臨床免疫學(xué)及檢驗(yàn)李梨平

臨床免疫學(xué)及檢驗(yàn)李梨平第1頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月概論免疫學(xué)(Immunology)是研究免疫系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能，并通過(guò)對(duì)其在免疫應(yīng)答過(guò)程中所產(chǎn)生的免疫保護(hù)與免疫損傷機(jī)制的研究，探討有效的免疫措施，實(shí)現(xiàn)以防病、治病為目的的一門(mén)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)學(xué)科第2頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①免疫學(xué)經(jīng)驗(yàn)時(shí)期（11~17世紀(jì)）中國(guó)醫(yī)生發(fā)明了用人痘苗預(yù)防天花②經(jīng)典免疫學(xué)時(shí)期（18世紀(jì)末到20世紀(jì)中葉）——

抗感染免疫牛痘苗、減毒疫苗、吞噬細(xì)胞、抗體、補(bǔ)體、原始體液免疫和細(xì)胞免疫學(xué)說(shuō)③近代免疫學(xué)時(shí)期（20世紀(jì)中葉）特異性細(xì)胞的免疫功能、天然和獲得性免疫耐受現(xiàn)象、抗體生成克隆學(xué)說(shuō)、細(xì)胞克隆選擇學(xué)說(shuō)（clonalselection）④現(xiàn)代免疫學(xué)時(shí)期——器官、細(xì)胞和分子水平雞法氏囊及哺乳動(dòng)物胸腺的免疫功能、TB淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、細(xì)胞因子、免疫學(xué)技術(shù)發(fā)展（單克隆抗體標(biāo)記技術(shù)、免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)、分子雜交技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)等）。免疫學(xué)的形成與發(fā)展第3頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫（immunity）是機(jī)體識(shí)別和排斥抗 原性異物的一種生理功能。免疫系統(tǒng)與機(jī)體的其他系統(tǒng)相互配合， 相互制約，共同維持機(jī)體在生命過(guò)程中 的生理平衡。免疫學(xué)簡(jiǎn)介第4頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

宿主體內(nèi)的免疫系統(tǒng)，能識(shí)別并清除從外環(huán)境中侵入的病原生物及其產(chǎn)生的毒素、內(nèi)環(huán)境中因基因突變產(chǎn)生的腫瘤細(xì)胞、自身衰老殘損的組織細(xì)胞或自身變性抗原，實(shí)現(xiàn)

免疫防御(immunologicaldefence)

免疫自穩(wěn)(immunologicalhomeostasis)免疫監(jiān)視(immunologicalsurveillance)免疫系統(tǒng)的三大生理功能免疫學(xué)概念與免疫應(yīng)答第5頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月免疫防御（immunologicaldefence）

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指機(jī)體排斥外源性異物的能力。免疫自穩(wěn)（immunologicalhomeostasis）

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指機(jī)體識(shí)別和清除自身衰變殘損的組織細(xì)胞的能力，以維持正常內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。免疫監(jiān)視（immunologicalsurveillance）

——

指機(jī)體殺傷和清除異常突變細(xì)胞的能力，以監(jiān)視和抑制惡性腫瘤在體內(nèi)生長(zhǎng)。免疫系統(tǒng)的三大生理功能第6頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫應(yīng)答反應(yīng)（immuneresponse）

是指機(jī)體免疫系統(tǒng)接受抗原刺激發(fā)生一系列反應(yīng)，并以排出或分解該抗原為目的的反應(yīng)過(guò)程。免疫應(yīng)答的過(guò)程主要分為： 識(shí)別階段（recognitionphase） 活化階段（activationphase） 效應(yīng)階段（responsephase）抗原識(shí)別處理傳遞信息免疫細(xì)胞活化增殖產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞、分子執(zhí)行效應(yīng)功能第7頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫應(yīng)答效應(yīng)大多為生理性，是機(jī)體對(duì)外來(lái)抗原或自身變性抗原的清除效應(yīng)

免疫應(yīng)答反應(yīng)過(guò)強(qiáng)時(shí)，可致機(jī)體組織或器官發(fā)生病理?yè)p傷，出現(xiàn)臨床疾病第8頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月功能名稱(chēng)生理功能

病理表現(xiàn)免疫防御清除病原微生物及其它抗原性異物超敏反應(yīng)（強(qiáng)）免疫缺陷?。ㄈ酰┟庖咦苑€(wěn)清除損傷或衰老細(xì)胞自身免疫性疾病免疫監(jiān)視清除突變或畸變細(xì)胞，防止腫瘤發(fā)生、殺傷病毒感染細(xì)胞腫瘤或病毒持續(xù)性感染免疫系統(tǒng)功能的生理和病理表現(xiàn)第9頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫組織與器官免疫系統(tǒng)(immunesystem)由免疫器官、免疫細(xì)胞和免疫分子構(gòu)成。淋巴組織及免疫細(xì)胞分布于機(jī)體全身，執(zhí)行免疫防衛(wèi)功能，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境正常的生理功能及動(dòng)態(tài)平衡。免疫器官按功能不同，分為中樞免疫器官和外周免疫器官。第10頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月中樞免疫器官是免疫細(xì)胞產(chǎn)生、分化和成熟的場(chǎng)所外周免疫器官是免疫應(yīng)答的場(chǎng)所單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞經(jīng)血液循環(huán)及淋巴循環(huán)，進(jìn)出于外周淋巴組織及淋巴器官，形成機(jī)體免疫系統(tǒng)的免疫網(wǎng)絡(luò)第11頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月通過(guò)免疫網(wǎng)絡(luò)，免疫細(xì)胞能及時(shí)到達(dá)機(jī)體各臟器及皮膚粘膜的病原微生物入侵部位，又能將機(jī)體各部位的抗原成分經(jīng)抗原遞呈細(xì)胞攜帶至相應(yīng)淋巴組織及淋巴器官，活化T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞，執(zhí)行特異性免疫應(yīng)答功能。第12頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）中樞淋巴器官：骨髓:

（1）是造血干細(xì)胞生成、分化發(fā)育的場(chǎng)所；

（2）是功能性B細(xì)胞分化成熟的唯一場(chǎng)所；（3）提供各種免疫細(xì)胞的前體細(xì)胞；

T細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所胸腺:T細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所（二）外周淋巴器官：淋巴結(jié)、脾臟、粘膜相關(guān)淋巴組織（扁桃體、闌尾等）第13頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）淋巴細(xì)胞再循環(huán)與歸巢淋巴細(xì)胞在全身器官組織及體液中的循環(huán)，可擴(kuò)大與病原異物抗原接觸的機(jī)遇，并將被抗原激活的淋巴細(xì)胞引流入局部淋巴組織及器官，在T細(xì)胞、B細(xì)胞、抗原遞呈細(xì)胞(antigenpresentingcells,APC)間發(fā)揮協(xié)同的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生的效應(yīng)淋巴細(xì)胞定向地遷移于病原異物部位，發(fā)揮免疫效應(yīng)功能。第14頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月淋巴細(xì)胞再循環(huán)與歸巢第15頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月外周免疫器官及外周淋巴組織既是淋巴細(xì)胞再循環(huán)的起點(diǎn)和中途站，也是淋巴細(xì)胞歸巢的終點(diǎn)。淋巴細(xì)胞在發(fā)揮免疫效應(yīng)的同時(shí)，被歸巢受體引導(dǎo)回該類(lèi)細(xì)胞的原定居處，進(jìn)行修整、增殖和發(fā)育，以提高該類(lèi)淋巴細(xì)胞的數(shù)量和功能，這是保證淋巴細(xì)胞功能健全的重要環(huán)節(jié)。第16頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫細(xì)胞凡參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為免疫細(xì)胞，按免疫細(xì)胞在體內(nèi)的作用不同分為三大類(lèi)。第17頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

T細(xì)胞（Thymus-dependentcell） 淋巴細(xì)胞B細(xì)胞（Bonemarrowdependent

cell）

NK細(xì)胞（NaturalKillercell）

能增殖分化并產(chǎn)生免疫效應(yīng)淋巴細(xì)胞分類(lèi)第18頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

吞噬細(xì)胞（phagocyte） 樹(shù)突狀細(xì)胞（DendriticCell,DC）免疫輔助細(xì)胞參與輔助淋巴細(xì)胞的活化

中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞免疫應(yīng)答細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞肥大細(xì)胞

參與免疫應(yīng)答中的某一環(huán)節(jié)第19頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月T細(xì)胞B細(xì)胞NK細(xì)胞

主要功能抗原識(shí)別抗原識(shí)別細(xì)胞毒性細(xì)胞免疫體液免疫免疫監(jiān)視免疫調(diào)節(jié)免疫調(diào)節(jié)

分布外周血液70%～75%10%～15%＜10%淋巴結(jié)70%～75%20%～25%很少脾臟30%～50%50%～65%≤5%

不同淋巴細(xì)胞及功能簡(jiǎn)介第20頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫分子

免疫分子是由一些免疫活性細(xì)胞或相關(guān)細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)及小分子多肽物質(zhì)組成，它們參與機(jī)體的免疫反應(yīng)或免疫調(diào)節(jié)。第21頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）補(bǔ)體系統(tǒng)（Complement,C）細(xì)胞因子（Cytokine）細(xì)胞粘附分子（CellAdhesionMolecules,CAM）白細(xì)胞分化抗原（ClusterDifferentiationantigen,CD）主要的免疫分子第22頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

臨床免疫學(xué)第23頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月臨床免疫學(xué)(clinicalimmunology)是將免疫學(xué)基礎(chǔ)理論、臨床醫(yī)學(xué)疾病與免疫學(xué)技術(shù)相結(jié)合，用于研究疾病的免疫病理機(jī)制、診斷與鑒別診斷、評(píng)價(jià)治療效果和判斷愈后的多個(gè)分支學(xué)科的總稱(chēng)。

第24頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月臨床免疫學(xué)發(fā)展的主要方向是將基礎(chǔ)免疫學(xué)研究所取得的理論成果應(yīng)用于臨床疾病的診治，探討新的免疫現(xiàn)象與臨床疾病的關(guān)系，進(jìn)一步推動(dòng)臨床免疫學(xué)與各相關(guān)學(xué)科的發(fā)展，為人類(lèi)的生命健康作出重要貢獻(xiàn)。第25頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月免疫病理學(xué)(immunopathology)是溝通基礎(chǔ)免疫研究與臨床醫(yī)學(xué)研究的橋梁。通過(guò)研究免疫細(xì)胞、炎性細(xì)胞、免疫分子，了解當(dāng)這些細(xì)胞或分子的功能失衡或缺陷與導(dǎo)致自身免疫性疾病、免疫缺陷病、免疫增殖病之間的相互關(guān)系。探討免疫相關(guān)性疾病患者疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的免疫病理改變，對(duì)治療與預(yù)后評(píng)價(jià)有著重要的臨床意義。

免疫病理與免疫性疾病第26頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

移植免疫學(xué)(transplantationimmunology)：移植免疫學(xué)是通過(guò)組織、細(xì)胞或器官移植，以替代機(jī)體喪失功能的組織器官或細(xì)胞，移植后保證移植物存活，不發(fā)生排斥反應(yīng)的一門(mén)科學(xué)，是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中臨床治療的一項(xiàng)重要手段

移植免疫第27頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月腫瘤免疫學(xué)(tumorimmunology)是研究腫瘤相關(guān)抗原和腫瘤的免疫診斷、腫瘤的發(fā)生發(fā)展與機(jī)體的免疫狀況、機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答和抗腫瘤免疫效應(yīng)機(jī)制的一門(mén)分支學(xué)科

腫瘤免疫第28頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月感染免疫學(xué)（infectionimmunology）是研究病原生物與宿主相互關(guān)系的學(xué)科，是傳統(tǒng)免疫學(xué)的基礎(chǔ)與核心。掌握免疫系統(tǒng)在殺傷被病原體感染的宿主細(xì)胞時(shí)對(duì)宿主的損傷程度，在免疫應(yīng)答過(guò)程中激活或抑制的效應(yīng)細(xì)胞當(dāng)病原體被清除后所發(fā)揮的作用，固有性免疫與獲得性免疫間的相互調(diào)節(jié)關(guān)系，生物疫苗在免疫防御中的特點(diǎn)均是當(dāng)前感染免疫研究的重點(diǎn)。

感染免疫第29頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)第30頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展免疫學(xué)檢驗(yàn)（laboratoryimmunology）是研究免疫學(xué)技術(shù)及其在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的重要學(xué)科。免疫學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展是隨著各種免疫物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)密切相關(guān)，在免疫學(xué)理論與生物學(xué)技術(shù)的長(zhǎng)期發(fā)展過(guò)程中，許多經(jīng)典技術(shù)被加以革新與放大而派生出更多新技術(shù)與新方法，這些方法和技術(shù)在醫(yī)學(xué)研究與臨床診斷的運(yùn)用中發(fā)揮了不可估量的作用。第31頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月發(fā)展進(jìn)程的主要階段自然的肉眼觀察的抗原抗體反應(yīng)（沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)）加速的肉眼觀察的抗原抗體反應(yīng)（電泳技術(shù)、分離技術(shù)）標(biāo)記性免疫技術(shù)提高抗原抗體反應(yīng)的特異性、敏感性半自動(dòng)、自動(dòng)化檢驗(yàn)儀器與免疫反應(yīng)原理結(jié)合，加快了反應(yīng)過(guò)程標(biāo)記技術(shù)、單克隆技術(shù)、高智能自動(dòng)化技術(shù)的最佳組合第32頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月免疫檢驗(yàn)可分為兩部分：一部分為利用免疫檢測(cè)原理與技術(shù)檢測(cè)免疫活性細(xì)胞、抗原、抗體、補(bǔ)體、細(xì)胞因子、細(xì)胞粘附分子等免疫相關(guān)物質(zhì)；另一部分是利用免疫檢測(cè)原理與技術(shù)檢測(cè)體液中微量物質(zhì)如激素、酶、血漿微量蛋白、血液藥物濃度、微量元素等。

臨床免疫學(xué)與免疫檢驗(yàn)第33頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

放射免疫技術(shù) 化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù) 熒光免疫技術(shù) 流式細(xì)胞免疫技術(shù) 酶聯(lián)免疫技術(shù) 免疫印跡技術(shù) 速率散射免疫技術(shù) 單克隆抗體技術(shù)免疫檢驗(yàn)涉及的主要技術(shù)第34頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月確定診斷分析病情調(diào)整治療方案判斷預(yù)后提供有效實(shí)驗(yàn)依據(jù)臨床應(yīng)用第35頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月臨床免疫檢驗(yàn)常用技術(shù)第36頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)記免疫技術(shù)免疫技術(shù)：以抗原-抗體反應(yīng)原理為基礎(chǔ)，對(duì)樣品中相應(yīng)抗原或抗體進(jìn)行檢測(cè)。標(biāo)記技術(shù)：將可被探測(cè)的示蹤物質(zhì)用化學(xué)方法與化合物連接。標(biāo)記免疫分析：用可微量或超微量檢測(cè)的示蹤劑標(biāo)記抗原、抗體，檢測(cè)免疫反應(yīng)結(jié)果并確定待檢物。第37頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月放射免疫技術(shù)

早期的放射免疫技術(shù)是基于競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng)原理的放射免疫分析(RIA)，稍后又發(fā)展了非競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的免疫放射分析(IRMA)。該類(lèi)技術(shù)具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、樣品及試劑用量少、操作簡(jiǎn)便且易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷領(lǐng)域中各種微量蛋白質(zhì)、激素、小分子藥物和腫瘤標(biāo)志物的定量分析，對(duì)相關(guān)學(xué)科的發(fā)展起到了極大地推動(dòng)作用。第38頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月原理及分類(lèi)

放射免疫

RIA以標(biāo)記抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體來(lái)測(cè)定待檢樣品中抗原量。

免疫放射

IRMA以過(guò)量標(biāo)記抗體與抗原非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，采用固相免疫吸附載體分離游離和結(jié)合標(biāo)記抗體。其它放射受體分析

RRA用受體測(cè)量抗原放射配體結(jié)合分析RBA用標(biāo)記配體研究受體生物學(xué)特牲第39頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月IRMA與RIA比較第40頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月化學(xué)發(fā)光免疫分析

化學(xué)發(fā)光是吸收了化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中所產(chǎn)生的化學(xué)能使分子激發(fā)而發(fā)光。化學(xué)發(fā)光免疫分析是將化學(xué)發(fā)光與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測(cè)微量抗原或抗體的標(biāo)記免疫分析技術(shù)，分為直接化學(xué)發(fā)光免疫分析，化學(xué)發(fā)光酶免疫分析和電化學(xué)發(fā)光免疫分析。第41頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

直接化學(xué)發(fā)光免疫分析

用吖啶酯直接標(biāo)記抗體(抗原)，與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測(cè)抗原-吖啶酯標(biāo)記抗體復(fù)合物，這時(shí)只需加入氧化劑（H2O2）和NaOH使成堿性環(huán)境，吖啶酯在不需要催化劑的情況下分解、發(fā)光。由集光器和光電倍增管接收、記錄單位時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)生的光子能，這部分光的積分與待測(cè)抗原的量成正比，可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出待測(cè)抗原的含量。第42頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

直接化學(xué)發(fā)光的機(jī)理

發(fā)光YYY磁微粒被測(cè)抗原+抗體+帶丫啶酯標(biāo)記物抗體YYYYYYYYYYY沖洗后---夾心法（1）加入H2O2（pH<10）（2）加入堿（pH>10）第43頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月化學(xué)發(fā)光酶免疫分析

化學(xué)發(fā)光酶免疫分析（chemiluminescenceenzyme

immunoassay，CLEIA）是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的酶如辣根過(guò)氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶(ALP)來(lái)標(biāo)記抗原或抗體，在與待測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫反應(yīng)后，形成固相包被抗體-待測(cè)抗原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，經(jīng)洗滌后，加入底物(發(fā)光劑)，酶催化和分解底物發(fā)光，由光量子閱讀系統(tǒng)接收，光電倍增管將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)并加以放大，再把它們傳送至計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，計(jì)算出測(cè)定物的濃度。第44頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖第45頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月堿性磷酸酶標(biāo)記化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖第46頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

電化學(xué)發(fā)光免疫分析

電化學(xué)發(fā)光免疫（electrochemiluminescenceimmunoassay，ECLIA）是以電化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗體(抗原)，以三丙胺(TPA)為電子供體，在電場(chǎng)中因電子轉(zhuǎn)移而發(fā)生特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個(gè)過(guò)程。第47頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月電化學(xué)發(fā)光免疫分析示意圖第48頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月酶免疫技術(shù)酶免疫技術(shù)酶免疫組化酶免疫測(cè)定均相非均相固相酶免疫測(cè)定液相酶免疫測(cè)定組織切片或其它標(biāo)本中抗原的定位

液體標(biāo)本中抗原或抗體的定性和定量第49頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月用于小分子激素和半抗原（如藥物）的測(cè)定

酶標(biāo)記物與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合后，標(biāo)記酶的活性會(huì)發(fā)生改變，不用分離結(jié)合和游離酶標(biāo)記物，通過(guò)測(cè)定標(biāo)記酶的活性的改變，而確定抗原或抗體的含量。原理均相酶免疫測(cè)定第50頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月最具代表性的兩種技術(shù)酶增強(qiáng)免疫測(cè)定技術(shù)EMITenzyme-mutipliedimmunoassaytechnique

克隆酶供體免疫分析

CEDIAclonedenzymedonorimmunoassay

第51頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月EMIT示意圖第52頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月CEDIA示意圖第53頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月分類(lèi)：液相酶免疫測(cè)定固相酶免疫測(cè)定以聚苯乙烯等材料作為固相載體的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）是目前最為常用的固相酶免疫測(cè)定與均相不同之處需分離游離與結(jié)合的酶標(biāo)記物非均相酶免疫測(cè)定第54頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

底物顯色定性或定量的分析原理包被反應(yīng)加入待測(cè)抗體或抗原和酶標(biāo)抗原或抗體洗滌使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的分離1234第55頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)抗原

方法：用已知抗體包被，加入待檢血清，再加酶標(biāo)抗體，加底物顯色

應(yīng)用：二價(jià)或二價(jià)以上的較大分子抗原測(cè)定

第56頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

ELISA竟?fàn)幏z測(cè)抗原方法：用已知抗體包被，加入待測(cè)血清，再加酶標(biāo)抗原，酶標(biāo)抗原與待檢物競(jìng)爭(zhēng)與包被物結(jié)合。加底物顯色。

應(yīng)用：用于只有一個(gè)抗原決定簇的小分子半抗原（藥物、激素等）第57頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月ELISA間接法檢測(cè)抗體方法

用已知抗原包被，加入待測(cè)血清，再加酶標(biāo)的抗人IgG（抗抗體或二抗）加底物顯色。優(yōu)點(diǎn)

一種酶標(biāo)抗抗體檢測(cè)各種與抗原相應(yīng)的抗體。應(yīng)用

常用于HCV抗體、HIV抗體和梅毒螺旋體抗體等的測(cè)定。第58頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月ELISA捕獲法檢測(cè)抗體原理：抗人IgMμ鏈抗體包被捕獲待測(cè)標(biāo)本中IgM類(lèi)抗體加入特異性抗原和酶標(biāo)記特異性抗原的抗體底物顯色

第59頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月熒光免疫技術(shù)基本原理

將抗原抗體反應(yīng)與熒光物質(zhì)發(fā)光分析相結(jié)合，用熒光檢測(cè)儀檢測(cè)抗原抗體復(fù)合物中特異性熒光強(qiáng)度，對(duì)液體標(biāo)本中微量或超微量物質(zhì)進(jìn)行定量測(cè)定。第60頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月熒光抗體技術(shù)熒光免疫測(cè)定均相熒光免疫測(cè)定（homogeneousfluorescenceimmunoassay）

非均相熒光免疫測(cè)定（heterogeneousfluorescenceimmunoassay）熒光免疫技術(shù)熒光免疫技術(shù)的類(lèi)型非均相熒光免疫測(cè)定：

時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定、熒光酶免疫測(cè)定均相熒光免疫測(cè)定：

熒光偏振免疫測(cè)定第61頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月直接熒光抗體染色法示意圖熒光素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。直接熒光抗體染色法第62頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月特異性抗體與相應(yīng)抗原反應(yīng)，熒光素標(biāo)記的抗抗體再與第一抗體結(jié)合。

間接熒光抗體染色法示意圖間接熒光抗體染色法第63頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)（TRFIA）是用鑭系金屬離子作為示蹤物標(biāo)記蛋白質(zhì)、多肽、激素、抗體、核酸探針或生物活性細(xì)胞,與其螯合劑、增強(qiáng)液(有一部分不需要)在待反應(yīng)體系(如:抗原抗體免疫反應(yīng)、生物素親和素反應(yīng)、核酸探針雜交反應(yīng)、靶細(xì)胞與效應(yīng)細(xì)胞的殺傷反應(yīng)等)發(fā)生反應(yīng)后,用時(shí)間分辨熒光儀測(cè)定最后產(chǎn)物中的熒光強(qiáng)度,根據(jù)熒光強(qiáng)度和相對(duì)熒光強(qiáng)度比值,推測(cè)反應(yīng)體系中分析物的濃度,達(dá)到定量分析的目的時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)第64頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月自發(fā)熒光壽命短:1ns～10ns鑭系元素壽命長(zhǎng):10μs～1000μs短壽命熒光完全衰變后再測(cè)定鑭系元素特異熒光基本原理時(shí)間分辨檢測(cè)原理示意圖時(shí)間分辨時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)第65頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月雙抗體夾心法固相抗體和Eu3+標(biāo)記抗體與待檢抗原結(jié)合，形成固相抗體-待檢抗原-Eu3+標(biāo)記抗體復(fù)合物，酸性增強(qiáng)液下，Eu3+解離，340nm激發(fā)光下發(fā)射613nm熒光。固相抗原競(jìng)爭(zhēng)法待檢抗原和固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合定量的Eu3+標(biāo)記抗體，溫育洗滌后在固相中加入熒光增強(qiáng)液,測(cè)定熒光強(qiáng)度，熒光強(qiáng)度與待檢抗原含量成反比。固相抗體競(jìng)爭(zhēng)法

待檢抗原和Eu3+標(biāo)記抗原與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合,溫育洗滌后在固相中加入熒光增強(qiáng)液,測(cè)定熒光強(qiáng)度，熒光強(qiáng)度與待檢抗原含量成反比。時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)測(cè)定方法第66頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月光線通過(guò)偏振濾光片后，形成一個(gè)方向的平面光稱(chēng)為偏振光。偏振熒光(綠光,525nm～550nm)偏振光(藍(lán)光,485nm)熒光物質(zhì)基本原理熒光偏振免疫技術(shù)測(cè)定第67頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

抗原抗體競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)AgF分子小，轉(zhuǎn)動(dòng)速度快，偏振熒光弱AgF-Ab分子大，轉(zhuǎn)動(dòng)速度慢，偏振熒光強(qiáng)若待檢抗原多，則AgF-Ab少，AgF多，偏振熒光弱待檢抗原含量與偏振熒光強(qiáng)度成反比熒光偏振免疫技術(shù)測(cè)定原理示意圖

基本原理熒光偏振免疫技術(shù)測(cè)定第68頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月基本原理熒光酶免疫測(cè)定熒光物質(zhì)產(chǎn)生示意圖

堿性磷酸酶標(biāo)記抗體或抗原，固相載體包被抗原或抗體，酶分解4-MUP，脫磷酸根基團(tuán)形成4-MU，360nm激發(fā)光照射，發(fā)出450nm熒光。熒光酶免疫技術(shù)測(cè)定第69頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月雙抗體夾心法固相抗體和酶標(biāo)記抗體與待檢原反應(yīng)，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，加入底物進(jìn)行酶促發(fā)光反應(yīng)，發(fā)光量與待檢抗原含量成正比。固相抗原競(jìng)爭(zhēng)法熒光酶免疫測(cè)定（雙抗體夾心法）示意圖熒光酶免疫技術(shù)測(cè)定方法第70頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定：

蛋白質(zhì)、激素、藥物、腫瘤標(biāo)記物、病原體抗原/抗體等熒光偏振免疫測(cè)定：

藥物、維生素、激素、常規(guī)生化項(xiàng)目等熒光酶免疫測(cè)定：

病毒抗體、細(xì)菌和毒素抗原、激素、腫瘤標(biāo)志物等熒光免疫測(cè)定的應(yīng)用第71頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)是以流式細(xì)胞儀為檢測(cè)手段的一項(xiàng)能快速、精確的對(duì)單個(gè)細(xì)胞理化特性進(jìn)行多參數(shù)定量分析和分選的新技術(shù)。流式細(xì)胞儀是測(cè)量染色細(xì)胞標(biāo)記物熒光強(qiáng)度的細(xì)胞分析儀，是在單個(gè)細(xì)胞分析和分選基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的對(duì)細(xì)胞的物理或化學(xué)性質(zhì)（如大小、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等）進(jìn)行快速測(cè)量并可分類(lèi)收集的高技術(shù)。流式細(xì)胞術(shù)第72頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月流式細(xì)胞術(shù)最大的特點(diǎn)是能在保持細(xì)胞及細(xì)胞器或微粒的結(jié)構(gòu)及功能不被破壞的狀態(tài)下，通過(guò)熒光探針的協(xié)助，從分子水平上獲取多種信號(hào)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行定量分析或純化分選。

細(xì)胞不被破壞，測(cè)量快速、大量、準(zhǔn)確、靈敏、定量流式細(xì)胞術(shù)的特點(diǎn)第73頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月流式細(xì)胞儀檢測(cè)范圍細(xì)胞大小細(xì)胞粒度細(xì)胞表面面積核漿比例DNA含量與細(xì)胞周期RNA含量蛋白質(zhì)含量細(xì)胞結(jié)構(gòu)特異性抗原（細(xì)胞表面/胞漿/核）細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子細(xì)胞活性酶活性激素結(jié)合位點(diǎn)細(xì)胞受體細(xì)胞功能第74頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

流式細(xì)胞術(shù)目前已廣泛地被應(yīng)用于免疫學(xué)基礎(chǔ)研究和逐步進(jìn)入臨床應(yīng)用各方面，用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)胞表面的抗原成分進(jìn)行標(biāo)記分析，可區(qū)別多種細(xì)胞的特性，為細(xì)胞免疫的研究增加了有效的手段和幫助。

在免疫學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

第75頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月T淋巴細(xì)胞及其亞群分析

Th(CD3+CD4+CD8-T);Tc(CD3+CD4-CD8+T)B淋巴細(xì)胞及其亞群分析

B1(CD19+CD5+):產(chǎn)生IgM型自身抗體,參與免疫調(diào)節(jié)、與自身免疫病的發(fā)生有關(guān)

B2(CD19+CD5-):受外來(lái)抗原刺激,產(chǎn)生高親和性特異性抗體NK細(xì)胞分析

NK(CD3-CD16+CD56+)細(xì)胞表面的抗原成分分析第76頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月淋巴細(xì)胞亞群與疾病疾病CD3CD4CD8CD4/CD8NK自身免疫性疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎自身免疫性溶血性貧血重癥肌無(wú)力免疫缺陷病愛(ài)滋病病毒感染傳染性單核細(xì)胞增多癥慢性活動(dòng)性肝炎活動(dòng)性肝硬化腫瘤消化道癌,肝癌,肺癌再生障礙性貧血粒細(xì)胞減少癥第77頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月在免疫學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用淋巴細(xì)胞功能分析細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒性試驗(yàn)(死細(xì)胞與活細(xì)胞比例)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子測(cè)定淋巴造血系統(tǒng)及白血病免疫分型對(duì)淋巴瘤和白血病進(jìn)行多色免疫分型用于選擇化療方案、判斷預(yù)后及檢出微小殘留病變腫瘤耐藥基因分析MDR(+)表示對(duì)化療藥物耐藥在免疫學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

第78頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月AIDS病檢測(cè)中的應(yīng)用CD4+Th細(xì)胞、CD4+/CD8+比例自身免疫病相關(guān)HLA抗原分析HLA-B27可出現(xiàn)在58%～97%的強(qiáng)直性脊椎炎(As)患者移植免疫中的應(yīng)用FCM作為一個(gè)強(qiáng)大的技術(shù)平臺(tái)，其在移植免疫分析中的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。目前移植免疫中的FCM應(yīng)用主要包括流式細(xì)胞術(shù)的交叉配型（Flowcytometrycross-matching,FCXM）和群體反應(yīng)性抗體（Panelreactiveantibody,PRA）檢測(cè)。

在免疫學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

第79頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月基因芯片技術(shù)

基因芯片(Genechip)

又稱(chēng)DNA芯片（DNAChip）或生物芯片(Biologicalchip），它是指將大量探針?lè)肿庸潭ㄓ谥С治锷希缓笈c標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交，通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)度及分布進(jìn)而對(duì)靶分子的序列和數(shù)量進(jìn)行分析。第80頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月基因芯片檢測(cè)原理及簡(jiǎn)要過(guò)程用生物素標(biāo)記并經(jīng)擴(kuò)增的靶序列或樣品然后再與芯片上的大量探針進(jìn)行雜交用鏈霉親和素(streptavidin)偶聯(lián)的熒光素（常用的熒光素還有l(wèi)assamine和phycoerythrin）進(jìn)行顯色圖象的采集用落射熒光顯微鏡(epifluorescencemicroscope)、激光共聚焦顯微鏡或其它熒光顯微裝置對(duì)片基掃描由計(jì)算機(jī)收集熒光信號(hào)，并對(duì)每個(gè)點(diǎn)的熒光強(qiáng)度數(shù)字化后進(jìn)行分析。第81頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月基因芯片技術(shù)的應(yīng)用利用基因芯片進(jìn)行雜交測(cè)序基因芯片技術(shù)與生物傳感器的結(jié)合應(yīng)用基因芯片技術(shù)在分子免疫學(xué)中的應(yīng)用基因芯片技術(shù)在基因表達(dá)譜測(cè)定中的應(yīng)用基因芯片技術(shù)在突變檢測(cè)及多態(tài)性分析方面的應(yīng)用基因芯片技術(shù)在基因組文庫(kù)作圖中的應(yīng)用第82頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月自身免疫性疾病及其免疫檢測(cè)第83頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月自身免疫性疾病(autoimmunedisease，AID)

因自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致組織器官損傷或功能障礙所致疾病。自身免疫性疾病分類(lèi)第84頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月系統(tǒng)性自身免疫病(systemicautoimmunedisease)或器官非特異性或全身性自身免疫病器官特異性自身免疫病(organ-specificautoimmunedisease)或局限性自身免疫病按疾病累及的系統(tǒng)區(qū)分按器官特異性分為兩類(lèi)

結(jié)締組織疾病神經(jīng)肌肉疾病內(nèi)分泌性疾病消化系統(tǒng)疾病泌尿系統(tǒng)疾病血液系統(tǒng)疾病生殖系統(tǒng)疾病皮膚組織疾病循環(huán)系統(tǒng)疾病第85頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月器官特異性非器官特異性橋本甲狀腺炎擴(kuò)張性心肌炎自身免疫性溶血性貧血系統(tǒng)性紅斑狼瘡原發(fā)性粘液水腫惡性貧血特發(fā)性血小板減少性紫癜干燥綜合征甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)自身免疫性胃炎特發(fā)性粒細(xì)胞減少癥類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎Addisino病自身免疫性肝炎絕經(jīng)過(guò)早（少數(shù)病例）硬皮病1型糖尿病原發(fā)性膽汁性肝硬化男性不育（少數(shù)病例）多發(fā)性肌炎/皮肌炎重癥肌無(wú)力原發(fā)性硬化性膽管炎交感性眼炎混合性結(jié)締組織病多發(fā)性硬化癥潰瘍性結(jié)腸炎晶狀體源性葡萄膜炎系統(tǒng)性血管炎脫髓鞘疾病克羅恩病抗磷脂綜合征尋常型天皰瘡自身免疫性腎小球腎炎肺腎出血綜合征自身免疫病的“病譜”第86頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.多數(shù)病因不明2.患者以女性居多，并隨年齡增加發(fā)病率有所增加3.有遺傳傾向4.患者血清中有多種自身抗體或自身反應(yīng)性致敏淋巴細(xì)胞存在5、疾病有重疊現(xiàn)象，即一個(gè)病人可同時(shí)患一種以上自身免疫病6.病程一般較長(zhǎng)，多遷延為慢性7.病損局部可發(fā)現(xiàn)淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等浸潤(rùn)8.免疫抑制劑治療可取得一定療效自身免疫性疾病的共同特征第87頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

常見(jiàn)的自身免疫性疾病

由于病理性的自身免疫應(yīng)答可發(fā)生在體內(nèi)任何組織器官，臨床上常以病理?yè)p害的機(jī)制來(lái)區(qū)分各類(lèi)自身免疫性疾病，而許多自身免疫性疾病與超敏反應(yīng)的發(fā)生髻之密切相關(guān)，因此，可分為由Ⅱ型超敏反應(yīng)引起的自身免疫性疾病，由Ⅲ型超敏反應(yīng)引起的自身免疫性疾病及由T細(xì)胞對(duì)自身抗原應(yīng)答引起的自身免疫性疾病。當(dāng)兩種或兩種以上的自身免疫病出現(xiàn)混合的臨床表現(xiàn)時(shí)，稱(chēng)為混合性結(jié)締組織?。╩ixedconnectivetissuedisease，MCTD）。第88頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）II型超敏反應(yīng)引起的AID1）抗血細(xì)胞表面抗原的抗體引起的AID

自身抗體與相應(yīng)的細(xì)胞膜表面抗原結(jié)合，并激活補(bǔ)體系統(tǒng)而引起細(xì)胞破壞和溶解。自身免疫性血小板減少性紫癜2）抗細(xì)胞表面受體抗體引起的AID

自身抗體與細(xì)胞膜表面抗原結(jié)合后，其Fc段與K細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞的Fc受體結(jié)合，通過(guò)ADCC作用對(duì)靶細(xì)胞殺傷。毒性彌漫性甲狀腺腫、重癥肌無(wú)力重癥肌無(wú)力：神經(jīng)肌肉接頭傳遞的自身免疫?。?）

胸腺病變（2）

IgG增多，血中抗乙酰膽堿受體抗體陽(yáng)3）細(xì)胞外抗原的自身抗體引起的AID自身抗體刺激或封閉靶細(xì)胞表面受體，而興奮(刺激)或抑制細(xì)胞的功能。肺-腎綜合癥第89頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.細(xì)胞膜或膜吸附成分的自身抗體引起AID自身抗體作用方式：由于該反應(yīng)主要發(fā)生在脾臟，故脾臟切除是治療這些疾病的一種療法。′第90頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.細(xì)胞表面受體自身抗體引起的自身免疫病第91頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第92頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3.細(xì)胞外成分自身抗體引起的AID體內(nèi)自發(fā)產(chǎn)生anti-基底膜Ⅳ型膠原腎小球基底膜腎炎肺出血肺基底膜吸煙肺出血-腎炎綜合征第93頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

自身抗體-免疫復(fù)合物引起的AID與Ⅲ型超敏反應(yīng)有關(guān)的自身免疫病有；SLE、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及慢性肝炎的各種肝外表現(xiàn)等。SLE（非器官特異性）多種自身抗體形成：抗核抗體、抗DNA、RNA...

免疫損傷：狼瘡細(xì)胞形成，皮膚、關(guān)節(jié)、心血管、腎、肝…

原因：（1）

慢病毒持續(xù)性感染（2）

Ag-Abcomplex沉積（3）

藥物應(yīng)用（二）Ⅲ型超敏反應(yīng)引起的AID第94頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎

類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是患者血中變性的IgG與其相應(yīng)的自身抗體即類(lèi)風(fēng)濕因子(rheumatoidfactor，RF)結(jié)合形成的免疫復(fù)合物沉積于關(guān)節(jié)滑膜和血管壁而導(dǎo)致關(guān)節(jié)的慢性炎性病變。第95頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）IV型超敏反應(yīng)引起的AIDT細(xì)胞對(duì)自身抗原應(yīng)答引起的炎癥性傷害與Ⅳ型超敏反應(yīng)有關(guān)的自身免疫有；慢性活動(dòng)性肝炎、慢性潰瘍性結(jié)腸炎，特發(fā)性慢性腎小腺皮質(zhì)功能減退癥(Addison’s病)、變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓膜炎、胰島素依賴(lài)性糖尿病等。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)SLE病人血中的T細(xì)胞能與DNA反應(yīng)并釋放淋巴因子，提示SLE的發(fā)病也與Ⅳ型超敏反應(yīng)有關(guān)第96頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

常見(jiàn)自身免疫性疾病的自身抗體檢測(cè)

自身抗體（autoantibody）

是指抗自身細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞表面和細(xì)胞外抗原的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身抗體(譜)

分類(lèi):

臟器特異性自身抗體臟器非特異性自身抗體第97頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)志抗體相關(guān)疾病dsDNASLESmSLESSBSS著絲點(diǎn)抗體PSS（局限型）Scl-70抗體PSS（彌漫型）AKA、抗CCP抗體RAJo-1抗體PM/DM高滴度RNP抗體MCTD肝腎微粒體抗體（LKM-1）Ⅱ型自身免疫性肝炎平滑肌抗體（SMA）Ⅰ型自身免疫性肝炎AMA（M2）PBC常見(jiàn)自身免疫性疾病的標(biāo)志抗體第98頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月抗核抗體（ANA）抗可提取性核抗原抗體（ENA）抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）抗角蛋白抗體（AKA）抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）抗心磷脂抗體（ACLA）常檢測(cè)的自身抗體第99頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

抗核抗體::以真核細(xì)胞（如HEp-2細(xì)胞、肝細(xì)胞）的各種細(xì)胞核成分為靶抗原所檢測(cè)的自身抗體的總稱(chēng)?？购丝贵w的檢測(cè)與應(yīng)用第100頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月抗核抗體譜第101頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月抗雙鏈DNA抗體

抗dsDNA抗體與細(xì)胞核DNA（外圍區(qū)）脫氧核糖磷酸框架結(jié)合。

抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體。其抗體滴度與疾病的活動(dòng)程度有相關(guān)性，抗體滴度的動(dòng)態(tài)測(cè)定為監(jiān)控治療提供了有效的實(shí)驗(yàn)室手段?？闺p鏈DNA抗體第102頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月檢測(cè)方法及應(yīng)用間接免疫熒光檢測(cè)，是目前國(guó)內(nèi)外臨床常規(guī)檢測(cè)抗dsDNA抗體最常用的方法。抗dsDNA抗體診斷SLE的特異性可達(dá)95%～100%，但其敏感性?xún)H為30%～50%，因此抗dsDNA抗體陰性不能排除SLE的診斷。檢測(cè)方法及應(yīng)用第103頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月抗核小體抗體

核小體（nucleosome）是真核生物細(xì)胞核染色質(zhì)的基本單位。凋亡細(xì)胞是核小體的重要來(lái)源，當(dāng)SLE患者的吞噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的清除能力受損或降低，導(dǎo)致核小體在患者體內(nèi)大量存積，激活B細(xì)胞產(chǎn)生抗核小體抗體（Antinucleosomeantibody,AnuA）。第104頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月檢測(cè)及應(yīng)用AnuA的檢測(cè)通常采用ELISA檢測(cè)法。AnuA具有同抗ds-DNA抗體相同的診斷特異性，可達(dá)到95%，在系統(tǒng)性硬化（SSc）病中可有20%～50%低濃度陽(yáng)性率，其他自身免疫性疾病中該抗體均為陰性。AnuA的表達(dá)與SLE病情活動(dòng)分?jǐn)?shù)相關(guān)。檢測(cè)及應(yīng)用第105頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

抗ENA抗體譜:可提取核抗原抗體的總稱(chēng)

臨床常檢測(cè)的抗ENA抗體譜主要包括：

抗Sm抗U1-RNP

抗SSA抗SSB

抗Jo-1抗Scl-70

抗rib-P蛋白抗ENA抗體譜的檢測(cè)與應(yīng)用第106頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

抗可提取性核抗原（ENA）抗體抗Sm抗體：SLE標(biāo)記性抗體（20%~30%）抗nRNP抗體：MCTD95%~100%（高滴度）抗SSA抗體：PSS60%~75%，其它CTD抗SSB抗體：

PSS10%~40%，其它CTD抗Scl-70抗體：SSc25%~75%,標(biāo)記性抗體抗Jo-1抗體：PM/DM25%，標(biāo)記性抗體抗rRNP抗體：

SLE特異性抗體（10%~30%）第107頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（anti-neutrophilcytoplasmicautoantibodies,ANCA）是一組以人中性粒細(xì)胞胞漿成分為靶抗原，與臨床多種小血管炎性疾病密切相關(guān)的自身抗體，對(duì)系統(tǒng)性血管炎、炎癥性腸病等疾病的診斷與鑒別診斷具有重要意義。與小血管炎相關(guān)的自身抗體檢測(cè)與應(yīng)用第108頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

ANCA臨床應(yīng)用

髓過(guò)氧化物酶（MPO）與顯微鏡下多血管炎、壞死性新月體型腎小球腎炎、過(guò)敏性肉芽腫性血管炎相關(guān)殺菌/通透性增高蛋白（BPI）主要見(jiàn)于肺部炎癥性疾病并與長(zhǎng)期慢性綠膿桿菌感染有一定關(guān)系

蛋白酶3（PR3）與Wegener’s肉芽腫（WG）密切相關(guān)。僅cANCA診斷WG的特異性大于90%，聯(lián)合PR3

可超過(guò)95%，活動(dòng)期幾乎100%陽(yáng)性。

組織蛋白酶G(Cath-G)白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)乳鐵蛋白(LF)可見(jiàn)于SLE、IBD（炎性潰瘍）、PBC、PSC等第109頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月免疫缺陷性疾病及其免疫檢驗(yàn)第110頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月由遺傳因素或其他原因造成的免疫系統(tǒng)發(fā)育或免疫應(yīng)答障礙而導(dǎo)致的一種或多種免疫功能不全稱(chēng)為免疫缺陷(immunodeficiency),由此所致的各種臨床綜合征稱(chēng)為免疫缺陷病(immunodeficiencydisease,ID)。

第111頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月原發(fā)性免疫缺陷性疾?。╬rimaryimmunodeficiencydisease,PIDD）繼發(fā)性免疫缺陷?。╯econdaryimmunodeficiencydisease,SIDDorAIDD）免疫缺陷病分類(lèi)第112頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月反復(fù)感染易發(fā)腫瘤高度伴發(fā)自身免疫病的傾向，以類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和惡性貧血等多見(jiàn)。遺傳傾向臨床表現(xiàn)和病理?yè)p傷復(fù)雜多樣免疫缺陷病的特點(diǎn)第113頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月免疫缺陷病類(lèi)型病原體類(lèi)別感染類(lèi)型體液免疫、吞噬細(xì)胞和補(bǔ)體缺陷以化膿性球菌感染為主，補(bǔ)體缺陷時(shí)也常見(jiàn)腦膜炎鏈球菌和淋球菌感染敗血癥、化膿性腦膜炎、肺炎、氣管炎、中耳炎、全身性肉芽腫等細(xì)胞免疫缺陷細(xì)胞內(nèi)寄生病原體感染為主重癥病毒感染、真菌感染、布氏菌病、結(jié)核病聯(lián)合免疫缺陷以化膿菌為主，有時(shí)合并胞內(nèi)寄生病原體感染全身重癥細(xì)菌及病毒感染、頑固性腹瀉或膿皮病免疫缺陷病感染特點(diǎn)第114頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月原發(fā)性免疫缺陷病原發(fā)性免疫缺陷性疾?。╬rimaryimmunodeficiencydisease,PIDD）又稱(chēng)先天性免疫缺陷病（congenitalimmunodeficiencydisease,CIDD）,是由于免疫系統(tǒng)遺傳基因異?；蛳忍煨悦庖呦到y(tǒng)發(fā)育障礙而致免疫功能不全引起的疾病。第115頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

一、原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病二、原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病三、原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病四、原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷病五、原發(fā)性補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷病原發(fā)性免疫缺陷性疾病第116頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

由于B細(xì)胞先天性發(fā)育不全，或由于B細(xì)胞不能接受T細(xì)胞傳遞的信號(hào)，而導(dǎo)致抗體產(chǎn)生減少的一類(lèi)疾病。

原發(fā)性B細(xì)胞缺陷primaryBlymphocytesdeficiency第117頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)特征主要臨床表現(xiàn)體內(nèi)Ig水平降低或缺陷外周血B細(xì)胞可減少或缺陷T細(xì)胞數(shù)量正常。反復(fù)化膿性感染第118頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月發(fā)病機(jī)制:B細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子酪氨酸激酶（Bruton’styrosinekinase，Btk）基因缺陷，使得B細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)障礙，導(dǎo)致B細(xì)胞發(fā)育停滯于前B細(xì)胞階段，成熟B細(xì)胞數(shù)量減少或缺失。（一）X性連鎖無(wú)丙種球蛋白血癥（X-linkedagamaglobulinemia，XLA）為X連鎖隱性遺傳，多見(jiàn)于男性嬰幼兒。故又稱(chēng)Bruton病。臨床表現(xiàn)：患兒多在出生6月后反復(fù)發(fā)生化膿性細(xì)菌感染,血清中各類(lèi)Ig含量明顯降低，外周血成熟B細(xì)胞和漿細(xì)胞數(shù)量幾乎為零。第119頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月臨床表現(xiàn)：患兒易反復(fù)感染，尤其是呼吸道感染，比低水平免疫球蛋白缺陷病表現(xiàn)更為嚴(yán)重。（二）X性聯(lián)高IgM綜合征

（X-linkedhighIgMsyndrome，XLHM）發(fā)病機(jī)制：X-染色體上CD40L基因突變，使T細(xì)胞表達(dá)CD40L缺陷，其與B細(xì)胞CD40的相互作用受阻，導(dǎo)致B細(xì)胞活化增殖和Ig類(lèi)別轉(zhuǎn)換障礙，不能產(chǎn)生除IgM以外的其它類(lèi)型免疫球蛋白。實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)：血清IgM升高而IgG、IgA、IgE水平低下，外周血和淋巴組織中有大量分泌IgM的漿細(xì)胞。第120頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)：血清IgA水平異常低下（<50mg/L），sIgA缺乏，其它各類(lèi)Ig水平正常。（三）選擇性IgA缺陷

（selectiveIgAdeficiency）最常見(jiàn)的選擇性Ig缺陷，為常染色體顯性或隱性遺傳

發(fā)病機(jī)制：具有IgA受體的B細(xì)胞發(fā)育停滯，不能分化成為分泌IgA的漿細(xì)胞。臨床表現(xiàn)：患者多無(wú)明顯癥狀，或僅表現(xiàn)為呼吸道、消化道和泌尿道反復(fù)感染，少數(shù)患者可出現(xiàn)嚴(yán)重感染，常伴有自身免疫病和超敏反應(yīng)性疾病。第121頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月T細(xì)胞的發(fā)生、分化和功能障礙的遺傳性缺陷，其中包括T細(xì)胞及其前體。T細(xì)胞缺陷不僅影響T效應(yīng)細(xì)胞（如TCL），也會(huì)間接影響單核-吞噬細(xì)胞和B細(xì)胞。因此，多數(shù)T細(xì)胞功能缺陷者常伴體液免疫功能缺陷。原發(fā)性T細(xì)胞缺陷（primaryTlymphocytesdeficiency）第122頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月患兒T細(xì)胞功能缺陷、外周血T細(xì)胞數(shù)減少或正常，B細(xì)胞和抗體功能正?；蚱?。（一）先天性胸腺發(fā)育不全綜合癥又稱(chēng)DiGeorge綜合征，為典型的T細(xì)胞缺陷性疾病，并伴甲狀腺功能低下。發(fā)病機(jī)制：由于妊娠早期胚胎第三、四咽囊分化發(fā)育障礙，導(dǎo)致起源于該部位的器官如胸腺、甲狀旁腺、主動(dòng)脈弓、唇和耳等發(fā)育不全。臨床特征：有心臟和大血管畸形，反復(fù)感染和新生兒24小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)手足抽搐

第123頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

例如：CD3復(fù)合分子（-、-、-、-鏈）基因變異引起TCR-CD3復(fù)合物表達(dá)或功能受損

ZAP-70（一種酪氨酸激酶）基因變異，不能產(chǎn)生ZAP-70蛋白

（二）TCR活化和功能缺陷T細(xì)胞膜分子表達(dá)異常或缺失可導(dǎo)致T細(xì)胞活化和功能缺陷第124頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

一組胸腺、淋巴組織發(fā)育不全及Ig缺乏的遺傳性疾病，機(jī)體不能產(chǎn)生細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答?；颊叱錾?個(gè)月即出現(xiàn)發(fā)育障礙，易發(fā)嚴(yán)重感染而死亡。重癥聯(lián)合免疫缺陷

（severecombinedimmunodeficiencydisease，SCID）第125頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月患者病理表現(xiàn)：T細(xì)胞缺乏或顯著減少B細(xì)胞數(shù)量正常但功能異常，導(dǎo)致Ig生成減少和類(lèi)型轉(zhuǎn)換障礙主要發(fā)病機(jī)制：IL-2受體鏈基因突變。（一）性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺陷（X-linkedSCID,X-SCID）

第126頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月發(fā)病機(jī)制：定位于第20對(duì)染色體的ADA基因突變導(dǎo)致ADA缺乏，使腺苷和脫氧腺苷分解障礙，造成核苷酸代謝產(chǎn)物dATP和dGTP在細(xì)胞內(nèi)大量蓄積，對(duì)早期T、B細(xì)胞有毒性作用，影響RNA、DNA、蛋白質(zhì)和磷脂合成，使之發(fā)育成熟受阻，造成T細(xì)胞和B細(xì)胞缺陷。（二）腺苷脫氨酶缺乏癥（adenosinedeaminase,ADA）

第127頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月主要表現(xiàn)：

吞噬細(xì)胞的數(shù)量、移動(dòng)和（或）黏附功能、殺菌活性等異常原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷

primaryphagocytesdeficiency臨床表現(xiàn)：化膿性細(xì)菌或真菌反復(fù)感染第128頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月臨床表現(xiàn)：患兒多在出生后1個(gè)月內(nèi)即開(kāi)始發(fā)生各種細(xì)菌的反復(fù)感染。（一）中性粒細(xì)胞數(shù)量減少分類(lèi)：粒細(xì)胞減少癥（granulocytopenia）和粒細(xì)胞缺乏癥（agranulocytosis。發(fā)病機(jī)制：G-CSF（粒細(xì)胞集落刺激因子）基因突變導(dǎo)致粒細(xì)胞分化受阻。第129頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月LAD-1發(fā)病機(jī)制：是由于CD-18基因突變，使中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、NK細(xì)胞表面整合素家族成員表達(dá)缺陷，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞不能與內(nèi)皮細(xì)胞黏附、移行并穿過(guò)血管壁到達(dá)感染部位。

（二）白細(xì)胞黏附缺陷

（leukocyteadhesiondeficiency，LAD）分類(lèi)：分為L(zhǎng)AD-1和LAD-2兩種LAD-2發(fā)病機(jī)制：是一種巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因突變，使得白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞表面缺乏能與選擇素家族成員結(jié)合的寡糖配體Sialyl-Lewisx（Slex），導(dǎo)致白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的黏附障礙。臨床表現(xiàn)：均表現(xiàn)為反復(fù)的化膿性細(xì)菌感染第130頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月發(fā)病機(jī)制：

編碼還原型輔酶Ⅱ（NADPH）氧化酶系統(tǒng)的基因缺陷。（三）慢性肉芽腫病

（chronicgranulomatousdisease，CGD）臨床表現(xiàn)：為反復(fù)的化膿性感染，淋巴結(jié)、皮膚、肝、肺、骨髓等器官有慢性化膿性肉芽腫或伴有瘺管形成。第131頁(yè)，課件共149頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月多數(shù)為常染色體隱性遺傳，少數(shù)為常染色體顯性遺傳,屬最少見(jiàn)的原發(fā)性免疫缺陷病。原發(fā)性補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷

（primarycomplementsystemdeficiency）在補(bǔ)體系統(tǒng)中，幾乎所有的補(bǔ)體固有成分、