艾滋病常用實(shí)驗(yàn)室檢測及臨床意義分析

主要內(nèi)容HIV抗體檢測CD4檢測病毒載量檢測實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)本文檔共92頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體-感染成功抗體轉(zhuǎn)陽診斷艾滋病死亡-

4-8周-出現(xiàn)癥狀2-10年1年0.5-2年HIV抗體+

無癥狀有癥狀HIV抗體+艾滋病感染艾滋病毒后的自然發(fā)展過程急性感染期潛伏期發(fā)病期艾滋病感染者艾滋病患者窗口期本文檔共92頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分1234急性感染期本文檔共92頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分KINETICSOFVIRALMARKERSDURINGPRIMARYHIV-1INFECTIONHIVRNAHIVp24antigenHIVantibodiesHIV感染后血液中核酸、抗原和抗體動態(tài)變化窗口期暴露天數(shù)檢測域本文檔共92頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分感染HIV后病毒載量、CD4與病程變化規(guī)律本文檔共92頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分本文檔共92頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分艾滋病實(shí)驗(yàn)室分類篩查實(shí)驗(yàn)室（CD4檢測實(shí)驗(yàn)室）確證實(shí)驗(yàn)室（CD4、病毒載量實(shí)驗(yàn)室…)本文檔共92頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分中國HIV實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)

國家艾滋病參比實(shí)驗(yàn)室中國CDC性艾中心艾滋病確認(rèn)中心實(shí)驗(yàn)室省、市艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室省、市艾滋病篩查中心實(shí)驗(yàn)室省、市、州、縣艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室省、市、州、縣艾滋病檢測點(diǎn)鄉(xiāng)、鎮(zhèn)本文檔共92頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV實(shí)驗(yàn)室條件人員:經(jīng)過專門技術(shù)培訓(xùn),取得培訓(xùn)合格證/上崗證;環(huán)境:功能分區(qū),符合生物安全二級要求;儀器設(shè)備:按要求配備，滿足檢測要求。

實(shí)驗(yàn)室必須經(jīng)過資質(zhì)認(rèn)證/驗(yàn)收！本文檔共92頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV病原體診斷HIV抗體檢測艾滋病病毒抗原檢測（P24）HIV核酸檢測病毒分離本文檔共92頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分檢測樣品血清、血漿尿液抗凝全血（CBC、CD4、VL…)PBMC（外周血淋巴細(xì)胞）本文檔共92頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分樣品的采集和處理

一、樣品的采集

最常用的樣品是血液，包括血清、血漿和全血(抗凝血)。唾液或尿液有時(shí)也可作為測試樣品。常用樣品的采集方法如下：（一）采集樣品應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范及檢測試劑盒要求進(jìn)行。（二）采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意安全，操作應(yīng)戴雙層手套。建議采用真空采血管及蝶形針具，以免直接接觸血液。本文檔共92頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分

（三）血清樣品采集：用注射器抽靜脈血3－5ml，室溫放置1-2小時(shí)，待血液凝固或用3000rpm離心15分鐘，吸出血清備用。（四）抗凝血樣品采集(免疫功能CD4/CD8測定、血液常規(guī)CBC測定、病毒載量）：用加有抗凝劑（K3EDTA）的真空采血管或試管抽取靜脈血，反復(fù)輕搖，常溫6小時(shí)以內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室檢測CD4/CD8或CBC后，再分離血漿和血細(xì)胞備用。

本文檔共92頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分（五）血清或血漿樣品應(yīng)存放于-20℃，短期內(nèi)（1周）進(jìn)行檢測的樣品可存放于2-8℃。（六）用于抗原和核酸檢測的血漿和血細(xì)胞樣品應(yīng)凍存于-20℃以下，進(jìn)行病毒RNA檢測的樣品如長期（3個月以上）保存應(yīng)置于-80℃。本文檔共92頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分二、樣品的運(yùn)送

（一）抗體檢測實(shí)驗(yàn)室間傳遞的樣品應(yīng)為血清或血漿，血液常規(guī)、CD4和病毒載量等要求送抗凝血。樣品應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣品的編號或受檢者姓名、種類和采集時(shí)間。本文檔共92頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分

（二）將試管放入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。如果路程較遠(yuǎn)或氣候炎熱，應(yīng)在2-8℃條件下運(yùn)送?？鼓涂贵w檢測樣品路程短可常溫送檢。包裝內(nèi)需附有送檢單。（三）特殊情況下如需對個別樣品進(jìn)行復(fù)測，可以用特快專遞形式投寄，但必須將盛樣品的試管包扎好，保證不會破碎和溢漏。本文檔共92頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分三、樣品的接收

（一）含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。（二）核對標(biāo)本與送檢單，檢查樣品管有無破損和溢漏。（三）檢查樣品的狀況，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況。（四）因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。本文檔共92頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體檢測的目的診斷

確定個體HIV感染狀況，包括臨床檢測、自愿咨詢檢測、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。血液篩查防止輸血傳播HIV，包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。監(jiān)測

了解不同人群HIV感染率及其變化趨勢，包括各類高危人群、重點(diǎn)人群和一般人群。本文檔共92頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體檢測的方法篩查試驗(yàn)（包括初篩和復(fù)檢）：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA)、化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)、明膠顆粒凝聚試驗(yàn)（PA）、免疫滲濾試驗(yàn)、免疫層析試驗(yàn)等確證試驗(yàn)：免疫印跡試驗(yàn)（WB)、條帶免疫試驗(yàn)、放射免疫沉淀試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)等。本文檔共92頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分艾滋病抗體確證試驗(yàn)

免疫印跡法（WB）為目前最常用的HIV抗體確認(rèn)方法，被公認(rèn)為判斷HIV感染的黃金方法。本文檔共92頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分艾滋病抗體檢測試劑使用條件

HIV篩查或確認(rèn)試劑必須是HIV/1+2混合型，國家衛(wèi)生部批準(zhǔn)或注冊，經(jīng)過國家醫(yī)藥監(jiān)督管理局批批檢合格，臨床試劑評估優(yōu)良，并且在有效期內(nèi)。本文檔共92頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分檢測要點(diǎn)1、嚴(yán)格按照試劑說明書操作，不得擅自更改。2、注意防止交叉污染。3、嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程。4、認(rèn)真做好實(shí)驗(yàn)記錄。本文檔共92頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體檢測結(jié)果及結(jié)論

HIV抗體篩查結(jié)果陰性反應(yīng)可做HIV抗體陰性報(bào)告，篩查試驗(yàn)呈陽性反應(yīng)，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)告，不能出HIV抗體陽性報(bào)告。篩查陽性反應(yīng)或可疑陽性反應(yīng)不能作最終報(bào)告通知被檢測者，對個體診斷來說,只有經(jīng)過確證試驗(yàn)，結(jié)果陽性才可做HIV抗體陽性報(bào)告。本文檔共92頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分檢測程序及流程圖1、篩查檢測驗(yàn)收標(biāo)本，用篩查試劑進(jìn)行檢測，如呈陰性反應(yīng)，報(bào)告HIV抗體陰性；對呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本，須進(jìn)行重復(fù)檢測。2、重復(fù)檢測對篩查呈陽性反應(yīng)的標(biāo)本用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑重復(fù)檢測。本文檔共92頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體篩查檢測流程樣品初篩檢測篩查試劑陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)重復(fù)檢測原有試劑和另外一種不同原理（或廠家）的試劑，或另外兩種不同原理或不同廠家的試劑

一陰一陽均陰性反應(yīng)均陽性反應(yīng)送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)報(bào)告陰性本文檔共92頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分

HIV抗體確證

1、常用的確證實(shí)驗(yàn)方法是免疫印跡法（WB）。2、免疫印跡試劑有HIV-1/2混合型和單一型。一般先用HIV-1/2混合型試劑進(jìn)行檢測，如果呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIV抗體陰性，如果呈陽性反應(yīng)，則報(bào)告HIV-1抗體陽性，如果不滿足陽性標(biāo)準(zhǔn)，則判為HIV抗體不確定。如果出現(xiàn)HIV-2型的特異性指示條帶，還需要用HIV-2型免疫印跡試劑再做單一的HIV-2型抗體確認(rèn)試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)，報(bào)告HIV-2抗體陰性；呈陽性反應(yīng)的則報(bào)告HIV-2抗體血清學(xué)陽性。本文檔共92頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體確證檢測流程免疫印跡法（WB，HIV-1/2混合型）HIV-1陽性反應(yīng)不確定反應(yīng)

出現(xiàn)HIV-2指示條帶報(bào)告HIV-1陽性結(jié)合流行病學(xué)資料，可以在4周后隨訪檢測，如帶型沒有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告陰性；如隨訪期間出現(xiàn)陽性反應(yīng)，則報(bào)告陽性；如隨訪期間帶型有進(jìn)展，但不滿足陽性標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)繼續(xù)隨訪到8周。如帶型沒有進(jìn)展或呈陰性反應(yīng)則報(bào)告陰性；滿足HIV抗體陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)則報(bào)告陽性，不滿足陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)可視情況決定是否繼續(xù)隨訪。陰性反應(yīng)報(bào)告陰性篩查試驗(yàn)陽性反應(yīng)樣品根據(jù)具體情況進(jìn)一步檢測HIV-2本文檔共92頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分檢測結(jié)果的報(bào)告和處理

HIV抗體篩查：篩查實(shí)驗(yàn)呈陰性反應(yīng)出具HIV抗體陰性報(bào)告，如果近期有高危行為，如性亂、注射毒品等，或有急性流感樣癥狀等情況，為排除“窗口期”的可能，建議2—3個月以后再做抗體檢測。篩查實(shí)驗(yàn)呈陽性反應(yīng)，可出具“HIV抗體待復(fù)查”報(bào)告，不能出陽性報(bào)告。本文檔共92頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體篩查呈陽性的處理（1）填寫HIV抗體篩查陽性送檢單（2）盡可能重新采集受檢者的血樣。（3）將二份血樣（或僅原血樣）連同HIV抗體篩查陽性送檢單一并送當(dāng)?shù)匕滩『Y查中心實(shí)驗(yàn)室，再轉(zhuǎn)送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室，或直接送確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)。（4）篩查中心實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡快進(jìn)行復(fù)測。（5）做好檢測后咨詢。本文檔共92頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV抗體確證結(jié)果報(bào)告1、HIV抗體陽性應(yīng)出具HIV抗體陽性確認(rèn)報(bào)告，并按相關(guān)規(guī)定做好咨詢、保密和報(bào)告工作;2、HIV抗體陰性應(yīng)出具HIV抗體陰性確認(rèn)報(bào)告，如果近期有高危行為，如性亂、注射毒品等，或有急性流感樣癥狀等情況，為排除“窗口期”的可能，建議1個月以后再做抗體檢測;本文檔共92頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分抗體確證不確定結(jié)果HIV抗體不確定出具HIV抗體不確定確認(rèn)報(bào)告，在備注中應(yīng)注明“1個月后復(fù)查”。1、隨訪：每1個月一次，連續(xù)2次，共2個月。2、做好檢測后咨詢。本文檔共92頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009版本文檔共92頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009版本文檔共92頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分本文檔共92頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分本文檔共92頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分實(shí)驗(yàn)室記錄要求1、標(biāo)本的登記收到標(biāo)本后，及時(shí)登記有關(guān)參數(shù)，包括受檢者姓名或代號、試管編號、性別、年齡、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢驗(yàn)結(jié)果、送檢日期、報(bào)告日期、備注(必要時(shí)記錄通信地址)等。2、實(shí)驗(yàn)原始記錄表應(yīng)按實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)計(jì)操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對照、陽性對照、陰性對照、外部對照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員加樣。要注明試劑盒來源、測定方法、批號、有效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測日期。本文檔共92頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分3、HIV陽性標(biāo)本的保存記錄記錄HIV陽性標(biāo)本的儲存量、儲存溫度、儲存起始時(shí)間以及標(biāo)本保管人姓名。4、文件存檔實(shí)驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、檢測記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存15年以上。最好同時(shí)使用計(jì)算機(jī)保存各種文件和記錄。本文檔共92頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

適用范圍

HIV感染產(chǎn)婦所生嬰幼兒；已滿18個月的嬰幼兒，其母親HIV感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)HIV相關(guān)臨床表現(xiàn)，臨床懷疑HIV感染的兒童。本文檔共92頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

檢測程序及結(jié)果報(bào)告嬰兒滿12個月進(jìn)行第一次HIV抗體檢測。使用兩種不同原理或不同廠家篩查試劑進(jìn)行抗體檢測，兩種篩查試劑檢測結(jié)果均為陰性反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性（－）”，可排除感染。檢測結(jié)果出現(xiàn)陽性反應(yīng)（一種為陰性反應(yīng)一種為陽性反應(yīng)或兩種均呈陽性反應(yīng)），不能排除感染，應(yīng)繼續(xù)追蹤隨訪，至兒童滿18個月時(shí)再次進(jìn)行HIV抗體檢測。本文檔共92頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

檢測程序及結(jié)果報(bào)告嬰兒滿18個月時(shí)應(yīng)再次進(jìn)行HIV抗體檢測。使用兩種不同原理或不同廠家篩查試劑進(jìn)行抗體檢測。兩種篩查試劑的檢測結(jié)果均為陰性反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性（－）”，可排除感染。檢測出現(xiàn)陽性反應(yīng)（一種為陰性反應(yīng)一種為陽性反應(yīng)或兩種均呈陽性反應(yīng)），進(jìn)一步進(jìn)行確證試驗(yàn)，根據(jù)確證試驗(yàn)的結(jié)果判斷是否感染HIV。本文檔共92頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分HIV感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體

檢測策略及流程

檢測程序及結(jié)果報(bào)告在發(fā)放檢測報(bào)告的同時(shí)上報(bào)疫情；做好檢測后咨詢。本文檔共92頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009版本文檔共92頁；當(dāng)前第42頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分免疫功能（CD4/CD8）的檢測本文檔共92頁；當(dāng)前第43頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分T淋巴細(xì)胞分類在T淋巴細(xì)胞分類中，CD4代表T輔助細(xì)胞而CD8代表T抑制細(xì)胞和T殺傷細(xì)胞。CD4+T淋巴細(xì)胞是HIV感染的主要靶細(xì)胞，也是免疫反應(yīng)的中心細(xì)胞；CD8+T淋巴細(xì)胞是免疫反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞。本文檔共92頁；當(dāng)前第44頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分T淋巴細(xì)胞分類正常人的CD4+T淋巴細(xì)胞約占總的T淋巴細(xì)胞的65%，CD8+T淋巴細(xì)胞約占35%。人體感染了HIV后，涉及的主要病理過程就是免疫系統(tǒng)的損害，主要表現(xiàn)為：CD4+T淋巴細(xì)胞的丟失，絕對數(shù)量的減少，同時(shí)CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量增加，CD4和CD8的比例失調(diào)。因此CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)作為直接測定免疫功能的方法，是提供HIV感染病人免疫系統(tǒng)損害狀況最明確的指標(biāo)。本文檔共92頁；當(dāng)前第45頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4+T淋巴細(xì)胞正常值CD4：410-1590/mm3

CD8：190-1140/mm3CD4/CD8：＞1本文檔共92頁；當(dāng)前第46頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)意義

是艾滋病疾病分期、確定診斷、制定抗病毒治療和預(yù)防機(jī)會性感染方案的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，也是與病毒載量相配合預(yù)測疾病進(jìn)程的可靠指標(biāo)。本文檔共92頁；當(dāng)前第47頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4+T淋巴細(xì)胞檢測意義1、用于HIV感染者的疾病分期：凡CD4+T淋巴細(xì)胞＜200/mm3或CD4+T淋巴細(xì)胞的百分比＜14%的HIV感染者可歸入艾滋病。

本文檔共92頁；當(dāng)前第48頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4+T淋巴細(xì)胞檢測意義2、判斷HIV感染者的臨床合并癥（各種機(jī)會性感染與CD4+T淋巴細(xì)胞的相關(guān)性），如CD4+T淋巴細(xì)胞＜200/mm3時(shí)，很容易發(fā)生卡氏肺囊蟲肺炎；而巨細(xì)胞病毒感染和鳥分支桿菌感染常發(fā)生于CD4+T淋巴細(xì)胞＜50/mm3的病人，極少見于CD4+T淋巴細(xì)胞＞100/mm3的病人。本文檔共92頁；當(dāng)前第49頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4+T淋巴細(xì)胞檢測意義3、幫助確定抗HIV藥物治療及機(jī)會性感染預(yù)防性治療的適應(yīng)癥，例如，當(dāng)CD4+T淋巴細(xì)胞＜200/mm3時(shí)，應(yīng)給予抗卡氏肺囊蟲肺炎的預(yù)防性治療；4、抗HIV藥物療效的重要判斷指標(biāo)。本文檔共92頁；當(dāng)前第50頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分成人及青少年艾滋病分期標(biāo)準(zhǔn)（美國CDC.1993）CD4<200/ul和/或出現(xiàn)艾滋病指征性癥狀（如卡氏肺囊蟲肺炎等）時(shí)，就可定義為進(jìn)入艾滋病期。如表中A3，B3，C1-3期。本文檔共92頁；當(dāng)前第51頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4+、CD8+T細(xì)胞檢測絕對計(jì)數(shù)方法單平臺法：應(yīng)用流式細(xì)胞儀、絕對計(jì)數(shù)管及相應(yīng)軟件，可直接得出CD4+、CD8+T細(xì)胞值，操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，目前廣泛應(yīng)用。多重平臺法：

包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞中的淋巴細(xì)胞百分比及淋巴細(xì)胞中的CD4+T/CD8+T細(xì)胞百分比等三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)，操作及計(jì)算較復(fù)雜，結(jié)果準(zhǔn)確性不如單平臺法。本文檔共92頁；當(dāng)前第52頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4檢測樣品要求抗凝血新鮮、不溶血、無脂肪血按要求常溫送檢信息滿足要求本文檔共92頁；當(dāng)前第53頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分樣品的采集1、合適抗凝管：有2ml、4ml、10ml不同容量管；2、抗凝劑：用于流式細(xì)胞儀免疫表型檢測的抗凝劑（K2EDTA，K3EDTA）；3、采血管上注明樣品編號等信息；4、按管的容量采集；5、采血后立即握住試管兩端，垂直輕柔顛倒混勻數(shù)次，防止血液凝固；6、填寫相應(yīng)的送樣單，信息滿足要求，編號與采血管一致。本文檔共92頁；當(dāng)前第54頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分樣品的運(yùn)輸1、包裝應(yīng)符合國家《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》防泄漏、防污染，運(yùn)輸樣品至檢測實(shí)驗(yàn)室；2、要求室溫條件（18~25℃）保存和運(yùn)輸樣品，避免極端溫度（結(jié)冰或大于37℃），高溫季節(jié)，需用隔熱容器盛裝樣品，并將其置于有冰袋和吸熱物質(zhì)的容器中3、樣品采集后6小時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室檢測效果最好。本文檔共92頁；當(dāng)前第55頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分樣品的接收1、專人接收樣品，檢查樣品質(zhì)量、數(shù)量并核對標(biāo)識，送檢單需記錄樣品詳細(xì)資料；2、溶血、凝血、嚴(yán)重脂血、結(jié)冰、量不足、管裂有滲漏的樣品視為不合格樣品；3、超過檢測允許時(shí)間的樣品接收但不能用于CD4檢測；本文檔共92頁；當(dāng)前第56頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分樣品檢測要求、報(bào)告及結(jié)果錄入建議實(shí)驗(yàn)室及時(shí)檢測；一般要求24小時(shí)內(nèi)染色，染色后6小時(shí)內(nèi)分析；兩天內(nèi)出報(bào)告，報(bào)告及時(shí)反饋到治療點(diǎn)；治療點(diǎn)及時(shí)將檢測結(jié)果錄入國家治療信息系統(tǒng)。本文檔共92頁；當(dāng)前第57頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分本文檔共92頁；當(dāng)前第58頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分本文檔共92頁；當(dāng)前第59頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)

全區(qū)目前共有25個CD4檢測實(shí)驗(yàn)室，分布14個市級CDC，3家醫(yī)院和9個縣級CDC，去年自治區(qū)衛(wèi)生廳新招標(biāo)采購多臺流式細(xì)胞儀，將陸續(xù)配備到疫情較為嚴(yán)重的縣級CDC和抗病毒治療點(diǎn)。本文檔共92頁；當(dāng)前第60頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分CD4實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)1、自治區(qū)CDC11、貴港市CDC2、百色市CDC12、欽州市CDC3、崇左市CDC13、防城港市CDC4、河池市CDC14、北海市CDC5、桂林市CDC15、賀州市人民醫(yī)院6、南寧市CDC16、廣西龍?zhí)夺t(yī)院7、柳州市CDC17、南寧市四醫(yī)院8、來賓市CDC18、靈山縣CDC9、梧州市CDC19、鹿寨縣10、玉林市CDC20、平南縣CDC…本文檔共92頁；當(dāng)前第61頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分病毒載量檢測本文檔共92頁；當(dāng)前第62頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分1、輔助診斷

某些非典型的抗體反應(yīng)，特別是不確定反應(yīng)時(shí)，RNA的測定可提供非常有用的證據(jù)。單純使用RNA測定不能完全確定感染與否，但當(dāng)RNA測定出現(xiàn)較高拷貝數(shù)的陽性結(jié)果時(shí)（>1000）提示感染發(fā)生的可能性非常大。本文檔共92頁；當(dāng)前第63頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分2、窗口期輔助診斷在窗口期抗原峰出現(xiàn)前后通常出現(xiàn)一個病毒載量的高峰，通常此高峰高于發(fā)病時(shí)的血漿病毒水平，早期病毒RNA測定具有特殊的意義。目前國際上正在嘗試使用這種檢測對采供血樣品進(jìn)行多個樣品混合后的RNA檢測以降低窗口期傳播的殘余危險(xiǎn)度。本文檔共92頁；當(dāng)前第64頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分3、病程監(jiān)控由于HIV感染發(fā)生后病毒載量的變化具有一定規(guī)律，并且這種變化與疾病的進(jìn)程有著密切的相關(guān)性。通常在感染后無癥狀期內(nèi)發(fā)生的臨床癥狀很難與AIDS發(fā)病時(shí)的癥狀區(qū)別，病毒載量測定可以幫助醫(yī)生判斷一個剛發(fā)生的癥狀是否與HIV感染有關(guān)。本文檔共92頁；當(dāng)前第65頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分4、指導(dǎo)治療方案及療效測定并非在任何情況下感染者都應(yīng)該進(jìn)行抗病毒治療，這不但是經(jīng)濟(jì)上的原因，更重要的是在于抗病毒藥物的副作用和療效。通常在病毒載量達(dá)到一定水平后（如>35000-50000拷貝/毫升）才具有良好的效果。只有通過治療后病毒水平的檢測才能確定治療是否有效，通常治療后病毒水平降低50%才被認(rèn)為臨床有效。1000800600400200654320204060weekHAARTSTIHIV-1plasmaRNACD4+TcellcountHIV-1plasmaRNACD4+Tcellcount本文檔共92頁；當(dāng)前第66頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分5、預(yù)測疾病進(jìn)程HIV疾病進(jìn)程與病毒載量的關(guān)系十分密切，觀察感染者病毒RNA水平可大致預(yù)測其發(fā)病的可能。如右圖所示，病毒載量與6年發(fā)病率的關(guān)系為：<500時(shí)5.4%，501-3000時(shí)16.6%，3001-10000時(shí)31.7%，10001-30000時(shí)55.2%，>30000時(shí)則為80%。本文檔共92頁；當(dāng)前第67頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分兩種方法檢測病毒載量（一）RT-PCR（二）NASBAEasyQ本文檔共92頁；當(dāng)前第68頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分病毒載量檢測樣品要求血漿樣品量約1毫升樣品要求保存低溫保存（-20℃以下）冷凍運(yùn)輸本文檔共92頁；當(dāng)前第69頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)自治區(qū)CDC確證中心實(shí)驗(yàn)室柳州市CDC確證實(shí)驗(yàn)室梧州市CDC確證實(shí)驗(yàn)室賀州市CDC確證實(shí)驗(yàn)室龍?zhí)夺t(yī)院確證實(shí)驗(yàn)室桂林市CDC確證實(shí)驗(yàn)室本文檔共92頁；當(dāng)前第70頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分3.12×105本文檔共92頁；當(dāng)前第71頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分低于最低檢測限（＜400拷貝/毫升）本文檔共92頁；當(dāng)前第72頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分高于最高檢測限（>7.5×105拷貝/毫升）本文檔共92頁；當(dāng)前第73頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分本文檔共92頁；當(dāng)前第74頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分本文檔共92頁；當(dāng)前第75頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分RT-PCR病毒載量結(jié)果的報(bào)告三種情況具體的一個數(shù)值（該值在400--7.5×105拷貝/毫升）低于最低檢測限（＜400拷貝/毫升）高于最高檢測限（＞7.5×105拷貝/毫升）本文檔共92頁；當(dāng)前第76頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分1.6×105本文檔共92頁；當(dāng)前第77頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分低于最低檢測限（＜50拷貝/毫升）本文檔共92頁；當(dāng)前第78頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分高于最高檢測限（>3.0×106拷貝/毫升）本文檔共92頁；當(dāng)前第79頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分NASBAEASYQ病毒載量結(jié)果報(bào)告的三種情況

具體的一個數(shù)值（該值在50–3.0×106拷貝/毫升）低于最低檢測限（＜50拷貝/毫升）高于最高檢測限（＞3.0×106拷貝/毫升）本文檔共92頁；當(dāng)前第80頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分注意事項(xiàng)1、不同檢測方法的結(jié)果不能直接比較，必須轉(zhuǎn)化為國際單位

RT-PCR:1IU/ml=0.51copies/mlNASBAEASYQ:1IU/ml=1copies/ml本文檔共92頁；當(dāng)前第81頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分注意事項(xiàng)2、檢測結(jié)果低于最低檢測限不能排除HIV感染3、病毒載量結(jié)果低于1000copies/ml不進(jìn)行耐藥檢測，只有大于1000copies/ml的病人才做耐藥檢測。本文檔共92頁；當(dāng)前第82頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)一、建立安全制度（一）實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備、建筑和設(shè)施的安全性應(yīng)通過專家的評審。（二）建立安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序，該程序應(yīng)適用于現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件，并與實(shí)驗(yàn)室其他規(guī)章制度一致。（三）無論是否發(fā)生意外事故，每年都要對安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序及其實(shí)施情況進(jìn)行檢查。（四）制定意外事故處理預(yù)案。建立意外事故的登記和報(bào)告制度。本文檔共92頁；當(dāng)前第83頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分二、人員管理和培訓(xùn)（一）人員管理1、實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)了解所有工作人員。在安排工作區(qū)域時(shí)，要根據(jù)人員的工作種類和所涉及的生物材料，對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境做安全檢查。2、新調(diào)入人員、外來合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室主任的批準(zhǔn)。非實(shí)驗(yàn)室人員和物品不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。3、嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血檢測HIV抗體和備案制度，工作人員血清應(yīng)長期保留。本文檔共92頁；當(dāng)前第84頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分（二）培訓(xùn)

1、所有工作人員必須經(jīng)過HIV檢測技術(shù)和實(shí)驗(yàn)室安全培訓(xùn)，包括上崗培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受實(shí)驗(yàn)室管理人員的監(jiān)督。實(shí)驗(yàn)室的安全責(zé)任人要對工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，所有工作人員都有責(zé)任保護(hù)自己和他人的安全。2、必須告知新上崗人員實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)，進(jìn)行安全教育，直至有能力后方可單獨(dú)工作。本文檔共92頁；當(dāng)前第85頁；編輯于星期三\17點(diǎn)27分三、安全保障措施（一）個人保健

1、高標(biāo)準(zhǔn)的個人保健對于減少感染的危險(xiǎn)性很重要。皮膚受損、患病都會增加感染的危險(xiǎn)。皮膚的傷口和擦傷都應(yīng)以防水敷料覆蓋。2、進(jìn)實(shí)驗(yàn)室前要摘除首飾，修剪長