第十七章抗生素

第十七章抗生素第一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五隨著微生物學(xué)基礎(chǔ)理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，微生物在藥學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用越來越廣。在醫(yī)藥生產(chǎn)中已廣泛利用微生物發(fā)酵來制備各種藥物，形成一門獨(dú)立的微生物藥物學(xué)科。第二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

發(fā)酵（fermentation）：原來是指在厭氧條件下酵母菌分解碳水化合物釋放能量以及得到產(chǎn)物的過程，但目前工業(yè)上把發(fā)酵擴(kuò)展為利用培養(yǎng)微生物來制得產(chǎn)物的任何過程，其中也包括利用微生物的某些酶來轉(zhuǎn)化某些物質(zhì)使之成為所需物質(zhì)的過程.。第三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五發(fā)酵（fermentation）：原來是指在厭氧條件下酵母菌分解碳水化合物釋放能量以及得到產(chǎn)物的過程，目前工業(yè)上把發(fā)酵擴(kuò)展為利用培養(yǎng)微生物來制得產(chǎn)物的任何過程，其中也包括利用微生物的某些酶來轉(zhuǎn)化某些物質(zhì)使之成為所需物質(zhì)的過程.。第四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五發(fā)酵的分類：根據(jù)發(fā)酵時(shí)所需條件1、是否需要氧氣厭氧發(fā)酵與需氧發(fā)酵2、培養(yǎng)基的物理性狀固體發(fā)酵與液體發(fā)酵3、工藝淺層發(fā)酵與深層發(fā)酵

現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，使發(fā)酵工業(yè)的范疇突破了利用天然微生物的傳統(tǒng)發(fā)酵，逐步建立起新型的發(fā)酵，可生產(chǎn)天然微生物所不能產(chǎn)生或產(chǎn)生很少的特殊產(chǎn)物。第五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五本篇主要內(nèi)容：1、介紹微生物發(fā)酵制品包括抗生素、維生素、氨基酸、酶和酶抑制劑。2、微生物與藥物變質(zhì)的關(guān)系以及保證藥物制劑質(zhì)量所必需的各種微生物學(xué)檢驗(yàn)法。如:抗生素效價(jià)的微生物學(xué)檢定;藥物抗菌活性的測(cè)定;第六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第十七章抗生素共生現(xiàn)象：互相依存，作為整體如：根瘤菌與豆科植物拮抗：生活在一起，一種生物產(chǎn)生物質(zhì)抑制或殺滅另一種生物?？股鼐褪寝卓宫F(xiàn)象的體現(xiàn)。Fleming于1929年首先發(fā)現(xiàn)從青霉菌中產(chǎn)生的青霉素（penicillin），Waksman于1944年發(fā)現(xiàn)從鏈霉菌中產(chǎn)生的鏈霉素（streotomycin）。第七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五抗生素的現(xiàn)狀目前從自然界發(fā)現(xiàn)和分離的抗生素已達(dá)10，000多種，實(shí)際應(yīng)用于生產(chǎn)和醫(yī)療上的抗生素約有一百多種，連同各種半合成衍生物及其鹽類共約三百種。國外現(xiàn)有的主要抗生素在我國已有生產(chǎn)，其中的慶大霉素用我國自行分離的菌種生產(chǎn)。國外沒有的抗生素如創(chuàng)新霉素國外雖有，但我國發(fā)現(xiàn)新的成分或新的用途如平陽霉素（或博來霉素）第八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第一節(jié)

抗生素的概念和分類

一、抗生素的概念抗生素是指青霉素、鏈霉素等一類化合物的總稱，是人類控制、治療感染性疾病，保障身體健康及用來防治動(dòng)植物災(zāi)害的重要化合物。原始含義：是指那些由微生物產(chǎn)生的、能抑制其微生物生長的物質(zhì)。習(xí)慣上：將那些由微生物產(chǎn)生的，極微量即具有選擇性地抑制其他微生物或腫瘤細(xì)胞的天然有機(jī)化合物稱為抗生素。第九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五確切的含義：

抗生素是生物（包括微生物、植物和動(dòng)物）在其生命活動(dòng)中產(chǎn)生的（或由其他方法獲得的），能在低濃度下有選擇地抑制或影響其他生物機(jī)能的有機(jī)物。第十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

幾個(gè)注意點(diǎn)：確切含義是只有來自微生物的天然產(chǎn)物才能稱為抗生素，而現(xiàn)在把經(jīng)化學(xué)改造的天然來源的抗生素或微生物代謝的其他產(chǎn)物均稱為半合成抗生素。抗生素：是一個(gè)低分子量（指一個(gè)分子有一定的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其相對(duì)質(zhì)量最大可達(dá)數(shù)千）的微生物代謝產(chǎn)物，在低濃度（﹤1mg/ml）時(shí)能抑制其他微生物生長。第十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五醫(yī)療用抗生素需要以下要求：1、差異毒力大是指微生物或腫瘤細(xì)胞等靶體的抑制或殺滅作用，與其對(duì)機(jī)體損害程度的差異比較?？股氐牟町惗玖τ?，則愈有利于臨床應(yīng)用。如青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，而人及哺乳類動(dòng)物細(xì)胞不具備細(xì)胞壁，因而青霉素的差異毒力大。一般的化學(xué)消毒劑對(duì)微生物和機(jī)體的毒力無明顯差異。2、生物活性強(qiáng)大、有不同的抗菌譜是指在極微量的抗生素就對(duì)微生物具有抑制或殺滅作用。第十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五抗菌作用的強(qiáng)弱用最低抑菌濃度（MIC）來表示，即能抑制微生物生長所需的最低濃度（以μg/ml為單位），數(shù)值越小，則作用越強(qiáng)?？咕V：是指抗生素所能抑制或殺滅微生物的范圍和所需劑量。范圍廣者稱為廣譜抗生素，范圍窄稱為窄譜抗生素。良好的抗生素還應(yīng)具有不易使病原菌產(chǎn)生抗藥性，毒副作用小，不易引起超敏反應(yīng)，吸收快，血藥濃度高，不易被血清蛋白結(jié)合而失活。第十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

二、抗生素的分類

目前尚無完善的系統(tǒng)分類方法

1、根據(jù)抗生素的產(chǎn)生來源（1）細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素如多粘菌素和短桿菌肽（2）放線菌產(chǎn)生的抗生素主要來自鏈霉菌屬如:鏈霉素、卡那霉素、四環(huán)素（3）真菌產(chǎn)生的抗生素如青霉菌屬產(chǎn)生的青霉素，頭孢菌屬產(chǎn)生的頭孢菌素（4）植物和動(dòng)物產(chǎn)生的抗生素如:地衣和藻類植物產(chǎn)生的地衣酸被子植物蒜中制得的蒜素動(dòng)物臟器中制得的魚素第十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五2、根據(jù)抗生素的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類（1）β-內(nèi)酰胺類抗生素如：青霉素、頭孢菌素[特點(diǎn)]分子中有一個(gè)含四個(gè)原子的酰胺環(huán)，化學(xué)上稱為β-內(nèi)酰胺環(huán)。[來源]它們起初是從真菌產(chǎn)黃青霉菌和頭孢菌屬中發(fā)現(xiàn)，后來從放線菌的鏈霉菌屬和諾卡菌屬及其某些革蘭陰性菌中也發(fā)現(xiàn)。從生物合成角度看，被認(rèn)為是從氨基酸聚合而衍生的。第十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

[機(jī)制]抑制細(xì)菌細(xì)胞壁基本成分肽聚糖的合成，導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的破壞，具有殺菌作用。早期的青霉素只對(duì)革蘭陽性和陰性菌有效。對(duì)真菌無用（細(xì)胞壁不含肽聚糖），對(duì)支原體無效（無細(xì)胞壁）[使用注意問題]

除個(gè)別外，此類抗生素的毒性非常低。有時(shí)出現(xiàn)極為嚴(yán)重的超敏反應(yīng)。第十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五（2）四環(huán)類抗生素如金霉素、土霉素和四環(huán)素

[特點(diǎn)]

具有很廣的抗菌譜及較好的治療果[來源]不同種的鏈霉菌均能產(chǎn)生四環(huán)素類抗生素[結(jié)構(gòu)特點(diǎn)]由乙酸和丙二酸單位縮合的鍵環(huán)化而形成；由四個(gè)環(huán)線形相連而組成。[作用特點(diǎn)]抑制核糖體蛋白的合成，其作用是可逆的，因此具有抑制作用。抗菌譜廣即革蘭陽性與陰性菌、立克次體、衣原體和某些原蟲。由于其理化性質(zhì)（在中性PH條件下不溶水）所決定，天然產(chǎn)生的只能口服，化學(xué)半合成獲得了一些可用于注射的衍生物及作用周期較長的。第十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五（3）氨基糖苷類抗生素（氨基環(huán)醇類）[來源]包括很廣的由鏈霉菌、小單孢菌和芽孢桿菌產(chǎn)生的物質(zhì)。[化學(xué)特征]具有環(huán)狀氨基醇和與之相連的氨基糖。葡萄糖是氨基醇和氨基糖的來源。[作用機(jī)制]以不可逆的方式作用于核糖體而抑制蛋白質(zhì)的合成，具有殺菌作用，主要作用革蘭陽性菌。第十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五[代表藥物]鏈霉素（第一個(gè)發(fā)現(xiàn)，也是第一個(gè)對(duì)抗生素有效的抗生素）、卡那霉素、慶大霉素、妥布拉霉素和丁安卡那霉素。[特點(diǎn)]由于分子內(nèi)含許多羥基，此類抗生素水溶性非常好，因而不能口服，主要的副作用為腎和耳毒性。第十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五（4）大環(huán)內(nèi)酯類抗生素[化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)]具有一個(gè)由不少于12個(gè)碳原子，并由內(nèi)脂基團(tuán)使其環(huán)化。他們是鏈霉菌的典型產(chǎn)物，其生物合成是由一系列乙酸和丙酸單位縮合而成。[分類與作用特點(diǎn)]分兩類

a、抗細(xì)菌大環(huán)內(nèi)酯類抗生素

由14-16個(gè)碳原子構(gòu)成的內(nèi)酯環(huán)，至少有兩個(gè)糖分子；具有抑菌作用；抗菌譜局限于革蘭陽性菌和支原體；典型代表是紅霉素、竹桃霉素；為改善口服吸收率，還半合成了一些新的衍生物。第二十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

b、抗真菌和抗原蟲大環(huán)內(nèi)酯類抗生素

[特征]由約30個(gè)原子組成內(nèi)酯類，帶有羥基取代基團(tuán)包含一系列共軛的雙鍵，也稱為多烯類化合物，只有靜脈注射才有活性。

[機(jī)制]通過干擾細(xì)胞膜甾醇類合成誘導(dǎo)細(xì)胞膜畸變，因此對(duì)細(xì)菌無作用。毒副作用較大，因而只能有限的用于最需要的病例。

[代表藥物]兩性霉素B第二十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

(5)肽類抗生素

由氨基酸組成，經(jīng)常形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)；主要對(duì)革蘭陽性菌。短肽菌肽主要干擾細(xì)菌細(xì)胞膜功能；桿菌肽主要抑制細(xì)胞壁肽聚糖的合成。[代表藥物]多黏菌素---對(duì)革蘭陰性菌有效，作用于細(xì)胞膜；肽托霉素和雷膜拉寧—對(duì)細(xì)胞壁合成抑制作用。第二十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

（6）安莎霉素類60年代末期投入臨床使用，其典型結(jié)構(gòu)是具有一條脂肪鏈，連接兩個(gè)相對(duì)的芳香環(huán)，像是一條鏈子上的兩個(gè)籃子。它們由放線菌屬的多種類群所構(gòu)成，由一系列乙酸和丙酸單位縮合而成。如利福霉素（對(duì)革蘭陽性菌及分枝桿菌有極強(qiáng)的作用）、利福平（對(duì)分枝桿菌及葡萄球菌效果尤佳）。第二十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五（7）糖肽類抗生素（二丙庚肽類）

代表藥物為萬古霉素和替考拉寧。主要對(duì)革蘭陽性細(xì)菌有效，尤其是對(duì)耐β-內(nèi)酰胺類抗生素的葡萄球菌有效。第二十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

（8）抗腫瘤抗生素屬于不同化學(xué)類別，但都以不同機(jī)制作用于DNA復(fù)制。

放線菌素→由酚惡嗪酮環(huán)組成帶有二個(gè)相同的肽環(huán)，它們以其芳香環(huán)與DNA堿基嵌合，而影響DNA功能，在其真核細(xì)胞中主要干擾RNA合成。蒽環(huán)類化合物（柔紅霉素和阿霉素）→

具有四環(huán)結(jié)構(gòu)帶有一個(gè)取代的糖基，作用于拓?fù)洚悩?gòu)酶，使DNA斷裂。絲裂霉素C→具有三環(huán)結(jié)構(gòu)，使二個(gè)DNA鏈中間形成共價(jià)鍵橋。博來霉素→由輪生鏈霉菌產(chǎn)生的9肽混合物，以類酶反應(yīng)使DNA鏈斷裂。第二十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

（9）其他抗生素

氯霉素：抑制蛋白質(zhì)合成，有抑菌作用，

對(duì)革蘭陰性細(xì)菌尤其沙門菌有很好的效果。

林可霉素：抑制蛋白質(zhì)合成。

新生霉素：抑制DNA回旋酶的一個(gè)單位，

作用革蘭陽性菌和變形桿菌。

灰黃霉素：可以在體內(nèi)應(yīng)用的抗真菌抗生素，由真菌產(chǎn)生，具有芳香環(huán)結(jié)構(gòu)，生物合成是由乙酸和丙二酸單位縮合而成，抑制細(xì)胞支架的形成。第二十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

第二節(jié)抗生素產(chǎn)生菌的分離和篩選目前新抗生素的獲得途徑：

1、從自然界分離篩選新抗生素產(chǎn)生菌從土壤到海洋一般常見到極端微生物從微生物到植物、海洋生物。2、改造現(xiàn)有的已知抗生素的產(chǎn)生菌，再經(jīng)篩選獲得新得抗生素產(chǎn)生菌。3、從已知的抗生素進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，經(jīng)篩選獲得新的半合成抗生素。第二十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

4、采用新的篩選方法

如：應(yīng)用定向生物合成和突變生物合成的原理，以及培養(yǎng)超敏細(xì)菌以尋找微量的抗生素，選用新的腫瘤模型來篩選抗腫瘤的抗生素。第二十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五5、采用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)產(chǎn)生新抗生素（1）基因克隆產(chǎn)生新抗生素：首先獲得某已知抗生素的結(jié)構(gòu)基因，然后通過一定的載體將基因片段導(dǎo)入特定的另一種抗生素產(chǎn)生菌中，則可能產(chǎn)生完全符合人們?cè)O(shè)計(jì)要求的新抗生素。（2）沉默基因的激活：引入抗生素生物合成的調(diào)控基因，有可能激發(fā)抗生素產(chǎn)生菌處于休眠狀態(tài)或沉默狀態(tài)的基因系統(tǒng)，從而開啟另一結(jié)構(gòu)抗生素的生物合成開關(guān)，得到新抗生素。第二十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

絕大多數(shù)抗生素的原始產(chǎn)生菌是從自然界分離篩選獲得，以傳統(tǒng)的分離土壤放線菌為例，說明新抗生素產(chǎn)生菌的常規(guī)分離和篩選過程。

第三十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五一、土壤微生物的分離1、采土以春、秋兩季采土為宜。去除表土，采取5-10cm深處的土壤，裝入無菌容器。2、分離菌株將2-4克土壤均勻散布水中待其沉降，上清部分經(jīng)適當(dāng)稀釋后（一般為10-3-104），涂布于適宜培養(yǎng)基中，并培養(yǎng)至單菌落出現(xiàn)，挑取單個(gè)菌落移種純培養(yǎng)，根據(jù)菌落的特征，初步排除相同菌。第三十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五二、篩選：是指從大量待篩選微生物中，盡快地鑒別出有實(shí)用價(jià)值的抗生素產(chǎn)生菌的實(shí)驗(yàn)過程。

1、篩選模型：是指篩選工作中所使用的實(shí)驗(yàn)菌。為了避免感染病原菌的危險(xiǎn)，盡可能選用非致病的、且能代表某些類型致病菌的微生物作為實(shí)驗(yàn)菌。

第三十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

表17-1常用的實(shí)驗(yàn)菌和代表的致病微生物實(shí)驗(yàn)菌代表的致病微生物

金黃色葡萄球菌革蘭陽性球菌枯草芽孢桿菌革蘭陽性桿菌恥垢分支桿菌結(jié)核分枝桿菌大腸埃希菌革蘭陰性桿菌白假絲酵母菌酵母狀真菌曲霉絲狀真菌噬菌體病毒、腫瘤細(xì)胞第三十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五2、篩選方法

抗菌抗生素一般采用瓊脂擴(kuò)散法。

先制備含實(shí)驗(yàn)菌的平板，然后以無菌濾紙片蘸取各放線菌的搖瓶培養(yǎng)發(fā)酵液或切取一定大小的放線菌瓊脂培養(yǎng)塊，置于含菌平板上，培養(yǎng)后觀察有無抑菌圈產(chǎn)生。

第三十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

三、早期鑒別

經(jīng)過篩選的陽性菌應(yīng)進(jìn)一步做抗菌譜和抗藥譜的測(cè)定，對(duì)有價(jià)值的產(chǎn)生菌必須從產(chǎn)生菌及自該菌產(chǎn)生的抗生素兩方面進(jìn)行鑒定。

1、抗生素產(chǎn)生菌的鑒別

通過形態(tài)、培養(yǎng)、生化反應(yīng)等實(shí)驗(yàn)對(duì)抗生素產(chǎn)生菌進(jìn)行初步的分類鑒定。第三十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五2、抗生素的鑒別常用理化方法如：紙層析法測(cè)定抗生素的極性和在各種溶媒中的溶解度。紙電泳法判斷抗生素是酸性、堿性、中性或兩性。薄層層析法、高效液相層析法、紫外分光光度法等方法測(cè)定新抗生素的理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)。

第三十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

四、分離精制

將可能產(chǎn)生新抗生素的放線菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，然后選擇合適的方法從培養(yǎng)液中提取有效抗生素，進(jìn)一步精制純化。在此過程中，須跟綜測(cè)定抗生素的生物活性。第三十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五五、臨床前實(shí)驗(yàn)研究

如：進(jìn)行動(dòng)物毒性實(shí)驗(yàn)（急性、亞急性、慢性）動(dòng)物治療保護(hù)性實(shí)驗(yàn)臨床前藥效實(shí)驗(yàn)和藥理實(shí)驗(yàn)（抗生素在體內(nèi)吸收、分布、排泄），經(jīng)系列實(shí)驗(yàn)認(rèn)為確有前途的新抗生素經(jīng)有關(guān)部門審查合格后方可進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)。國家制定了《藥品臨床前研究質(zhì)量管理規(guī)范》，（簡稱GLP）。第三十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五六、臨床實(shí)驗(yàn)

《藥品臨床實(shí)驗(yàn)管理規(guī)范》簡稱GCP，是臨床實(shí)驗(yàn)的全過程，包括方案設(shè)計(jì)、組織實(shí)施、監(jiān)視、審核、記錄、分析、總結(jié)和報(bào)告的標(biāo)準(zhǔn)。第三十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

第三節(jié)抗生素的制備

抗生素的制備分為發(fā)酵和提取兩個(gè)階段。

抗生素的發(fā)酵：是指抗生素產(chǎn)生菌在一定培養(yǎng)基條件下生物合成抗生素的過程，該過程又分為菌體生長和抗生素生物合成兩個(gè)部分。發(fā)酵后存在于發(fā)酵液中的抗生素需用一系列物理和化學(xué)方法進(jìn)行提取和精制，得到抗生素成品。第四十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五抗生素生產(chǎn)大致分為二個(gè)階段：發(fā)酵和提取一般流程如下：

菌種→孢子制備→種子制備→發(fā)酵→發(fā)酵液預(yù)處理及壓濾→提取及精制→成品檢驗(yàn)→成品包裝第四十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五一、發(fā)酵階段（一）現(xiàn)代抗生素發(fā)酵的一般特點(diǎn)

1、需氧發(fā)酵抗生素產(chǎn)生菌多為需氧菌，需要在發(fā)酵的過程中不斷通入無菌空氣，并進(jìn)行機(jī)械攪拌，以提供足夠氧來進(jìn)行生物代謝和生物合成。

2、深層發(fā)酵（或?yàn)槌翛]發(fā)酵），在大型發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行，可進(jìn)行較大規(guī)模的生產(chǎn)。

3、純種發(fā)酵在純種培養(yǎng)的抗生素發(fā)酵工業(yè)中，應(yīng)防止雜菌及噬菌體污染。第四十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五(二）一般生產(chǎn)流程抗生素發(fā)酵階段一般主要包括：孢子制備、種子制備和發(fā)酵，這是進(jìn)行微生物逐步擴(kuò)大培養(yǎng)過程。1、孢子制備目的是將沙土管保存的菌種進(jìn)行培養(yǎng)，以制備大量孢子供下一步種子制備之用，一般于試管、扁瓶或搖瓶內(nèi)進(jìn)行。2、種子制備目的是使有限數(shù)量的孢子發(fā)芽繁殖，獲得足夠菌絲體以供發(fā)酵之用。在種子罐內(nèi)進(jìn)行。通過種子制備，可以縮短發(fā)酵罐內(nèi)菌絲體繁殖生長的時(shí)間，增加抗生素合成的時(shí)間。一般通過種子罐1-3次，再移種到發(fā)酵罐中，分別為二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)發(fā)酵。第四十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

3、發(fā)酵關(guān)鍵階段目的是在人工培養(yǎng)條件下使菌絲體產(chǎn)生大量的抗生素。在發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行。發(fā)酵注意事項(xiàng)：

1、無菌操作污染雜菌主要是種子和空氣過濾系統(tǒng)污染，各部件滲漏及操作。在發(fā)酵的各階段應(yīng)取樣進(jìn)行雜菌檢查。

2、營養(yǎng)需要發(fā)酵培養(yǎng)基應(yīng)供給微生物生產(chǎn)繁殖以及生物合成所需的營養(yǎng)，其原料應(yīng)盡可能價(jià)廉，來源要廣。

3、pH值：加入使培養(yǎng)基pH值恒定的化合物：硫酸銨、硝酸鈉。第四十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五4、溫度酶的催化需要合適的溫度?？赏ㄟ^罐的夾套或蛇管導(dǎo)入冷水或熱水以控制罐溫。5、前體

前體→是抗生素分子的前身或其組成的一部分，直接參與抗生素的生物合成而自身無顯著變化。在一定條件下，加入前體可控制抗生素的合成方向，并增加產(chǎn)量。如：在青霉素G的生產(chǎn)中常加入苯乙酸或苯乙酰胺作為前體；在紅霉素生產(chǎn)中添加丙酸、丙醇鹽作為前體。但前體一般對(duì)產(chǎn)生菌有一定的毒性。第四十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

6、通氣、攪拌及消沫發(fā)酵過程中利用溶解氧，因此必須不斷經(jīng)空氣過濾系統(tǒng)輸入無菌空氣，同時(shí)在發(fā)酵罐內(nèi)設(shè)置攪拌和擋板以增加通氣效果。為防止泡沫造成的逃液和滲漏，需用消沫漿或消沫劑。7、發(fā)酵終點(diǎn)判斷定期取樣，測(cè)定抗生素含量、發(fā)酵液的pH值、含糖量和含氮量、菌絲含量及形態(tài)觀察。放罐應(yīng)在產(chǎn)量的高峰期，過早或過遲都會(huì)影響抗生素含量。第四十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五二、發(fā)酵液預(yù)處理及提取階段預(yù)處理時(shí)應(yīng)盡可能使抗生素轉(zhuǎn)入以后要處理的相中（多數(shù)是液相），可用調(diào)節(jié)pH值呈酸性或堿性的方法。預(yù)處理的主要任務(wù)是除去發(fā)酵液內(nèi)的雜質(zhì)（Ca、Mg、Fe）及蛋白質(zhì)，并經(jīng)過過濾，使菌絲與濾液分開，便于進(jìn)一步提取。第四十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五常用的提取方法主要有四類：

1、溶媒萃取法是用一種溶劑將物質(zhì)從另一種溶劑中提取出來的方法，這兩種溶劑不能互溶或只部分互溶，能形成便于分離的兩相。目前微生物制藥生產(chǎn)中常用的提取方法。先進(jìn)的萃取設(shè)備：ABE-216萃取機(jī)

2、離子交換法離子樹脂交換法是應(yīng)用離子交換樹脂作為吸附劑，將發(fā)酵液中物質(zhì)選擇性地吸附至離子交換樹脂上，然后用合適的洗脫劑將抗生素從樹脂上洗脫下來，達(dá)到分離、濃縮、提純的目的。由于費(fèi)用較低，成為提取主要方法。如：鏈霉素和卡那霉素的生產(chǎn)。第四十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

3、沉淀法是利用等電點(diǎn)或能與酸、堿、金屬鹽類形成不溶性或溶解度極小的復(fù)鹽沉淀出抗生素。此法簡便、經(jīng)濟(jì)。如：四環(huán)素4、吸附法是利用適當(dāng)?shù)奈絼?，在一定的PH條件下，使發(fā)酵液中抗生素被吸附劑吸附，然后再以適當(dāng)?shù)南疵搫⑽降目股貜奈絼┥舷疵撓聛?，達(dá)到濃縮和提純目的。隨著大網(wǎng)格聚合物吸附劑的合成成功，吸附法得到新的發(fā)展。第四十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五抗生素提取得到粗品后應(yīng)加以精制，上述方法均可使用。

一般用多級(jí)溶劑萃取或多級(jí)吸附、洗脫或薄層層析、柱層法、葡聚糖凝膠過濾等。因一般抗生素的穩(wěn)定性差，應(yīng)避免常壓蒸餾、升華、過酸或過堿等方法。第五十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

第四節(jié)抗生素的生物合成機(jī)制

一、次級(jí)代謝產(chǎn)物的概念次級(jí)代謝產(chǎn)物：是指那些由微生物合成的，但對(duì)微生物的生長、繁殖無明顯影響的各種代謝產(chǎn)物，如抗生素。特點(diǎn)：1、對(duì)微生物的生長、繁殖無明顯影響。初級(jí)代謝產(chǎn)物往往是微生物生長所不可缺少的物質(zhì)。

2、與初級(jí)代謝緊密相連先有微生物生長，后有抗生素的合成。

3、在一定條件下能大量合成。第五十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五二、抗生素生物合成的代謝途徑

1、抗生素生物合成的大致步驟屬于次級(jí)代謝物營養(yǎng)物攝入細(xì)胞→轉(zhuǎn)化為初級(jí)代謝各中間產(chǎn)物→合成小分子的抗生素前體物質(zhì)→前體物質(zhì)經(jīng)修飾、碳架重排等→進(jìn)入各抗生素所特有的合成途徑→聚合或裝配，合成抗生素。2、抗生素合成的有關(guān)代謝途徑①脂肪酸代謝②氨基鹽代謝③糖代謝④嘌呤及嘧啶代謝⑤芳香族生物合成⑥一碳單位的甲基庫大多數(shù)抗生素前體物質(zhì)是經(jīng)多條途徑合成。第五十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五三、抗生素的生物合成及調(diào)控1、青霉素的生物合成

通過氨基己二酸途徑（AAA）

第五十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第五十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

α-酮戊二酸+乙酰CoA

↓高枸櫞酸↓高順烏頭酸↓高異枸櫞酸↓

α-氨基己二酸（α-AAA）

α-AA-δ-半縮醛↙↘L-α-AA-L-cys↙酵母氨酸↘L-AA-L-cys-D-val↙↘L-α-AA-6-APA賴氨酸↙↘←苯乙酸

6-APA青霉素G第五十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五2、青霉素生物合成的調(diào)控

青霉素生物合成的過程與一般次級(jí)代謝產(chǎn)物的生物合成一樣，同樣受酶及外界的調(diào)控。（1）賴氨酸對(duì)青霉素生物合成的反饋抑制作用由于初級(jí)代謝產(chǎn)物賴氨酸與青霉素具有共同的前體α-AAA，因此賴氨酸對(duì)代謝途徑的反饋抑制作用，使得共同中間體的合成也受到抑制，因而青霉素的合成受抑制。

第五十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五（2）糖分解代謝物的阻抑作用

在青霉素的生物合成中，加入過量的葡萄糖能抑制青霉素的合成，而加入乳糖就無此影響。因?yàn)槠咸烟堑姆纸猱a(chǎn)物阻抑青霉素合成中的關(guān)鍵酶（?；D(zhuǎn)移酶）的產(chǎn)生，導(dǎo)致青霉素不能合成。而乳糖氧化緩慢，它被水解為可利用的單糖的速度恰好符合青霉生長后期合成青霉素的需要。

第五十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

第五節(jié)抗生素的主要作用機(jī)制一、抑制細(xì)胞壁的合成

多種抗革蘭陽性菌的抗生素，主要與抑制肽聚糖的合成有關(guān)，而肽聚糖合成的阻斷，就使得細(xì)胞壁無法完全形成。第五十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五肽聚糖的合成以大腸埃希菌，其肽聚糖的生物合成分為三個(gè)階段：1、基本單元的形成肽聚糖是由N-乙酰胞壁酸（MurNAc）、N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）及短肽側(cè)鏈組成。它的前體物質(zhì)是UDP-MurNAc-五肽和UDP-GlcNAc。UDP-GLcNAc由糖酵解的中間產(chǎn)物6-磷酸果糖生成，UDP-GlcNAc與磷酸烯醇式丙酮酸縮合，雙鍵還原形成UDP-MurNAc，L-Ala、D-Glu和間-DAP相繼加到UDP-MurNAc上，生成中間物胞壁酰三肽。所有的反應(yīng)均在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。第五十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

2、單體的形成及跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)

3、肽聚糖鏈的組裝及三維結(jié)構(gòu)的構(gòu)建合成的最后幾步是由幾種酶催化完成；①轉(zhuǎn)糖基酶②轉(zhuǎn)肽酶③D-羧肽酶④內(nèi)肽酶反應(yīng)發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)膜外表面.第六十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五金黃色葡萄球菌

①五肽中第三位氨基酸是Lys，而不是DAP；第二位氨基酸是Gln，而不是Glu。②二糖五肽合成后，五個(gè)Gly分子通過肽鍵連接在Lys的ε-NH2上③轉(zhuǎn)肽反應(yīng)在五肽次末端D-Ala的羧基和末端Gly的氨基之間。第六十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五抑制細(xì)胞壁肽聚糖合成的抗生素有：1）環(huán)絲氨酸2）萬古霉素和桿菌肽3）β-內(nèi)酰胺類抗生素，如青霉素和頭孢菌素第六十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五二、影響細(xì)胞膜的功能

作用于細(xì)菌細(xì)胞膜抗生素對(duì)細(xì)菌有較強(qiáng)的殺傷作用，如：多黏菌素，屬多肽類抗生素，分子內(nèi)含堿性親水性（多肽）基團(tuán)與親脂性脂肪酸鏈。親水性基團(tuán)可以與細(xì)菌細(xì)胞膜磷脂上的磷酸基形成復(fù)合物，而親脂鏈可以插入細(xì)胞膜上的脂肪鏈之間，因而解聚細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性增加，導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的主要成分如氨基酸、核酸和鉀離子等滲漏，細(xì)菌因而死亡。

第六十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

短桿菌肽：為多肽類抗生素，對(duì)革蘭陽性菌有較強(qiáng)的殺菌作用，其分子的氨基酸側(cè)鏈也有親水性和輸水性兩種基團(tuán)，也可與細(xì)胞膜的脂蛋白或脂質(zhì)結(jié)合，影響細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性和其他功能。兩性霉素B是一種抗真菌的抗生素，對(duì)新型隱球菌和白假絲酵母菌等具有良好的抗菌作用，其作用機(jī)制主要是能和敏感菌細(xì)胞膜上的甾醇部分結(jié)合而改變了膜的通透性，使細(xì)胞內(nèi)鉀離子和其他成分滲出膜外，從而抑制了真菌的生長。第六十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五三、干擾蛋白質(zhì)合成

抑制蛋白質(zhì)合成過程的抗生素較多，主要有氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類以及其他一些抗生素。它們作用于蛋白質(zhì)的起始、延長、終止各階段的不同環(huán)節(jié)。如：鏈霉素對(duì)蛋白質(zhì)的起始、延長、終止各階段均有影響，但其作用是能不可逆地與細(xì)菌核糖體30S亞基結(jié)合，抑制蛋白質(zhì)合成的起始及密碼子識(shí)別階段。

第六十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

四環(huán)素類與核糖核蛋白體30S亞基16SrRNA上靠近與氨基酰-tRNA連接的區(qū)域形成可逆復(fù)合物，使氨基酰-tRNA不能與結(jié)合部位結(jié)合，阻斷蛋白質(zhì)合成的肽鏈延長。這類抗生素對(duì)細(xì)菌有選擇性毒性，因?yàn)樵思?xì)胞中的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)體系能使藥物特異性透過細(xì)胞，真核生物細(xì)胞卻能主動(dòng)外排此類抗生素。

大環(huán)內(nèi)脂類抗生素如紅霉素與核糖核蛋白體50S亞基結(jié)合，選擇性地抑制原核細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成林可霉素與核糖核蛋白體50S亞基結(jié)合，抑制蛋白質(zhì)合成的肽鏈的延長。第六十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五四、抑制核酸的合成如：博來霉素是引起DNA單鏈斷裂，也可使DNA一條鏈上的脫氧核糖和磷酸連接部分?jǐn)嗔?，形成缺口，還可抑制DNA連接酶和DNA聚合酶，干擾DNA的復(fù)制。

第六十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五利福霉素和利福平可直接作用于RNA聚合酶而抑制RNA的合成，主要是特異性抑制RNA合成的初始步驟，對(duì)原核生物細(xì)胞RNA合成有選擇性抑制作用，低濃度可抑制細(xì)胞RNA聚合霉，而高濃度對(duì)DNA聚合酶幾乎無作用，利福霉素類抗生素還能抑制RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶（逆轉(zhuǎn)錄酶）和RNA復(fù)制酶。蒽環(huán)類抗生素：如阿霉素可致DNA斷裂、染色體交換率增高、染色體畸變、抑制DNA復(fù)制第六十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五五、干擾細(xì)胞的能量代謝和電子傳遞體系由于大多數(shù)毒性較強(qiáng)，限制在臨床上的廣乏應(yīng)用。

如：抗霉素A是呼吸鏈電子傳遞體系的抑制劑，可以使細(xì)胞色素b變成還原狀態(tài)，細(xì)胞色素c1變成氧化狀態(tài)，抑制細(xì)胞色素b和細(xì)胞色素c1間的電子傳遞。另外，抗霉素還能抑制細(xì)胞能量代謝中的氧化磷酸化過程，其機(jī)制可能是阻抑電子傳遞體系放出的自由能形成高能中間體向ATP生成的過程。第六十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

第六節(jié)

抗藥性

常見的臨床致病菌金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌、大腸埃希菌、志霍菌屬等抗藥情況突出。所引起的各種感染已成為臨床治療上的一大難題。第七十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五一、抗藥性的基本概念

抗藥性（drugresistance）：

指在微生物或腫瘤細(xì)胞多次與藥物接觸發(fā)生敏感性降低的現(xiàn)象，是微生物對(duì)藥物所具有的相對(duì)抗性?？顾幮缘某潭纫话阋栽撍帉?duì)某種微生物的最小抑菌濃度來衡量。

第七十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

有些微生物由于具有一些獨(dú)特的結(jié)構(gòu)或代謝，天生對(duì)藥物不敏感，根據(jù)抗藥性的概念，就不能稱之為抗藥性，這種現(xiàn)象可稱為天然不敏感性（過去稱為固有抗藥性）。如：銅綠假單胞菌對(duì)多種藥物不敏感。第七十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

微生物個(gè)體對(duì)原來敏感的抗生素通過遺傳性的改變而獲得了抗藥性，可稱之為獲得抗藥性，常常是臨床上不合理用藥或長期用藥之后表現(xiàn)出的抗藥性。第七十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五多重抗藥性（multipledrugresistance）：

指某一些微生物可同時(shí)對(duì)兩種以上作用機(jī)制不同的藥物所產(chǎn)生的抗藥性，也稱為多劑抗藥性，這是由于多重抗藥性菌株的遺傳物質(zhì)上帶有多種抗藥性基因。第七十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

交叉抗藥性（crossdrugresistance）：有些微生物對(duì)結(jié)構(gòu)類似或作用機(jī)制類似的抗生素均有抗藥性的現(xiàn)象。賴藥性（drugdependence）：由于基因突變而致的抗藥性，不僅對(duì)該藥具有抗性，而且需要該藥物作為特殊營養(yǎng)因素，這種現(xiàn)象稱為賴藥性。第七十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五耐受性（tolerance）：有一些微生物對(duì)藥物抑菌作用的敏感性未改變，而對(duì)藥物的殺菌作用具有相對(duì)抗性，即該菌在最低抑菌濃度時(shí)仍受到抑制，但最小殺菌濃度提高，抗生素此時(shí)表現(xiàn)的是抑菌，而不是殺菌作用，這種現(xiàn)象稱為耐受性。第七十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五二、抗藥性產(chǎn)生的遺傳學(xué)機(jī)制微生物對(duì)藥物的抗藥性可由染色體或質(zhì)粒，或兩者兼有介導(dǎo)。大多數(shù)抗藥性由質(zhì)粒編碼，少數(shù)由染色體編碼。產(chǎn)生抗藥性的原因可能是染色體或質(zhì)粒上帶有與抗藥性有關(guān)的基因。如：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌，帶有一種與抗藥性相關(guān)的mecA基因。有些具有多重抗藥性的菌株，可能含有兩個(gè)以上的抗藥質(zhì)粒，或其抗藥質(zhì)粒上可能含有多個(gè)抗藥基因。第七十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

1、自發(fā)突變加藥物選擇一般認(rèn)為，抗藥菌所含的抗藥基因是由敏感菌的遺傳物質(zhì)自發(fā)突變產(chǎn)生的，但突變率極低，在10-10-10-6。極少量的抗藥菌存在于大量的敏感菌不足為害，但經(jīng)臨床頻繁使用抗生素后，藥物殺死或抑制敏感菌的生長，而抗藥性細(xì)菌繼續(xù)生長繁殖，無形中對(duì)抗藥菌起了選擇作用，造成抗藥菌株的大量增殖，形成抗藥菌系。

許多實(shí)驗(yàn)證明，抗藥性的產(chǎn)生不是由于微生物與藥物接觸而產(chǎn)生的，而是自發(fā)突變加上藥物選擇的結(jié)果。第七十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五2、細(xì)胞間抗藥性的基因轉(zhuǎn)移

染色體上的抗藥性可以通過三種機(jī)制由一個(gè)細(xì)菌傳遞到另一個(gè)細(xì)菌：1）接合帶有抗藥性基因的質(zhì)?？勺孕袕?fù)制，代代相傳，并在不同種屬間（特別是腸道）進(jìn)行轉(zhuǎn)移，而導(dǎo)致抗藥性的廣泛散播。如：1958年日本爆發(fā)痢疾大流行發(fā)現(xiàn)：攜帶黃胺、四環(huán)素、鏈霉素、氯霉素等抗藥基因的大腸埃希菌在腸道內(nèi)通過接合將多種抗藥性基因轉(zhuǎn)移給痢疾桿菌，從而抗藥性的散播。第七十九頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五2）轉(zhuǎn)導(dǎo)通過噬菌體將細(xì)菌染色體片段由供體菌株向受體菌株轉(zhuǎn)移。當(dāng)轉(zhuǎn)導(dǎo)片段中含有抗藥性的遺傳因子時(shí)，轉(zhuǎn)導(dǎo)將導(dǎo)致抗藥性的傳播。但頻率不高。3）轉(zhuǎn)化不重要4）一些微生態(tài)制劑的活菌細(xì)胞中可能攜帶有一定的抗藥性基因，由于廣泛大量地被服用，也可能造成抗藥性的傳播。5）轉(zhuǎn)座子在細(xì)胞間抗藥性的基因轉(zhuǎn)移中，起重要作用。第八十頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五三、抗藥性產(chǎn)生的生物化學(xué)機(jī)制

是指抗藥菌遺傳學(xué)上的改變?cè)谏锘瘜W(xué)上的表現(xiàn)。

主要有三方面：

1、產(chǎn)生使抗生素結(jié)構(gòu)改變的酶（即鈍化酶）一些抗藥菌產(chǎn)生能使抗菌藥物活性降低或完全失活的酶類（包括組成酶和誘導(dǎo)酶）最典型代表：β-內(nèi)酰胺類抗生素，由于抗藥菌產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶（包括青霉素酶、頭孢菌素酶等），而使抗生素水解滅活。第八十一頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

細(xì)菌

β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生一般兩種情況：

1、與具有誘導(dǎo)酶作用的藥物接觸，酶被誘導(dǎo)產(chǎn)生，大多數(shù)是胞外酶，此類酶一般由質(zhì)粒編碼,在革蘭陽性菌株的抗藥菌中約占90%.

2、細(xì)菌發(fā)生自發(fā)突變，β-內(nèi)酰胺酶可以穩(wěn)定地產(chǎn)生，與誘導(dǎo)藥物無關(guān)，是一種組成酶，常常結(jié)合在細(xì)胞膜上，屬于固有的胞內(nèi)酶。氨基糖苷類抗生素的抗藥菌產(chǎn)生乙?；D(zhuǎn)移酶、磷酸轉(zhuǎn)移酶、腺苷酸轉(zhuǎn)移酶，以及氯霉素類抗藥菌產(chǎn)生的CM-乙酰基轉(zhuǎn)移酶，均屬抗藥酶（鈍化酶）類。第八十二頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五2、抗生素作用靶位的修飾

許多抗生素通過使作用靶位失活而發(fā)揮作用。由于基因突變，一些細(xì)菌形成抗生素不能與之結(jié)合的作用靶位，或者即使與之結(jié)合形成復(fù)合物，但靶位仍能保持其功能，微生物就出現(xiàn)抗藥性。如：對(duì)鏈霉素抗藥的突變株，就是由于抗藥菌染色體上的str基因發(fā)生突變，使得核糖體30s亞基上的S12蛋白的構(gòu)型發(fā)生改變，而核糖體上的S12蛋白與鏈霉素和核糖體RNA復(fù)合體的形成有關(guān)，因而使鏈霉素不能與核糖體結(jié)合，因而不能抑制蛋白質(zhì)合成而產(chǎn)生抗藥性。第八十三頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

青霉素的原始作用靶位是青霉素結(jié)合蛋白，它們是與肽聚糖交聯(lián)有關(guān)的酶類，抗藥菌的結(jié)合蛋白數(shù)目減少、類型改變、與抗生素親和力下降，即酶的性質(zhì)發(fā)生改變，則造成此類抗生素的失活。黃胺類抗藥菌株

由于基因突變，改變了二氫葉酸合成酶的性質(zhì)，合成了另一種對(duì)黃胺不敏感的酶類，在黃胺存在情況下，仍能合成大量二氫葉酸，使代謝正常進(jìn)行，由此而產(chǎn)生抗藥性。第八十四頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五3、細(xì)胞膜通透性改變由于細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變致使藥物進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)減少，就使得微生物細(xì)胞表現(xiàn)出抗藥性。如：抗四環(huán)素的細(xì)菌可能是因?yàn)橐恍┡c抗生素透入細(xì)胞相關(guān)的膜孔蛋白結(jié)構(gòu)上的改變，降低細(xì)胞膜的餓通透性而使藥物的透入濃度降低，另外其細(xì)胞膜上可能還存在有一種使藥物外排的機(jī)制，在降低藥物攝入的同時(shí)，促使藥物的外排，使之達(dá)不到抑制濃度，因而產(chǎn)生抗藥性。第八十五頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

銅綠假單胞菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素具有天然不敏感性，其原因之一就是其細(xì)胞膜上缺乏幫助轉(zhuǎn)運(yùn)這類藥物的膜孔蛋白或可利用的膜孔蛋白數(shù)量極少，使得抗生素進(jìn)入較少。

微生物對(duì)抗生素的抗藥性產(chǎn)生存在著不同的生物化學(xué)機(jī)制，有的與抗生素的作用有關(guān)，有的則與抗生素的作用機(jī)制無關(guān)。對(duì)同一種抗生素，可能存在不同機(jī)制抗藥的菌株。當(dāng)兩種抗生素作用于相同位點(diǎn)時(shí)，常出現(xiàn)交叉抗藥性。第八十六頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五四、抗藥性的控制

1、合理使用抗生素不必使用抗生素時(shí)盡可能不用，防止交叉抗藥性。同時(shí)注意聯(lián)合用藥，因每一種藥物在代謝過程中發(fā)生作用的部位不同，聯(lián)合服用兩種藥物可起到協(xié)同作用。

2、尋找新藥尋找具有新的化學(xué)結(jié)構(gòu)的新抗生素以及新的酶抑制劑，改造現(xiàn)有的抗生素（包括對(duì)現(xiàn)有的產(chǎn)生菌和抗生素的改造）。目前半合成抗生素的使用己成為克服抗藥性的主要途徑。

3、加強(qiáng)抗藥機(jī)制的研究研究抗藥機(jī)制，有助于了解細(xì)菌抗藥性的本質(zhì)，有效地控制細(xì)菌感染。第八十七頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五第七節(jié)抗生素的效價(jià)、單位及測(cè)定法

一、抗生素的效價(jià)和單位抗生素是一種生物活性物質(zhì)，可以利用抗生素對(duì)生物所起作用的強(qiáng)弱來判定抗生素的含量。含量通常用效價(jià)或單位表示。有時(shí)二者合稱效價(jià)單位。效價(jià)（potency）:指在同一條件下比較抗生素的檢品和標(biāo)準(zhǔn)品的抗菌活性，從而得出檢品的效價(jià)。即效價(jià)是檢品的實(shí)際單位數(shù)與其標(biāo)準(zhǔn)量的比值。常用百分?jǐn)?shù)表示。

第八十八頁，共九十八頁，編輯于2023年，星期五

效價(jià)=檢品的抗菌活性x100%

標(biāo)準(zhǔn)品的抗菌活性

單位（unit，u）是衡量抗生素有效成分的具體尺度。有以下幾種：1、重量單位以抗生素的生物活性部分的重量作為單位。1mg=1000單位（u），對(duì)于不同鹽類的同一抗生素，只要它們的單位相同，即使鹽類重量不同，其實(shí)際有效含量是一致的。如:鏈霉素硫酸鹽、土霉素鹽酸鹽、新霉素鈉（鉀）鹽等以重量單位表