高效毛細(xì)管電泳在蛋白質(zhì)分析中應(yīng)用

高效毛細(xì)管電泳在蛋白質(zhì)分析中應(yīng)用第一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六一、概述

隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的不斷發(fā)展及各種新型蛋白質(zhì)類生化藥物的相繼問世．傳統(tǒng)的SDS一聚丙烯酰胺電泳及常規(guī)的液相色譜技術(shù)已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能適應(yīng)大規(guī)模藥物生產(chǎn)過程分析與產(chǎn)品純度檢驗的需要，而毛細(xì)管電泳(HPCE)技術(shù)是近年來迅速發(fā)展起來的一種新型分離、分析技術(shù)。具有高效、快速、簡便、微量的優(yōu)異特點。該技術(shù)在生物大分子、無機離子、光學(xué)異構(gòu)體及有機藥物分離、分析方面獲得了廣泛的應(yīng)用。第二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六分離原理電泳儀進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測系統(tǒng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)第三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六毛細(xì)管電泳的分離模式

毛細(xì)管電泳有多種分離模式，給樣品分離提供了不同的選擇機會.根據(jù)分離原理可分為:毛細(xì)管區(qū)帶電泳CZE膠束電動毛細(xì)管色譜MEKC等電聚焦CIEF、等速電泳CITP、凝膠電泳CGE毛細(xì)管電色譜CEC親和毛細(xì)管電泳ACE、免疫毛細(xì)管電泳CETA非水毛細(xì)管電泳NACE芯片電泳等第四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六毛細(xì)管區(qū)帶電泳

capillaryzoneelectrophoresis，CZE第五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六

帶電粒子的遷移速度=電泳和電滲流速度的矢量和正離子：兩種效應(yīng)的運動方向一致，在負(fù)極最先流出；中性粒子：無電泳現(xiàn)象，受電滲流影響，在陽離子后流出；陰離子：兩種效應(yīng)的運動方向相反；ν電滲流>ν電泳時,陰離子在負(fù)極最后流出,在這種情況下,不但可以按類分離,同種類離子由于差速遷移被相互分離。

是最基本、應(yīng)用廣的分離模式第六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六毛細(xì)管等電聚焦電泳（CIEF，isoelectricfocusingelectrophoresis）利用特殊的一種緩沖液（兩性電解質(zhì)）在凝膠（常用聚丙烯酰胺凝膠）內(nèi)制造一個pH梯度，電泳時每種蛋白質(zhì)就將遷移到等于其等電點（pI）的pH處（此時此蛋白質(zhì)不再帶有凈的正或負(fù)電荷），形成一個很窄的區(qū)帶，也同時達(dá)到濃縮的作用。第七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六毛細(xì)管凝膠電泳

capillarygelelectrophoresis，CGE將聚丙烯酰胺等在毛細(xì)管柱內(nèi)交聯(lián)生成凝膠。其具有多孔性，類似分子篩的作用，試樣分子按大小分離。能夠有效減小組分?jǐn)U散，所得峰型尖銳，分離效率高。常用于蛋白質(zhì)、DNA等的分離，是DAN排序的重要手段。特點：抗對流性好，散熱性好，分離度極高。無膠篩分技術(shù)：采用低粘度的線性聚合物溶液代替高粘度交聯(lián)聚丙烯酰胺。柱便宜、易制備。第八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六膠束電動毛細(xì)管色譜（MECC，MEKC）

micellarelectrokineticcapillarychromatography，MEKC第九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六緩沖溶液中加入離子型表面活性劑，其濃度達(dá)到臨界濃度，形成一疏水內(nèi)核、外部帶負(fù)電的膠束。在電場力的作用下，膠束在柱中移動。中性分子在膠束相和溶液（水相）間分配，疏水性強的組分與膠束結(jié)合的較牢，流出時間長；可用來分離中性物質(zhì)，擴展了高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用范圍。是色譜與電泳分離模式的結(jié)合第十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六毛細(xì)管電泳分離模式選擇根據(jù)簡單通用性原則,還是以CZE、MEKC為優(yōu)，分離中性離子時優(yōu)先考慮MEKC在分離生物樣品時,通常需要根據(jù)分離的目的來選擇分離方式,若測定樣品的尺寸,就須選NGCE或CGE,偶可選CZE或MEKC,要測定樣品的等電點,則應(yīng)選用CIEF,在做親和作用研究時,應(yīng)首選ACE.分離蛋白質(zhì)和多肽等兩性樣品時優(yōu)先考慮CIEF分離水難溶組分時，優(yōu)先考慮非水毛細(xì)管電泳形式第十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六CE技術(shù)的應(yīng)用

毛細(xì)管電泳技術(shù)不僅廣泛應(yīng)用于環(huán)境保護(hù)、生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)衛(wèi)生、臨床檢測、司法、食品衛(wèi)生、藥品檢測、農(nóng)業(yè)化學(xué)等領(lǐng)，在臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用也有較多應(yīng)用第十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六CE在蛋白質(zhì)分離分析中的應(yīng)用

主要包括：肽和蛋白的鑒別分析、結(jié)構(gòu)分析、微量制備，以及蛋白的定量測定、純度檢測、非均一性檢測、穩(wěn)定性和動力學(xué)研究。蛋白的鑒別分析通常包括對氨基酸的組成和序列、一些物化常數(shù)如分子量和等電點等的測定，以區(qū)分和鑒定結(jié)構(gòu)和種類不同的蛋白質(zhì)第十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六氨基酸與蛋白質(zhì)分析

analysisofaminoacids第十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六蛋白質(zhì)分析第十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六核酸分析及DNA排序

analysisofnucleicacidsandsequence

ofDNA重要分析手段；圖，酶解的雙螺旋DNA限制性片段的分離；第十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六蛋白質(zhì)的尺寸分離

蛋白質(zhì)的尺寸分離或分子量測定，是化學(xué)等研究中的重要工作，通常利用超速離心、質(zhì)譜、凝膠排斥色譜、SDS等方法完成。利用毛細(xì)管電泳有較其他方法的優(yōu)點：

１.只需消耗納升級的樣品；

２.可在短時間內(nèi)進(jìn)行重復(fù)和自動化的測定３.如果能獲得準(zhǔn)確的分子量標(biāo)準(zhǔn)，可以比較準(zhǔn)確的測定未知蛋白質(zhì)的分子量；

４.利用紫外等進(jìn)行柱上檢測，可以實現(xiàn)定量分析等；

第十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六

蛋白質(zhì)尺寸分析的關(guān)鍵，首先是篩分介質(zhì)的選擇，其次是緩沖體系的確定，此外還需需要仔細(xì)考慮進(jìn)樣、分離電壓和電泳溫度等因素。第十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六

常用的篩分介質(zhì)有兩大類，一是各種凝膠，應(yīng)用于CGE,適合于蛋白質(zhì)分離的凝膠有線性聚丙烯酰胺、交聯(lián)聚丙烯酰胺和瓊脂糖等。二是水溶性高分子溶液或稱非膠篩分介質(zhì)，用于NGCE，最好選用紫外透明或吸收較弱的高分子，例如葡聚糖、聚乙二醇等。第二十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第二十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第二十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六

蛋白質(zhì)對毛細(xì)管內(nèi)壁的吸附某種程度上限制了毛細(xì)管電泳在該領(lǐng)域的應(yīng)用。影響毛細(xì)管電泳分離蛋白質(zhì)效率及重現(xiàn)性的最主要因素是毛細(xì)管壁對蛋白質(zhì)的吸附,吸附作用的大小取決于毛細(xì)管材料、蛋白質(zhì)的等電點、緩沖溶液的pH值等多種因素。存在的問題第二十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六毛細(xì)管內(nèi)壁對蛋白質(zhì)產(chǎn)生吸附的原因

毛細(xì)管電泳中的蛋白質(zhì)吸附,可源于疏水作用、靜電作用和其它多種兩相分配機制。通常情況下堿性蛋白的靜電吸附最為突出,在常用緩沖溶液的pH下(pH=4~8),管內(nèi)壁的硅羥基發(fā)生解離,使管內(nèi)壁帶負(fù)電荷,蛋白質(zhì)在低于等電點時會帶上正電荷,在高于等電點時帶負(fù)電荷。第二十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六

若緩沖溶液的pH值低于蛋白質(zhì)等電點,蛋白質(zhì)則吸附H+而帶正電荷,由于靜電相互作用,蛋白質(zhì)與管壁發(fā)生吸附當(dāng)pH值增大到接近等電點時,蛋白質(zhì)顯中性,不帶電;pH值繼續(xù)增大(超過等電點),蛋白質(zhì)帶負(fù)電,此時與毛細(xì)管壁的SiO-產(chǎn)生排斥作用,不再發(fā)生吸附。第二十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六(a)堿性蛋白質(zhì)(pI=8)所帶電荷量隨pH的變化曲線;(b)在pH=4時,堿性蛋白質(zhì)(pI=8)與毛細(xì)管壁發(fā)生吸附第二十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六解決辦法1、極端pH值法緩沖溶液pH值通過影響柱壁與溶質(zhì)的電荷差異,從而改變其間的相互作用。在低pH下,硅羥基主要以不帶電的質(zhì)子化形式存在,壁電荷非常小,可以減少吸附。在高pH值下,內(nèi)壁表面SiOH基大部分電離帶負(fù)電荷,與溶液中帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)產(chǎn)生庫侖排斥作用,從而有效地抑制了管壁的吸附。第二十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六2、添加小分子添加劑

在CE分離中,除了背景電解質(zhì)外,常常還在緩沖溶液中添加某種成分,常用添加劑有:表面活性劑,如季銨鹽和氟化的陽離子表面活性劑;中性鹽,如磷酸鹽、硫酸鉀等;胺類,三乙醇胺、三乙胺、N-乙基二乙醇胺、N,N,N,N-四甲基-1,3丁二胺(TMBD)等;有機溶劑,包括醇類、乙腈、丙酮、四氫呋喃、二甲亞砜等。上述兩種方法只能從一定程度上降低蛋白質(zhì)吸附,而且pH值過高(或過低),小分子添加劑濃度過大都會導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集和變性。第二十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六3、聚合物涂覆毛細(xì)管內(nèi)壁抑制蛋白質(zhì)吸附化學(xué)鍵合涂層的涂覆過程如圖2所示,一般分為兩大步:首先,硅烷化試劑與毛細(xì)管內(nèi)壁的SiOH反應(yīng)生成Si-O-Si結(jié)構(gòu)固定在管壁內(nèi)表面;然后,通過硅烷化試劑末端雙鍵與適宜單體共聚生成聚合物覆蓋在毛細(xì)管內(nèi)表面,形成永久涂層。

第二十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六常見的化學(xué)鍵合聚合物涂層有以下幾種:

聚丙烯酰胺(PAA)

聚乙烯醇(PVA)

聚乙二醇(PEG)

聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA)

通過共價鍵與毛細(xì)管壁結(jié)合的涂層壽命長,穩(wěn)定性好,分離效率高,已在毛細(xì)管電泳中獲得廣泛應(yīng)用,但是化學(xué)鍵合的過程中涉及毛細(xì)管硅烷化和引發(fā)單體聚合兩步反應(yīng),一方面受兩步反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率影響,Si-OH很難被完全屏蔽;另一方面,毛細(xì)管內(nèi)的聚合反應(yīng)很難控制,容易造成涂層的不均一性、不規(guī)整性,甚至阻塞毛細(xì)管。第三十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六化學(xué)鍵合的交聯(lián)的PVA涂層對4種堿性蛋白質(zhì)實現(xiàn)第2次和第902次分離的電泳圖譜樣品濃度:50ug/mL的(1)細(xì)胞色素C,(2)溶解酵素,(3)胰蛋白酶原,(4)胰凝乳蛋白酶原。分離條件:毛細(xì)管,內(nèi)徑50μm,總長48cm(有效長度40cm);注入,3kV,5s;緩沖液,40mM磷酸鈉;分離,309V/cm第三十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六物理吸附的毛細(xì)管涂層通過物理作用吸附在毛細(xì)管壁上的聚合物涂層相對于化學(xué)鍵合涂層優(yōu)勢在于:(1)涂層制備過程簡單易操作,涂覆過程可一步完成,比化學(xué)鍵合的涂層省去了硅烷化步驟,聚合物直接通過物理作用(包括氫鍵,靜電引力和疏水基團(tuán)間的相互作用)吸附在管壁上;(2)涂層可再生。這種涂層可以是中性的、帶正電荷的、也可以是吸附在帶正電的聚合物涂層表面轉(zhuǎn)而帶負(fù)電荷的。第三十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六無膠篩分毛細(xì)管電泳(non-gelsievingcapillaryelectrophoresis，NGCE)是近年來發(fā)展起來的一種用于檢測核酸的新方法，與毛細(xì)管凝膠電泳相比，具有向毛細(xì)管內(nèi)注入篩分介質(zhì)方便，易于沖洗，毛細(xì)管可反復(fù)使用，以及便于實現(xiàn)自動化等優(yōu)點。NGCE一般以非交聯(lián)的高分子水溶性化合物作篩分介質(zhì)，常用的有水溶性纖維素衍生物、聚吡咯烷酮、線性聚丙烯酰胺等。可采用非涂層管，以大分子聚乙二醇為篩分介質(zhì)，以NGCE模式進(jìn)行蛋白質(zhì)樣品的檢測。第三十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六三、儀器設(shè)備1、高壓電源系列CL101系列包含：CL101A智能高壓電源（正）

CL101B智能高壓電源（負(fù)）

CL101C智能高壓電源（正負(fù)）

CL101D多路智能高壓電源

CL101E高壓電源（恒流、正）

CL101F高壓電源（恒流、負(fù)）第三十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六技術(shù)指標(biāo)輸出電壓：0～30KV，連續(xù)可調(diào)(正電源)（標(biāo)配）輸出電壓：0～-30KV，連續(xù)可調(diào)(負(fù)電源)（選配）輸出電流范圍：0～999μA電源調(diào)節(jié)率：電源電壓變化±10%，輸出電壓變化0.01%負(fù)載調(diào)節(jié)：10V/100A紋波：輸出電壓的0.1%P-P電壓示值誤差：≤2.0%電流示值誤差：≤3.0%穩(wěn)定度變化：≤1.5%第三十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六CL101A智能高壓電源正CL101B智能高壓電源負(fù)第三十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六CL101C智能高壓電源正負(fù)CL101E高壓電源正第三十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六2、CL1020高效毛細(xì)管電泳儀紫外檢測器

包含：國產(chǎn)紫外檢測器電泳機箱高壓電源工作站紫外檢測池第三十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六工作原理

紫外檢測原理基于被測組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同，當(dāng)被測組分通過檢測窗時，吸光度發(fā)生的變化服從朗伯-比爾定律，即在一定的實驗條件下，吸光度與被測組分的濃度成正比。

第三十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六技術(shù)指標(biāo)光路系統(tǒng)：進(jìn)口設(shè)計衍射光柵單色儀，進(jìn)口光電池?zé)粼矗喝毡緸I松L6302氘燈波長范圍：190～700nm，連續(xù)可調(diào)波長精度：±2nm；波長重復(fù)性：±0.4nm噪聲：±1.5×10-5AU在254nm，t=1s漂移：±4×10-4AU/h在254nm，t=1s檢測限：≤1×10-6g/ml(對氨基苯甲酸)定性重復(fù)性：RSD≤1.3%；定量重復(fù)性：RSD≤3.0%第四十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六儀器特點

分離效率高，分析速度快，檢測靈敏度高試劑用量少，樣品預(yù)處理簡單微處理器控制，波長重復(fù)性高，檢測范圍寬可變波長選擇，190～700nm連續(xù)可調(diào)液晶屏幕顯示，輕觸面板，程控找波長，自動調(diào)零獨特的氘燈溫度控制方式，氘燈使用壽命可達(dá)2500小時進(jìn)樣方式：電進(jìn)樣0～30KV可調(diào)，壓差進(jìn)樣130～230mm可調(diào)沖洗方式：彈簧加壓沖洗第四十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六第四十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六3、CL1030高效毛細(xì)管電泳儀紫外檢測器包含：諾爾紫外檢測器電泳機箱高壓電源工作站諾爾紫外檢測池第四十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六技術(shù)指標(biāo)

進(jìn)口德國諾爾（Knauer）紫外檢測器光路系統(tǒng)：衍射光柵單色儀，光電二極管燈源：氘燈（標(biāo)準(zhǔn)），鎢鹵燈（選配）波長范圍：190～740nm，連續(xù)可調(diào)邊緣濾波：370nm波長精度：±2nm時間常數(shù)：0.1/0.2/0.5/1.0/2.0/5.0/10.0s掃描速度：全程范圍掃描速度：100nm/s模擬輸出：±1V自動調(diào)零：全量程GLP功能：詳細(xì)報告，點燈時間和點燈次數(shù)噪聲：±1.5×10-5AU在254nm，t=1s基線漂移：±4×10-4AU/h在254nm，t=1s檢測限：≤1×10-6g/ml(對氨基苯甲酸)定性重復(fù)性：RSD≤1.3%；定量重復(fù)性：RSD≤3.0%第四十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六4、CL3020高效毛細(xì)管電泳液相色譜一體機

包括：國產(chǎn)紫外檢測器平流泵高壓電源進(jìn)樣閥色譜柱毛細(xì)管電泳檢測池液相色譜檢測池第四十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六性能介紹CL3020高效毛細(xì)管電泳液相色譜一體機既具有高效液相色譜的功能，既具有高效毛細(xì)管電泳儀的所有功能，更換液相的流通池又可以做液相色譜分析。采用的是溫分檢測器，溫分平流泵等梯度高壓輸液系統(tǒng)。此款儀器是為廣大用戶提供最優(yōu)性價比的分析儀器。在生物學(xué)、藥物學(xué)、食品科學(xué)、化學(xué)化工、農(nóng)業(yè)、刑偵和環(huán)保等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。

第四十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六技術(shù)指標(biāo)CL3020高壓輸液泵泵壓力范圍：0.00～42Mpa流量范圍：0.01～10ml/min（分析型）流量精度：＜3μl(0.01ml/min～0.1ml/min)

＜1%(0.5ml/min～10ml/min)流量穩(wěn)定度：±0.3%第四十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六

光路系統(tǒng)：衍射光柵單色儀，光電二極管波長范圍：190～700nm，連續(xù)可調(diào)燈源：日本濱松L6302氘燈波長精度：±2nm；波長重復(fù)性：±1nm衰減范圍：0.002～2AU/mv10檔噪音：±1.5×10-5AU；基線漂移：±4×10-4AU/h檢測限：≤1×10-6g/ml（對氨基苯甲酸，毛細(xì)管電泳）≤2×10-8g/ml（萘的甲醇檢出量，液相色譜）定量重復(fù)性：RSD≤3.0%（毛細(xì)管電泳）檢測池體積：4.5μl（液相檢測池）CL3020紫外檢測器第四十八頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六進(jìn)口馬達(dá)，進(jìn)口驅(qū)動器，細(xì)分兩萬步，無機械噪聲，確保精度顯示方式：液晶屏幕顯示，輕觸面板，程控找波長，自動調(diào)零單柱塞往復(fù)泵，獨特的單向閥設(shè)計，流動相無須脫氣，進(jìn)口密封系統(tǒng)，耐高壓能力強進(jìn)口緩沖器，緩沖能力強，使脈動最小顯示模式：實際壓力顯示，流量設(shè)置，壓力上下限設(shè)置安全控制：壓力上下限控制，蜂鳴報警，自動停機儀器特點第四十九頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六全進(jìn)口液路管，簡單液路連接可更換流通池，使之適用于分析型高效液相色譜和高效毛細(xì)管電泳分離系統(tǒng)燈源：日本濱松L6302氘燈微處理器控制，波長重復(fù)性高獨特的控制氘燈溫度，啟輝電壓氘燈的使用壽命可達(dá)2500小時專利的反壓器設(shè)計，使氣泡不易進(jìn)入流通池尺寸與重量：440×420×400（W×D×H）35kg第五十頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六毛細(xì)管：50μm(i.d)×50cm，有效長度38cm，緩沖溶液：60mmol/L的檸檬酸緩沖溶液工作電壓：15KV；高差進(jìn)樣：10厘米20s；檢測波長：230nm；B瘦肉精HPLC色譜圖A瘦肉精HPCE色譜圖流動相：甲醇：水：磷酸：三乙胺=40：60：0.2：0.2流速：0.8ml/minC18柱：25cm波長：220nm第五十一頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六5、CL3020高效毛細(xì)管電泳液相色譜一體機包括：溫分紫外檢測器溫分三元低壓梯度泵高壓電源進(jìn)樣閥色譜柱毛細(xì)管電泳檢測池液相色譜檢測池第五十二頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六性能介紹

毛細(xì)管電泳與液相色譜相比具有更加高效、快速、微量、經(jīng)濟(jì)等幾大特點，是當(dāng)代分離科學(xué)的最新成就。尤其在多肽、蛋白質(zhì)、核酸等方面的分離顯示出優(yōu)越性能。CL3030高效毛細(xì)管電泳液相色譜一體機則集成高效液相色譜和高效毛細(xì)管電泳儀的所有功能，紫外檢測器采用的是溫分紫外檢測器，液相輸液泵可以按照用戶的要求配置二元或三元梯度系統(tǒng)。第五十三頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六技術(shù)指標(biāo)CL3030高壓輸液泵泵壓力范圍：0.00～42Mpa流量范圍：0.01～15ml/min（分析型）流量精度：＜3μl(0.01ml/min～0.1ml/min)

＜1%(0.5ml/min～9.99ml/min)B液%精度：±0.5%ABS第五十四頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六紫外檢測器

光路系統(tǒng)：衍射光柵單色儀，光電二極管波長范圍：190～700nm，連續(xù)可調(diào)波長精度：±2nm；波長重復(fù)性：±1nm衰減范圍：0.002～2AU/mv10檔噪音：±1.5×10-5AU；基線漂移：±4×10-4AU/h檢測限：≤1×10-6g/ml（對氨基苯甲酸，HPCE）≤2×10-8g/ml（萘的甲醇檢出量，HPLC）定量重復(fù)性：RSD≤3.0%（HPCE）檢測池體積：4.5μl（HPLC）第五十五頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六1、安賽蜜2、糖精鈉3、苯甲酸4、山梨酸甲醇：0.02M乙酸銨＝35：65的溶液做流動相；流速0.5ml/min,波長230nm，柱子25cmC-18色譜柱。1、山梨酸2、苯甲酸3、糖精鈉4、安賽蜜毛細(xì)管：50μm(i.d)×50cm，有效長度38cm，緩沖溶液：30mmol/L的硼砂溶液；工作電壓：25KV；高差進(jìn)樣：10厘米20s；檢測波長：230nm；A防腐劑HPCE色譜圖B防腐劑HPLC色譜圖第五十六頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六蛋白質(zhì)的分離儀器：WatersQuanta4000CE檢測器：UV--214nm毛細(xì)管：75pmI．D．×60cm，分離長度52cm內(nèi)壁修飾：無進(jìn)樣：虹吸30s分離模式：FSCE電場強度：V／cm電壓：12kV電流：uA溫度：室溫載體電解質(zhì)溶液：33mmol／L磷酸鹽pH2.0第五十七頁，共六十四頁，編輯于2023年，星期六pl點以上蛋白質(zhì)的分離

儀器：CE檢測器：UV毛細(xì)管：52μm×101cm，分離長度55cm內(nèi)壁修飾：無進(jìn)樣：分離模式：FSCE電場強度：V／cm電壓：30kV電流：uA溫度：室溫載體電解質(zhì)溶液：20mmol／L硼酸鹽pH8.25第五十八頁，共六十四頁，編輯于202