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文檔簡(jiǎn)介
紅細(xì)胞的生理一紅細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋液二計(jì)數(shù)方法三一、紅細(xì)胞的發(fā)育過程
造血干細(xì)胞→早幼紅細(xì)胞→中幼紅細(xì)胞→晚幼紅細(xì)胞→網(wǎng)織紅細(xì)胞→成熟紅細(xì)胞上一頁(yè)下一頁(yè)返回EPO紅系祖細(xì)胞→原始紅細(xì)胞成熟紅細(xì)胞
120天上一頁(yè)下一頁(yè)返回鐵→鐵代謝原卟啉
→膽色素代謝珠蛋白→蛋白質(zhì)代謝衰老紅細(xì)胞形態(tài):雙凹圓盤狀;直徑:6~9μm,平均7.2μm;厚度:邊緣部分約2μm,中央約1μm側(cè)面觀呈啞鈴形。二、紅細(xì)胞的形態(tài)與功能上一頁(yè)下一頁(yè)返回血涂片經(jīng)瑞特染色后,細(xì)胞呈粉紅色,中央著色較淡,有明顯的中央淡染區(qū),淡染區(qū)的直徑約占紅細(xì)胞直徑的1/3~2/5。上一頁(yè)下一頁(yè)返回紅細(xì)胞皺縮,邊緣呈鋸齒狀;在高滲溶液中:上一頁(yè)下一頁(yè)返回紅細(xì)胞腫漲甚至破裂,血紅蛋白逸出后形成影細(xì)胞。在低滲溶液中:上一頁(yè)下一頁(yè)返回功能:1.運(yùn)輸O2和CO22.調(diào)節(jié)酸堿平衡3.免疫粘附上一頁(yè)下一頁(yè)返回三、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(一)顯微鏡計(jì)數(shù)法【原理】等滲稀釋液稀釋定量全血→充入計(jì)數(shù)板→計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)→求得每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)量。上一頁(yè)下一頁(yè)返回同WBC計(jì)數(shù)想一想:WBC計(jì)數(shù)用到了哪些器材?【器材】上一頁(yè)下一頁(yè)返回【稀釋液】
甲醛枸櫞酸鹽稀釋液
Hayem稀釋液上一頁(yè)下一頁(yè)返回
1.甲醛枸櫞酸鹽稀釋液成分功能枸櫞酸鈉抗凝、維持滲透壓36%甲醛液防腐并固定紅細(xì)胞氯化鈉維持滲透壓蒸餾水上一頁(yè)下一頁(yè)返回2.Hayem稀釋液成分功能氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓硫酸鈉提高相對(duì)密度,防止細(xì)胞粘連氯化高汞防腐劑蒸餾水上一頁(yè)下一頁(yè)返回【操作】加稀釋液:2.0ml↓采血:10μl↓混勻
↓充液
↓靜置:2~3min上一頁(yè)下一頁(yè)返回
↓計(jì)數(shù):高倍鏡下中央大方格五個(gè)中方格的RBC↓計(jì)算:
RBC/L=五個(gè)中方格的RBC
×5×10×200×106↓報(bào)告:RBC:△.△△×1012/L上一頁(yè)下一頁(yè)返回1.血量要準(zhǔn)確。2.稀釋液要過濾。3.紅細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)要分布均勻。4.實(shí)驗(yàn)器材應(yīng)清潔干燥。5.自身凝集素增高者,宜用不含甲醛的枸櫞酸鹽稀釋液。6.同時(shí)做白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定,應(yīng)先取紅細(xì)胞計(jì)數(shù)用血?!举|(zhì)量控制】上一頁(yè)下一頁(yè)返回計(jì)數(shù)誤差1.技術(shù)誤差同白細(xì)胞計(jì)數(shù)白細(xì)胞數(shù)過高時(shí)應(yīng)進(jìn)行校正。2.固有誤差嚴(yán)重貧血的標(biāo)本,應(yīng)縮小稀釋倍數(shù)或擴(kuò)大計(jì)數(shù)范圍。上一頁(yè)下一頁(yè)返回(二)血細(xì)胞分析儀技術(shù)法利用電阻抗原理對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng)計(jì)數(shù)。血紅蛋白結(jié)構(gòu)一血紅蛋白組成二血紅蛋白測(cè)定三血紅蛋白是在人體有核紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)合成的一種含色素輔基的結(jié)合蛋白質(zhì),是紅細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸?shù)鞍?。每個(gè)Hb分子含有4條珠蛋白肽鏈,每條肽鏈結(jié)合1個(gè)亞鐵血紅素,形成具有四級(jí)空間結(jié)構(gòu)的四聚體,以利于結(jié)合O2和CO2。
一、Hb的結(jié)構(gòu)上一頁(yè)下一頁(yè)返回Hb-A:α2β2,占95%~98%。Hb-A2:α2δ2,占2%~3%。Hb-F:α2γ2,占1%。珠蛋白4個(gè)亞鐵血紅素原卟啉鐵Hb的分子量:64458。1分子Hb:4個(gè)亞鐵血紅素,4個(gè)Fe2+,可結(jié)合4個(gè)O2。
1molHb:4molFe2+
,可結(jié)合4molO2。1克Hb:3.47mgFe2+,結(jié)合1.39mlO2。上一頁(yè)下一頁(yè)返回在生理?xiàng)l件下,99%Hb的鐵呈Fe2+,稱為還原血紅蛋白(Hbred);Fe2+狀態(tài)的Hb與氧結(jié)合稱氧合血紅蛋白(HbO2);1%Hb的鐵呈Fe3+,稱為高鐵血紅蛋白(Hi);如與氧結(jié)合的配位鍵被CO或S占據(jù),則變?yōu)樘佳跹t蛋白(HbCO)或硫化血紅蛋白(SHb)。上一頁(yè)下一頁(yè)返回二、血紅蛋白測(cè)定【方法】比密法
氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法(HiCN測(cè)定法)比色法十二烷基硫酸鈉法堿羥高鐵血紅素法血氧結(jié)合力法全血鐵法上一頁(yè)下一頁(yè)返回
HiCN測(cè)定法是WHO和ICSH推薦的參考方法,由于HiCN試劑含有劇毒的氰化鉀,各國(guó)均相繼研發(fā)出不含氰化鉀的血紅蛋白測(cè)定方法,有的測(cè)定法已用于血液分析儀,但其標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)溯源到HiCN量值。血紅蛋白測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)見表2-8。【原理】表面活性劑溶解紅細(xì)胞膜,釋放血紅蛋白。血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白(Hi),在一定的PH值下,Hi與氰離子(CN-)結(jié)合生成穩(wěn)定棕紅色氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)。HiCN在540nm處有一吸收峰,測(cè)定其吸光度,可求得血紅蛋白濃度(g/L)。
三、氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)測(cè)定法上一頁(yè)下一頁(yè)返回【試劑】文齊血紅蛋白轉(zhuǎn)化液氰化鉀提供CN離子高鐵氰化鉀氧化劑無水磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pHTritonX-100(非離子表面活性劑)加速溶血、防止渾濁蒸餾水上一頁(yè)下一頁(yè)返回
試劑配成后用濾紙過濾,置棕色玻瓶中(不能用塑料瓶?。?,塞緊后保存于冷暗處,勿使結(jié)冰,可保存數(shù)月。此液應(yīng)呈透明、淡黃色,pH在7.0~7.4之間,以蒸餾水作空白,用540nm比色,吸光度應(yīng)<0.001。若變渾、變綠或發(fā)生混濁則應(yīng)廢棄。上一頁(yè)下一頁(yè)返回【操作】1.取指血20μl,加入5ml轉(zhuǎn)化液中,充分混勻,靜置5min。
2.用分光光度計(jì)比色。波長(zhǎng)540nm,光徑(比色杯內(nèi)徑)1.000cm,以轉(zhuǎn)化液或蒸餾水為空白,測(cè)定其吸光度“A”。
上一頁(yè)下一頁(yè)返回加轉(zhuǎn)化液:5ml↓
采血:20μl↓
靜置:混勻后放置5min↓
比色:λ=540nm,比色杯1.000cm,轉(zhuǎn)化液(蒸餾水)為空白,測(cè)A值
上一頁(yè)下一頁(yè)返回【計(jì)算】分光光度計(jì)符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)式中:
64458是目前國(guó)際公認(rèn)的血紅蛋白平均分子量。
44000是1965年國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(ICSH)公布的血紅蛋白摩爾吸光度。
251是稀釋倍數(shù)。上一頁(yè)下一頁(yè)返回【質(zhì)量控制】紅細(xì)胞正常形態(tài)一紅細(xì)胞異常形態(tài)二紅細(xì)胞異常結(jié)構(gòu)三紅細(xì)胞的異常形態(tài)檢驗(yàn)一、紅細(xì)胞大小異常二、紅細(xì)胞形態(tài)異常三、紅細(xì)胞染色異常四、紅細(xì)胞結(jié)構(gòu)異常上一頁(yè)下一頁(yè)返回回顧:正常紅細(xì)胞形態(tài)
正常成熟紅細(xì)胞為兩面微凹的圓盤形,平均直徑7.2μm,厚約2μm,無核,經(jīng)瑞特染色后,紅細(xì)胞呈粉紅色,邊緣較深,中央著色較淡。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
1.小紅細(xì)胞直徑小于6μm稱小紅細(xì)胞,正常人偶見。出現(xiàn)較多中央淡染區(qū)擴(kuò)大的小紅細(xì)胞,提示血紅蛋白合成減少,多見于缺鐵性貧血。
一、紅細(xì)胞大小異常上一頁(yè)下一頁(yè)返回2.大紅細(xì)胞直徑大于10μm稱為大紅細(xì)胞,有時(shí)中央淡染區(qū)不明顯,見于巨幼細(xì)胞性貧血。上一頁(yè)下一頁(yè)返回3.巨紅細(xì)胞直徑大于15μm者稱巨紅細(xì)胞,常見于巨幼細(xì)胞性貧血。肝臟疾病等。上一頁(yè)下一頁(yè)返回4.紅細(xì)胞大小不均紅細(xì)胞之間直徑相差一倍以上者稱為紅細(xì)胞大小不均,常見于增生性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
1.球形紅細(xì)胞球形紅細(xì)胞直徑<6μm,厚度>2μm,呈小圓球形,無中央淡染區(qū)。血片中此類細(xì)胞達(dá)25%時(shí)有診斷參考價(jià)值,常見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥,自身免疫性溶血性貧血、異常血紅蛋白病等。
二、形態(tài)異常上一頁(yè)下一頁(yè)返回2.橢圓形紅細(xì)胞呈長(zhǎng)橢圓形,甚至呈長(zhǎng)柱形,長(zhǎng)度大于寬度的3倍~4倍。正常人偶見,但最多不超過15%。常見于遺傳性橢圓形紅細(xì)胞增多癥,可達(dá)25%~75%,巨幼細(xì)胞貧血和惡性貧血時(shí)也常見。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
3.靶形紅細(xì)胞紅細(xì)胞中心深染,其外周淡染,而細(xì)胞邊緣又深染,形狀如射擊之靶。常見于地中海貧血、嚴(yán)重缺鐵性貧血,其他異常血紅蛋白病。上一頁(yè)下一頁(yè)返回4.口形紅細(xì)胞紅細(xì)胞中央淡染區(qū)呈裂口狀狹孔。正常人<4%,增高見于遺傳性口形紅細(xì)胞增多癥,急性乙醇中毒和DIC時(shí)也可見少量口形紅細(xì)胞。上一頁(yè)下一頁(yè)返回5.鐮刀形紅細(xì)胞紅細(xì)胞狹長(zhǎng)似鐮刀,也有呈麥粒狀或冬青葉狀。主要見于HbS病。上一頁(yè)下一頁(yè)返回6.棘形紅細(xì)胞紅細(xì)胞表面帶有長(zhǎng)短不一的針刺狀或尖刺狀突起,其間距不規(guī)則,突起的長(zhǎng)度和寬度也不一致。見于遺傳性血漿β-脂蛋白缺乏癥。上一頁(yè)下一頁(yè)返回7.鋸齒紅細(xì)胞鋸齒紅細(xì)胞也稱短棘形紅細(xì)胞,細(xì)胞表面突起較棘形紅細(xì)胞短,但分布較均勻。主要見于尿毒癥等疾病.上一頁(yè)下一頁(yè)返回8.淚滴形紅細(xì)胞紅細(xì)胞形態(tài)似淚滴樣、手鏡形或梨狀,正常人外周血少見,增多主要見于骨髓纖維化。上一頁(yè)下一頁(yè)返回9.緡錢狀紅細(xì)胞多個(gè)紅細(xì)胞相互聚集重疊,連接成串,形似緡錢。主要見于多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等。上一頁(yè)下一頁(yè)返回10.裂紅細(xì)胞是紅細(xì)胞碎片或不完整的紅細(xì)胞,大小不一,形態(tài)各異,增多見于彌散性血管內(nèi)凝血等。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
11.紅細(xì)胞形態(tài)不整指紅細(xì)胞形態(tài)發(fā)生各種明顯改變的情況而言??梢姕I滴狀、梨形、棍棒形、盔形、三角形、新月形等。
常見于巨幼細(xì)胞性貧血,可能與貧血嚴(yán)重而又缺乏原料,骨髓粗制濫造及紅細(xì)胞脆性增大,推片時(shí)易破裂等有關(guān)。在DIC時(shí)也可見少量此類細(xì)胞。常稱為裂細(xì)胞,或紅細(xì)胞碎片。上一頁(yè)下一頁(yè)返回三、紅細(xì)胞染色異常1.染色過淺指紅細(xì)胞中央淡染區(qū)明顯擴(kuò)大,甚至呈環(huán)狀,又稱為低色素性紅細(xì)胞。常見于缺鐵性貧血。上一頁(yè)下一頁(yè)返回2.染色過深紅細(xì)胞中央淡染區(qū)消失,著色較深,整個(gè)紅細(xì)胞均染成紅色,又稱為高色素性紅細(xì)胞。常見于巨幼細(xì)胞性貧血和遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
3.嗜多色性紅細(xì)胞紅細(xì)胞經(jīng)瑞特染色后部分或全部呈紅藍(lán)混合色,灰紅或灰藍(lán)色。見于增生性貧血,急性溶血性貧血時(shí)尤為多見。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
1.點(diǎn)彩紅細(xì)胞屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞,是胞質(zhì)中殘存的RNA變性沉淀的表現(xiàn)。在鉛、鉍、汞等金屬中毒和骨隨機(jī)能旺盛時(shí),點(diǎn)彩紅細(xì)胞增多。常用作鉛中毒的診斷篩選指標(biāo)。
四、結(jié)構(gòu)異常上一頁(yè)下一頁(yè)返回2.染色質(zhì)小體位于成熟或幼稚紅細(xì)胞的胞質(zhì)中,呈圓形,大小約1μm~2μm,數(shù)量不一,染紫紅色,已證實(shí)為核殘留物。常見于增生性貧血、脾切除后、巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血等。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
3.卡波環(huán)為一紫紅色的細(xì)線圈狀結(jié)構(gòu),呈圓形或8字形,位于成熟紅細(xì)胞、嗜多色性紅細(xì)胞或點(diǎn)彩紅細(xì)胞胞質(zhì)中?,F(xiàn)認(rèn)為是胞質(zhì)中脂蛋白變性所致。此結(jié)構(gòu)常與染色質(zhì)小體同時(shí)存在??梢娪谌苎载氀?、巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血、鉛中毒等。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
4.有核紅細(xì)胞即幼稚紅細(xì)胞,見于溶貧、白血病、嚴(yán)重缺氧、骨髓纖維化等。上一頁(yè)下一頁(yè)返回圖2-3
紅細(xì)胞大小不均圖2-4巨紅細(xì)胞紅細(xì)胞異常形態(tài)展示:圖2-5球形紅細(xì)胞圖2-6橢圓形紅細(xì)胞圖2-7靶形紅細(xì)胞圖2-8棘形紅細(xì)胞圖2-9鋸齒形紅細(xì)胞圖2-10淚滴形紅細(xì)胞圖2-11紅細(xì)胞形態(tài)不整圖2-12低色素性紅細(xì)胞圖2-13嗜多色性紅細(xì)胞圖2-14豪焦小體圖2-15卡波環(huán)圖2-16嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞圖2-18紅細(xì)胞緡錢狀形成圖2-17有核紅細(xì)胞血細(xì)胞比容定義一測(cè)定方法二臨床意義三
血細(xì)胞比容(Hct,HCT,PCV)是指一定體積的全血中紅細(xì)胞所占體積的相對(duì)比例。
HCT高低與紅細(xì)胞數(shù)量、平均體積及血漿量有關(guān),主要用于貧血、真性紅細(xì)胞增多癥和紅細(xì)胞增多的診斷、血液稀釋和血液濃縮變化的測(cè)定、紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度的計(jì)算等。一、血細(xì)胞比容的定義
1.離心法為直接法,常用微量法和溫氏法,其檢測(cè)原理基本相同,但離心力不同。定量抗凝血液離心后分5層,自上而下分別為血漿層、血小板層、白細(xì)胞和有核紅細(xì)胞層、還原紅細(xì)胞層和氧合紅細(xì)胞層。讀取結(jié)果以還原紅細(xì)胞層為準(zhǔn)(圖2-19)。圖2-19血細(xì)胞比容結(jié)果判斷二、血細(xì)胞比容測(cè)定原理2.血液分析儀法為間接法,由紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞平均體積導(dǎo)出HCT,HCT=紅細(xì)胞計(jì)數(shù)×紅細(xì)胞平均體積?!痉椒▽W(xué)評(píng)價(jià)】HCT測(cè)定的方法學(xué)評(píng)價(jià)見表2-18。1.溫氏紅細(xì)胞比容管2.長(zhǎng)毛細(xì)滴管3.水平式離心機(jī)4.抗凝管
【器材和試劑】上一頁(yè)下一頁(yè)返回三、溫氏法測(cè)定HCT【操作】
采血:靜脈血2ml,EDTA-K2或肝素鈉抗凝
↓
加樣:用細(xì)長(zhǎng)毛細(xì)滴管將抗凝血加至比容管刻度“10”處
↓
離心:RCF為2264g,時(shí)間為30min。
↓(若離心半徑為22.5cm,則為3000r/min的轉(zhuǎn)速)讀數(shù):紅細(xì)胞層高度
上一頁(yè)下一頁(yè)返回
再離心:同樣RCF,10min,至紅細(xì)胞層高度不再下降為止。
↓
讀數(shù):紅細(xì)胞層柱高度
↓
計(jì)算:Hct值上一頁(yè)下一頁(yè)返回【質(zhì)量控制】
1.器材清潔干燥。
2.抗凝劑應(yīng)對(duì)紅細(xì)胞體積無影響且溶解迅速。
3.血漿若有黃疸、溶血現(xiàn)象應(yīng)注明。
4.離心條件必須恒定。本試驗(yàn)要求的相對(duì)離心力是2264g,離心時(shí)間為30分鐘。上一頁(yè)下一頁(yè)返回相對(duì)離心力(RCF)g
=1.118X10-5×有效離心半徑(cm)
×每分鐘轉(zhuǎn)速的平方(n2)有效離心半徑是指由離心機(jī)軸心至水平位置時(shí)管底的距離(cm)上一頁(yè)下一頁(yè)返回
【器材和試劑】
1.專用高速離心機(jī)
2.一次性使用的專用毛細(xì)管
3.毛細(xì)管密封膠
4.刻度讀數(shù)器
5.抗凝劑:肝素或EDTA-K2上一頁(yè)下一頁(yè)返回四、毛細(xì)管法測(cè)定HCT
準(zhǔn)備:抗凝劑處理毛細(xì)管
↓
吸血:血液吸入毛細(xì)管內(nèi)60~65mm處
↓
混勻
↓
封口上一頁(yè)下一頁(yè)返回【操作】編號(hào)
↓離心:12000r/min,5min。
↓讀數(shù):用刻度讀數(shù)器測(cè)量紅細(xì)胞比容的讀數(shù)
↓計(jì)算上一頁(yè)下一頁(yè)返回刻度讀數(shù)器測(cè)量紅細(xì)胞比容上一頁(yè)下一頁(yè)返回【質(zhì)量控制】
1.末梢血采血應(yīng)防止混入組織液。
2.靜脈血標(biāo)本收集后擱置時(shí)間不可超過6小時(shí)。
3.同一標(biāo)本的兩次測(cè)量結(jié)果之差不可大于0.015。
4.毛細(xì)管不能用燒熔的方法密封。
5.嚴(yán)格控制離心條件。
6.讀數(shù)應(yīng)盡量避免視差,不能將白細(xì)胞和血小板層的高度算入上一頁(yè)下一頁(yè)返回成年男性0.380~0.508L/L成年女性0.335~0.450L/L兒童0.35~0.49L/L新生兒0.49~0.54L/L微量法較溫氏法平均低1%~2%五、HCT的參考區(qū)間上一頁(yè)下一頁(yè)返回HCT的臨床意義與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似。HCT減低是診斷貧血的指標(biāo),若紅細(xì)胞數(shù)量正常,血漿量增加,為假性貧血;HCT增加可因紅細(xì)胞數(shù)量絕對(duì)增加或血漿量減少所致(表2-19)。HCT的主要應(yīng)用價(jià)值為:
1.臨床補(bǔ)液量的參考
2.真性紅細(xì)胞增多癥診斷指標(biāo)
3.計(jì)算紅細(xì)胞平均指數(shù)的基礎(chǔ)上一頁(yè)下一頁(yè)返回六、HCT的臨床意義MCV一MCH二MCHC三
紅細(xì)胞平均指數(shù)包括紅細(xì)胞平均體積(MCV)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)。紅細(xì)胞平均指數(shù)有助于深入認(rèn)識(shí)紅細(xì)胞特征,為貧血的鑒別診斷提供線索。上一頁(yè)下一頁(yè)返回一、平均紅細(xì)胞體積平均紅細(xì)胞體積(MCV):是指每個(gè)紅細(xì)胞的平均體積。以飛升(fl)為單位,1L=1015fl。上一頁(yè)下一頁(yè)返回二、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH):是指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量。以皮克(pg)為單位,1g=1012pg上一頁(yè)下一頁(yè)返回三、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC):是指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度(g/L)。上一頁(yè)下一頁(yè)返回
從上述公式可以看出:手工計(jì)算紅細(xì)胞平均指數(shù)依賴于RBC、HGB和HCT測(cè)定的準(zhǔn)確性。而儀器法測(cè)定則依賴于RBC、HGB和MCV測(cè)定的準(zhǔn)確性。【參考區(qū)間】MCV、MCH、MCHC的參考區(qū)間如下:【臨床意義】紅細(xì)胞平均指數(shù)可用于貧血形態(tài)學(xué)分類(表2-22)及提示貧血的可能原因。但紅細(xì)胞平均指數(shù)僅反映了紅細(xì)胞群體平均情況,無法闡明紅細(xì)胞彼此之間的差異。紅細(xì)胞體積分布寬度(RDW)紅細(xì)胞分布寬度RDW是反映紅細(xì)胞體積異質(zhì)性的參數(shù),用紅細(xì)胞體積大小的變異系數(shù)來表示,比血涂片上紅細(xì)胞形態(tài)大小不均的觀察更客觀、準(zhǔn)確。MCVRDW分類意義減低正常小細(xì)胞均一性輕型地中海貧血減低增高小細(xì)胞不均一性缺鐵性貧血正常正常正細(xì)胞均一性慢性病性貧血、再障、白血病正常增高正細(xì)胞不均一性骨髓纖維化、鐵粒幼細(xì)胞性貧血增高正常大細(xì)胞均一性骨髓增生異常綜合征增高增高大細(xì)胞不均一性巨幼細(xì)胞性貧血、惡性貧血RET定義一RET分型二臨床意義三圖2-20網(wǎng)織紅細(xì)胞一、網(wǎng)織紅細(xì)胞定義
網(wǎng)織紅細(xì)胞(Ret,RET)是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的過渡細(xì)胞,略大于成熟紅細(xì)胞,其胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)RNA經(jīng)堿性染料活體染色后,形成藍(lán)色或紫色的點(diǎn)粒狀或絲網(wǎng)狀沉淀物。
在正常情況下,晚幼紅細(xì)胞脫核后平均需要2天才能發(fā)育成完全成熟的紅細(xì)胞。因此,骨髓中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)比外周血高約3倍,而且也較幼稚。網(wǎng)織紅細(xì)胞通常比成熟紅細(xì)胞稍大,并且其中網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)越多,表示細(xì)胞越幼稚。二、網(wǎng)織紅細(xì)胞分型ICSH將網(wǎng)織紅細(xì)胞分為4型(表2-23,圖2-20)
三、網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的目的:
1.鑒別貧血的類型(增生性、非增生性、增生增高性)。
2.檢查骨髓的功能。
3.檢測(cè)貧血的治療效果。
4.評(píng)估骨髓移植后、再生障礙性貧血細(xì)胞毒藥物誘導(dǎo)治療后或EPO治療后的紅細(xì)胞造血情況。
三、網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的方法
1.普通顯微鏡法(1)玻片法:取血量少,省時(shí),攜帶方便,適合床旁操作。但染色時(shí)血液水分容易蒸發(fā),造成染色時(shí)間短,結(jié)果偏低。(2)試管法:重復(fù)性好,易于掌握,操作簡(jiǎn)便,為手工網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的參考方法。
2.血液分析儀法檢測(cè)細(xì)胞多,精密度好,易于標(biāo)準(zhǔn)化,但在出現(xiàn)豪焦小體、巨大血小板、有核紅細(xì)胞時(shí)易出現(xiàn)假性增高。四、顯微鏡法計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞【檢測(cè)原理】
煌焦油藍(lán)、新亞甲藍(lán)等活體染料的堿性著色基團(tuán)可與網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的磷酸基結(jié)合,使RNA膠體間的負(fù)電荷減少而發(fā)生凝縮,形成藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。在顯微鏡下計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(Ret%),并可根據(jù)RNA含量將網(wǎng)織紅細(xì)胞分類及計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞其他參數(shù)。【操作步驟】1.在小試管內(nèi)加入染液1~2滴;2.加入等量血液,混勻;3.37℃水浴箱里,靜置30分鐘。4.取1滴已染色血液于玻片上;5.將蓋玻片壓上,制成血薄片?!居?jì)數(shù)方法】(1)Miller窺盤法:ICSH及我國(guó)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心推薦使用Miller窺盤法(圖2-21)進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。(2)顯微成像系統(tǒng)圖2-21Miller窺盤結(jié)構(gòu)示意圖米勒窺盤:大方格內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)小方格內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)*9×100%網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)=
為一個(gè)厚1mm,直徑19mm的圓形玻片,玻片上刻有大小兩個(gè)正方形格子,大方格B面積是小方格A面積的9倍。當(dāng)小方格A里計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞時(shí),大方格B的紅細(xì)胞數(shù)約為9000個(gè)。因此可以選擇在B里計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞,而用A來控制紅細(xì)胞總數(shù)。【質(zhì)量控制】以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)。
1.選擇合適的染料用于網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)的活體染料很多,有煌焦油藍(lán)(
brilliantcresylblue)、新亞甲藍(lán)(
newmethyleneblue)、中性紅、亞甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)等。網(wǎng)織紅細(xì)胞活體染料的評(píng)價(jià)見表2-25。2.正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞外周血液網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為Ⅳ型,凡含有2個(gè)或2個(gè)以上顆粒、且顆粒必須遠(yuǎn)離細(xì)胞邊緣的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。紅細(xì)胞各種顆粒或包涵體的鑒別見表2-26。網(wǎng)織紅細(xì)胞圖示
【參考區(qū)間】
①成人、兒童:0.5℅~1.5℅。
②新生兒:2.0℅~6.0℅。
③成人絕對(duì)值:(24~84)×109/L。
【臨床意義】1.網(wǎng)織紅細(xì)胞增高
(1)提示骨髓造血功能旺盛見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性(缺乏葉酸、維生素B12)貧血、失血性貧血,尤以溶血性貧血時(shí)增加最為顯著,常>10%。
(2)缺鐵性貧血及巨幼細(xì)胞性貧血在給予鐵劑、維生素B12、葉酸治療之后,可見網(wǎng)織紅細(xì)胞明顯增加。2.網(wǎng)織紅細(xì)胞減低提示骨髓造血功能低下,見于再生障礙性貧血、急性白血病。
網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo),根據(jù)自動(dòng)計(jì)算還可得出其他相關(guān)參數(shù)供參考,常見網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)及評(píng)價(jià)見表2-28。1.評(píng)價(jià)骨髓增生能力,判斷貧血類型2.評(píng)價(jià)療效3.放療和化療的監(jiān)測(cè)4.藥物影響臨床應(yīng)用血沉定義一血沉過程二臨床意義三一、血沉概念紅細(xì)胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,ESR)簡(jiǎn)稱血沉。是指在規(guī)定條件下,離體抗凝全血中的紅細(xì)胞自然下沉的速率。用mm/h表示。ESR是傳統(tǒng)且應(yīng)用較廣的指標(biāo),用于診斷疾病雖然缺乏特異性,但操作簡(jiǎn)便,具有動(dòng)態(tài)觀察病情與療效的實(shí)用價(jià)值。二、血沉過程
1.緡錢狀紅細(xì)胞形成期(數(shù)min到10min)
(血沉快慢的關(guān)鍵,在于紅細(xì)胞是否易于形成緡錢狀)
2.快速沉降期(形成緡錢狀紅細(xì)胞下降,約40min)
3.細(xì)胞堆積
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