無菌保證工藝

無菌保證工藝第1頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月一、前言二、無菌保證工藝選擇的原則三、無菌保證工藝驗證要求四、申報資料要求五、總結(jié)第2頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月一、前言注射劑無菌保證工藝是指為實現(xiàn)規(guī)定的無菌保證水平所采取的經(jīng)過充分驗證后的滅菌（無菌）生產(chǎn)工藝。

第3頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月一、前言

無菌安全的藥害事件

“欣弗”事件—-無菌檢查的局限性

滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌工藝、嚴格的GMP管理和良好的無菌保證體系第4頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月

《注射劑無菌保證工藝研究及評價的原則要求》

2007年8月14日國家藥審中心正式印發(fā)并上網(wǎng)公布國食藥監(jiān)注[2008]7號關于發(fā)布化學藥品注射劑和多組分生化藥注射劑基本技術要求的通知明確要求進行制備工藝研究包括：制備工藝的選擇工藝參數(shù)的確定工藝的驗證

注射劑滅菌工藝及其驗證一、前言第5頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月一、前言現(xiàn)行法規(guī)要求

《藥品注冊管理辦法》（局令第28號）附件2申報資料項目8制劑處方及工藝的研究資料及文獻資料：應包括起始物料、處方篩選、生產(chǎn)工藝及驗證資料第6頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月一、前言

共識--無菌保證工藝的研究與驗證

是確保無菌制劑達到無菌要求的重要措施是無菌制劑質(zhì)量控制研究的重要組成部分第7頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月二、無菌保證工藝選擇的原則（一）與產(chǎn)品無菌保證相關的影響因素

環(huán)境廠房、設備

原材料（原輔料、包裝材料）無菌保證工藝生產(chǎn)過程控制人員衛(wèi)生（無菌環(huán)境中人是最大的污染源）第8頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）不同滅菌方式的無菌保證水平

中國藥典、美國藥典、歐洲藥典都將最終滅菌產(chǎn)品的無菌保證水平規(guī)定為微生物污染概率不超過百萬分之一；采用無菌生產(chǎn)工藝的產(chǎn)品，其無菌保證水平為微生物污染概率不超過千分之一凡是可以最終滅菌的產(chǎn)品務必要最終滅菌第9頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月

滅菌工藝的選擇濕熱滅菌法干熱滅菌法除菌過濾法環(huán)氧乙烷滅菌法輻射滅菌法第10頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月滅菌工藝的選擇濕熱滅菌是首選的滅菌方法按產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性分為二種過度殺滅法殘存概率法第11頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌藥品常用滅菌工藝的比較類別Fo值微生物存活概率要點說明過度殺滅法Fo≥12≤10-6熱穩(wěn)定產(chǎn)品以殺滅微生物作為實現(xiàn)無菌的手段殘存概率法8<Fo<12≤10-6熱穩(wěn)定性較差產(chǎn)品工藝過程將防止產(chǎn)品被耐熱菌污染放在首位而不是依賴最終滅菌去消除污染流通蒸汽法不計算Fo≤10-3熱不穩(wěn)定產(chǎn)品加熱是除菌過濾的補充手段除菌過濾法不大于10-3不能加熱的產(chǎn)品不能除去病毒、支原體等微生物依賴于無菌生產(chǎn)工藝是否嚴格按照藥品GMP的要求進行生產(chǎn)與驗證

第12頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月影響濕熱滅菌效果的因素待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的包裝形式待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量濕熱滅菌工藝條件濕熱滅菌設備第13頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）歐盟滅菌方法選擇的決策樹歐盟1999年8月正式開始執(zhí)行滅菌方法選擇的決策樹決策樹的作用是在考慮各種復雜因素的情況下輔助選擇最佳的滅菌方法第14頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月第15頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月第16頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月決策樹越往下，風險越大需要提供的必要證據(jù)越多第17頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月基本原則:無菌產(chǎn)品應在灌裝到最終容器后進行最終滅菌（首選）如因產(chǎn)品對熱不穩(wěn)定不能進行最終滅菌時，可采用最終滅菌方法的替代方法--過濾除菌和/或無菌生產(chǎn)工藝（退而求其次）第18頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月同時明確如下要求：無菌藥品生產(chǎn)企業(yè)，首先應根據(jù)特定的處方選擇最佳的滅菌方法，然后再選擇包裝材料使用熱不穩(wěn)定的包裝材料不能作為選擇無菌生產(chǎn)工藝的理由因其他因素選擇的包裝容器不能進行最終滅菌，藥品生產(chǎn)企業(yè)仍有責任不斷尋找可接受的替代容器，使得產(chǎn)品可以在可接受的時間范圍內(nèi)采用最終滅菌的方法

任何商業(yè)考慮均不能作為不使用具有最高無菌保證水平的最終滅菌方法的理由第19頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月三、無菌保證工藝研究及驗證要求（一）注射劑劑型選擇的原則（二）無菌保證工藝研究及驗證的技術要求第20頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）注射劑劑型選擇的原則注射劑：大容量注射劑（50ml以上）小容量注射劑（20ml以下）粉針劑（凍干、無菌分裝）

不同劑型采用的滅菌工藝可能不同，進而會影響產(chǎn)品的SAL（無菌保證水平），因此，在評價無菌保證工藝時，首先應評價劑型選擇的合理性

注射劑型選擇合理性的考慮要素：

主藥的穩(wěn)定性和制劑的無菌保證水平第21頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月

首先考慮所選劑型采用滅菌工藝的無菌保證水平首選劑型能采用最終滅菌工藝（F0≥8），SAL≥6如有充分依據(jù)證明不適宜采用最終滅菌工藝且臨床必需的品種，可考慮選擇采用無菌生產(chǎn)工藝的劑型。通常無菌生產(chǎn)工藝僅限于粉針劑或部分小容量注射劑大容量注射劑、小容量注射劑和粉針劑之間互改，如無充分的依據(jù)，所改劑型的無菌保證水平不得低于原劑型第22頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌保證工藝的選擇研究

無菌保證工藝的驗證要求---最終滅菌工藝的驗證---無菌生產(chǎn)工藝的驗證容器系統(tǒng)的密封性驗證（二）無菌保證工藝研究及驗證的技術要求第23頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌保證工藝的選擇研究---為選擇滅菌工藝進行的研究

包括：主藥穩(wěn)定性研究主藥穩(wěn)定性影響因素分析控制影響主藥穩(wěn)定性的內(nèi)因和外因為判斷滅菌工藝對產(chǎn)品質(zhì)量的影響，應進行滅菌前后產(chǎn)品質(zhì)量對比的研究

第24頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌保證工藝的驗證要求基本概念：F0值--標準滅菌時間SAL--無菌保證水平SAL＝F0/D121

–lgN0N0：滅菌前染菌量D121：121℃微生物殘存率為10％時所需的滅菌時間SAL：產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存概率的負對數(shù)SAL與F0值有關，還與染菌量及所染菌的耐熱性有關第25頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月注意：污染菌在不同產(chǎn)品中耐熱性可能不同eg:嗜熱脂肪芽孢桿菌常規(guī)D值在1.5-3.0分鐘在復方氨基酸注射液中的D值為0.8分鐘左右在30％的葡萄糖溶液中的D值為2.2分鐘第26頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月最終滅菌工藝的驗證要求最終滅菌工藝：過度殺滅法（F0≥12）殘存概率法（8≤F0＜12）目標：滅菌后的微生物殘存概率＜10-6

第27頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月過度殺滅法殘存概率法適用范圍主藥熱穩(wěn)定性好主藥熱穩(wěn)定性較好目標防止產(chǎn)品被耐熱菌污染，保證SAL大于6適度滅菌，同時控制污染原理所采用的滅菌條件下可保證D121＝1分鐘的微生物下降12個對數(shù)（即F0≥12）根據(jù)所染菌的數(shù)量及耐熱性來確定滅菌溫度和時間過程控制一般無需進行微生物負荷的測定需進行微生物負荷量測定及污染菌的耐熱性測定第28頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月工藝驗證要求：過度殺滅法和殘存概率法均應進行工藝驗證驗證內(nèi)容：空載熱分布滿載熱分布熱穿透試驗

微生物挑戰(zhàn)試驗（殘存概率法）滅菌前微生物污染水平---數(shù)量和耐熱性---過程控制第29頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月空載熱分布試驗－找出冷點多個溫度探頭均勻/重點分布在腔室內(nèi)，重復運行代表性滅菌程序，記錄各點溫度變化曲線，計算各點溫差通過比較各點溫度與平均溫度的差異確定冷點滿載熱分布試驗－找出裝載方式下的冷點以空載試驗結(jié)果為基礎更接近實際情況以上試驗通常要求重復運行三次第30頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月

熱穿透試驗－測定產(chǎn)品實際溫度和F0值以熱分布（空載、滿載）試驗結(jié)果為基礎，進一步確定實際樣品（或模擬樣品）的冷點（與平均溫度差超過1.5度為冷點）重要標準產(chǎn)品中F0MEAN±3SD符合注冊F0值標準第31頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月注意：同品種不同濃度—考察不同濃度對熱穿透的影響不同包裝規(guī)格—進行最大和最小包裝規(guī)格的試驗不同裝載量—進行最小和最大裝載量的試驗不同滅菌溫度—進行最高溫度條件下的試驗第32頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物挑戰(zhàn)試驗證明通過該工藝能殺滅一定污染量和D值的微生物生物指示劑根據(jù)D值計算接種量植入芽孢的產(chǎn)品放在冷點部位運行滅菌程序后含芽孢的產(chǎn)品應通過無菌檢查第33頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月空載、滿載熱分布試驗---考察滅菌設備的特性和狀況熱穿透和微生物挑戰(zhàn)試驗---考察滅菌設備在執(zhí)行特定滅菌工藝時賦予產(chǎn)品的F0值，以及對微生物孢子的實際殺滅效果第34頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌生產(chǎn)工藝的驗證要求無菌生產(chǎn)工藝：過濾除菌＋無菌生產(chǎn)工藝無菌組裝工藝第35頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月選擇無菌生產(chǎn)工藝的前提：同品種均未采用最終滅菌工藝經(jīng)過深入的研究（化學反應機理、窮盡方法并證明在合理的技術條件下無法有效阻止化學反應的發(fā)生）臨床需要注射劑型第36頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月最終滅菌工藝與無菌生產(chǎn)工藝的差異最終滅菌工藝－以控制微生物污染量為目的嚴格原輔料微生物標準控制微生物污染，制定滅菌前微生物污染水平限度標準控制藥液存放溫度和時間藥液取樣、污染菌的鑒別第37頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌生產(chǎn)工藝－以防止污染為目的，消除后續(xù)導致二次污染的各種可能性對進入無菌區(qū)的物料充分滅菌，消除污染源所有接觸經(jīng)除菌過濾的藥液的設備都經(jīng)過清潔和滅菌驗證避免人員直接接觸除菌后的藥液、容器防止人員活動干擾層流第38頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月過濾除菌＋無菌生產(chǎn)工藝凍干粉針劑

小容量注射劑除菌工藝步驟—0.22μm(或更?。V膜過濾第39頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月工藝驗證要求：---培養(yǎng)基模擬灌裝試驗對生產(chǎn)系統(tǒng)的驗證---除菌過濾系統(tǒng)適應性試驗包括過濾系統(tǒng)相容性測試、過濾前后濾膜完整性測試、濾膜的微生物截留量測試第40頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月小容量注射劑和凍干粉針劑驗證項目差異不同劑型驗證項目小容量注射劑凍干粉針劑過濾系統(tǒng)驗證需要需要培養(yǎng)基灌裝驗證驗證至灌裝結(jié)束除灌裝外，尚包括部分凍干程序，目的是尚要考察凍干區(qū)域的裝載和卸載過程第41頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌組裝工藝嚴格執(zhí)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）是無菌粉針劑生產(chǎn)的重要質(zhì)量保證生產(chǎn)工藝的控制和驗證要求對不同的無菌組裝產(chǎn)品是一致的工藝驗證：培養(yǎng)基灌裝驗證無菌原料藥，精、烘、包需在百級環(huán)境下進行無菌輔料的技術要求與無菌原料藥一致第42頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月四、申報資料要求

按照《藥品注冊管理辦法》，申報資料需提供生產(chǎn)工藝及驗證資料生產(chǎn)工藝研究與驗證內(nèi)容的完整體現(xiàn)生產(chǎn)工藝技術評價的重要試驗依據(jù)批準前檢查、現(xiàn)場核查等監(jiān)管的檔案依據(jù)

第43頁，課件共49頁，創(chuàng)作于2023年2月無菌保證工藝研究及驗證資料的格式和內(nèi)容簡述無菌保證工藝，以及用到的滅菌設備、原理和型號（一）原輔料、藥包材的來源及質(zhì)量標準（二）原輔料、藥包材的準備：原輔料的預處理、直接接觸藥品的內(nèi)包裝材料等的清洗、滅菌等。（三）無菌保證工藝研究與驗證試驗的過程及結(jié)果（四）結(jié)論（五）再驗證（擬進行再驗證的時間和內(nèi)容）第44頁，課件共49頁，創(chuàng)作