癌基因和抑癌基因專業(yè)知識培訓課件

癌基因和抑癌基因專業(yè)知識存在于細胞內有自主增殖能力的遺傳單位。編碼有生物學功能的多肽或RNA序列的核酸序列（一般是DNA序列）。包括DNA編碼區(qū)和多種調節(jié)“元件”。2癌基因和抑癌基因專業(yè)知識

癌基因：簡單講所有被引進正常細胞后能使其轉化為腫瘤的基因。

腫瘤抑制基因：突變或缺失而功能失活后使正常細胞轉化為腫瘤的基因。

調整基因：這是一種能控制腫瘤細胞在體內擴散的基因，其作用方式是阻止惡性細胞的轉移、入侵正常組織，或削弱惡性細胞抗拒免疫系統(tǒng)的能力。3癌基因和抑癌基因專業(yè)知識歷史：1911年PeytonRous，從雞發(fā)現(xiàn)Rous肉瘤病毒(RSV)。RSV屬逆轉錄病毒（RNA病毒）。含病毒基因V-src?；蚪M中含有原癌基因：1983年發(fā)現(xiàn)V-sis存在于猿猴肉瘤病毒SSV中的癌基因，它的產物和人的一個正?；騊DGF相似。

SSV(無轉化能力)“劫持”PDGF基因感染宿主細胞

改頭換面的PDGF大量表達細胞不斷生長4癌基因和抑癌基因專業(yè)知識致癌因素：病毒化學物理DNA轉染：證明非病毒引起的腫瘤也含有癌基因。如：ras什么是癌基因（oncogene）：人類基因組中存在著一類能促進細胞分裂并有潛在致癌作用的基因稱為原癌基因(proto-oncogenes)。某些原癌基因在環(huán)境因子的作用下，發(fā)生突變、DNA重排、促進子插入、DNA擴增或調控序列的改變而被激活成為癌基因。5癌基因和抑癌基因專業(yè)知識TransformedCellsorTumorTissueHighMolecularWeightDNACalciumPhosphate-DNAPrecipitateNormalCells2adCycle2ndCycleHybridizationtoHumanRepeatSequencesFocltumor6癌基因和抑癌基因專業(yè)知識、原癌基因Protooncogenes必要條件：1．與細胞生長有關可促進生長2．潛在致癌性特定條件下：

原癌基因Proto-Oncogene化學致癌物、病毒、放射線等

突變Mutation“激活”Activation重排Rearrangement

過量表達Over-expression癌基因Oncogene擴增Amplification3．個體生長、發(fā)育所必需“看家基因”HouseKeeperGenes進化上高度保守性4．僅在特定組織中具有潛在的致癌性促進生長的功能7癌基因和抑癌基因專業(yè)知識原癌基因基因高表達（1）異常表達（2）abl妊娠中期胚胎、睪丸、脾、胸腺慢性髓細胞白血病erbAerbB胚胎鱗細胞癌、膠質母細胞瘤fes骨髓髓性、淋巴性白血病fms巨噬細胞、胎盤乳腺癌、腎癌fos羊膜、絨毛膜、成熟巨噬細胞、GF刺激后的細胞絨毛膜癌mos睪丸、卵細胞漿細胞瘤myb卵黃囊、骨髓、胸腺髓性、淋巴性白血病myc普遍存在B細胞淋巴瘤、早幼粒白血病raf普遍存在多種腫瘤ras普遍存在多種腫瘤rel脾臟ros腎臟sis血小板骨肉瘤ski軟骨、肌肉、皮膚src脾臟、巨噬細胞、大腦腦腫瘤yes腎臟（1）大多數(shù)研究使用實驗動物，主要小鼠。（2）實驗材料為人體腫瘤或腫瘤細胞系。8癌基因和抑癌基因專業(yè)知識二、原癌基因活化的幾種主要機制1．逆轉錄病毒轉導TransductionviaretrovirusesLTRLTRLTRLTRLTRLTRViralRNAPackagingOfrotrovirusgogpolenvgagpolenvgogpolenvProtooncogene“captured”fromhostcellgenomeReplicationDefectionRetroviruswithoutoncogeneReplicationCompotontA9癌基因和抑癌基因專業(yè)知識2．控制元件插入ControlingelementinsertionCBLTRCellularproto-oncogenehostDNAtranscriptionLTRLTRtranscriptiontranscriotionCellularproto-oncogenehostDNAEnhancereffect逆轉錄病毒感染細胞后，病毒DNA插入宿主細胞染色體DNA（插入突變）10癌基因和抑癌基因專業(yè)知識3．點突變Pointmutation

典型實例ras癌基因：p21ras密碼子12，61是突變“熱點”。膀胱癌、肺癌、乳腺癌和神經母細胞瘤甲狀腺癌RET基因突變RETmutation綜合癥

11114EctoTmCyto錯義（e.g.codon609）MEN2A/FMTC錯義（e.g.codon918）MEN2B無義缺失、框架移動Hirschsprung病錯義(e.g.codon620)Hirschsprung病及/或MEN2A11癌基因和抑癌基因專業(yè)知識4．染色體移位Chromosomaltranslocation

不同染色體的一部分合并，造成基因重排、表達增加。Burkitt淋巴瘤：chromosome8q(c-myc)14.2.22c-myc活化慢性髓細胞性白血病(CML)：chromosome9大部位(c-abl)chromosom22一段，c-abl基因活化q3495’3’5’3’22q11.2ablder9Ph’abl9q3422q11.222q11.29q34Der(22)DNARNAProtein12癌基因和抑癌基因專業(yè)知識5．基因擴增

染色體一定區(qū)域DNA的許多次復制造成大量拷貝

(1)

均勻染色區(qū)(Homogeneouslystainingregion,HSR)：被復制的DNA串聯(lián)排列在染色體的同一位置。(2)雙微染色體(Doubleminutechromosomes)：被復制的DNA呈細小成對的染色體樣結構。

在人的各種神經系統(tǒng)腫瘤的HSRs和雙微體均發(fā)現(xiàn)N-myc基因。TumorOncogeneAmplificationRcf.Small-celllungcancerc-mycUpto8OX67N-mycUpto50X66L-mycUpto20X266NenroblastomasN-mycUpto250X295Glioblastomasc-crbB1(EGFR)Upto50X296Mammarycarcinomac-crbB2(HER2)Upto30X71.72c-mycUpto50X297CyclinD1Upto30X20113癌基因和抑癌基因專業(yè)知識原癌基因種類甚多，它們表達產物的功能涉及細胞信號傳遞系統(tǒng)的各個層次，根據產物的分類。I生長因子sisPDGFint-2FGF-3FGF-5int-1II受體及非受體型酪氨酸蛋白激酶src膜相關、非受體型yes膜相關、非受體型LCK膜相關、非受體型abl膜相關、非受體型fgr/bcr非受體型ros膜相關受體erbB膜相關受體(EGF受體、膜外部分斷裂)neu膜相關受體(EGF受體相關)fms膜相關受體(CSF-1受體、突變)met膜相關受體(HGF受體相關)kit干細胞受體，部分斷裂sea膜相關受體ret受體樣，部分斷裂III模相關G蛋白H-ras模相關，GTP結合，GTPaso活性K-ras模相關，GTP結合，GTPaso活性N-ras模相關，GTP結合，GTPaso活性gspGs

活化突變體gipGs

活化突變體IV受體：無蛋白激酶活性mas血管緊張素受體V胞質絲氨酸－蘇氨酸蛋白激酶raf/milpim-lmosCytostatic因子cotAkt三、癌基因分類：14癌基因和抑癌基因專業(yè)知識VI胞質調控因子crkSH-2/SH3VII核反式調控因子mycN-mycL-mycmyblylp53p53突變體(Dominantoncogenio)fos與c-jun結合(AP1)jun為AP1的一部分erbAv-erbA為癌基因c-erbA為T3受體relv-rel為癌基因

c-rel(與NF-1b同源)ets1/2vayskievi-1gli-1mafpbxhox-2,4VIII其他dbl斷裂的胞質細胞骨架蛋白bcl-2膜信號傳遞15癌基因和抑癌基因專業(yè)知識growthfactorsGTPaseproteinsguaninenucleotideExchangeproteinscytoplasmicMembraneassociatedTyrosinekinasesgrowthfactorreceptorsnucleartranscriptionfactorscytoplasmicserineThreoninekinases16癌基因和抑癌基因專業(yè)知識四、基因產物的功能：1．細胞外：生長因子（GF）PDGF(sis)TGFIGFII2．細胞膜：膜外表面TPK類GF受體EGFR(erbB)erbB與EGFR高度同源EGFR－受到磷酸化修飾的蛋白，具有酪氨酸激酶活性，無適當配體時產生連續(xù)增生信號。

CSFIR(c-fms)IGFIR其它GF受體

17癌基因和抑癌基因專業(yè)知識18癌基因和抑癌基因專業(yè)知識PTK(Proto-oncogene)Viraloncogene*(viraloncoprotein)OncogenicalterationTumour/cancertypes(onlythemostfrequent,Mainlyhumantypesaredescribed)EGFR/ErbB1(c-erbB)V-erbBfromAEV(p68/74abB)V-erbB:TruncatedEGFRPTKC-erb:Overexpression(amplification)Extracellulardomaindeletionsv-ErbB:fibrosarcomasc-ErbB:mammarycarcinoma,glioblastomamultiforme,Cvarian,non-small-celllungandlthercancersErbB2/HER2/NeuOverexpression(amplification)Norecurrenthumanmutations(Val664gluinrodents)Mammary,ovarian,gastric,non-small-celllungandcoloncancerErbB3/HER3Overexpression;constitutivetyrosinephosphoylation(heterodimerwithErbB2)MammarycarcinomaErbB4/HER4OverexpressionMammarycarcinoma,granulasacelltumoursIGF-1ROverexpression(expressionrequiredforinvitrotransformationbymanyoncogenesandDNAviruses)Cervicalandothercarcinomas,sarcomasPDGF-Overexpression(amplification)Glioma,glioblastoma,ovariancarcinomaPDGFR-Tel-PDGR-(t(5;12)translocationfusingEts-likeTelwithPDGFR-PTKdomain)OverexpressionTel-PDGFR-:chronicmyelomonocyticleukaemiaPDGFR-:gliomaCSF-1R(c-fms)V-fmsfromFesV(p170gag-fms)v-fms:TruncatedCSF-1RPTKwithmutantC-terminaltailConstitutivelyactivec-fms:GOFpointmutationsOverexpressionv-fms:jelinesarcomasc-fims:acuteandchronicmyelomonocyticleukaemias,monocytictumours,malignanthistiocytosis,endometrialcancer,gliomaKit/SCFR(c-kit)V-kitfromFeSV(p80gag-kit)v-kit:TruncatedKit/SCFRPTKwithmutantC-terminaltailConstitutivelyactivec-kit:GOFpointmutationsandsmalldeletionsOverexpressionV-kit:felinefibrosarcomasC-kit:malignantgastrointestinalstromaltumours,acutemyeloidleukaemias,myelodysplasticsyndromes,mast-cellleukaemia/systemicmastocytosis,seminomas/dysgerminomas,small-celllungcancerandothercarcinomas19癌基因和抑癌基因專業(yè)知識20癌基因和抑癌基因專業(yè)知識膜內側TRK（非受體型）src族－磷酸化蛋白質，Mr60KD.

自身其他蛋白質類脂物

分子磷酸化G蛋白－ras族Ha-ras,Ki-ras,N-rasrasGAP

GTPaseras蛋白腺苷環(huán)化酶調節(jié)物21癌基因和抑癌基因專業(yè)知識actinCIP4DNAFABDFERMkinaseKinase-likePHSH2SH3Actin-bindingdomainBtkmotifCdc42-bindingCIP4homologydomainDNA-bingingdomainFocaladhosion-bindingdomainIntogcyin-bindingdomainPIKdomainPscodoPIKdomainPlockstrinhomologydomainSrchomology-2domainSichomology-3domainSH2kinaseSH3DNAactinSH2kinaseSH3FERMKinase-likekinasekinaseSH3SH3SH2kinasekinaseFERMFABDkinaseCIP4SH2SH3kinaseSH2SH3SH2kinaseSH2SH2kinasePHSRCABLJAKACKCSKFAKFESFRKTECSYKFGR,FYN,SRC,YES1,BLK,HCK,LCK,LYNBAL,ARGJAK1,JAK2,JAK3,TYK2ACK1,ACK2CSK,MATK/CTKFAK,FESFA,PYK2BRK,FRK,SRMSBMX,BTK,ITK,TEC,TXXSYK,ZAP7022癌基因和抑癌基因專業(yè)知識PTK(Proto-oncogene)Viraloncogene*(viraloncoprotein)OncogenicalterationTumour/cancertypes(onlythemostfrequent,Mainlyhumantypesaredescribed)ROS(c-ros)v-rosfromavianUR2SV(p68gag-ros)v-ros:TruncatedRosPTKdomain.Constitutivelyactivec-ros:OverexpressionRaretruncations/pointmutations?v-ros:avianfibrosarcomasC-ros:glioblastomas,astrocytomasAlkNPM-Alk(t(2;5)nucleophosminfusedtoAlkPTKdomain)lg-Alk(t(2;22)lgfusedtoAlkPTKdomain)Othersporadicfusionswithtropomyosin,etc.Non-Hodgkinlymphomas,CD30+andCD30-anaplasticlarge-celllymphomaSrc(c-src)v-srcfromRSV(pp60v-src)v-src:C-teminaltruncationandpointmutations(increasedkinaseactivity)c-src:C-terminaltruncation(increasedkinaseactivity)Overexpressionand/orincreasedkinaseactivitypp60v-sre:aviansarcomasc-Srctruncation:coloncancerc-Srcoverexpression:mammaryandpancreaticcancers.neuroblastomas,othersAbl(c-abl)V-ablfromAbelsonMLV(p160gag-abl)orfromP1-FeSVv-abl:N-terminal(SH3)truncationotAblFusions:p190Bcr-Abl,(t(9;22)m-bcr);p210bct-Abl,(t(9;22)M-bcr);p230bcr-Abl,(t(9;22)-bcr).M-,m-and-bcr:3breakpointclusterregionsinBCR.ThechimaericmRNAusuallystartswithexona2ofABL,itneverincludesexon1aor1b.Tel-Abl(t(12;22)N-terminal(H-L-HregionofTelfusedwithAblexon2ap160gag-abl:murineacuteleukaemiasp190Bct-Abl:~50%ofPh+acutelymphocyticleukaemias,rarelychronicmyelomonocyticleukaemiasp210Bcr-Abl:chronicmyeloidleukaemias,~30%ofPh+acutelymphocyticleukaemiasp230Bcr-Abl:somePh+chronicneutrophilicleukaemiasTel-Abl:rarecasesofacutelymphocyticleukaemiasExamplesofdominantprotein-tyrosinekinaseoncogenes23癌基因和抑癌基因專業(yè)知識24癌基因和抑癌基因專業(yè)知識3．細胞質：

serine/threoninePKAkt

c-Akt：

Akt8逆轉錄病毒轉化癌基因的細胞同源物c-Akt和PKB由同一個基因編碼

Akt組成：中心激酶活性區(qū)，活化底物為絲氨酸／蘇氨酸，N端含pHdomain，調節(jié)脂－蛋白，蛋白－蛋白相互作用，C端疏水區(qū)富含脯氨酸。PHDomainKinaseDomainTailcDNA全長2707bp編碼480氨基酸PH(PleckstrinHomology)25癌基因和抑癌基因專業(yè)知識26癌基因和抑癌基因專業(yè)知識4．細胞核Transactivators反式活化因子反式活化因子具有特異的DNA結合區(qū)

螺旋－轉角－螺旋（H－T－H）結合區(qū)特征鋅指（ZF）

亮氨酸拉鏈（LZ）螺旋－環(huán)－螺旋（HLH）

C-myc(N-myc,L-myc)：DNA結合區(qū)屬：HLH(螺旋－環(huán)－螺旋)，同時有LZ．結構，myc蛋白與DNA結合需另一個反式因子形成complex.

C-myb：細胞周期依賴基因，G1期水平高。

C-fos：產物Fos，55－60KD胞核磷蛋白。

C-jun：產物Jun，39KD。

異二聚體AP1，多聚體型反式因子，經由LZ而與DNA結合(促進子/增強子)起正調控作用。FosJunRB，p53－反式因子，通過蛋白－蛋白結合。27癌基因和抑癌基因專業(yè)知識什么是抑癌基因：抑癌基因有時也叫抗癌基因，是指一大類可以抑制細胞分裂。并有抑制癌變作用的基因。抑癌基因失活機制：Knudson’s兩次打擊論1.二個等位基因中的一個缺失（LOH）

對癌易感的引起遺傳綜合癥的基因突變2.另一個等位基因突變如：RB-1化學致癌物、病毒等引起體細胞中的基因突變

3.基因5’端CPG島胞嘧啶（C-5）高度甲基化，抑制抑癌基因的轉錄抑癌基因存在的證據:(1)1969年細胞融合(2)Rb-1基因的發(fā)現(xiàn)28癌基因和抑癌基因專業(yè)知識mutMemutmutMeMeMeMeMutationMethylationFirsthitLOHMethylationLOHMethylationSecondhitSecondhitMutationMutationMethylationBialielic++++LOHmethylationLOHmethytaoon29癌基因和抑癌基因專業(yè)知識30癌基因和抑癌基因專業(yè)知識ACACACACTranscriptionMethylationMeMeCP2bindingMeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP231癌基因和抑癌基因專業(yè)知識Co-repressoranddeacetylasebindingMeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2MeCP2Co-RepressorDeacetylaseCo-RepressorDeacetylaseCo-RepressorDeacetylaseCo-RepressorDeacetylaseHistonedeacetylationandChromatincompactionMeCP2MeCP2MeCP2Co-RepressorDeacetylaseCo-RepressorDeacetylaseMeCP2NotranscriptionAcetylationmethylation32癌基因和抑癌基因專業(yè)知識Pathwaysoftumour-suppressorgeneinactivationGeneTumourtypeMechanismsofinactivationDocumentationofdoublehitsLOHMutationmethylationHomozygousdeletionMutation+LOHMethylation+LOHMutation+methylationbiallelicnmethylationRB1retinoblastomayesyesyesrareyesyesyes?TP53commontumoursyesyesnorareyesnononoVHLrenalcancersyesyesyesrareyesyesyes?CDKN2AHaematologicmalignanciesyesnoyesyesyesyesyesyesCDKN2Bmelanomaandothertumoursyesyesyesyes?yesyesyesMLH1colorectalcanceryesyesyes?yes?yesyesAPCcolorectalcanceryesyesyes?yes???33癌基因和抑癌基因專業(yè)知識細胞遺傳學研究：確定癌患者組成性染色體改變DNA連鎖分析：對有遺傳生癌傾向的基因定位雜合性缺失（LOH)或等位基因丟失所有這些策略都要用定點克隆方法，從染色體區(qū)段確定和分離腫瘤抑癌基因。34癌基因和抑癌基因專業(yè)知識1.與細胞生長有關，可抑制細胞分裂。2.潛在抑癌3.特定條件下：化學致癌物、病毒等

失活：MutationDeletionProtein產物－病毒蛋白結合其它4.同屬HouseKeeper抑癌基因也有相對的組織特異性（個別除外）抗癌基因Antioncogenes35癌基因和抑癌基因專業(yè)知識1.在該腫瘤的相應正常組織中表達2.在該腫瘤中存在缺陷：DNA水平mRNA表達蛋白產物3.導入該基因后，腫瘤細胞生長受抑（部分）正常細胞增殖分化死亡程序性死亡ProgrammedDeathApoptosisGene≠抑癌基因抗AntiapoptosisGene:可能是癌基因凋亡基因Apoptosisgene36癌基因和抑癌基因專業(yè)知識CancersyndromeGenePrincipalTumorsProteinProductLocalizationModeofActionRetinoblastomaRB1Retinoblastoma.OsteosarcomaNucleusTranscriptonalregulator/factorLi-Fraumcnip53Sarcomas.breastandbraintumorsNucleusTranscriptonfactorFamilialadcnomatouspolyposisAPCAdenomatouspolyps.coloncancerCytoplasm?Regulates

-cateninfunctionWilmstumorWT-1NephroblastomaNucleusTranseriptionfactorNeuofibromatosistype1NF-1Neurofibromas.sarcomas.GliomasCytoplasmp21ras-GTPaseactivatorFamilialmelanomaandpancreaticcancerp16Melanoma,pancreaticcancer.?otherNucleusCyclin-dependentkinaseinhibitorFamilialbreastcancerBRCA1BRCA2BreastandovariancancerBreastand?other?NucleusUnknownUnkownUnknownTumorSuppressorGenesAssociatedWithaCancerSyndrome37癌基因和抑癌基因專業(yè)知識Presumed/CandidateTumorSuppressorGenesnotyetAssociatedwithaCancerSyndromeDPC4Pancreatic,andsomeothers,includingcolonCytoplasmTGF-signalingE-cadherinGastric,brcast,endometrial.Ovarian,othersTrans-membraneCell-cell,adhesion-cateninProstate.Lung,?othersCytoplasm(juxta-membrane)CytoskeletallinkerproteinDCCColorectal,brain,neuroblastoma.?othersTrans-membrane?NetrinreceptorTGF-IIRColorectal.?othersTransmembraneReceptorforTGF-signaling38癌基因和抑癌基因專業(yè)知識跨膜受體：PTCH基因DCC基因胞漿調節(jié)或結構蛋白：NF1PTENAPCNF2等轉錄因子或轉錄調節(jié)因子：p53WT1RB1VHL等細胞周期因子：p16p21p15等DNA損傷修復蛋白：MSH2MLH1PMS2ATMBRCA1BRCA2等39癌基因和抑癌基因專業(yè)知識1．跨膜受體TransmembranereceptorsPTCH基因－位置9q22.3，Hedgehog信號傳遞分子的跨膜受體。原發(fā)腫瘤：基底細胞皮膚癌

DCC基因(DeletedinColorectalCarcimmagene)－產物位于細胞胞膜與神經細胞粘附因子同源。點突變結腸癌中LOH70%結直腸癌,5%腺瘤.mRNA表達下降或消失2．胞漿內調節(jié)／結構蛋白NF1基因－17q11.2，60Kb，mRNA11-13Kb產物2,485a.a.蛋白，其中350a.a.序列具有GTPase活性，對rasp21蛋白專一性作用。原發(fā)腫瘤：神經纖維瘤AML，腦瘤NF2基因－22q12.2產物功能：使胞膜蛋白與細胞骨架(Cytoskeleton)連接(?)，細胞骨架相關因子。

原發(fā)腫瘤：視神經癌膜脊膜瘤

相關腫瘤：神經膠質母細胞瘤室管膜瘤40癌基因和抑癌基因專業(yè)知識PTEN

(phosphateandtensionhomologydeletedonchromosome10,PTEN)又稱為MMACI(mutatedinmultipleadvantedcancer1)和TEPI(TGF-regulatedandepithelialcell-enrichedphosphatase)PTEN：10q23.39個外顯子編碼403個氨基酸拮抗酪氨酸激酶、磷酸化酶活性而抑制腫瘤發(fā)生、發(fā)展。使Ip3的第3位磷酸、去磷酸化抑制胰島素誘導的磷酸肌醇3激酶活性，Ip3是胰島素調節(jié)細胞生長信號通路中的重要的第二信使。PI–3.4.5P3PI-4.5P2PTEN41癌基因和抑癌基因專業(yè)知識等位基因缺失：

純合性丟失：膠質母細胞瘤，前列腺癌等有15%。

基因突變：缺失突變，錯義突變，無義突變，mRNA剪接突變，突變一般在等位基因雜合性缺失基礎上發(fā)生。

膠質母細胞瘤、子宮膜癌：突變率可達30-40%。

前列腺細胞株：突變75~100%

甲基化：前列腺癌，晚期明顯。(cwden?。–D），BZS(Bannayan-Zonana或Bannayan-Ruvalcabu)80%存在LOH和基因突變。42癌基因和抑癌基因專業(yè)知識APC基因--5q21、60kb、蛋白產物Mr.300kD。功能：調節(jié)細胞內β-鏈蛋白（catenin）；微管結合。原發(fā)腫瘤：結直腸癌。相關腫瘤：結直腸腺癌、十二指腸、胃癌、·······A.正常細胞中APC調節(jié)β-鏈蛋白水平。B.癌細胞中APC突變造成β-cat累積，Tcf-4轉錄激活。核Fcf-4Targetgenes-catDSHAPCGSK3FrizzledWNTE-cad核Fcf-4TargetgenesFrizzledWNTDSHGSK3-cat-cat43癌基因和抑癌基因專業(yè)知識E-cadherin細胞-細胞粘附分子β-cateninβ-鏈蛋白GSK3糖原合成酶激酶3Tcf-4T細胞因子4WNT側翼蛋白（Wingless）Frizzled卷發(fā)受體DSH亂發(fā)蛋白（Dishevelled）Fcf-4Targetenes-catDSHAPCGSK3FrizzledWNTE-cad-cat癌細胞中β-cat點突變抑制β-cat蛋白磷酸化,不能降解,造成Tcf-4靶基因活化44癌基因和抑癌基因專業(yè)知識3.轉錄因子或轉錄調節(jié)因子RB1基因--13q14.3,200kb,27exons,4.8kbmRNA。表達產物核蛋白110kD,磷酸化RB1蛋白110-112kD。DNA結合、反式活化因子主要通過蛋白--蛋白結合形式磷酸化--去磷酸化依賴細胞周期階段和細胞分化階段變化原發(fā)腫瘤：視網膜母細胞瘤（兩個等位基因的缺失或失活）相關腫瘤：骨肉瘤、小細胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌CyclinAcdk2CyclinDcdk4CyclinEcdk2E2FPPPPPE2FRbRb+Ser780Ser796Thr373Ser249/252Ser870/811G1SRestrictionPointDNASynthesisRB1-0

結合SV40TE1AHPV745癌基因和抑癌基因專業(yè)知識位于11P13DNA：50KD編碼3Kb，mRNA，245個氨基酸WTI產物：4個ZF結構抑制：IGFIIPDGFA鏈的轉錄作用有關腫瘤：Wilmstumor、WAGR綜合癥。WTI蛋白與DNA特定序列結合，可抑制EGR1與DNA結合，即抑制EGR對轉錄的激活作用，從而抑制細胞生長。46癌基因和抑癌基因專業(yè)知識1.17p2.357aaMW53KD3.核內（Transactivator)調節(jié)細胞周期，可與其它蛋白結合。4.野生型：抑癌基因突變型

(1)失活：顯性抑制或顯性陰性(DominantNegative)，隱性癌基因(recessivegene)。失活的產物→與野生型產物結合→抑制野生型產物的功能。

(2)顯性致癌：少數(shù)突變型→癌基因一個等位基因的某種突變可致癌。

稱：DominantOncogene47癌基因和抑癌基因專業(yè)知識1.

p53:是一種TA，它可辯認一段特定DNA序列。P：嘌呤Py：嘧啶ATPPPCGPyPyPyTAp53:DNA-binding&cis-elementofMCK:MusclecreationekinaseGADD45:GrowtharrestDNADamageInducidleGeneMDM-2:MouseDoubleMinuteOncogenic30%softparttumorsWAF1(p21):Inactivatedinbrain,LungintestinalcancercelllinesRBp53p53蛋白中央核心區(qū)結合特定的DNA序列，N未端序列有轉錄活化的功能，C未端可使p53蛋白自身形成二聚體或四聚體。48癌基因和抑癌基因專業(yè)知識2.p53:蛋白／蛋白結合

MDM-2MDM-2p53activity

HPVE6HBVX:3.p53通過DNA修復酶進行DNA修復或凋亡，維持基因組可塑性和基因組穩(wěn)定性。HBX/p531.HBXBindingwithp53Wt.249S,273Hbutnotp53135Y2.p53p53p53HBXNotransciription49癌基因和抑癌基因專業(yè)知識IncreasedExpressionCellCycleArrestinG1ApoptosisDNARepairCelldivisionWUTANTp53LossofCellCycleArrestinG1GenomicInstabilityCelldivisionWithAccumulatedDNADAMAGEWILDTYPEp53Differentiation第一途徑：p53直接作用于細胞周期51癌基因和抑癌基因專業(yè)知識第二途徑：p53調節(jié)p21p53p21CDK2p21CDK2CYCLINDCYCLINEDNASynthesisCelldivision

p21:CDKsINHIBITORBlockCDK/cyclinactiyityCellarrestatG1CDKs:CYCLINDEPENDENTKINASESp53WAF152癌基因和抑癌基因專業(yè)知識4.細胞周期因子p16基因－9p21，8.5Kb，3exons，p16蛋白，MW15.8KD

功能：p16蛋白為細胞周期素依賴激酶CDK4及CDK6抑制物，通過結合CDK4或CDK6而抑制CyclinD-CDK4/CDK6復合物，阻止細胞分裂、增生、突變型p16蛋白無此抑制活性，細胞分裂失控，導致癌變。主要幾種Cyclin-CDK細胞周期復合物Cellcyclestagecyclin-CDKcomplexesinhibiforsp15p16p18p21p27G1cyclinD-CDK4/CDK6＋＋＋＋＋G1/ScyclinE-CDK2－－－＋＋ScyclinA-CDK2－－－＋－G2/McyclinB-CDK2－－－＋－53癌基因和抑癌基因專業(yè)知識5.DNA損傷修復NucleotideExcisionRepaiTwoSteps:1.DamagedBaseRemovalrGlycosylaste－糖基化酶2.Excisionofoligonucteotide(ss)carryingthelesion.Prokaryote(12~13nt)Eukaryote(27~29nt)*+8-5*+24-554癌基因和抑癌基因專業(yè)知識XPA:DamagerecognitonFactorXPF/ERCC1complexBindingtoHSSB(RPCreplicationproteinbintingtolesionsiteXPB:XPD:

TFIIHcontain>8svbunitsTranscriptionFactorDNARepairDNAReplicationrelatedTFIIHunwoundHelixXPG.XPFentercouplingXPFXPGPCNARPCPOLPolLigaseNuclease→excisionat

5’3’(ProliferatingCellNuclearAntigen)Catalyzeremovinttherepairingenzyme.Fillthe“gag”→repairedHelicaseSubunitofTFIIH55癌基因和抑癌基因專業(yè)知識HumanYeastXPFRAD1XP:XerodermaPigmentosum著色性干皮病ERCC：(ExcisionRepairCrossComplementinggene)XPGRAD2XPDRAD3XPCRAD4XPARAD10ERCC1RAD14XPBRAD25Exinuclease56癌基因和抑癌基因專業(yè)知識DisesesRelatedtoDNARepairXPXerodermaPigmentosumCSCockayneSyndromeTTDTrichothiodysplasiaSkincancer+－－Skinphoto-sensitivity

+＋＋ScalySkinnBurologicalabnormality+＋＋Growthretartation(lackofcouplingofTranscription/repair)BrittlehairSkeletalabnormalityMutation+inXPA

XPGCSB/ERCC6SPDXPBXPDXPGOtheTFIIHSubunritsorassociatedproteins57癌基因和抑癌基因專業(yè)知識MismatchDNARepairMutaion→mismatch3’5’5’3’CH3CH33’5’5’3’CH3CH33’5’5’3’CH3CH33’5’5’