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文檔簡介

食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求第一頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四(一)無菌操作要求:食品微生物檢驗(yàn)室工作人員,必須有嚴(yán)格的無菌觀念,許多試驗(yàn)要求在無菌條件下進(jìn)行,主要原因:防止試驗(yàn)操作中人為污染樣品;保證工作人員安全,防止檢出的致病菌由于操作不當(dāng)造成個(gè)人污染。第二頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四接種時(shí)必須穿工作服、戴工作帽。進(jìn)行接種食品樣品時(shí),必須穿專業(yè)工作服、帽及拖鞋,它們應(yīng)放在無菌室緩處間,工作前經(jīng)紫外線消毒后使用。應(yīng)在進(jìn)無菌室前用肥皂洗手,然后用75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛?。進(jìn)行接種所用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須經(jīng)消毒滅菌,打開包裝未使用完的器皿,不能放置后再使用,金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用95%酒精點(diǎn)燃燒灼3次后使用。第三頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四從包裝中取出吸管時(shí),吸管尖部不能觸及外露部位,使用吸管接種于試管或平皿時(shí),吸管尖不能觸及試管或平皿邊。接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作,接種細(xì)菌或樣品時(shí),吸管從包裝中取出后及打開試管塞都要通過火焰消毒。接種環(huán)或接種針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼全部金屬絲,必須時(shí)還要燒到環(huán)和針與桿的連接處。吸管吸取菌液或樣品時(shí),應(yīng)用相應(yīng)的橡皮頭吸取,不得直接用口吸。第四頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四(二)無菌室使用要求無菌室通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻璃,并要密封,不得隨意打開,并設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及推拉門,另設(shè)有小窗,以備進(jìn)入無菌間后傳遞物品。無菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔,工作后用2%-3%煤酚皂溶液消毒,拭擦工作臺面,不得存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。第五頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四無菌室使用前后應(yīng)將門關(guān)緊,打開紫外線,如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時(shí),需30W紫外燈,距離在1.0m處,照射時(shí)間不少于30min,使用紫外燈,應(yīng)注意不得直接在紫外線下操作,以免引起損傷,燈管每隔兩周需用酒精棉球輕輕拭擦,除去上面灰塵和油垢,以減少紫外線穿透的影響。第六頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四處理和接種食品標(biāo)本時(shí),進(jìn)入無菌室操作,不得隨意出入,如需要傳遞物品,可通過小窗傳遞。在無菌室內(nèi)如需要安裝空調(diào)時(shí),則應(yīng)有過濾裝置。第七頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四(三)消毒滅菌要求

微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等,必須經(jīng)滅菌后方能使用。1﹑干熱和濕熱高壓蒸汽鍋滅菌(1)滅菌前準(zhǔn)備(2)裝放干熱滅菌器(3)設(shè)備檢查第八頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四(4)干熱滅菌法(5)手提式高壓鍋或立式壓力蒸汽滅菌器的使用步驟(6)臥式壓力鍋蒸汽滅菌器的使用步驟2﹑間歇滅菌方法(1)滅菌方法(2)血清凝固器使用方法(3)煮沸消毒(4)滅菌后處理第九頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四(4)干熱滅菌法

此法適應(yīng)于在干熱情況下,不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品,較常用于玻璃器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。①器械、器皿應(yīng)清洗后再干烤,以防附著在表面的污物碳化。②滅菌時(shí)安放物品不能過擠,不要直接接觸底和箱壁,物品之間留有空隙。第十頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四③滅菌時(shí)將箱門關(guān)緊,接上電源,先將排氣孔打開約30min,排除滅菌器中的冷空氣,溫度升至160℃調(diào)節(jié)指示燈,維持1.5~2h。④滅菌完畢后或升溫過程中,須在60℃以下才能打開箱門。第十一頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四

(5)手提式高壓鍋或立式壓力蒸汽滅菌器的使用步驟①手提式高壓鍋在主體內(nèi)加入3L清水,立式高壓鍋加水16L(重復(fù)使用時(shí)應(yīng)將水量補(bǔ)足,水變混濁需更換)。②手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管插入消毒桶內(nèi)壁的方管中(無軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不得使用)。第十二頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四③蓋好頂蓋擰緊,勿使漏氣;置滅菌器于火源上加熱,立式壓力鍋通上電源,并打開頂蓋上的排氣閥放出冷氣(水沸騰后排氣10~15min)。

④關(guān)閉排氣閥,使蒸汽壓上升到規(guī)定要求,并維持規(guī)定時(shí)間(按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況而定)。第十三頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四⑤達(dá)到規(guī)定時(shí)間后,對需干燥的物品,立即打開排氣閥排出蒸汽,待壓力恢復(fù)到零時(shí),自然冷卻至60℃后開蓋取物,如為液體物品,不要打開排氣閥,而應(yīng)立即將鍋去除熱源,待自然冷卻,壓力恢復(fù)至零,溫度降到60℃以下再開蓋取物,以防突然減壓,液體劇烈沸騰或容器爆破。第十四頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四

(6)臥式壓力鍋蒸汽滅菌器的使用步驟①關(guān)緊鍋門,打開進(jìn)氣閥,將蒸汽引入夾層進(jìn)行預(yù)熱,夾層內(nèi)冷空氣經(jīng)阻氣器自動排出。②夾層達(dá)到預(yù)定溫度后,打開鍋室進(jìn)氣閥,將蒸汽引入鍋室,鍋室內(nèi)冷空氣經(jīng)鍋室阻氣器自動排出.第十五頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四③待鍋室達(dá)到規(guī)定的壓力與溫度時(shí),調(diào)節(jié)進(jìn)氣閥,保持103.4kPa、121℃15~30min滅菌。④自然或人工降溫至60℃再開門取物,不得使用快速排出蒸汽法,以防突然降壓,液體劇烈沸騰或容器爆破。第十六頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四⑤使用自動程序控制式壓力蒸汽滅菌器,在放好物品關(guān)緊門后,應(yīng)根據(jù)物品類別按動相應(yīng)開關(guān),以便按要求程序自動進(jìn)行滅菌,滅菌時(shí)必須利用附設(shè)儀表記錄溫度與時(shí)間以備查,操作要求應(yīng)嚴(yán)格按照廠家說明書進(jìn)行。第十七頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四2﹑間歇滅菌方法(1)滅菌方法是利用不加壓力的蒸汽滅菌,某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸汽滅菌容易破壞,可用此法滅菌。(2)血清凝固器使用方法培養(yǎng)基中含有血清或雞蛋特殊成分時(shí),因高熱會破壞其營養(yǎng)成分,故用低溫,可使用血清凝固,又可達(dá)到滅菌目的,在使用該法滅菌的血清等分裝時(shí),需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,試管、平皿也經(jīng)滅菌后使用。第十八頁,共十九頁,編輯于2023年,星期四(3)煮沸消毒(4)滅菌后處理滅菌后物品,按正常情況已屬無菌,從滅

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