HPLC法測(cè)定心舒康膠囊中人參皂苷Rg1Re含量

HPLC法測(cè)定心舒康膠囊中人參皂苷Rg1Re含量

【摘要】目的:建立心舒康膠囊中人參皂苷Rg1和Re含量的測(cè)定方法。方法：應(yīng)用高效液相色譜法，固定相：C18柱，流動(dòng)相：乙腈-%磷酸溶液；檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，測(cè)定心舒康膠囊中人參皂苷Rg1、Re，的含量。結(jié)果:該方法測(cè)定人參皂苷Rg1、Re的線性范圍為μg，其加樣回收率為%，精密度≤2%。結(jié)論：方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確，可為心舒康膠囊的含量測(cè)定方法提供借鑒。

【關(guān)鍵詞】心舒康膠囊；人參皂苷Rg1、Re；高效液相色譜法

心舒康膠囊由三

七、丹參、黃芪等中藥組成，經(jīng)科學(xué)方法提取有效成分精制而成，用于益氣活血、補(bǔ)心腦，為我院治療心血管疾病的經(jīng)驗(yàn)方。其中三七是我國(guó)名貴的中藥材，其主要活性成分為多種皂苷，且具有多種顯著的藥理作用，含三七的復(fù)方制劑常以其作為指標(biāo)成分進(jìn)行含量測(cè)定。

采用高效液相色譜檢測(cè)法對(duì)心舒康膠囊中人參皂苷Rg1、Re進(jìn)行了含量測(cè)定。在樣品預(yù)處理中，采用大孔樹脂吸附分離法直接對(duì)樣品提取液進(jìn)行凈化處理，并采用C18柱，以乙腈-%磷酸溶液為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，可取得滿意的結(jié)果。

1材料

儀器Waters515高效液相色譜儀，WatersMillennium32色譜工作站。轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，F(xiàn)QC100超聲波清洗機(jī)，SC2021型電熱恒溫干燥箱，F(xiàn)A1004型十萬分之一電子天平，電熱恒溫水浴鍋。

試藥人參皂苷Rg1和Re對(duì)照品，心舒康膠囊，乙腈為Merck色譜純，純凈水，其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

色譜及檢測(cè)條件色譜柱：C18柱；流動(dòng)相：乙腈%磷酸溶液；流速：1ml/min；柱溫：室溫；在上述色譜條件下，人參皂苷Rg1和Re分離效果良好。

供試品溶液的制備取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約，精密稱定，置索氏提取器中，精密加入甲醇30ml，置80℃水浴上加熱回流3h，殘?jiān)鼡]干，加水10ml使溶解，加石油醚提取2h，每次10ml，棄去醚液，水液通過D101大孔樹脂柱，以水50ml洗脫，棄去水液，再用20%乙醇洗脫，棄去洗脫液，用80%乙醇洗脫，收集洗脫液70ml，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

對(duì)照品溶液的制備取人參皂苷Rg1和Re對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每1ml含的溶液，即得。

線性關(guān)系考察分別精密吸取對(duì)照品液50、40、25、10、5μl進(jìn)樣，按上述色譜條件分別測(cè)定峰面積；以峰面積值為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程分別為：Rg1：lgY＝+，Re：lgY＝+，線性范圍為μg。

精密度試驗(yàn)取對(duì)照品溶液適量連續(xù)進(jìn)樣5次,測(cè)得各峰面積,計(jì)算RSD,結(jié)果見表1。表1精密度

穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一樣品供試品溶液，分別在0、2、4、6、8h進(jìn)樣測(cè)定，測(cè)定結(jié)果表明在8h內(nèi)穩(wěn)定，RSD≤%。

重現(xiàn)性試驗(yàn)取同一樣品，按供凝血酶RSD分別為，。

樣品測(cè)定取樣品供試品溶液在上述色譜條件下測(cè)定，結(jié)果見表2、表3。表2人參皂苷Rg1樣品測(cè)定結(jié)果表3人參皂苷Re樣品測(cè)定結(jié)果

加樣回收率試驗(yàn)精密稱取己知含量的樣品適量，分高中低量加入一定量對(duì)照品，按供試品溶液制備項(xiàng)操作，制備溶液，測(cè)定，計(jì)算,結(jié)果見表4、表5。表4人參皂苷Rg1加樣回收率試驗(yàn)

3討論

心舒康膠囊中多為水溶性成分，而待測(cè)成分極性亦較大，如何除去其他成分對(duì)測(cè)定的干擾，是預(yù)處理中首要解決的問題。在含皂苷樣品預(yù)處理中，多用正丁醇液萃?。?］及大孔樹脂柱層析純化［2-3］的方法，研究發(fā)現(xiàn)大孔樹脂柱層析分離除去干擾成分的效果較好，而且具有樣品用量少、操作步驟簡(jiǎn)單、快捷等優(yōu)點(diǎn)。

參考藥典方法［4］可以很好測(cè)定本品中人參皂苷Rg1、人參皂苷Re的含量，有利于很好的控制本品的質(zhì)量。

【參考文獻(xiàn)】

［1］吳廣宣.野山參與園參中皂甙含量的對(duì)比分析［J］.藥學(xué)通報(bào)；1988，23：397.

［2］唐第光.大孔樹脂吸附法提取三七總苷工藝探討［J］.中成藥；1990，12：5.

［3］劉中秋，蔡雄.大孔吸附樹脂富集三七總皂苷工藝研究［