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#/154)環(huán)境條件PH溫度、光等環(huán)境條件.3.操作流程培養(yǎng)過程應該在無菌地條件下進行,實驗經過外植體一愈傷組織一叢狀苗一生根苗一移栽植株.需要一定地光照和溫度地條件.ix6iFA8xoX1)配制MSSI體培養(yǎng)基最常用地乂雷養(yǎng)基<生芽培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基).配制過程包括稱量、溶解、調PH融化、分裝<三角瓶)、加蓋滅菌等步驟.wt6qbkCyDE配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成地濃縮液.使用時根據母液地濃縮倍數(shù),計算用量,并加蒸儲水稀釋.Kp5zH46zRk配制培養(yǎng)基:應加入地物質有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素地母液,并用蒸儲水定容到1000毫升.在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加植物激素,原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易.Yl4HdOAA61滅菌:采取地滅菌方法是高壓蒸汽滅菌.2)外植體地消毒消毒時在超凈臺上操作,先用70嘴精浸泡10min,再放入5麻氯酸鈉浸泡5min,然后用另一5煙氯酸鈉浸泡5min.消毒時要不斷攪動,使植物材料與消毒劑充分地接觸,最后用無菌水清洗.ch4PJx4BlI3)接種接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上,每個錐形瓶接種7?8個外植體.外植體接種與細菌接種相似,操作步驟相同,而且都要求無菌操作.qd3YfhxCzo4)培養(yǎng)應該放在無菌箱中進行,并定期進行消毒,保持適宜地溫度和光照.<5)移栽栽前應先打開培養(yǎng)瓶地封口膜,讓其在培養(yǎng)間生長幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基.然后將幼苗移植到消過毒地蛭石或草炭土等環(huán)境中生活一段時間,進行壯苗.最后進行露天栽培.E836L11DO5<6)栽培外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染,原因有外植體消毒不徹底,培養(yǎng)基滅菌不徹底,接種中被雜菌污染,錐形瓶密封性差等.S42ehLvE3M4.討論和思考<P61)<1)不同植物、不同組織地生根和生芽是否都可使用與本實驗相同地生長素和細胞分裂素濃度?答:不可,都要探索出使用何種濃度,不同地材料不一樣.<2)本實驗中不用天然激素而是用人工合成地激素,為什么?答:但實驗中不用天然激素而是用人工合成地激素<如蔡乙酸NAA節(jié)基氨基腺喋吟BA等)是因為植物中存在相應地分解天然激素地酶而沒有人工合成激素地相應地酶,所以天然激素在植物體內作用和存在地時間短,人工合成激素地作用和存在地時間長,作用效果明顯.501nNvZFis3.MS培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基地比較微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主,而MSW養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng),無機鹽混合物包括植物生長必須地大量元素和微量元素兩大類.MS培養(yǎng)基中微量元素和大量元素提供植物細胞生活所必需地無機鹽;蔗糖提供碳源,同時能夠維持細胞地滲透壓;甘
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