血細胞檢驗-白細胞檢驗（臨床檢驗課件）

臨床檢驗基礎第六講白細胞分類計數傳統(tǒng)顯微鏡分類法01血液分析儀分類計數法02CONTENTS01傳統(tǒng)顯微鏡分類法PartOne檢測原理04結合白細胞計數結果，可間接求出每升血液中各種白細胞的絕對值02經Wright染色后03放置于顯微鏡下，按白細胞形態(tài)學特征逐個分別計數，得出各種白細胞百分率01將血液涂成薄膜質量保證技術誤差0102質量考核與評價03形態(tài)識別01020304血涂片制備和染色觀察部位：體尾交界處或片頭至片尾的3／4區(qū)域

分類計數的范圍和移動規(guī)律:“城垛式”

分類計數的白細胞數量：計數越多，誤差越小技術誤差注意事項1)觀察全片2)計數異常和幼稚血細胞:①白細胞包括在白細胞分類的比值或百分率中。②幼稚紅細胞以分類100個白細胞時見到幼稚紅細胞的數量來報告。3)觀察其他血細胞或成分：紅細胞、血小板05全國臨床檢驗方法學學術研討會推薦的方案見表。

質量考核與評價

由于手工制備的血涂片細胞分布不均勻，分類計數結果變化大，很難對每張血涂片進行嚴格的質量控制。目前亦缺乏統(tǒng)一的質量控制方法，關鍵在于熟練操作技術，嚴格控制各個操作環(huán)節(jié)，盡量減少誤差。形態(tài)識別桿狀核和分葉核標準的不同，單核細胞與大淋巴細胞的鑒別、染色較差的涂片，脫顆粒的嗜堿性粒細胞與中性粒細胞的區(qū)分等。凡不能識別的細胞應歸為“未能識別的白細胞”。參考值成人白細胞分類參考值

百分率(％)絕對值(×109／L)中性桿狀核粒細胞1~50.04~0.5中性分葉核粒細胞50~702~7嗜酸性粒細胞0.5~50.05~0.5嗜堿性粒細胞0~10~1淋巴細胞20~400.8~4單核細胞3~80.12~0.8中性粒細胞增多1粒細胞2淋巴細胞3單核細胞4臨床意義1.中性粒細胞增多白細胞總數與中性粒細胞(neutrophil，N)白細胞總數與中性粒細胞數量增多及減少的定義見表.

在外周血中，由于中性粒細胞占白細胞總數的50％一70％，臨床意義基本一致。淋巴細胞、嗜酸性粒細胞等數量上的改變也會引起白細胞總數的變化。因此，還應具體分析。

1)中性粒細胞生理性增多：常不伴有白細胞質量的改變。年齡：1)生理性增多：日間變化：一日之間最高值與最低值之間可相差1倍。運動、疼痛和情緒的影響：如劇烈運動可使短時間內白細胞高達35X109／L，以中性粒細胞為主。當運動結束后迅即恢復原有水平。妊娠與分娩：分娩后2～

5d內恢復正常。其他：吸煙者白細胞的生理波動很大，30%以內波動多無意義，只有通過定時和反復觀察才有意義。2)病理性：數量變化

核左移(shifttotheleft)：外周血中桿狀核粒細胞增多或(和)出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細胞時稱為核左移。核右移(shihtotheright)：

中性粒細胞核分葉5葉以上者超過3％則稱為核右移，常伴有白細胞總數減低。

核象變化

2)病理性增多：外周血白細胞>10X109／L

①反應性增多，可見于：

A、急性感染或炎癥：為引起白細胞總數和中性粒細胞增多最常見的原因。球菌、桿菌、真菌、放線菌、病毒、立克次體、螺旋體、寄生蟲等。增高程度與病原體種類、感染部位和程度以及機體的反應性等有關

B、類白血病反應：指機體在有明確病因的刺激下，出現(xiàn)白細胞數中度增高(<50Xl09／L)，多以成熟中性粒細胞增多為主，原始、早幼粒細胞增多少見(<10％)，常伴較明顯的中性粒細胞中毒性改變，其他細胞均無明顯變化。C.廣泛組織損傷或壞死：嚴重外傷、手術創(chuàng)傷、大面積燒傷、凍傷以及血管栓塞(如心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性壞死等使組織嚴重損傷者，在12～36h內常見白細胞增高，以中性分葉核粒細胞增多為主。有無術后感染，與心絞痛鑒別。

D、急性溶血：缺氧及分解產物刺激E、急性失血：消化道大量出血、內臟破裂如脾破裂或輸卵管妊娠破裂等，白細胞總數常在1～2h內迅速增高，可達(10～

20)X109／L，但此時的紅細胞數和血紅蛋白量仍可暫時保持正常范圍，待組織間液吸收回血液或補充循環(huán)血容量后，才出現(xiàn)紅細胞和血紅蛋白減低。早期診斷內出血的參考指標。F、急性中毒：a、外源性中毒：化學物質或藥物如汞、鉛、安眠藥急性中毒，生物毒素如昆蟲毒、蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒。b、內源性中毒：如尿毒癥、糖尿病酮癥酸中毒、子癇、內分泌疾病危象等。G、惡性腫瘤：

非造血系統(tǒng)惡性腫瘤可出現(xiàn)持續(xù)性白細胞增高，以中性分葉核粒細胞增多為主。其機制可能為：①腫瘤壞死分解產物刺激②腫瘤細胞(如肝癌、胃癌等)促粒細胞生成因子。③惡性腫瘤骨髓轉移，破壞骨髓調控作用等H、其他原因：見于類風濕性關節(jié)炎、自身免疫性溶血性貧血、痛風及嚴重缺氧應用皮質激素、腎上腺素、氯化鋰等。

②異常增生性增多

A、白血?。築、骨髓增殖性疾病：包括真性紅細胞增多癥、原發(fā)性血小板增多癥和骨髓纖維化癥(也可包括慢性粒細胞白血病)等。本組疾病均系多能干細胞的病變引起，具有潛在演變?yōu)榧毙园籽〉内厔?。其特點為除了一種血細胞成分的主要增多外，常伴有其他一種或兩種血細胞的增生，故常有中性粒細胞增多，白細胞數常在(10—30)X109／L。

(2)中性粒細胞減低(neutropenia)：

白細胞減低主要是中性粒細胞減低。粒細胞減低癥(granulocytopenia)：中性粒細胞絕對值成人<

2.0X109／L,

兒童<1.5X109／L粒細胞缺乏癥(agranulocytosis)：外周血白細胞<2.0X109／L,

中性粒細胞絕對值<0.5X109／L(2)中性粒細胞減低(neutropenia)：

(2)中性粒細胞減低(neutropenia)：

1)嗜堿性粒細胞增多(basophilia)：指外周血嗜堿性粒細胞濃度絕對值超過參考值的上限(>0.05×109／L)的一種征象

(2)嗜堿性粒細胞減少(basopenia)：多無臨床意義。減少可見于過敏性休克、促腎上腺皮質激素或糖皮質激素應用過量以及應激反應等。3．淋巴細胞(lymphocyte，L)(1)淋巴細胞增多(lymphocytosis)：指外周血淋巴細胞絕對值增高成人：大于4.0×109／L；兒童：4歲以上大于7.2×109／L、

4歲以下大于9.0×109／L。

(1)淋巴細胞增多：(2)淋巴細胞減少(1ymphopenia)：指外周血淋巴細胞絕對值減低(成人<1.0×109／L)。凡中性粒細胞顯著增高的各種病因均可導致淋巴細胞相對減少。(2)淋巴細胞減少(2)淋巴細胞減少

4．單核細胞(monocyte，M)

成人單核細胞占白細胞總數3％-8％。正常兒童稍高，平均為9％；2周內的嬰兒可達15％或更多；妊娠中、晚期及分娩增多.骨髓釋放入外周血的單核細胞為成熟的單核細胞，在血液中停留3—6d，即逸出血管進入組織或體腔內，經5—9d，發(fā)育為巨噬細胞，形成單核-巨噬系統(tǒng)，

單核細胞增多

臨床檢驗基礎第五講白細胞計數白細胞計數WBC)：指測定單位容積的外周血各種白細胞的總數檢測原理（顯微鏡計數法）用白細胞計數稀釋液(稀乙酸)，將血液稀釋一定倍數并破壞成熟紅細胞和固定白細胞充入改良牛鮑(Neubauer)計數板，在顯微鏡下計數一定范圍內的白細胞數經換算求得每升血液中各種白細胞的總數。白細胞數=N/4×10×20×106/L【質量保證】1．計數誤差(1)技術誤差：規(guī)范、熟練的操作，儀器的校正、試劑的標準化和操作人責任心。1)器材：清潔、干燥，校準，合格試劑。2)標本要求：血液分析儀檢測的標本要求及質量保證3)加蓋玻片影響：WHO推薦采用“推式”法，此法較“蓋式”法更能保證充液體積的高度為0.10mm。4)充池影響：①充池前充分混勻白細胞懸液，避免氣泡。②充池應避免充液過多、過少、斷續(xù)，避免氣泡及充液后移動蓋玻片。技數誤差5)計數原則：計數壓線細胞時，數上不數下,數左不數右。6)計數室內細胞分布要均勻：白細胞總數在正常范圍內時，各大方格間的細胞數不得相差8個以上。2次重復計數誤差不超過l0％。7)有核紅細胞影響：外周血出現(xiàn)有核紅細胞，可使白細胞計數結果偏高，須校正。

2.固有誤差：主要是指計數域誤差(fielderror)。是由于每次充池后血細胞在計數室內分布不同計數域誤差變異系數(CV)可隨計數的細胞數量增多而減小。

白細胞數量太少時(<3X109／L)8個大方格或縮小稀釋倍數白細胞數量太多時(>15X109／L)稀釋固有誤差還應包括計數室和吸管的使用次數，即計數池誤差(chambererror)和吸管誤差

3)生理狀態(tài)影響：運動、勞動、冷熱水浴、酷熱、嚴寒等常出現(xiàn)一過性白細胞增高；一日之內白細胞數最高值與最低值可相差1倍。另外，吸煙者白細胞總數平均較非吸煙者高30％。最好在固定檢查時間。血涂片上WBC密度與WBC數量關系血涂片上WBC數：／HPWBC(×109／L)

2~44~74~67~96~1010~1210~1213~18

①成人：(