活化血漿凝固時(shí)間對(duì)血小板輸注療效評(píng)價(jià)的研究

活化血漿凝固時(shí)間對(duì)血小板輸注療效評(píng)價(jià)的研究【摘要】本研究探討活化血漿凝固時(shí)間對(duì)評(píng)價(jià)血小板輸注療效的價(jià)值，用血小板聚集凝血因子分析儀檢測(cè)了20例血液病患者血小板輸注前后APCT的變化，并與血小板計(jì)數(shù)增加校正指數(shù)和實(shí)際血小板回收率進(jìn)行了對(duì)比研究。結(jié)果表明：輸注1小時(shí)、24小時(shí)后的APCT均明顯縮短，APCT由血小板輸注前的(±)秒分別縮短為輸注后1小時(shí)、24小時(shí)的(±)秒、秒,，而正常對(duì)照的APCT為(±)秒；按照CCI和PPR的判斷標(biāo)準(zhǔn)，有2例為血小板輸注無效，其輸注1小時(shí)、24小時(shí)的CCI值分別為7415、2966和6913、4988，PPR值分別為%、%和%、%。1例PPR均達(dá)血小板輸注無效標(biāo)準(zhǔn)，而CCI值均顯示血小板輸注有效；2例PPR均達(dá)血小板輸注無效標(biāo)準(zhǔn)，而輸注1小時(shí)的CCI值表示為血小板輸注有效，24小時(shí)的CCI值表示為血小板輸注無效。結(jié)論：APCT可以反映血小板數(shù)量和質(zhì)量的變化，也能較全面的評(píng)估血小板的輸注療效。

【關(guān)鍵詞】活化血漿凝固時(shí)間血小板輸注血小板

TestofActivatedPlasmaClottingTimetoAssessEfficacyofPlateletTransfusion

AbstractThestudywasaimedtoinvestigatethevalueofactivatedplasmaclottingtime(APCT)forestimatingtheefficacyofplatelettransfusiontherapy.Thereweretwentypatientswithhematologicaldiseases,whoreceivedtransfusionofplatelet,involvedinthetest.APCTwasdeterminedbeforeandaftertransfusionofthesepatients,thenAPCTwascontrastedwithcorrespondingCCIandPPR.Theresultsshowedthat1hourand24hourAPCTswereshortenedobviously.APCTbeforetransfusionwas(±)seconds,butthe1hourand24hourAPCTswereshortenedto(±)secondsand(±)secondsrespectively().AccordingtothejudgingcriteriaofCCIandPPR(CCIandPPRvaluesat1and24hoursaftertransfusionare7500,5000and30%,20%respectively,thetransfusionisinvalid),twopatientsreceivedinvalidtransfusion.Their1and24hourCCIswere7415,2966and6913,4988respectively.Their1and24hourPPRswere%,%and%,%respectively.Onepatient‘sPPRreachedthestandardofinvalidtransfusion,buthisCCIshowedavalidtransfusionhereceived.Twopatients‘PPRreachedthestandardofinvalidtransfusion,buttheir1hourCCIreachedthestandardofvalidtransfusion,andtheir24hourCCIreachedthestandardofinvalidtransfusion.ItisconcludedthatAPCTreflectsthevariationsofquantityandqualityofplateletsimultaneously,andcanevaluatepreciselytheefficacyofplatelettransfusion.

Keywordactivatedplasmaclottingtime;platelettransfusion;platelet

JExpHematol2007;15(1):108-111

血小板輸血主要是指針對(duì)血小板減少或血小板功能異常的患者進(jìn)行的血小板輸注替代性治療，目的在于止血或預(yù)防出血。評(píng)價(jià)血小板輸注療效的常用指標(biāo)為血小板計(jì)數(shù)增加校正指數(shù)和實(shí)際血小板回收率。這兩個(gè)指標(biāo)由于計(jì)算較繁瑣，并且需反復(fù)抽取病人靜脈血進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，故極不適于臨床應(yīng)用。血小板止血作用的大小不僅與血小板數(shù)量有關(guān)，還與血小板的功能密切相關(guān)，故尋找一種簡(jiǎn)便可行的血小板功能試驗(yàn)來作為血小板輸注療效的判斷指標(biāo)十分必要?；罨獫{凝固時(shí)間是一種新型的血小板功能試驗(yàn)，它反映了血小板的數(shù)量和質(zhì)量的變化［1］，此試驗(yàn)操作簡(jiǎn)便、快速，非常適合于臨床應(yīng)用。我們檢測(cè)了20例血液病患者血小板輸注前后APCT的變化，并與CCI和PPR進(jìn)行了對(duì)比研究，以評(píng)價(jià)APCT對(duì)判斷血小板輸注療效的效果。

研究對(duì)象

2006年1月-2006年6月，在東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院血液科住院的20例輸注血小板的患者，男9例，女11例，年齡從15-72歲。20例中骨髓增生異常綜合癥5例，白血病(M1-M5)化療后15例。20例患者均有皮膚、黏膜散在出血點(diǎn)或鼻衄或牙齦出血癥狀。每次輸注1個(gè)治療量10U的單采血小板，在血小板輸注前和輸注后1小時(shí)、24小時(shí)分別抽取患者靜脈血，以%的枸櫞酸鈉抗凝后，測(cè)定血小板數(shù)和活化血漿凝固時(shí)間。同時(shí)檢測(cè)100例單采血小板獻(xiàn)血者的APCT，作為正常對(duì)照。

主要儀器與試劑

血球計(jì)數(shù)儀為Sysmex公司產(chǎn)品(型號(hào)KX21)。LGPABER血小板聚集凝血因子分析儀為北京世帝儀器公司產(chǎn)品。陽離子沒食子酸丙酯溶液為美國(guó)ACS公司產(chǎn)品。mol/LCaCl2溶液自配。

血小板計(jì)數(shù)增加校正指數(shù)的計(jì)算［2］

計(jì)算公式

CCI=［PI×W×/N(1011)

×100×F］×100%]

式中W=患者體重。F=矯正系數(shù)，脾正常者為,脾大者為,無脾者為。

實(shí)際血小板回收率的計(jì)算［2］

計(jì)算公式

PPR=［PI×S(m2)/N(1011)］×100%

式中PI=輸注后Plt計(jì)數(shù)-輸注前Plt計(jì)數(shù)。N=輸入血小板的絕對(duì)數(shù)量。S=×身高(cm)+×體重(kg)

活化血漿凝固時(shí)間測(cè)定［3］

將ACD抗凝血在室溫或22℃條件下400×g離心8分鐘，分離出富含血小板血漿。在100μlPRP中加入終濃度為150μmol/L的CPG，37℃預(yù)溫3分鐘后，加入100μl的CaCl2溶液，計(jì)時(shí)，測(cè)定血漿凝固時(shí)間。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩樣本均數(shù)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)。

結(jié)果

20例病人輸注前的血小板計(jì)數(shù)為×109/L，且均有皮膚、黏膜散在出血點(diǎn)或鼻衄或牙齦出血癥狀。在血小板輸注1小時(shí)、24小時(shí)后的血小板計(jì)數(shù)均有不同程度的提高，出血癥狀消失，APCT均明顯縮短，APCT由血小板輸注前的(±)秒分別縮短為輸注后1小時(shí)、24小時(shí)的(±)秒、秒，正常對(duì)照的APCT為(±)秒；按照CCI判斷血小板輸注無效的標(biāo)準(zhǔn)(輸注后1小時(shí)CCI7500,24小時(shí)CCI5000)，有2例為血小板輸注無效,輸注后1小時(shí)、24小時(shí)的CCI值分別為7415、2966和6913、4988，此2例的PPR值也同樣符合血小板輸注無效的判斷標(biāo)準(zhǔn)(輸注后1小時(shí)PPR30%,24小時(shí)PPR20%)，其輸注1小時(shí)、24小時(shí)的PPR值分別為%、%和%、%。1例PPR均達(dá)血小板輸注無效標(biāo)準(zhǔn)，而CCI值均顯示血小板輸注有效；2例PPR均達(dá)血小板輸注無效標(biāo)準(zhǔn)，而輸注后1小時(shí)的CCI值表示為血小板輸注有效，24小時(shí)的CCI值表示為血小板輸注無效。結(jié)果見附表。

討論

目前，研究如何延長(zhǎng)采集血小板的保存時(shí)間，如何有效檢測(cè)血小板的功能，以及血小板輸注療效的判斷，已成為血小板研究的熱點(diǎn)［4，5］。現(xiàn)在臨床上，血小板輸注療效主要是通過觀察病人臨床出血表現(xiàn)是否得到改善、血小板計(jì)數(shù)升高的情況來判斷。用于判斷血小板輸注療效的指標(biāo)主要有血小板計(jì)數(shù)增加校正指數(shù)和實(shí)際血小板回收率。以PPR為判斷指標(biāo)，若輸注后1小時(shí)的PPR30%或輸注后24小時(shí)的PPR20%，通?？紤]為血小板輸注無效；以CCI為判斷指標(biāo)，若輸注后1小時(shí)的CCI7500或輸注后24小時(shí)的CCI5000，應(yīng)考慮血小板輸注無效。對(duì)于治療性血小板輸注，主要以血小板輸注后出血表現(xiàn)得到改善和輸注后1小時(shí)的血小板計(jì)數(shù)升高為參考指標(biāo)，由于血小板參與了止血而被消耗，使輸注后24小時(shí)后的血小板計(jì)數(shù)可能升高并不明顯，在我們總結(jié)的臨床資料中就有2例出血病人輸注血小板后出血得到了明顯改善，輸注后1小時(shí)的血小板計(jì)數(shù)明顯升高，而輸注后24小時(shí)的血小板計(jì)數(shù)升高并不明顯，其CCI和PPR值均為血小板輸注無效的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于預(yù)防性血小板輸注的療效主要觀察輸注后的血小板計(jì)數(shù)升高的情況，測(cè)定血小板輸注后1小時(shí)和24小時(shí)的血小板計(jì)數(shù)均十分重要。

CCI和PPR均是觀察血小板升高程度的指標(biāo)，這2項(xiàng)指標(biāo)是通過檢測(cè)患者輸注血小板1小時(shí)或24小時(shí)后的血小板計(jì)數(shù)并經(jīng)過計(jì)算獲得。對(duì)于血小板輸注療效的判斷，兩者有時(shí)并不一致，甚至?xí)a(chǎn)生相悖的結(jié)果。由于CCI是根據(jù)體表面進(jìn)行計(jì)算，減少了個(gè)體差異的影響，因此CCI對(duì)輸注療效的評(píng)估比PPR更準(zhǔn)確。

輸注后血小板數(shù)量明顯增高與血小板輸注效果有直接關(guān)系，但單憑血小板數(shù)量的變化來評(píng)價(jià)血小板輸注療效是不全面的。血小板在受者體內(nèi)發(fā)揮止血作用的強(qiáng)弱不但與輸注血小板的數(shù)量有關(guān)，更與其質(zhì)量，即功能密切相關(guān)。判斷血小板的輸注療效不能只看血小板數(shù)量的增高，更重要是要看輸注的血小板在病人體內(nèi)是否能發(fā)揮止血功能，輸注的量是否已達(dá)到了止血和預(yù)防出血的效果。對(duì)于治療性血小板輸注，可通過觀察病人出血的改善來推斷輸注血小板的質(zhì)量，但這需要一定時(shí)間才能做出判斷。對(duì)于預(yù)防性血小板輸注的患者，以血小板的數(shù)量就不能很好的判斷輸注的血小板在受者體內(nèi)的止血功能如何。

應(yīng)用血小板止血效能試驗(yàn)?zāi)茌^全面評(píng)判血小板的輸注療效，Salama等［6］應(yīng)用血小板功能分析儀評(píng)價(jià)了血小板輸注療效，并與CCI進(jìn)行了比較。結(jié)果表明PFA試驗(yàn)與血小板輸注療效明顯相關(guān)，而CCI與血小板輸注療效的相關(guān)性較差?；罨獫{凝固時(shí)間能較全面的反應(yīng)病人血小板數(shù)量、功能及凝血因子水平的變化。APCT與活化的部分凝血活酶時(shí)間不同，APTT是把接觸活化劑和磷脂混合物加入到乏血小板血漿中，經(jīng)孵育后，由接觸活化劑活化凝血因子，磷脂提供凝血催化表面，加入鈣離子引起凝血的發(fā)生，血漿的凝固時(shí)間即為APTT，APTT只反映凝血因子水平的變化；而APCT是在富含血小板血漿中加入接觸活化劑，加入的接觸活化劑不但激活凝血因子，同時(shí)激活血小板釋放磷脂絲氨酸，在鈣離子的存在下起動(dòng)凝血過程，當(dāng)血小板缺乏或功能不良時(shí)會(huì)引起APCT延長(zhǎng)。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，APCT能較好地反映血小板輸注后的療效。

【參考文獻(xiàn)】

1SchwartzKA,SchwartzDE,PittsleyRA,etal.Anewmethodformeasuringinhibitionofplateletfunctionbynonsteroidalantiinflammatorydrugs.JLabClinMed,2002;139:227-233

2高峰主編.輸血與輸血技術(shù).北京：人民衛(wèi)生出版社,2003:146-150

3XiaoHY,MatsubayashiH,BondermanDP,etal.GenerationofannexinVpositiveplateletsandsheddingofmicroparticleswithstimulusdependentprocoagulantactivityduringstorageofplateletsat4℃.Transfusion,2000;40:420-427

4黃成垠，唐榮才，