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文檔簡介
血清堿性磷酸酶磷酸單酯水解酶01辨別原理正常值偏高原因試劑臨床意義目錄03050204基本信息堿性磷酸酶(ALP)屬磷酸單酯水解酶,是一組特異的磷酸酯酶。該酶廣泛分布于人體組織和體液,以骨、肝、乳腺、小腸、腎中含量較高,其大部分由骨細胞產(chǎn)生,小部分來自肝,經(jīng)膽汁排入腸道。ALP測定方法主要是比色法和連續(xù)監(jiān)測法。辨別原理辨別原理(1)比色法:ALP在堿性條件下使磷酸苯二鈉水解,生成磷酸和游離酚,后者與4-氨基安替比林作用,并經(jīng)鐵氰化鉀氧化成紅色醌類化合物,其顏色的深淺與ALP活性成正比。(2)連續(xù)監(jiān)測法:ALP在堿性條件下,使磷酸對硝基苯酚(4-NPP)釋放出磷酸基團,AMP參與磷酸?;霓D(zhuǎn)移,促進酶反應速率,生成游離的對硝基苯酚(4-NP),并形成黃色的醌,其吸光度的增高速率與酶活力成正比。試劑連續(xù)監(jiān)測法比色法試劑比色法①0.1mol/L碳酸鹽緩沖液(pH10.0):稱取無水碳酸鈉6.36g,碳酸氫鈉3.36g,4-氨基安替比林1.5g,溶于800ml蒸餾水中,移入1000ml容量瓶內(nèi),加蒸餾水至刻度,置棕色瓶內(nèi)保存。②20mmol/L磷酸苯二鈉溶液:稱取磷酸苯二鈉(AR)2.18g,迅速加入已煮沸的500ml蒸餾水中,冷卻后加入氯仿2ml防腐,冰箱保存。此為基質(zhì)液。③鐵氰化鉀溶液:稱取鐵氰化鉀2.5g,硼酸17g,分別溶于400ml蒸餾水中,混合后加水至1000ml,置棕色瓶內(nèi)避光保存。出現(xiàn)藍綠色應棄去。④酚標準貯存液(1mg/ml):稱取重蒸餾酚1.0g,溶于0.1mol/L鹽酸中,并加至1000ml刻度。也可購買標準液。⑤酚標準應用液(0.05mg/ml):取酚標準貯存液5ml,加蒸餾水至100ml。連續(xù)監(jiān)測法①1.8mol/LAMP緩沖液(pH10.3):稱取2-氨基-2甲基-1-丙醇(AMP,MW89.14)160g,加1mol/L鹽酸320ml混合,加500ml新煮沸已涼的蒸餾水,調(diào)pH至10.3±0.02(30℃),并加上述蒸餾水至1000ml,置緊塞瓶中于冰箱保存。②10.5mmol/L氯化鎂溶液:稱取氯化鎂(MgCl2·6H2O,MW203.31)0.21g,溶于水中,并稀釋至100ml,室溫保存。③31.5mmol/L磷酸對硝基苯酚溶液(4-NPP):稱磷酸對硝基苯酚二鈉鹽(含6分子水,MW371.15)120.8mg,溶于100ml蒸餾水中,置棕色瓶內(nèi)于冰箱保存。④底物緩沖液(0.84mol/LAMP,15mmol/L4-NPP,0.5mmol/LMgCl2,pH10.3)將AMP、4-NPP和MgCl23種溶液按10∶10∶1混合,37℃預溫待用。
正常值正常值(1)酶速率法(37℃):成人:40~160U/L;兒童:<350U/L;(2)磷酸苯二鈉法:成人:3~13Kat單位;兒童:5~30kat單位;(3)動態(tài)法:成人:20~110U/L;青少年:1.男性:<750U/L;2.女性:<500U/L;兒童:<500U/L;臨床意義臨床意義(1)升高:①無黃疸:肝硬化、肝細胞癌、膽管疾病(膽管癌,肝內(nèi)結石)、局限性肝損害(轉(zhuǎn)移性肝癌、肝膿瘍、肉芽腫性肝損傷)、其他肝疾病(慢性肝炎、脂肪肝)、骨疾病(佝僂病骨軟化癥、或骨肉瘤)、轉(zhuǎn)移性骨癌、甲狀腺功能亢進癥,甲狀旁腺功能亢進癥,慢性腎功能不全,惡性腫瘤(骨、肝轉(zhuǎn)移)等。②有黃疸:病毒性肝炎、酒精性肝炎、藥物性肝損害、肝炎病毒以外的病毒引起的肝損害、原發(fā)性膽汁性肝硬化、其他肝內(nèi)膽汁瘀滯、阻塞性黃疸(膽管癌、膽管細胞癌、胰頭癌,總膽管結石,硬化性膽管炎)。(2)降低:牛奶-堿綜合征、壞血病、甲狀腺功能減退癥、維生素D攝入過多、惡性貧血、重癥慢性腎炎、呆小病、惡病質(zhì)等。偏高原因代謝異常原因骨骼組織原因膽道排泄異常偏高原因代謝異常原因堿性磷酸酶主要用于阻塞性黃疸、肝癌、膽汁淤積性肝炎等的檢查,阻塞性黃疸、原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、膽汁淤積性肝炎都會使堿性磷酸酶偏高。膽道排泄異常堿性磷酸酶是需要經(jīng)過肝臟,然后由膽汁排出,當排
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