第章 酶工程制藥一

第六章酶工程制藥第一節(jié)概述

酶的特性酶是生物催化劑，大多數(shù)酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，有些酶是核酸。酶作為生物催化劑，除具有一般催化劑的特性：加快反應(yīng)速度、降低反應(yīng)活化能、不改變反應(yīng)平衡點(diǎn)、反應(yīng)前后無(wú)數(shù)量和性質(zhì)變化等外，還具有獨(dú)自的特點(diǎn)：催化效率高、專一性強(qiáng)、反應(yīng)條件溫和、催化活性易受調(diào)節(jié)和控制。酶由國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)分為六大類：氧化還原酶類、轉(zhuǎn)移酶類、水解酶類、裂合酶類、異構(gòu)酶類、合成酶類。一、酶工程簡(jiǎn)介酶工程（enzymeengineering）是酶學(xué)和工程學(xué)相互滲透、發(fā)展而形成的一門新的技術(shù)科學(xué)。從應(yīng)用的目的出發(fā)研究酶、應(yīng)用酶的特異催化功能，并通過(guò)工程化將相應(yīng)原料轉(zhuǎn)化成有用物質(zhì)的技術(shù)。20世紀(jì)20年代初出現(xiàn)，當(dāng)時(shí)主要是自然酶制劑在工業(yè)上的大規(guī)模應(yīng)用，1953年提出固定化酶技術(shù)，1969年利用該技術(shù)成功拆分了混旋氨基酸。1971年第一屆國(guó)際酶工程會(huì)議提出的酶工程主要內(nèi)容是：酶的生產(chǎn)、分離、純化、固定化、固定化的反應(yīng)器、酶與固定化酶的應(yīng)用。酶工程的優(yōu)點(diǎn)是工藝簡(jiǎn)單、效率高、生產(chǎn)成本低、環(huán)境污染小、產(chǎn)品收率高、純度好、還可制造出化學(xué)方法無(wú)法生產(chǎn)的產(chǎn)品?，F(xiàn)代酶工程的研究?jī)?nèi)容：1、酶的分離、提純、大批量生產(chǎn)及新酶和酶的應(yīng)用開(kāi)發(fā)；

2、酶和細(xì)胞的固定化及酶反應(yīng)器的研究；

3、酶生產(chǎn)中基因工程技術(shù)的應(yīng)用及遺傳修飾酶（突變酶）的研究；

4、酶的分子改造與化學(xué)修飾、以及酶的結(jié)構(gòu)與功能之間關(guān)系的研究；

5、有機(jī)相中酶反應(yīng)的研究；

6、酶的抑制劑、開(kāi)發(fā)及其應(yīng)用研究；

7、抗體酶、核酸酶的研究；

8、模擬酶、合成酶、酶分子的人工設(shè)計(jì)、合成的研究。二、酶的來(lái)源普遍存在于生物體中，可直接從生物體中分離。化學(xué)合成方法目前還不成熟。早期是以動(dòng)植物為原料進(jìn)行提取，由于動(dòng)植物生長(zhǎng)周期長(zhǎng)、來(lái)源有限、受地理、氣候和季節(jié)等因素的影響，不適于大規(guī)模生產(chǎn)。利用微生物來(lái)生產(chǎn)酶制品是一個(gè)更好的選擇，優(yōu)點(diǎn)是：1、微生物種類繁多，動(dòng)植物體內(nèi)的酶在微生物中幾乎都可以找到；2、繁殖快、生產(chǎn)周期短、培養(yǎng)簡(jiǎn)便、并可以通過(guò)控制培養(yǎng)條件來(lái)提高產(chǎn)量；3、微生物具有較強(qiáng)的適應(yīng)性，通過(guò)各種遺傳變異手段能培育出新的高產(chǎn)菌株。三、酶的生產(chǎn)菌1、對(duì)菌種的要求①繁殖快，產(chǎn)酶量高，酶的性能符合使用要求，最好是胞外酶；②不是致病菌、在系統(tǒng)發(fā)育上與病源體無(wú)關(guān)，不產(chǎn)生毒素；③穩(wěn)定，不易變異退化，不易感染噬菌體；④能利用廉價(jià)原料，發(fā)酵周期短，易于培養(yǎng)。2、生產(chǎn)菌來(lái)源從菌種保藏機(jī)構(gòu)和有關(guān)研究部門獲得，從自然界中分離篩選。土壤、深海、溫泉、火山、森林都是菌種采集地，篩選包括菌樣采集、菌種分離、初篩、純化、復(fù)篩、生產(chǎn)性能鑒定。生產(chǎn)菌的改良，基因突變、基因轉(zhuǎn)移、基因克隆。3、常用產(chǎn)酶微生物大腸桿菌：一般屬于胞內(nèi)酶，需要經(jīng)過(guò)細(xì)胞破碎才能得到。谷氨酸脫羧酶，用于測(cè)定谷氨酸含量或γ-氨基丁酸；天冬氨酸酶，催化延胡索酸加氨生成L-天冬氨酸；芐青霉素?；?，生成新的半合成青霉素或頭孢霉素；β-半乳糖苷酶，用于分解乳糖?？莶輻U菌：α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖氧化酶、堿性磷酸脂酶。青霉菌：產(chǎn)黃青霉用于生產(chǎn)葡萄糖氧化酶、青霉素?；?；橘青霉用于生產(chǎn)脂肪酶、葡萄糖氧化酶、凝乳蛋白酶。黑曲霉：有胞外酶和胞內(nèi)酶，糖化酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶、葡萄糖氧化酶、脂肪酶、纖維素酶。米曲霉：糖化酶和蛋白酶，在傳統(tǒng)的酒曲和醬油曲中得到廣泛應(yīng)用。木霉：纖維素酶，含有較強(qiáng)的17α-羥化酶，常用于甾體轉(zhuǎn)化。根霉：糖化酶、α-淀粉酶、轉(zhuǎn)化酶、酸性蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶，含有較強(qiáng)的11α-羥化酶，常用于甾體轉(zhuǎn)化。鏈霉菌：葡萄糖異構(gòu)酶、青霉素?；?、纖維素酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶，含有豐富的11α-羥化酶，可用于甾體轉(zhuǎn)化。啤酒酵母：釀造啤酒、酒精、飲料酒和面包制造。可生產(chǎn)轉(zhuǎn)化酶、丙酮酸脫羧酶等的生產(chǎn)。植物細(xì)胞：大蒜-超氧化物歧化酶、木瓜-木瓜蛋白酶、菠蘿-菠蘿蛋白酶。※提高藥用酶產(chǎn)量的措施1、添加誘導(dǎo)物對(duì)于誘導(dǎo)酶的發(fā)酵生產(chǎn)，在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)物，可使產(chǎn)酶量顯著提高。乳糖誘導(dǎo)β-半乳糖苷酶，纖維二糖誘導(dǎo)纖維素酶。誘導(dǎo)物可分為三種：酶的作用底物、酶的反應(yīng)產(chǎn)物、酶的底物類似物。2、控制阻遏物濃度有些酶的合成受到阻遏物的阻遏作用，應(yīng)設(shè)法解除阻遏作用來(lái)提高酶的產(chǎn)量。3、周添加陸表面箏活性改劑可分妨為離幫子型疾和非掃離子益型，什離子弟型對(duì)時(shí)細(xì)胞月有毒訊害作雹用，腸只能晝使用汗非離彩子型鮮，可塑聚集燥在細(xì)隔胞膜愁上，欲增加煎細(xì)胞婆通透袖性，純有利拾于酶濾的分禍泌，問(wèn)可增趨加酶痛的產(chǎn)窄量。4、校添加具刺激袖劑在植外物細(xì)澤胞培葬養(yǎng)生圓產(chǎn)次耕級(jí)代恒謝產(chǎn)地物的下過(guò)程干中，幫添加返某些獄刺激喬劑可武顯著叢提高家次級(jí)酒代謝赴的物畏的產(chǎn)阻量。連真菌慣的細(xì)芽胞壁炭碎片廳或其爛有效記成分梯、微梢生物鍵胞外嘗酶以壯及一春些小引分子熄物質(zhì)醉。5、坡添加轉(zhuǎn)產(chǎn)酶聞促進(jìn)呼劑植酸植鈣鎂隔可使鳴霉菌中蛋白淚酶和壞橘青瓣霉磷俯酸二錫酯酶酬的產(chǎn)頌量提堆高1但-2躍0倍滲。四、成酶在前醫(yī)藥旋領(lǐng)域護(hù)的應(yīng)球用1、居在疾徐病診愧斷方巾面的稠應(yīng)用酶學(xué)酬診斷攪：由智于酶某催化驢的高既效性柔和特這異性陸，具摸有可配靠、混簡(jiǎn)便裁又快夜捷的澡特點(diǎn)蜜。包括氣兩個(gè)史方面顏：一吩是根鏡據(jù)體盯內(nèi)原漲有酶葛活力苦的變傻化來(lái)料診斷率某些全疾病竟，如捎利用何谷丙謠轉(zhuǎn)氨湖酶活坐力升價(jià)高來(lái)至診斷坐肝炎純；二窩是用破酶測(cè)融定體種液中踏某些胞物質(zhì)英的量扛診斷堤疾病示，如迷利用賴葡萄批糖氧屋化酶笨測(cè)定病血糖鑄含量館，診效斷糖掀尿病讓等。2、掠在疾松病治鑰療方真面的摩應(yīng)用由于鐵酶具雕有專貫一性蹲和高稈效率璃的特張點(diǎn)，惹具有需種類弟多、厲用量絡(luò)少和炎純度底高等厭特點(diǎn)糧。主要醬醫(yī)藥校用酶聲：①蠶蛋白核酶；凈②溶哄菌酶??；③證超氧晚化物燙歧化捉酶；否④L帝-天專冬酰導(dǎo)胺酶膽；⑤釣?zāi)蚣は福恢奁溥f他相睡關(guān)酶引制劑胞等1、笨蛋白蘇酶臨床戀上使吊用最抵早、齒用途栗最廣勇的藥你用酶滿之一脅。消化僵劑，贈(zèng)用于枝治療剝消化何不良曉和食彼欲不絕振，曉使用涂時(shí)常議常與古淀粉欄酶、嬸脂肪脂酶等擇一起斗制成護(hù)復(fù)合疏酶制裹劑，條以增惜加療餓效，例片劑扔，可棍口服欺。消炎校劑，賢對(duì)各策種炎炎癥有衣很好厚的療瞇效，卵它能既分解桑一些幣蛋白獸質(zhì)和宋多肽草，使率炎癥扒部位唯的壞送死組壯織溶唱解，免增加端組織俊的通叼透性陷，抑言制浮叼腫，桂促進(jìn)叢病灶濫附近左組織避積液凱的排扶出并甜抑制突肉芽秒的形飄成，電可口畢服、軌外敷噸和肌炮肉注鞏射。蛋白罪酶經(jīng)將組織民注射雷可治皺療高區(qū)血壓河，由擁于蛋列白酶俊催化敵運(yùn)動(dòng)冠遲緩蟻素原助及胰豎血管篩舒張阻素原碼的部巴分肽光段水避解生唐成運(yùn)哪動(dòng)遲得緩素存和胰依血管展舒張須素，筐從而派使血鄰壓下凍降。2、琴α-栽淀粉記酶消化跟藥。3、脅脂肪第酶消化周劑。純假單民胞菌勝脂肪俱酶能站分解繁血液蛙中的繩低密遲度脂離蛋白參和乳喜糜微破粒，僚可用淹于預(yù)饞防和痰治療剪高血侮脂病畏。4、泥右旋杏糖苷醒酶水解秧右旋訊糖苷絕生產(chǎn)襯小分燈子產(chǎn)凈物，慨對(duì)齲飛齒有抓顯著像的預(yù)鞠防作初用，稈可加幻玉到牙策膏和桃嗽口收水中喪。5、改溶菌陳酶抗菌皇、消識(shí)炎、痕鎮(zhèn)痛獸作用萬(wàn)，作響用于們細(xì)胞鋼壁，量使其貝受到爆破壞軋，而蜓使病和原菌粥、腐毯敗性單細(xì)菌欄等溶叨解死仿亡。6、紫超氧祖化物唉歧化培酶抗氧映化、其抗輻仍射、浙抗衰糞老、哲保護(hù)吹機(jī)體短的D擠NA丟、蛋遼白質(zhì)攏和細(xì)吩胞膜毀免受驕超氧單負(fù)離悼子的匯破壞山。對(duì)紅源斑狼結(jié)瘡、梳皮膚穗炎、拜結(jié)腸還炎、匆白內(nèi)瓜障、肆風(fēng)濕野性關(guān)眠節(jié)炎舟、氧頌中毒洽等疾件病有逢顯著皆療效對(duì)輻究射有棗防護(hù)棵作用枝。7、觀乳糖植酶治療然乳糖閘缺乏拉癥，眉有些狂人或托嬰兒子腸道鎖中缺曉乏乳絲式糖酶卸，飲專用含請(qǐng)有乳淹糖的勝牛奶兔等食測(cè)品時(shí)洽，由郵于不喘能分跪解乳循糖，頌在腸勇道中膨，乳胖糖會(huì)泥因?yàn)榛技?xì)菌乳分解僅而產(chǎn)匪生有叢機(jī)酸翅，刺分激腸處道引汗起嘔箭吐。8、懲鏈激妄酶可催糾化纖父維蛋矛白酶界原，納激活侵成纖覺(jué)維蛋曠白酶奪，將肺纖維汽蛋白裁水解介，使露血栓棵溶解智。9、漠尿激接酶溶解瞇血栓急。3、序在藥董物生鉛產(chǎn)方僵面的暖應(yīng)用酶在利藥物稅制造辦方面距的應(yīng)勉用是鎖利用漫酶的邪催化評(píng)將前副體物素質(zhì)轉(zhuǎn)椅變?yōu)闇\藥物淡。主要左應(yīng)用饑有：休利用瘦青霉腸素酰設(shè)化酶訓(xùn)制造梳半合頁(yè)成青亦霉素塵和頭孤孢霉訂素、妥利用β-酷豎氨酸撇酶制萬(wàn)造多液巴、厚利用疊核苷及磷酸鳳化酶儀生產(chǎn)權(quán)阿糖農(nóng)腺苷鳴、利粱用蛋持白酶午和羧灑肽酶圓將豬蝴胰島難素轉(zhuǎn)泉化為嘗人胰畝島素啟等。4、破在分組析檢綿測(cè)方沾面的售應(yīng)用用酶雕進(jìn)行毛物質(zhì)意分析認(rèn)檢測(cè)域的方歌法統(tǒng)逃稱為扎酶法買檢測(cè)淋或酶掙法分俯析。酶法蟻檢測(cè)造可以窮分為梢單酶佩反應(yīng)史、多鉤酶偶赤聯(lián)反抖應(yīng)和顛酶標(biāo)桐免疫國(guó)反應(yīng)慶等三顫類?！獓?yán)——割——栽——第二委節(jié)嫩酶和臭細(xì)胞健的固席定化使用么均相蛙酶的慌缺點(diǎn)礙：只疼能使姥用一譜次，史成本億高，惹產(chǎn)品存分離揀困難駁；酶著溶液夏很不監(jiān)穩(wěn)定掩，容粱易變著性和少失活上。固定梁化酶解的優(yōu)密點(diǎn)：瞞性能紀(jì)穩(wěn)定口；可拾反復(fù)枯使用訓(xùn)，降壇低了鍋成本怨，易哄與產(chǎn)蛾品分贏離，洞簡(jiǎn)化扇下游蘇操作謹(jǐn)。一、魚固定勾化酶梁的制撥備1、叨定義指限避制或介固定稅于特標(biāo)定空戀間位相置的成酶。附也就受是指址經(jīng)物奪理化參學(xué)方曉法處從理，勢(shì)使酶區(qū)變成筍不易喇隨水保流失婦即運(yùn)露動(dòng)受譯到限縱制，擱而又群能發(fā)覽揮催瞞化作宴用的紡酶制困劑。固定惱化所倚用的浸酶，舉可以團(tuán)是分?jǐn)[離提赤純后國(guó)的酶瞎，也釋可以暢是結(jié)訊合成已菌體秀（死眠細(xì)胞巖）或危細(xì)胞站碎片因上的顫酶或擱酶系丹。2、貍特點(diǎn)鵝：既拜有生困物催噸化劑揮的功啟能，蹈又具承有固墾相催牽化劑慢的特允性。優(yōu)點(diǎn)語(yǔ)：（1存）可堆以多猾次使糞用，傻而且部在多任數(shù)情正況下存，酶鬧的穩(wěn)稈定性均提高斥；（太2）潑反應(yīng)管后，或酶與支底物亭和產(chǎn)扇物易罰于分督開(kāi)，龜產(chǎn)物矛中無(wú)夕殘留浸酶，嗎易于畫純化僑，產(chǎn)雁品質(zhì)腥量高悅；（踩3）置反應(yīng)生條件尚易于舉控制傅，可獅實(shí)現(xiàn)昏轉(zhuǎn)化離反應(yīng)狗的連尺續(xù)化常和自冰動(dòng)控傷制；謎（4踩）酶葵的利辦用效強(qiáng)率高表，單谷位酶烘催化裂的底住物量憐增加唱，用街酶量極減少段；（街5）萌比水廁溶性脈酶更蛇適合傭于多找酶反演應(yīng)。缺點(diǎn)犬：（1罷）固召定化遺時(shí)，絕酶活殿力有視損失阻；（妻2）趴增加訴了生叉產(chǎn)的默成本而，工線廠初貓始投葵資大偉；（巧3）近只能象和于竟可溶區(qū)性底促物，侮而且窮較適閱于小煩分子古底物惑，對(duì)永大分?jǐn)r子底寸物不膏適宜龜；（蘇4）洞胞內(nèi)堡酶必貢須經(jīng)妻過(guò)酶肚的分們離純止化過(guò)借程；琴（5億）與額完整棟菌體機(jī)相比顧不適洞宜用訊于多另酶反授應(yīng)，菠特別行是需壺要輔透助因忌子的免反應(yīng)位。3、棍酶的杜固定價(jià)化方演法與保制備京技術(shù)應(yīng)根瞇據(jù)酶爆的應(yīng)凡用目釘?shù)暮陀锰匦远洌瑏?lái)矮選擇書其固社定化芝方法滑。載體皮結(jié)合未法：物理狀吸附蛾法、紅離子妥結(jié)合嬸法、攻共價(jià)膝結(jié)合艷法；交聯(lián)得法：交聯(lián)耽酶法傘、酶獵與輔示助蛋奶白交沉聯(lián)法第、吸項(xiàng)附交籠聯(lián)法為及載督體交梨聯(lián)法高；包埋足法：網(wǎng)格梳型、俗微囊罵型選擇鑄性熱股變性灰（專用幟于細(xì)榮胞固游定化）固定合化所氣用的株載體蜜以及瓶固定團(tuán)化的倦技術(shù)列見(jiàn)課射本。1.橋載被體結(jié)委合法旱：將酶惠結(jié)合尖到不蒜溶性劍載體爬上的歐一種僑固定蕉化方俗法物理血吸附挖法：地用物常理方霸法將芒酶吸止附于視不溶殊性載餐體上批。優(yōu)：潔操作惜簡(jiǎn)單陵，固圓定化誰(shuí)過(guò)程研與純滲化過(guò)壞程同須時(shí)實(shí)的驗(yàn)，竟載體凍可再浮生；后缺：兵最適票吸附羅酶量永無(wú)規(guī)浪律可泰循，俱酶易柴于脫櫻落，縣導(dǎo)致延活力征下降卷并污趁染產(chǎn)鏈物。離子珠結(jié)合窩法：詞酶通丈過(guò)離忌子鍵里結(jié)合寄于有棗離子捆交換勻基的陽(yáng)水不嗎溶性追載體劫上。優(yōu)：譯操作蘋簡(jiǎn)單撓，處茫理?xiàng)l泄件溫狼和，嬌酶活絹回收讓率高做；缺凡：載棵體與兵酶的扶結(jié)合互力比缸較弱酒。共價(jià)濟(jì)結(jié)合淋法：俊酶以瞞共價(jià)佩鍵結(jié)屆合于匹載體恐上，彼也就斃是使役酶分套子上芽非活叉性部虜位功挺能團(tuán)秧與載摘體表替面活挺潑基警團(tuán)之變間發(fā)煩生化捏學(xué)反糠應(yīng)而丈形成夾共價(jià)擠鍵。優(yōu)：株酶與潑載體輝結(jié)合挎牢固獻(xiàn)，穩(wěn)矛定性潛好，助不易巾脫落瘦；缺斯：反鹽應(yīng)條放件苛麗刻，柱操作按復(fù)雜錦，酶躬的損抹失大扎，起你始投寄資大鞏。2.羨交快聯(lián)法跟：用雙黨功能攏或多租功能林試劑啟使酶賀與酶渾或微彈生物亡的細(xì)爹胞與甘細(xì)胞亡之間井交聯(lián)描。最聾常用薄的交術(shù)聯(lián)劑漂是戊氣二醛鄰。交聯(lián)毛酶法殘：用多促功能馬試劑濟(jì)使酶威分子扶內(nèi)或洲分子鴨間彼劃此連伴接成巨網(wǎng)絡(luò)饞結(jié)構(gòu)槐。酶—常輔助測(cè)蛋白貪交聯(lián)老法：在酶逗溶液妹中加在入輔槍助蛋轎白的齒交聯(lián)堆過(guò)程緊。吸附污交聯(lián)烤法：吸附嗽與交格聯(lián)相芳結(jié)合盟，兼撲有兩墨者雙階重優(yōu)凝點(diǎn)。載體瀉交聯(lián)虛法：同一摟多功演能試弓劑分方子的濃一些頸化學(xué)惜基團(tuán)雞與載尊體偶摧聯(lián)而侄另一療些化捕學(xué)基窄團(tuán)與搶酶分純子偶累聯(lián)的而方法品。交聯(lián)仆法的默反應(yīng)始條件陶比較住激烈派，酶雅活回抓收率萍一般系較低琴，所告得到置的固待定化渠顆粒示小、尾結(jié)構(gòu)銅性能圓差，溫酶活擇性低繭，常錦與吸堪附法正或包何埋法有聯(lián)合粉使用。3.郵包赴埋法攪：可例分為關(guān)網(wǎng)格際型和裹微囊臘型兩糟種。網(wǎng)絡(luò)新型：赴將酶悟或細(xì)邁胞包鮮埋在絨高分涼子凝扁膠細(xì)免微網(wǎng)音格中頌。微囊宣型：預(yù)將酶宇或細(xì)手胞包念埋在直高分洋子半直透膜臉中。優(yōu)：鍛制備雜條件源溫和蒸，很胡少改甲變酶描的高禾級(jí)結(jié)汁構(gòu)，藝酶活候回收辭率較事高刻，可泳應(yīng)用服于很違多酶降和細(xì)冰胞、寶細(xì)胞南器；飄但是調(diào)在發(fā)探生化奴學(xué)聚鉆合反盟應(yīng)時(shí)料包埋脾酶容太易失覽活，河必須婦合理吃設(shè)計(jì)特反應(yīng)份條件裝。缺棕：只適踩合作獻(xiàn)用于貸小分株子底沖物和蔬產(chǎn)物艱的酶宗，而且過(guò)擴(kuò)散洲阻力趨會(huì)導(dǎo)夫至酶肢的動(dòng)沉力學(xué)亭行為扶發(fā)生亦改變溜而降照低其刷活力爸。近年披來(lái)正脫研究統(tǒng)一種裂利用脂質(zhì)霉體的包鏡埋方縮慧法，番由表高面活嶼性劑賺和卵昏磷脂國(guó)等形砌成液篩膜包通埋酶訪。其礙特征視是底屬物或升產(chǎn)物膜的膜配透性晌只依態(tài)賴于捆對(duì)膜萄成分湖的溶麥解度揪。二、媽固定寺化細(xì)抓胞的炎制備1、梅定義將細(xì)腰胞限淘制或載定位肝于特沉定空未間位挺置的倘方法驅(qū)稱為某細(xì)胞家固定甲化技笨術(shù)。被限欺制或顫定位陽(yáng)于特謠定空漂間位敘置的曠細(xì)胞餅稱為迎固定水化細(xì)稅胞，姐它與癢固定艙化酶斥一起隸被稱典為固程定化智生物拳催化赤劑。2、引特點(diǎn)旅因定兼化細(xì)副胞具殿有：義細(xì)胞吸特性互、生周物催望化功且能、忠固相塵催化園劑特興點(diǎn)。優(yōu)點(diǎn)頑：無(wú)需歪進(jìn)行駁酶的抗分離斤純化情；細(xì)屋胞保登持酶謎的原骨始狀稼態(tài)，穩(wěn)固定合化工閱程中疼酶的格回收敘率高役；固倚定化扎酶比刪細(xì)胞敲內(nèi)酶熟穩(wěn)定狹性高巡壽；細(xì)克胞內(nèi)五酶的弟輔因騾子可陪自動(dòng)傾再生塔；細(xì)幟胞本飾身含吧多酶鎖體系吉，可屈催化船一系元列反全應(yīng)；暴抗污諒染能基力強(qiáng)煮。局限御性：利用銀的僅勿是胞臺(tái)內(nèi)酶映，而俗細(xì)胞鉗內(nèi)多孝種酶未的存概在會(huì)那形成勸不需綁要的寨副產(chǎn)纖物；惰細(xì)胞劃膜、洗細(xì)胞好壁和弓載體疤都存吃在著陶擴(kuò)散貍限制君作用瞎；載余體形難成的棟孔隙件大小悄影響廈高分梯子底鎮(zhèn)物的揮通透舟性。3、秧固定傳化細(xì)災(zāi)胞制啞備技償術(shù)細(xì)胞紡的固鄙定化淋技術(shù)笑是酶頃的固耳定化縣技術(shù)壁的延獨(dú)伸，唯其制喉備和雖應(yīng)用纏方法追也基彈本相譽(yù)同，旦但細(xì)疾胞的懷固定污化要膽求底吧物和俱產(chǎn)物感容易襯透過(guò)嘉細(xì)胞補(bǔ)膜，滅細(xì)胞端內(nèi)不這存在育分解仔系統(tǒng)恨及其賞他副啊反應(yīng)忙，或零有相舉應(yīng)的縮慧消除到副反虹應(yīng)的第措施羞。固定綱化細(xì)誼胞制學(xué)備方偏法有載體柿結(jié)合片法、包埋網(wǎng)法、交聯(lián)價(jià)法及無(wú)載勻體法等。三、排固定以化方酸法與役載體黑的選聲擇依坊據(jù)固定梢化方秋法的作選擇酶與欄細(xì)胞饞的固粘定化頌無(wú)特飾定的改規(guī)律置可循龜，要雜根據(jù)猾具體撓況和假試驗(yàn)恒摸索棋出具刊體可輩行的酷方法閉。主勉要考劫慮的搜因素祝：（1葡）固丹定化摧酶應(yīng)插用的栗安全西性（2泳）固既定化柱酶在移操作差中的都穩(wěn)定突性（3籍）固激定化藏的成陜本載體桐的選勒擇四、禾固定疫化酶挽與固姓定化咸細(xì)胞減的形恒狀和歲性質(zhì)固定姻化酶之與固紫定化季細(xì)胞凳的形助狀（需能根據(jù)籃底物什和產(chǎn)輸物的用性質(zhì)桃、基就質(zhì)材澡料的悲性能表、固份定化神的方兔興未掠艾、臨酶反泳應(yīng)的懸性質(zhì)謹(jǐn)、反償應(yīng)器漸的類敬型和箭應(yīng)用是目的城來(lái)決漸定固惱定化殘酶/噴細(xì)胞序的形脾狀。姻）顆粒攜狀固掙定化宏酶纖維性狀固灑定化予酶膜狀偷固定刪化酶管狀封固定舅化酶固定恨化細(xì)糕胞的隙形狀啄大多航與固往定化爛酶的儉形狀廢相同鎮(zhèn)，如翻珠狀悲、塊縮慧狀、循片狀包或纖炸維狀腔等。2.籮固雨定化弓酶的珠性質(zhì)由于胞固定往化方諷法和押所用座的載幼體不挑同，珠制得符的固搭定化僑酶可譯能會(huì)普受到開(kāi)擴(kuò)散掉限制避、空始間障復(fù)礙、估微環(huán)槐境變永化和郊化學(xué)疫修飾達(dá)等因身素的響影響海，可腐能會(huì)味導(dǎo)致岡酶學(xué)擱性質(zhì)慎和酶戚活力坡的變舊化。酶活淋力的盼變化{原哪因}酶穩(wěn)擇定性愿的變逃化{體盼現(xiàn)的馳方面做}酶學(xué)充特性長(zhǎng)的變古化（底尋物專歇一性拆、最故適p絮H、蕉最適勸溫度惜、米重氏常抓數(shù)Km、最孤大反啄應(yīng)速缸度）3.掉固值定化姜細(xì)胞趴的