃至25℃之間，溫度過(guò)高或過(guò)低均會(huì)引起內(nèi)部的程控芯片或其它電子元件的不正常工作。5.2PCR儀配有單獨(dú)使用的ups穩(wěn)壓電源。PCR儀不能靠近水池、火爐、腐蝕性物質(zhì)、強(qiáng)磁場(chǎng)等，均會(huì)影響儀器正常工作。5.3每次實(shí)驗(yàn)時(shí)，最好能將擴(kuò)增儀的孔位全部放置樣品管，若樣品管少時(shí)可用空的樣品管代替，以保證實(shí)驗(yàn)田的一致性和重復(fù)性。5.4實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)及時(shí)擦干孔內(nèi)存在的水份，蓋上機(jī)蓋。5.5本儀器表面如有污跡，可用軟布沾清潔膏擦拭干凈。5.6每周五清洗樣品槽一次。方法是用棉棒沾75%的乙醇清洗若干次，以有灰塵****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)或其它殘留物影響擴(kuò)增效果。5.7每月末清潔熱蓋和反應(yīng)孔。具體方法是：正常關(guān)機(jī)后，將反應(yīng)槽取出，將熱蓋翻開(kāi)，用浸透95%酒精棉棒擦拭反應(yīng)孔和熱蓋，待乙醇揮發(fā)后再將熱蓋和反應(yīng)槽安裝好，熱蓋恢復(fù)原位。5.8熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)軟件的維護(hù)：5.8.1安裝熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)軟件計(jì)算機(jī)進(jìn)入Window98/2000/XP系統(tǒng)后，將熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)安裝光盤(pán)放入光驅(qū),找到光盤(pán)根目錄下的SETUP.EXE雙擊它，進(jìn)入設(shè)置程序熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)。據(jù)屏幕提示進(jìn)行操作即可完成熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)軟件的安裝。5.8.2卸載熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)軟件：在【開(kāi)始】/【設(shè)置】/【控置面板】菜單中單擊“添加刪除程序”項(xiàng)，選擇“熒光定量PCRPCR檢測(cè)系統(tǒng).5.9Line-Gene基因擴(kuò)增儀的維護(hù)保養(yǎng)后要及時(shí)記錄（Line-Gene基因擴(kuò)增儀的維護(hù)保養(yǎng)記錄見(jiàn)表6校準(zhǔn)：Line-Gene基因擴(kuò)增儀校準(zhǔn)工作需由專(zhuān)業(yè)工程師進(jìn)行。除與儀器廠家達(dá)成協(xié)議以外，以實(shí)驗(yàn)判斷儀器校準(zhǔn)狀態(tài)也可為何時(shí)進(jìn)行儀器校準(zhǔn)提供信息。通過(guò)對(duì)室內(nèi)質(zhì)控圖的分析，及時(shí)發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)誤差的出現(xiàn)。經(jīng)過(guò)分析排除了試劑和人員誤差后，應(yīng)進(jìn)行儀器狀態(tài)校驗(yàn)實(shí)驗(yàn)：6.1使用標(biāo)準(zhǔn)化試劑作為校驗(yàn)試劑。6.2在儀器處于校準(zhǔn)狀態(tài)下，由固定人員用標(biāo)準(zhǔn)化試劑對(duì)10、10、10、10、4236標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)在兩個(gè)月應(yīng)進(jìn)行20次。分別計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率、截距、相關(guān)性的控制限。6.3每年6月、12月由固定人員進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，觀察標(biāo)準(zhǔn)曲線的三個(gè)參數(shù)是否處在控制范圍和10標(biāo)準(zhǔn)品是否檢出。26.4當(dāng)10標(biāo)準(zhǔn)品未檢出、標(biāo)準(zhǔn)曲線的三個(gè)參數(shù)控制超出控制范圍或僅出現(xiàn)后2者時(shí)，先排除實(shí)驗(yàn)人員、試劑因素，再重復(fù)實(shí)驗(yàn)。如結(jié)果依然，聯(lián)系廠家立即進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。6.5當(dāng)僅有10標(biāo)準(zhǔn)品未檢出時(shí)，檢查實(shí)驗(yàn)全過(guò)程。再次上機(jī)檢測(cè)10標(biāo)準(zhǔn)品22兩枚。如仍未檢出，則聯(lián)系廠家進(jìn)行儀器校準(zhǔn)。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)6.6儀器經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)后，重復(fù)該實(shí)驗(yàn)。結(jié)果歸入儀器檔案。6.7本程序的變動(dòng)程序：本程序的變動(dòng)，可由任一使用該文件的工作人員向主管負(fù)責(zé)人提出，主管負(fù)責(zé)人則召集與本制度相關(guān)的所有人員進(jìn)行討論，根據(jù)討論結(jié)果是否通過(guò)，如通過(guò)則公布實(shí)施。附：Line-GenePCR擴(kuò)增儀文件的創(chuàng)建：1.檢測(cè)文件的創(chuàng)建：1.1在熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)界面單擊“運(yùn)行”鍵，進(jìn)入程序設(shè)置界面。單擊1.2按1.3樣本信息輸入：扭?？騼?nèi)選擇屬性或性別。位”欄輸入：?jiǎn)螕魸舛葐挝坏南吕I在下拉框內(nèi)選擇濃度單位，缺省項(xiàng)為“copyies/ml”。欄的輸入：選中該欄中某輸入內(nèi)容，單擊“缺省樣本列表”鍵，名稱(chēng)欄自動(dòng)按1、2、3……33名稱(chēng)設(shè)置，其余欄全部清空。行，該行自動(dòng)形成比上一行大一個(gè)值的號(hào)碼，也可修改。的內(nèi)容，也可修改。出自動(dòng)形成上一行的內(nèi)容，也可單擊該行重新選擇。顯示當(dāng)天日期，按Enter鍵輸入該日期，或點(diǎn)擊對(duì)話框左邊的下拉鍵彈出日歷界面，選擇需輸入的日期按Enter鍵輸入，點(diǎn)擊下一行（無(wú)輸入內(nèi)空****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)9）樣本信息內(nèi)容在打印報(bào)表時(shí)將會(huì)打?。ù蛴r(shí)類(lèi)型、樣本編號(hào)、編號(hào)、姓名、年齡、性別、住院號(hào)、門(mén)診號(hào)、病歷號(hào)、臨床醫(yī)師、送檢科室、臨床診斷、采樣時(shí)間最多可選取10以缺省打印。1.4樣本輸入模板：?jiǎn)螕簟熬庉嫛辈藛沃械摹皹颖据斎肽０濉泵?。在樣本輸入模板中添加送檢科室、臨床醫(yī)生內(nèi)容。在樣本信息輸入時(shí)，送檢科室、臨床醫(yī)師項(xiàng)的輸入可選擇樣本輸入模板中已添加的送檢科室、臨床醫(yī)師內(nèi)容。1.5設(shè)置檢測(cè)通道、熒光強(qiáng)度增益：選擇Ｆ1通道，增益值須根據(jù)不同的試劑進(jìn)行設(shè)置，定量分析，熒光強(qiáng)度初試值調(diào)整在70左右。1.6實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置:1)“下移”鍵可對(duì)選中的程序進(jìn)行編輯。2)選擇分析模式：?jiǎn)螕舨迦腈I，在彈出的顯示框內(nèi)設(shè)置各參數(shù)，最多可插入六個(gè)。分析模式選擇定量分析時(shí)，單擊采樣模式欄的下拉鍵在彈出的下拉3)設(shè)置循環(huán)數(shù)。1.7保存程序設(shè)置文件：?jiǎn)螕簟拔募辈蓡沃械谋４婷?；如果要保存在另一個(gè)文件夾中，請(qǐng)找到并打開(kāi)該文件夾，在“文件名”框中，鍵入文件名稱(chēng)，單擊“保存”按扭。2.運(yùn)行程序設(shè)置文件：2.1運(yùn)行程序設(shè)置文件:單擊“運(yùn)行”菜單中的“運(yùn)行設(shè)置程序組”命令；單擊工具欄中的“運(yùn)行”按鈕。2.2保存檢測(cè)結(jié)果：運(yùn)行程序設(shè)置文件時(shí)彈出檢測(cè)結(jié)果保存對(duì)話框，如果要保存在另一個(gè)文件夾中，請(qǐng)找到或新建文件夾并打開(kāi)該文件夾，在“文件名”框中，鍵入文件名稱(chēng)，單擊“保存”按扭。保存的文件名為程序設(shè)置文件名+日期+時(shí)間，其文件名的后綴為*.flr2.3檢測(cè)結(jié)果保存設(shè)置完后，彈出運(yùn)行界面，系統(tǒng)進(jìn)行樣本位置檢測(cè)并彈出樣本位置檢測(cè)對(duì)話框。樣本位置檢測(cè)完成后系統(tǒng)運(yùn)行已設(shè)置的程序。3.檢測(cè)結(jié)果分析：3.1程序運(yùn)行結(jié)束后，系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入分析界面并將檢測(cè)結(jié)果自動(dòng)保存，在熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)界面單擊“數(shù)據(jù)分析”鍵，進(jìn)入結(jié)果分析界面。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)3.2定量分析：1)單擊“分析模式”菜單中的“定量分析”命令，在分析方法選擇中可選擇最大二階倒數(shù)法或樣點(diǎn)擬合法。2)樣點(diǎn)數(shù)選擇：樣點(diǎn)為循環(huán)數(shù)/熒光強(qiáng)度對(duì)數(shù)曲線中基線以上各循環(huán)的點(diǎn)，系統(tǒng)根據(jù)選擇的樣點(diǎn)數(shù)，將被選中的樣點(diǎn)擬合成直線，該直線與域值的交叉點(diǎn)即為CT3)a)自動(dòng)調(diào)整：以第一至第十循環(huán)熒光強(qiáng)度的平均值為零點(diǎn)。b）手動(dòng)調(diào)整：以設(shè)置的起始循環(huán)至終止循環(huán)熒光強(qiáng)度的平均值為零點(diǎn)設(shè)置時(shí)盡可能選擇樣本熒光強(qiáng)度穩(wěn)一種試劑在各個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析時(shí)基線設(shè)置盡可能相同。同一實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，基線置不同CT值不同。4)數(shù)，設(shè)置完成后界面顯示分析結(jié)果.4.分析結(jié)果打印4.1單擊“文件”菜單中的“設(shè)置打印模板”命令，在彈出的對(duì)話框內(nèi)進(jìn)行設(shè)4.2“刪除”項(xiàng)的排列順序。樣本類(lèi)型、樣本編號(hào)、編號(hào)、姓名、性別、住院號(hào)、門(mén)診號(hào)、臨床醫(yī)師、送檢科室、臨床診斷、采樣時(shí)間等所需項(xiàng)目。4.3在打印欄內(nèi)，選擇參考濃度、參考CT值選項(xiàng)并輸入數(shù)值，打印時(shí)顯示參考標(biāo)準(zhǔn)。4.4在打印欄內(nèi),輸入最大濃度、最小濃度、打印時(shí)當(dāng)某一樣本計(jì)算濃度大于最大濃度或小于最小濃度將顯示≥最大濃度或≤最小濃度值。4.5在打印選項(xiàng)欄內(nèi),選中結(jié)果判斷、打應(yīng)曲線、計(jì)算濃度、CT值后在打印報(bào)表內(nèi)容中將顯示結(jié)果判斷、熒光強(qiáng)度/循環(huán)數(shù)曲線、計(jì)算濃度、CT值。4.6在打印選項(xiàng)欄內(nèi),設(shè)置每項(xiàng)打印兩個(gè)樣本時(shí)選中打印注釋選項(xiàng)可打印注釋對(duì)話框內(nèi)輸入的內(nèi)容。4.7打印模板設(shè)置完成后按“確定”鍵，保存設(shè)置。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)4.8單擊“文件”菜單中的“打印報(bào)表”命令,在彈出的對(duì)話框內(nèi)進(jìn)行設(shè)置,單擊“確定”即可打印。批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表10臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室Roche480II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀使用記錄檢測(cè)項(xiàng)目運(yùn)行情況使用人簽字****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表11臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室Roche480II實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀擴(kuò)增儀維護(hù)保養(yǎng)記錄保養(yǎng)人室質(zhì)量負(fù)責(zé)簽名人檢查簽名****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：正確使用移液器，確保移液器的精確性。2適用范圍：各種品牌、型號(hào)的固定、可調(diào)式和多通道加樣器。3操作人：****4操作：4.1設(shè)定容量值：a)根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的加樣器；可調(diào)式加樣器應(yīng)在允許的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)；連續(xù)可調(diào)式加樣器容量讀數(shù)由三位撥號(hào)數(shù)字組成（顯示所轉(zhuǎn)移液體容刻度可將容量調(diào)節(jié)到更精確度的分度。b)各種不同的型號(hào)，F(xiàn)至FFFF4.2吸液和放液：首先選擇一支合適的吸嘴安放在加樣器套筒上。稍加扭轉(zhuǎn)壓緊吸頭使之與套筒間無(wú)空氣間隙。未裝吸頭的加樣器絕不可用來(lái)吸取任何液體。最常用的吸液和放液方式有兩種。4.2.1前進(jìn)式：a)吸液：把按扭壓至第一點(diǎn)；垂直握持加樣器,使吸頭浸入液樣中，浸入液面深度視加樣器型而定：F和FF和F2—3mm2—4mm然后緩慢、平穩(wěn)地松開(kāi)按鈕吸入液樣，待移液器吸滿液體后等一秒鐘，然后將吸頭提離液面，貼壁停留2-3秒，使管尖外側(cè)的液滴滑落。b)放液:將吸頭口貼到容器內(nèi)壁并保持10°～40°傾斜。平穩(wěn)地把按鈕壓到****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)c)第一停點(diǎn),放出液體，等1-2秒鐘后再把按鈕壓到第二停點(diǎn)以排出剩余液體。壓住按鈕,停頓1-2秒，提起加樣器,使吸頭貼容器壁擦過(guò)。松開(kāi)按鈕。按吸頭彈射器除去吸頭(只有改用不同的液體時(shí)才需更換吸嘴)。d)此種加樣方式適合加樣本時(shí)使用。4.2.2倒退式a)吸液：把按扭壓至第二點(diǎn)；垂直握持加樣器,使吸頭浸入液液樣中,然后緩慢平穩(wěn)地松開(kāi)按鈕吸入液樣，吸滿液體后，將吸頭撤出液面，貼壁停留2-3秒，使管尖滴滑落。b)放液:將吸頭口貼到容器內(nèi)壁并保持10°～40°傾斜。平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點(diǎn),放出液體。遺留在管嘴尖的液體隨吸嘴一起扔掉或按至第二點(diǎn)壓回到原來(lái)液體管中。c)此種方式適用于高粘度液體；易起泡沫的液體或極小量的液體。4.3預(yù)洗a)當(dāng)取液體積大于10ul時(shí)，為了保證吸液的精確度和準(zhǔn)確性，在裝上一個(gè)新吸嘴（或改變吸取的容量值）后應(yīng)預(yù)洗吸嘴，即先吸入一次液樣并將之排回原容器中，反復(fù)2-3次。這是因?yàn)榈谝淮挝〉囊后w會(huì)在吸嘴內(nèi)壁形成液膜，導(dǎo)致計(jì)量誤差。而同一吸嘴在連續(xù)操作時(shí)液膜相對(duì)保持不變，故第二次吸液時(shí)誤差即可消除。b)而當(dāng)液體體積小于10ul，只有在沒(méi)有預(yù)洗，同時(shí)要將吸取的液體在要轉(zhuǎn)入的液體中反復(fù)吸打幾次，排空液體，再將吸嘴提出并貼壁停留1-2秒，才能保證取液的精確度和準(zhǔn)確性。4.4致密及粘稠液體對(duì)于密度低于水的液體，可將容量計(jì)的讀數(shù)調(diào)到低于所需值來(lái)進(jìn)行補(bǔ)償。例如：用F加樣器轉(zhuǎn)移10ul血清。先將讀數(shù)調(diào)到10ul，吸取后以重量40法測(cè)定。如實(shí)測(cè)體積為9.5ul，即偏差0.5ul，則將讀數(shù)調(diào)到10.5ul并重復(fù)一次。如第二次仍不夠準(zhǔn)確，根據(jù)偏差再作調(diào)整。吸取或排放血清或粘稠液體時(shí)，宜在第一點(diǎn)多等一兩秒鐘再壓到第二點(diǎn)。4.5加樣器吸頭加樣的準(zhǔn)確性與精密度與加樣器的吸嘴的質(zhì)量也密切相關(guān)，吸嘴的選擇也至關(guān)重要?；驍U(kuò)增實(shí)驗(yàn)因?yàn)橐褂么罅康奈?，并有許多微量操作，因此在選擇時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)b)形狀（密封良好的環(huán)口、薄壁和嘴口尖細(xì)）使安裝或卸脫更加容易、管壁有彈性、不會(huì)產(chǎn)生漩渦，從而精度更高。c)嘴口決無(wú)毛刺。吸嘴表面光潔平滑，沾濕性極小，避免液體留外壁引起的誤差。e)每個(gè)嘴口上都有模具編號(hào)，確保品質(zhì)跟蹤系統(tǒng)。f)吸嘴與吸嘴套筒密封完好，防止空氣泄漏造成精度或準(zhǔn)確度的誤差。g)有液體容量刻度線。D200吸嘴在20和100ul處標(biāo)出、D1000吸嘴在300ul處標(biāo)出、D10吸嘴在2ul處標(biāo)出，這樣吸液量不夠可以及時(shí)發(fā)現(xiàn)。h)可在121C及1巴壓下消毒20分鐘。0i)應(yīng)選用帶慮芯的吸頭，以避免樣品與樣品、樣品與加樣器或樣品與操作人員的污染。4.6故障排除a)發(fā)現(xiàn)漏氣或計(jì)量不準(zhǔn)，其可能原因和解決方法為：套筒松動(dòng)？用手?jǐn)Q緊螺帽。套筒括花或破裂？卸下彈射器，檢查套筒?；钊蛎芊馐芑瘜W(xué)腐蝕？更換活塞或密封圈。用蒸餾水洗滌套內(nèi)壁。b)發(fā)現(xiàn)套筒內(nèi)有液體可依下法清潔：卸下彈射器，擰下螺帽并用蒸餾水洗滌套筒、活塞、密封圈及0形環(huán)，待完全干燥后重新組裝。c)需要時(shí)，雷勃加樣器的吸管部分及套筒、螺帽和彈射器在121C及1巴壓0力下消毒20分鐘。注意密封圈及0形環(huán)不能高溫消毒。d)發(fā)現(xiàn)吸液時(shí)有氣泡：先將液體排回原容器，檢查吸嘴浸入是否合適，再更慢地吸取液體；如仍有氣泡應(yīng)更換吸嘴。4.7凡是更換了活塞或操縱桿的加樣器需進(jìn)行全面調(diào)校。4.8加樣器使用注意事項(xiàng)：a)根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸嘴，基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)要求使用帶慮心的吸嘴，防止污染。b)取液時(shí)應(yīng)緩慢勻速吸取，避免液體淺到移液器頭上；打出液體后拇指不應(yīng)松開(kāi)按鈕，將吸嘴壓掉后再將拇指松開(kāi)，避免液體回吸。c)調(diào)整取液量的按鈕時(shí)，不要用力過(guò)猛，并應(yīng)注意計(jì)數(shù)器顯示的數(shù)值不要超過(guò)其可調(diào)范圍。d)連續(xù)可調(diào)移液器在取樣加樣過(guò)中應(yīng)注意移液嘴不能觸及其它物品，以免被污染。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)e)連續(xù)可調(diào)移液器在使用完畢后應(yīng)置于移液器架上，遠(yuǎn)離潮濕及腐蝕性物品。連續(xù)可調(diào)移液器不可在無(wú)吸嘴時(shí)使用，吸嘴有液體時(shí)不能平放或倒置。f)在取液之前，所取液體應(yīng)在室溫（15-25C）平衡；液體溫度與室溫有異0時(shí)，將吸嘴預(yù)洗多次再用；移液溫度不得超過(guò)70C。0g)操作時(shí)要慢和穩(wěn)，吸嘴浸入液體深度要合適，吸液過(guò)程盡量保持不變；改吸不同的液體、樣本或試劑前要更換新吸嘴；發(fā)現(xiàn)吸嘴內(nèi)有殘液時(shí)必須更換；新吸嘴使用前應(yīng)先預(yù)洗。h)為防止液體進(jìn)入移液器套筒內(nèi)，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：壓放按鈕時(shí)保持平穩(wěn)；移液器不得倒轉(zhuǎn)；吸嘴有液體時(shí)不得平放。i)切勿用油脂等潤(rùn)滑活塞或密封圈。j)不可把容量調(diào)到超過(guò)其適用范圍。k)使用了酸或有腐蝕性蒸氣的溶液后，最好拆下套筒，用蒸餾水清洗活塞及密封圈。4.9加樣器的維護(hù)a)每天實(shí)驗(yàn)完畢后用75%酒精清潔。b)如有液體進(jìn)入加樣器內(nèi)造成污染，可以將加樣器拆開(kāi)后進(jìn)行清潔。c)各區(qū)加樣器具有各區(qū)的標(biāo)識(shí)，清潔時(shí)分別對(duì)待。4.10本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：保證移液器加量的準(zhǔn)確性。2適用范圍：各種品牌、型號(hào)的固定、可調(diào)式和多通道加樣器。3操作人**4校準(zhǔn)管理程序：4.1使用全自動(dòng)PCR實(shí)時(shí)擴(kuò)增儀，三區(qū)、四區(qū)合并，第三區(qū)可調(diào)式加樣器轉(zhuǎn)為備用狀。4.2每年由本室工作人員分批對(duì)可調(diào)式加樣器打包，運(yùn)至生產(chǎn)廠家進(jìn)行校正。4.3每年的四月份對(duì)試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)的加樣器進(jìn)行校正，同時(shí)把備用加樣器換上試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)的區(qū)域標(biāo)識(shí)，把劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)貼上待校正標(biāo)識(shí)，打包，郵遞、托運(yùn)或?qū)ｉT(mén)派人送交及運(yùn)送日期，在實(shí)驗(yàn)室日志上要注明清楚。4.4加樣器校正完畢取回后，貼上正常運(yùn)行標(biāo)識(shí)，并注明本次校正日期、下次校正日期。4.5把備用加樣器去掉試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)識(shí)，消毒，再轉(zhuǎn)入備用狀態(tài)。4.6每年的八月份對(duì)標(biāo)本制備區(qū)的加樣器進(jìn)行校正，步驟同上。4.7每年的十二月份對(duì)備用加樣器進(jìn)行校正，步驟同上。4.8本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：保證溫度計(jì)及濕溫度計(jì)對(duì)環(huán)境溫度衡量的準(zhǔn)確性。2適用范圍：常規(guī)溫度計(jì)、低溫溫度計(jì)、濕溫度計(jì)3操作人**4校準(zhǔn)管理程序：4.1常規(guī)溫度計(jì)、低溫溫度計(jì)校正：a)本室工作人員取同其它溫度計(jì)規(guī)格相同的常規(guī)溫度計(jì)、低溫溫度計(jì)各一支，送到當(dāng)?shù)赜?jì)量部門(mén)進(jìn)行校正，并保存好校正記錄和校正溫度計(jì)的編號(hào)。b)溫度計(jì)自我標(biāo)定：用已校正過(guò)的溫度計(jì)及未校正的溫度計(jì)在同一溫度條件下，對(duì)同一溫度的刻度顯示來(lái)進(jìn)行校正，標(biāo)定。4.2濕溫度計(jì)校正：a)本室工作人員取同其它溫度計(jì)規(guī)格相同的濕溫度計(jì)一支，送到當(dāng)?shù)赜?jì)量部門(mén)進(jìn)行校正，并保存好校正記錄和校正溫度計(jì)的編號(hào)。b)濕溫度計(jì)自我標(biāo)定：用已校正過(guò)的濕溫度計(jì)及未校正的濕溫度計(jì)在同一環(huán)境溫度條件下，對(duì)同一溫度濕度的刻度顯示來(lái)進(jìn)行校正，標(biāo)定。4.3標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：保證離心機(jī)的正常使用。2適用范圍：各種品牌、型號(hào)的高速離心機(jī)。3操作人****4操作4.1使用方法：4.1.1高速離心機(jī)a)離心機(jī)應(yīng)放在水平堅(jiān)固的地板或平臺(tái)上，并力求使儀器處于水平位置以免離心時(shí)造成儀器振蕩。b)打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，將預(yù)先平衡好的樣品對(duì)稱(chēng)放置于轉(zhuǎn)頭的樣品架上，關(guān)閉機(jī)蓋。c)旋動(dòng)定時(shí)旋鈕設(shè)定離心時(shí)間，緩慢旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕使儀器轉(zhuǎn)速達(dá)到預(yù)定的要求。d)離心完畢后，將轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)回零位，關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)。e)待離心機(jī)停止轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)打開(kāi)機(jī)蓋，取出離心樣品，再次關(guān)閉機(jī)蓋結(jié)束離心。4.2校準(zhǔn)：每年6月、12月請(qǐng)本單位專(zhuān)業(yè)設(shè)備科專(zhuān)業(yè)人員對(duì)該類(lèi)儀器進(jìn)行定期檢修校準(zhǔn)。5使用時(shí)的注意事項(xiàng)：5.1離心機(jī)應(yīng)始終處于水平位置，外接電源系統(tǒng)的電源要匹配，并要有良好的接地線;開(kāi)機(jī)前應(yīng)檢查機(jī)腔內(nèi)有無(wú)異物掉入。5.2樣品應(yīng)預(yù)先平衡，使用離心機(jī)微量離心時(shí)離心套管與樣品應(yīng)同時(shí)平衡;使用離5.3揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時(shí)應(yīng)使用帶蓋的離心管，并確保液體不外漏，以免侵蝕機(jī)腔或造成事故。5.4離心機(jī)運(yùn)行時(shí)，離心機(jī)周?chē)?0cm范圍內(nèi)不得有人與危險(xiǎn)物品。5.5每次操作完畢，應(yīng)做好使用情況記錄，每年6月、12月請(qǐng)本單位設(shè)備科專(zhuān)業(yè)人員對(duì)儀器各項(xiàng)性能進(jìn)行檢修。5.6離心過(guò)程中如發(fā)現(xiàn)異?，F(xiàn)象，應(yīng)立即關(guān)閉電源，報(bào)請(qǐng)有關(guān)技術(shù)員檢修。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)5.7每年6月、12月視使用頻率而由設(shè)備科專(zhuān)業(yè)人員行清潔機(jī)腔和轉(zhuǎn)頭。5.8離心機(jī)的維護(hù)：一般清潔見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室清潔程序中的高速離心機(jī)的清潔；離心及轉(zhuǎn)子的清潔下，再用中性去污劑（75%的異丙醇/水混合物/或乙醇去污染）清潔離心室；離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后用水沖洗，再用甘油潤(rùn)滑。5.9離心機(jī)的轉(zhuǎn)速用相對(duì)離心力表示。離心機(jī)轉(zhuǎn)速與相對(duì)離心力（RCF）換算公式如下：N=（RCF×105）/（1.18×R）RCF=0.011238095×R×NN表示轉(zhuǎn)速，單位為轉(zhuǎn)/分(r/min)；R表示離心半徑，即離心管底端至軸心的距離，單位為厘米(cm)；RCF表示相對(duì)離心力，單位用重力加速度g(g=9.8m/s)；注：所引表格：離心機(jī)使用情況記錄見(jiàn)表12離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)記錄見(jiàn)表135.10本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表12離心機(jī)使用情況記錄表****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表維護(hù)保養(yǎng)內(nèi)容室質(zhì)量負(fù)責(zé)人檢查簽名日期儀器放置地點(diǎn)運(yùn)行標(biāo)識(shí)清潔儀器性能狀態(tài)意外情況記錄****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：保證超凈工作臺(tái)內(nèi)的高清潔，無(wú)污染。2適用范圍：醫(yī)用超凈工作臺(tái)3操作人****4使用方法4.1接通電源，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。4.2超凈工作臺(tái)使用時(shí)必須預(yù)先用紫外線消毒至少30分鐘。4.3消毒及工作期間嚴(yán)禁打開(kāi)風(fēng)機(jī)，始終保持工作臺(tái)內(nèi)“死屏”即無(wú)空氣對(duì)流效果。4.4每次使用后，即刻以消毒液洗擦工作臺(tái)面后，再用潔凈的濕布擦洗，然后以75%酒精擦洗；紫外線燈消毒30分鐘后關(guān)機(jī)。4.5經(jīng)常用紗布沾上酒精將紫外線燈殺菌表面揩擦干凈，保持表面整潔，以免影響紫外線燈消毒效果。紫外線燈按規(guī)定交醫(yī)院統(tǒng)一檢測(cè)。4.6定期將預(yù)過(guò)濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時(shí)間為3～6個(gè)月。4.7定期（一般每半年1次）計(jì)測(cè)工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)參數(shù)要求，則可調(diào)大風(fēng)機(jī)供電電壓。當(dāng)風(fēng)機(jī)組電壓調(diào)到最大時(shí)，工作區(qū)風(fēng)速仍達(dá)不到4.8本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1目的：保證水浴箱工作溫度恒定。2適用范圍：電熱恒溫水浴箱3操作人：****4電熱恒溫水浴箱的操作：4.1水浴箱應(yīng)置于堅(jiān)固的平臺(tái)上。4.2電源接地，在首次插入電源插頭將儀器通電以前應(yīng)先確認(rèn)以下內(nèi)容：4.2.1電源是否與儀器要求的電壓相符合。4.2.2確認(rèn)電源插頭已插入電源插座中。4.3在水浴箱內(nèi)注入清潔溫水至總高度的1/2～2/3處。4.4合上水浴箱蓋，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，待水沸騰后，放入需裂解的Ependoff管，計(jì)時(shí)，到時(shí)間后取出繼續(xù)其它操作。4.5每次水浴箱使用前，應(yīng)做溫度穩(wěn)定性校正：放入標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)同監(jiān)測(cè)實(shí)際水溫，連續(xù)監(jiān)測(cè)10分鐘，水浴箱工作溫度應(yīng)在±1℃以內(nèi)。水浴箱掛有溫度質(zhì)量控制表，記錄每天溫度；如有溫度超出范圍，該溫度應(yīng)劃上紅圈，并把修正操作記錄下來(lái)。4.6注意事項(xiàng)：在操作過(guò)程中應(yīng)注意Ependoff管蓋是否崩開(kāi)，以防止樣品損失及污染到水浴箱中。4.7水浴箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔，外殼忌用腐蝕性溶液擦拭。5、電熱恒溫水浴箱溫度的校準(zhǔn)5.1．校準(zhǔn)依據(jù)：溫度計(jì)測(cè)量校準(zhǔn)法，顯示溫度觀察法。5.2校準(zhǔn)環(huán)境及用具：5.2.1校準(zhǔn)環(huán)境：儀器的正常工作條件。5.2.2校準(zhǔn)用具：經(jīng)校準(zhǔn)的溫度計(jì)。5.2.3設(shè)置溫度：以該水浴箱使用溫度作為校準(zhǔn)的設(shè)定溫度。5.3校準(zhǔn)方法：5.3.1溫度波動(dòng)性校準(zhǔn)：采用顯示溫度連續(xù)觀察法，連續(xù)10次觀察水浴箱在設(shè)置溫度下的顯示溫度波動(dòng)，每隔20秒記錄一次顯示溫度。接受標(biāo)準(zhǔn)為：記錄的顯示溫度值在10分鐘內(nèi)其波動(dòng)范圍≤±0.5℃。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)5.3.2溫度準(zhǔn)確性校準(zhǔn)：比較水浴箱中實(shí)測(cè)溫度與顯示溫度的偏差，按溫度誤差修正方法（見(jiàn)水浴箱使用說(shuō)明書(shū)）來(lái)調(diào)整儀器。5.3.3溫度均勻性校準(zhǔn)：以水浴箱左上角，左下角，正中點(diǎn)，右上角，右下角五點(diǎn)的實(shí)測(cè)溫度進(jìn)行比較，觀察溫度均勻性。5.4．校準(zhǔn)步驟：5.4.1使水浴箱在設(shè)置的溫度恒溫30分鐘使其穩(wěn)定。5.4.2在水浴箱左上角，左下角，正中點(diǎn)，右上角，右下角五點(diǎn)分別放入已加入0.5ml石蠟油的Ependoff管。5.4.3把溫度計(jì)放入Ependoff管中測(cè)量溫度。5.4.4連續(xù)觀察記錄水浴箱的顯示溫度在設(shè)置溫度的波動(dòng)情況10分鐘。5.4.5比較記錄的顯示溫度數(shù)據(jù)，若數(shù)據(jù)在接受標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，則認(rèn)為該水浴箱溫度波動(dòng)性合格，繼續(xù)下列校準(zhǔn)。5.4.5若記錄數(shù)據(jù)不在接受標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)，則停止校準(zhǔn)，停用，報(bào)修。5.6記錄水浴箱中的實(shí)測(cè)溫度。5.4.7比較顯示溫度值與實(shí)測(cè)溫度，若二者一致，該儀器無(wú)溫度誤差，繼續(xù)下列校準(zhǔn)。5.4.8若顯示溫度與實(shí)測(cè)溫度不一致，則按溫度誤差修正方法校準(zhǔn)儀器，并重復(fù)測(cè)定，待其一致后，繼續(xù)下列校準(zhǔn)。5.4.9分別測(cè)量水浴箱左上角，左下角，正中點(diǎn)，右上角，右下角五點(diǎn)的度并記錄。5.4.10比較水浴箱邊四角與中間的實(shí)測(cè)溫度，若偏差≤±1℃，則認(rèn)為該水浴箱溫度均勻性合格，校準(zhǔn)完畢。5.4.11若水浴箱周邊四角與中間的實(shí)測(cè)溫度﹥±1℃，停用，報(bào)修。5.4.12校準(zhǔn)記錄見(jiàn)表145.5本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。起草人批準(zhǔn)人生效日期年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表℃℃℃波動(dòng)性是否合乎要求審核人(℃)注：校準(zhǔn)日期一到，在進(jìn)行校準(zhǔn)時(shí)用鋼筆填寫(xiě)當(dāng)日日期。完成后，在下一欄用鉛筆填上預(yù)定下次校準(zhǔn)日期。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1目的：保證待處理的樣品完全混勻。2適用振蕩器范圍：XW——80A旋渦振蕩器。3操作人：×××××××××4標(biāo)準(zhǔn)操作：4.1旋渦振蕩器應(yīng)置于堅(jiān)固的平臺(tái)上。4.2接通電源。4.3將樣品管垂直或略為傾斜地放置在振蕩盤(pán)上，開(kāi)機(jī)振蕩數(shù)秒或數(shù)分鐘直至樣品完全混勻后關(guān)機(jī)。4.4切忌將樣品管平躺或倒轉(zhuǎn)振蕩，以免管內(nèi)液體滲出。4.5保持振蕩器清潔、干燥。4.6本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1目的：確保冰箱內(nèi)溫度恒定（冷藏室：0～10℃，冷凍室：-202適用范圍：各種品牌、型號(hào)的冰箱、低溫冰箱。3操作人：****4操作：4.1冰箱應(yīng)放置于水平地面并留有一定的散熱空間。4.2外接電源電壓必須匹配，并要求有良好的接地線。4.3冰箱內(nèi)禁止存放與實(shí)驗(yàn)室無(wú)關(guān)的物品。4.4放入冰箱內(nèi)的所有試劑、樣品、質(zhì)控品等必須密封保存。4.5保持冰箱出水口通暢；非自動(dòng)除霜冰箱應(yīng)定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時(shí)切斷電源，用軟布蘸水擦拭冰箱內(nèi)外，必要時(shí)可用中性洗滌劑。4.6每日由專(zhuān)人負(fù)責(zé)觀察冰箱內(nèi)溫度并記錄于表中，記錄表掛于門(mén)上，每月一張，一年裝訂成冊(cè)存檔（冰箱溫度記錄表見(jiàn)表154.7若溫度超出規(guī)定范圍，調(diào)節(jié)溫控器使其回到正常范圍，并進(jìn)行記錄。4.8若溫控調(diào)節(jié)無(wú)效，報(bào)請(qǐng)?jiān)O(shè)備科維修，修理后須驗(yàn)收簽字后方可正常使用。4.9本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表１5冰箱溫度記錄表年月日至日區(qū)記錄人日期123456789987654321冷藏室0℃0℃冷-1-2-3凍室-4-5-6-7-8-9-10-11-12-13-14-15-16-17-18-19-20-21-22-23-24-25-26-27-28-29-30****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1目的：保證可移動(dòng)紫外燈的正常使用。2適用范圍：Ⅰ3操作人****4步驟：4.1使用前進(jìn)行通電實(shí)驗(yàn)，檢查是否有漏電現(xiàn)象，電源接地。用畢后將開(kāi)關(guān)切斷，拔掉插頭。4.2本儀器不能在易燃易爆的體環(huán)境中使用，放置于無(wú)腐蝕性氣體和通風(fēng)良好的室內(nèi)4.3每周五用干布擦干外殼和燈管，以保持清潔光亮。經(jīng)常用酒精進(jìn)行消毒、滅菌，特別是電源開(kāi)關(guān)等觸摸部位，以防交叉?zhèn)魅尽?.4紫外線燈波長(zhǎng)要定期由醫(yī)院統(tǒng)一檢測(cè)。4.5本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1目的：保證故障的儀器明顯區(qū)別于正常儀器，而不被錯(cuò)誤使用。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的各種儀器。3操作人****4步驟：4.1找到出現(xiàn)故障的儀器。4.2用紅牌故障標(biāo)志標(biāo)示故障儀器。4.3小型儀器送儀器部門(mén)維修。4.4大型貴重儀器關(guān)閉電源開(kāi)關(guān)，取下電源插頭。用相應(yīng)防塵罩遮蔽儀器。4.5維修完成后取下紅色故障標(biāo)志，換上黃色標(biāo)識(shí)牌。4.6調(diào)整實(shí)驗(yàn)通過(guò)，去掉未校準(zhǔn)標(biāo)識(shí)牌，換上綠色標(biāo)識(shí)牌。4.7儀器重新正常使用。4.8本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1．目的：在實(shí)際操作中，儀器設(shè)備發(fā)生故障是不可避免的。為在最大程度上減輕類(lèi)似情況所帶來(lái)的不利影響，特制定本程序。2．范圍：與PCR檢測(cè)、試劑存儲(chǔ)、污染預(yù)防等有關(guān)的設(shè)備。3．操作人：****4操作：4.1每一個(gè)工作人員在職責(zé)范圍內(nèi)均有責(zé)任有意識(shí)地注意以求及時(shí)發(fā)現(xiàn)并報(bào)告儀器設(shè)備的異常情況。4.2室主任負(fù)責(zé)啟動(dòng)本程序。4.3作為應(yīng)急處理，潛藏著一定的可能影響檢測(cè)質(zhì)量的不確定因素。室主任有責(zé)任組織并直接監(jiān)督本程序的實(shí)施。4.4室主任負(fù)責(zé)在第一時(shí)間檢查核實(shí)應(yīng)急措施的有效性。5．工作流程：5.1室主任接到異常情況報(bào)警后，立即現(xiàn)場(chǎng)確認(rèn)異常情況的性質(zhì)：觀察有誤、誤操作、偶發(fā)現(xiàn)象或確屬不能立即排除的故障。5.2對(duì)于發(fā)生故障的儀器設(shè)備，在聯(lián)系有關(guān)部門(mén)維修的同時(shí)，采取以下處理辦法。5.2.1有滿足要求的替用設(shè)備，啟用替用設(shè)備。5.2.2可借用其他部門(mén)儀器設(shè)備時(shí)，及時(shí)聯(lián)系借用并核實(shí)該設(shè)備的使用狀態(tài)。5.2.2及時(shí)與供應(yīng)方會(huì)同解決。5.2.2.1根據(jù)雙方合同約定，及時(shí)通知供應(yīng)方。供應(yīng)方技術(shù)人員將在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)隨身攜帶備用設(shè)備到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)。5.2.2.2在經(jīng)必要的驗(yàn)收工作后，啟用備用設(shè)備。5.2.3替用、借用或備用設(shè)備的使用在滿足質(zhì)量要求的同時(shí)，必須同時(shí)滿足實(shí)驗(yàn)室管理措施（特別是防污染）的要求。5.3室主任須檢查并隨時(shí)跟蹤所采取措施的有效性。5.4儀器設(shè)備故障處理見(jiàn)表16。5.5本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1目的：確保標(biāo)本收集正確和采集時(shí)間合適；確保樣品檢測(cè)準(zhǔn)確、有效。2適用范圍：血漿/清、分泌物、痰液、胸/腹水、腦脊液和尿液的采集。3操作人：****臨床專(zhuān)業(yè)醫(yī)生及護(hù)士4操作：4.1血清/漿標(biāo)本：用無(wú)菌注射器抽取受檢者的靜脈血2ml，注入PCR專(zhuān)用試管中，盡快在2小時(shí)內(nèi)分離血清/血漿后轉(zhuǎn)入另一1.5mlEppendoff管。如用血漿標(biāo)本，預(yù)先加入EDTA-Na、枸櫞酸鈉抗凝。24.2分泌物：a)男性：取尿道分分泌物或細(xì)小棉拭子伸入到尿道約2～4厘米，略捻拭子取b)女性：陰道——用無(wú)菌棉球洗去宮頸外分泌物，再用無(wú)菌棉拭子插入宮頸內(nèi)停留5送檢。c)尿道——用無(wú)菌棉球洗凈尿道口，再用無(wú)菌棉拭子插入尿道約2厘米處，4.3痰液：用一次性痰盒取受檢者肺深部咳出痰液1～3毫升，密閉送檢。4.4胸/腹水、腦脊液：用無(wú)菌注射器抽取胸/腹水或腦脊液后，注入PCR專(zhuān)用試管密閉送檢。4.5尿液：直接取中段晨尿入PCR專(zhuān)用試管密閉送檢。4.6本程序用于對(duì)臨床標(biāo)本采集及收集有關(guān)人員的培訓(xùn)，臨床標(biāo)本采集及收集有關(guān)人員要掌握本程序。4.7本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動(dòng)程序：可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：室技術(shù)負(fù)責(zé)人，檢驗(yàn)科主任。批準(zhǔn)人****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)）1目的：保證所收集的標(biāo)本符合實(shí)驗(yàn)要求，保證標(biāo)本的保存質(zhì)量。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的現(xiàn)行項(xiàng)目：HBV。3操作人：****4驗(yàn)收、保存程序：4.1驗(yàn)收步驟：4.1.1簽收：嚴(yán)格對(duì)各類(lèi)標(biāo)本執(zhí)行查對(duì)和雙簽制度，不符合要求的標(biāo)本一律退回，并記錄登記。4.1.2分類(lèi)驗(yàn)證：4.1.2.1住院部、門(mén)診及院外病人的標(biāo)本用未加抗凝劑的一次性真空負(fù)壓管由臨床護(hù)士或?qū)I(yè)人員按操作規(guī)程采集。4.1.2.2標(biāo)本的運(yùn)送：住院及門(mén)診病人的標(biāo)本，采集后2小時(shí)內(nèi)由專(zhuān)人送至PCR實(shí)驗(yàn)室；院外病人的標(biāo)本，須用加有冰塊的容器在采集后2小時(shí)內(nèi)由專(zhuān)人運(yùn)送。4.1.2.3查對(duì)姓名，聯(lián)號(hào)，住院號(hào)，病區(qū)床號(hào)，項(xiàng)目等。對(duì)不符合要求的者應(yīng)作記錄，并及時(shí)通知采樣科室，正確及時(shí)地補(bǔ)采樣，以免延誤病人的檢測(cè)報(bào)告。姓名，住院號(hào)，性別，年齡，病區(qū)床號(hào)，檢驗(yàn)項(xiàng)目等。4.1.2.4按檢測(cè)項(xiàng)目驗(yàn)證標(biāo)本：HBV所需標(biāo)本類(lèi)型為未溶血的血清或血漿，注意血漿標(biāo)本所用的抗凝劑，一般用EDTA-Na或枸櫞酸鈉抗凝，不可有用肝素。標(biāo)本為全血時(shí)及時(shí)分離2出血漿保存。4.1.3符合拒檢的不合格病人標(biāo)本的范圍：標(biāo)本的處理：標(biāo)本收到后，立即分離血清并分裝到兩只離心管內(nèi)，一份用****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)于檢測(cè)，另一份用于標(biāo)本的保存。4.1.4拒檢程序：a)對(duì)拒檢的不合格的標(biāo)本應(yīng)登記在不合格標(biāo)本處置記錄本上。b)填寫(xiě)不合格標(biāo)本處置單，并隨同申請(qǐng)單送返送檢單位。c)必要時(shí)電話告知相關(guān)科室醫(yī)生或護(hù)士。4.2標(biāo)本的保存：HBV標(biāo)本：血標(biāo)本可在4℃下短期保存，分離出的血清或血漿保存于-15℃下。4．PCR實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有專(zhuān)人專(zhuān)門(mén)保存檢測(cè)標(biāo)本的冰箱并加鎖，確保標(biāo)本的真實(shí)性及初、復(fù)檢的一致性。4.3特殊標(biāo)本的處理：對(duì)暫不檢測(cè)的項(xiàng)目和規(guī)定時(shí)間外收到的零散標(biāo)本，要隨時(shí)登記和正確保管，以免漏檢、遺失和延誤檢驗(yàn)。對(duì)特殊樣本或特殊病人的樣本，實(shí)行“首接”負(fù)責(zé)制，所謂特殊樣本是指難于采集的樣本。無(wú)論哪位工作人員一旦收到標(biāo)本后，均須負(fù)其責(zé)任，不得以任何借口推諉，及時(shí)、正確保管和轉(zhuǎn)送樣要到有關(guān)科室或有關(guān)人員，同時(shí)作交班記錄和雙簽名。對(duì)于做長(zhǎng)期病情動(dòng)態(tài)觀察的病人標(biāo)本一律置于-70℃下長(zhǎng)期保存?zhèn)溆谩?.4所引用的表格如下：a)可接收標(biāo)本記錄表見(jiàn)表17b)拒收標(biāo)本記錄表見(jiàn)表18c)標(biāo)本保存記錄表見(jiàn)19批準(zhǔn)人年月日****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表收記錄（****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室）接收人患者姓名（簽名）****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)表拒收標(biāo)本記錄表（****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室）送檢人患者姓名性別年齡科別（簽名）（簽名）****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)標(biāo)本保存記錄表19標(biāo)本保存記錄標(biāo)本唯一編號(hào)備注至至至至標(biāo)本保存記錄標(biāo)本唯一編號(hào)備注標(biāo)本唯一編號(hào)備注標(biāo)本唯一編號(hào)備注****醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室-103-****醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中心SOP文件第頁(yè)共頁(yè)1目的：保證樣品編號(hào)的一致性，也是準(zhǔn)確發(fā)報(bào)告單的基礎(chǔ)。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的現(xiàn)行項(xiàng)目：HBV。3操作人：****4操作：4.1標(biāo)本唯一標(biāo)識(shí)的規(guī)章:a)標(biāo)本的唯一性標(biāo)識(shí)須字跡清晰明了，不得隨意作任何涂改；必須時(shí)，在舊標(biāo)識(shí)上劃雙線更改，更改后應(yīng)保持舊標(biāo)識(shí)可辯識(shí)；操作人員在更改處必需簽名。b)標(biāo)本的唯一性標(biāo)識(shí)由三部分構(gòu)成——標(biāo)本接收日期、檢測(cè)項(xiàng)目類(lèi)型、化驗(yàn)單接收順序號(hào)，三部分無(wú)間隔符號(hào)。4.2編號(hào)基本原則(三點(diǎn)):a)按標(biāo)本接收日期標(biāo)記：如2003年6月15日，則接收標(biāo)本的編號(hào)開(kāi)始為030615。b)按檢測(cè)項(xiàng)目類(lèi)型分類(lèi)標(biāo)記：根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的不同，每種檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)應(yīng)為唯一的一種代號(hào)。如乙型肝炎病毒標(biāo)記為HBV。c)按化驗(yàn)單接收順序號(hào)編號(hào)：在同種類(lèi)型的化驗(yàn)單中，按化驗(yàn)單的順序編號(hào)。序號(hào)為01～99。如第一個(gè)檢測(cè)乙型肝炎病毒的化驗(yàn)單編為01，第二個(gè)檢測(cè)乙型肝炎病毒的化驗(yàn)單編為02,第三個(gè)檢測(cè)乙型肝炎病毒的化驗(yàn)單編為HBV03等。例如：03年06月15日HBV01，項(xiàng)目類(lèi)型序號(hào)標(biāo)本編號(hào)為030615HBV01(整個(gè)標(biāo)識(shí)共有11位)4.3編號(hào)步驟：a)先統(tǒng)計(jì)所有當(dāng)天送來(lái)的標(biāo)本，根據(jù)編號(hào)的基本原則，按類(lèi)型、按順序給當(dāng)天的標(biāo)本編好號(hào)，每個(gè)樣本的每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)應(yīng)一個(gè)唯一的編號(hào)。b)用記號(hào)筆在每一張化驗(yàn)單和對(duì)應(yīng)的樣本管上做