自創(chuàng)基因工程的基本操作程序

基因工程的基本操作程序1、目的基因的獲取2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4、目的基因的檢測與鑒定基因工程基本操作的四個步驟有了目的基因，我們才能賦予一種生物以另一種生物的遺傳特性。使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可進(jìn)行遺傳、表達(dá)和發(fā)揮作用載體進(jìn)入受體細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)，才能實(shí)現(xiàn)一種生物的基因在另一種生物中的轉(zhuǎn)化。才能確定目的基因是否真正在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá)。一、目的基因的獲取(一)、目的基因主要是______________________,也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因請舉出三個以上的例子（二）、獲取目的基因的常用方法有哪些?請閱讀P9第一和二兩段1、從基因文庫獲取目的基因2、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因3、人工合成目的基因已知序列未知序列一跳、母目默的達(dá)基欣因隔的換獲井?。岩粫纾_從勿基疤因棋文濁庫滲中槐直磚接其獲宜取1其.基蛛因丘文攤庫撲：概鏈念罪見P慎92昌.基宮因天文艘?guī)靺^(qū)的秀分?jǐn)傤?按秒外奸源D劣N截A片齒段鮮的煙來訂源船分冤類種塔類基豎因糖組D磁N立A文驅(qū)庫配：含明有察一澇種沫生牌物魯?shù)娜疾炕砸虿炕シ窒幕`因祝文灶庫風(fēng)：只鞭包褲含喬了朽一額種蕉生夾物擊的部閉分基絡(luò)因怕，如翁：c旨D萌N絲式A文鵝庫3俊.基教因驢文示庫哥的葬目揮的為幸了晉在弊不吹知像目土的駱基滅因億序爭列糖的賣情顧況智下獸，皮便疼于枯獲削得眠所建需嗓的借目水的鹿基茅因證。4盈.獲苦取再目援的的基比因擺的悅根價據(jù)包：見旱課暈本P繩9注餅意松：基公因塊文屢?guī)熘锌巢槐际菐弥睋]接結(jié)保緊管毛相瓣應(yīng)堡基益因番，企而伴是保捕存頑受破體破菌，報菌戶中桃含賓基姥因蠅。提升取怪某恨種婚生禿物暈的剝?nèi)鄄緿挖N涌A用紐奉適卷當(dāng)敗的崗限岸制竊酶垮切一頸定抹大州小丟的D吵N陡A片齡段將D違N重A片墊段柳與賭載舞體好連旁接導(dǎo)柔入棗受率體漏菌郵中混儲嫌存基羅因溉組胳文缺庫5伴.基崇因意文泊庫價的樣構(gòu)魯建怖方貪法煩之鼠一（1）殃直駛接省分云離閥法(鳥賢槍珠法)某傷種哥生柿物蛇的零單旦鏈m窄R光N爸A單蝕鏈煙互抬補(bǔ)D兆N億A雙值鏈c伯D巷N糖A片猛段導(dǎo)器入憑受但體衡菌財中堆儲割存與盤載小體蘭連筍接c銜D遍N盲A文駱庫反圖（抬逆闖）擋轉(zhuǎn)雹錄鄙酶D堪N掏A聚飼合計酶反樸轉(zhuǎn)盟錄忘法顛：c污D促N論A的練合響成常流敞程非圖民解5晨.基轉(zhuǎn)因勉文貍庫詢的催構(gòu)度建應(yīng)方封法杰之基墻因稅組D獨(dú)N渣A文稀庫c儲D曠N屋A文坡庫基測因望組D掃N車A文廣庫蠟與c揉D乞N婆A文叮庫寨的凡比爭較P東C綢R技京術(shù)礎(chǔ)擴(kuò)早增殖與D左N摘A復(fù)引制銷的冊比它較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點(diǎn)原理原料條件不同點(diǎn)解旋方式場所酶結(jié)果D該N互A雙捧鏈養(yǎng)復(fù)較制菠（才堿踐基乖互慘補(bǔ)警配辜對野）四激種坊脫鉤氧免核河苷俗酸模遵板柳、辭能夢量民、尤酶D腫N濁A在英高彼溫紗下寇變造性脅解供旋解意旋排酶偶催窄化體骨外穗復(fù)桶制細(xì)訓(xùn)胞意核多內(nèi)熱城穩(wěn)乘定符的D灑N咽A聚午合鏟酶細(xì)濫胞憤內(nèi)羞的D皺N書A聚薯合褲酶大秋量贏的D紗N杰A片磚段形駁成丑整尿個D禽N甩A分奏子模返板D技N嬸A95℃P肯C骨R的抓基員本界原嘩理P姿C曉R反欺應(yīng)谷條虛件P猴C負(fù)R過街程P訴C閃R的董特日點(diǎn)50℃引央物1引目物2DNA引物P賽C蕉R的畫基固本傾原抗理P雪C準(zhǔn)R反敗應(yīng)該條扛件P著C著R過深程P辱C漠R的蘭特造點(diǎn)引鞭物1引含物2DNA引物72℃T路a俗q酶T鎖a蹄q酶P褲C芒R的伸基挖本僚原襪理P茫C毀R反旋應(yīng)店條罵件P膜C觀R過其程P叫C匆R的江特苦點(diǎn)72℃第1輪籌結(jié)助束第2輪筍開桿始P綿C卡R的目基鳥本綿原需理P雞C捧R反獲應(yīng)鼠條年件P極C貫R過墻程P炎C傍R的揭特開點(diǎn)95℃50℃72℃T政a睬qT坦a嘩qT邊a枝qT燦a妙qP挖C婚R的幣基荒本震原忽理P呢C技R反炭應(yīng)宜條挺件P禾C縣R過糕程P胃C蹲R的撤特毯點(diǎn)72℃第2輪宅結(jié)纏束思借考絮？1個D劃N搜A分蹲子膨進(jìn)害行P腳C摧R擴(kuò)點(diǎn)增,循璃環(huán)4次脈，理寄論期上溉至羞少罪需剪要安幾池個蘆引絹物貼？2×（2n-口1）(濾n為醬循境環(huán)辰次梳數(shù))（24-照1）×吐2撥=蘿3疫0（膽三津）渴人莖工煌合閃成已嫁知促其級序致列已沒知傭其m芹R催N壺A的熄序候列已嫂知參其繳翻掉譯侵產(chǎn)挽物餐的寇氨領(lǐng)基研酸楚序鋪列基料因潤比念較頌小凱，廟核喇苷慎酸痰序血列愛又漲已掘知霞。D共N電A合耳成捉儀目焰的崖基相因扭的m鉛R袋N塞A單瓣鏈D艷N口A(掃c時D弦N肥A）雙芳鏈D修N腿A(即哪目凡的渡基菊因)反秘轉(zhuǎn)襪錄合哥成1）奶反上轉(zhuǎn)備錄昏法測：以謹(jǐn)目鋤的然基協(xié)因愉轉(zhuǎn)往錄勁成破的揮信遍使R加N亮A為隨模因板汪，暗反孩轉(zhuǎn)丸錄蒼成宿互濫補(bǔ)衰的為單憑鏈D昆N將A，器然坑后榴在雕酶惱的啞作湖用槐下到合丸成骨雙聲鏈D住N華A，算從蒼而訓(xùn)獲友得金所緩需珠的日基兩因候。蛋禾白緞質(zhì)胖的茂氨敲基型酸溫序庸列m倡R議N狼A的飲核婚苷啟酸士序丑列結(jié)略構(gòu)喜基厭因也的堵核肆苷槳酸挑序背列目姨的績基及因推緊測推拔測化蝦學(xué)普合核成2）垃根侍據(jù)鍛已川知洞的遭氨幅基萄酸莊序幸列拉合置成D株N鈔A法施：人堤工束合駛成級的傻目定的條基浴因械的顯具偽體旁方壩法從葉基條因敗文托庫鋪中誼獲倍取利勿用P拌C資R技使術(shù)編擴(kuò)嚼增利俘用杯化府學(xué)羞方蜂法銅人茫工矮合策成歸噴納爐：逢獲奔取烈目著的脈基扔因臂的悼方妙法科鹽學(xué)偽家寨在狗培僅育戴抗粉蟲眠棉吳時串，佳經(jīng)勤歷異了勁多閥次袖失味敗徹，字才國獲廊得平成束功酬。起甚初畜把促蘇鼻云業(yè)金悶芽銀孢筋桿胡菌度的抗誕蟲踢基羞因插政入默載餐體歸質(zhì)既粒隆中腰，西然親后盜導(dǎo)咬入叼棉遺花弱的昌受終精盲卵向中成，持結(jié)盈果爛抗趴蟲悟基坡因節(jié)在掘棉豆花哪體拐內(nèi)乞沒紐奉有悉表扮達(dá)管。然監(jiān)后號在蛋插假入榮抗報蟲求基侍因罪的茫質(zhì)頁粒賞中奧插寫入啟根動蝕子(抗螞蟲脖基鹽因厘首責(zé)端)，更導(dǎo)原入興棉卷花毫受碑精笨卵撒，壯長神成促的飾棉魚花籃植植株壁還晉是尚沒軋有限抗率蟲猜能蘆力嚼。劈燕科癥學(xué)幟家社又抹在世有爽啟掏動爹子集、妖抗簡蟲室基肌因象的揮質(zhì)專粒眉中排插粘入終皺止賽子(抗販蟲尖基膠因柱末跪端)，燥導(dǎo)掏入蜓棉鄰花眨受烈精畢卵邀，龍結(jié)孕果道成球長買的解植范株寨，季有奔了瓶抗釋蟲溪能鉆力慌。資爛料:復(fù)拳制救原顆點(diǎn)+目遙的居基正因+啟浪動筋子+終夠止猜子+標(biāo)北記懲基越因它魚們礎(chǔ)各躲自骨有六什比么犁作筐用謹(jǐn)？步市驟環(huán)二版：基顆因絕表錢達(dá)翁載喘體忽的冊構(gòu)鼻建—舒—核叼心調(diào)救節(jié)倦基摘因操謀縱尚基突因結(jié)傲構(gòu)柄基地因R丙N繁A聚茫合欺酶半域乳互糖椅苷然酶酶酶

RNA聚合酶啟憑動篩子R因N熄A聚世合色酶啟倉動飼子：位孕于題基拒因澡首館端危的聯(lián)一片段拆特誤殊逢的D探N村A片符斷費(fèi)，急它嫩是R芒N紗A聚投合澇酶糊識們別銹和味結(jié)披合候的割部專位影，里有朵了泡它弟才費(fèi)能睬驅(qū)幸動好基價因眼轉(zhuǎn)害錄豈出m懼R旅N撞A，膝最忌終莖獲魔得維蛋計白業(yè)質(zhì)弦。為強(qiáng)什假么漫要責(zé)構(gòu)濁建坑基裁因鳴表特達(dá)約載順體專呢沉？目莫的京：所胸需咸物獄質(zhì)半：使表目先的受基渠因造在處受媽體翻細(xì)翠胞失中棋穩(wěn)戲定乳存州在稿，廁并扒且帝可防以肚遺瓶傳瓣給虛下疼一憑代象，曉同饑時尸使陳目工的奸基食因蹈能葉夠測表登達(dá)仔和菊發(fā)摩揮琴作選用掏?；Y因偶工鵝程省技案術(shù)狠路從線（巡壽二欣）腎方奧法將習(xí)目緒的竄基部因希導(dǎo)幣入植慚物黎細(xì)條胞將娛目改的尤基都因餐導(dǎo)醋入動元物積細(xì)保胞將調(diào)目潔的櫻基淹因財導(dǎo)考入微置生麥物講細(xì)隸胞農(nóng)宅桿勤菌疫轉(zhuǎn)乒化草法基浸因擊槍如法花粘粉悶管渴通靠道續(xù)法—千—顯顯微告注勞射價法—暮—感如受杜態(tài)墳細(xì)棉胞（1）血農(nóng)孕桿郊菌存轉(zhuǎn)糕化窗法①允特作點(diǎn)克：易筐感扯染認(rèn)雙劇子仰葉愈植成物蓋和角裸壺子蒸植尸物斜，腰對撈大誦多快數(shù)露單雕子啟葉宇植伍物償沒鞠有繳感銷染健能歇力②你原咽理芹：T她i質(zhì)芬粒奸上辟的T炎-容D什N餡A可們以轉(zhuǎn)宗移到駕受巡壽體差細(xì)士胞寬，玻并整嬸合到受旋體棍細(xì)常胞相染揉色邊體的D重N價A上多。③轉(zhuǎn)震化嘴過蘋程:T犧i質(zhì)惕粒目棄的叉基要因構(gòu)方建表殼達(dá)深載潮體導(dǎo)入植堤物璃細(xì)興胞插入植諷物槳細(xì)彩胞魄染罩色辮體D個N影A表達(dá)新版性雀狀轉(zhuǎn)入農(nóng)板桿換菌基廁因俱槍州法戲又秒稱勉微授彈后轟察擊蝕法降，幅是利濤用煎壓蹲縮允氣籠體東產(chǎn)映生碼的旬動擾力，朵將溫包再裹兇在況金其屬讓顆恐粒領(lǐng)表災(zāi)面筍的細(xì)表淋達(dá)銀載兩體D旱N歐A打陵入億受久體那細(xì)瓦胞牢中，潛使掃目須的英基喘因鏡與辯其企整瓣合馬并笨表眉達(dá)血的培方穿法甚。（2）樓基禿因買槍柳法適龍用尸于單略子置葉香植悟物（3）寇花籃粉誼通斜道鮮法植本物震花栗粉亞在中柱忌頭蓮上惡萌桃發(fā)砍后模，室花錯粉濕管喊要惕穿筑過雪花刑柱沈直瓜通護(hù)胚鋤囊甩。質(zhì)花前粉會管例通饒道畝法綱就貝是謝在能植鑄物臣受舌粉袋后舞，花層粉叔形習(xí)成刺的兆花顛粉踏管激還悄未愈亮合前，剪石去柱稈頭昂，城然撐后討，滴受加D焦N慰A（仿含殃目視的疼基明因華）戰(zhàn)，財使劣目纏的知基仗因挺借高助種花鍛粉鄰管裝通努道梳進(jìn)將入說受籮體覺細(xì)毯胞恢。適跪用就于被兄子脂植訴物胚奪珠花息藥花袍絲柱片頭花見柱子粥房飾壁子織房雄雪蕊雌供蕊2猜.將碎目壓的抬基清因削導(dǎo)抬入窄動室物蹄細(xì)聲胞（1）殃方途法冤：艙顯淘微隱注羨射結(jié)法（漁將李基拌因腿表摘達(dá)靠載司體亮提涼純例，聾用睡顯擊微注語射爹儀賠注偶射店到受鉤精芳卵中其）思郵考伯：跌為彎什求么禮要陣用怕受索精辰卵用而則不筆用欺體佩細(xì)夠胞脅？（2）凍操替作姿程負(fù)序:提墳純綁含因目張的杯基叔因糞表誘達(dá)孫載跡體取病受駁精室卵顯澆微蹄注織射移炎植釋到武輸市卵赤管動或逮子乒宮受拖精稠卵捏發(fā)扁育新福性第狀印動惜物常厭用烏法：C彎a2奪+處獄理常設(shè)用奸菌：尚大盡腸江桿臂菌微鑼生昌物艱作綿受碰體晶細(xì)裁胞泰原耽因瞇：繁倆殖塑快亡、碎多美為袍單屈細(xì)才胞移、抹遺尿傳票物稈質(zhì)誓相右對風(fēng)少過桶程訂：C獲a2揭+處芝理頃大范腸業(yè)桿宮菌感巷受章態(tài)離細(xì)糖胞表柿達(dá)染載蠻體裳與劇感哲受備態(tài)治細(xì)絮胞諷混飲合感擺受純態(tài)兇細(xì)利胞嶺吸備收D知N捉A3算.將站目洲的它基幅因歉導(dǎo)嘉入刃微驗(yàn)生丈物之細(xì)割胞思耐考逐：備為春什垂么李要艷用C時a2癢+處杠理姨受生體積細(xì)蓮胞昨？用C瘋a2＋處你理治，推增法加局細(xì)困菌細(xì)水胞鞠壁的煩通寇透去性受體生物植物動物微生物受體細(xì)胞導(dǎo)入方法受器精投卵體姨細(xì)護(hù)胞受半精濁卵細(xì)蘆胞/個早體農(nóng)煎桿喬菌惑轉(zhuǎn)努化笨法基牢因稻槍享法花羽粉囑管肌通烤道慕法顯撤微禽注射隨技魄術(shù)用C懲a2頌+處武理菌成砌感踐受書態(tài)務(wù)細(xì)微胞采霧用押基校因廈工毯程汁的龜方殼法壓培狂育枕抗免蟲宜棉束，即下拌列勿導(dǎo)淚入屆目透的旅基巧因渣的伴作維法眠正派確祥的月是貝（輩）A犯.將釋毒搭素妨蛋動白犧注唱射化到土受上精載卵拜中B砍.將腥編噴碼皇毒知素鏟蛋抹白危的D武N桌A序浩列曉，掘與代質(zhì)般粒舉重資組靠，渠導(dǎo)論入菜細(xì)絕菌龜，絡(luò)用夏該鳥細(xì)認(rèn)菌儀感切染覺棉揚(yáng)的泳體睜細(xì)著胞存，京再卷進(jìn)估行減組勤織貼培能養(yǎng)C套.將貢編導(dǎo)碼講毒姑素齒蛋知白址的D輕N朱A序棍列烏，把與贊質(zhì)帶?；贾赝徒M雪，短注潔射鑼到援棉危的研子秘房丸并妻進(jìn)艱入濃受籃精缸卵D萌.將躺編聞碼帥毒撕素程蛋芹白動的D必N杰A序批列斃，蠶注補(bǔ)射丟到頑棉晶受咸精吊卵送中B盤C四詞、扮目摧的笛基惱因夏的淡檢蘇測稱與井鑒吵定檢練測:是壘否續(xù)插古入狂目諷的計基堅因是貨否歪轉(zhuǎn)谷錄是爽否均翻倚譯鑒呢定:分士子口水窮平指鑒范定個永體臺生禿物蝦學(xué)區(qū)水嗎平島鑒立定1、升檢線測肚轉(zhuǎn)突基條因纖生綿物或染絨色俱體賺的D酒N搖A上糞是銳否語插訴入濫了符目廣的走基閣因①享首寬先氏取疫出寄轉(zhuǎn)歐基鋸因軋生在物另的基維因拖組D傾N娃A；（1）灑方燥法:D捷N城A分斑子訴雜輔交（2）精過愁程:②將籌含目兵的奮基燒因撐的D史N使A片譜段這用搞放瞇射奪性融同鑄位軌素?fù)系葦_作殃標(biāo)言記,以卷此佳做探疼針；③使探帽針和轉(zhuǎn)字基肚因俗生己物址的襖基謹(jǐn)因勸組雜掩交,若腥顯龜示輪出雜舅交立帶,表報明康染悄色綁體伶已冒插顏入游染模色酸體D忠N莫A中禾。（鳳一燈）摘檢濫測基青因活探瓜針：是帖一溉段處帶幻玉有姿檢曬測勝標(biāo)猜記譜，松且伴序鵲列務(wù)已棋知守的利，愈與迫目暈的姥基滑因絞互庭補(bǔ)連的理核憑酸盜序渾列撞?；`因堅探緊針暗通謝過分眠子閱雜互交與莫目蠟的渠基艱因丟結(jié)肆合認(rèn)，框產(chǎn)繭生及雜仍交任信侮號權(quán)，亭能勸從瀉浩仗翰熊的漲基酬因記組六中伶把商目臺的悟基痰因冠顯脅示紗出綠來帥。D彈N血A分桂子晉雜柜交牧示綢意牽圖采交用勇一序定炕的躺技摟術(shù)擊手云段碑，捧將辨兩踏種北生啊物叮的D勵N刷A分痰子贊的賠單情鏈甘放疾在施一紹起芹，罰如問果蛾這拐兩跨個亂單飲鏈釋具甜有宏互可補(bǔ)法的纏堿叼基醋序摘列裕，岸那配么渡，鋤互賀補(bǔ)抬的炊堿胡基狹序旨列稠就觀會悶結(jié)印合凍在遍一謝起兔，漏形剩成雜姑合研雙禾鏈柜區(qū)；釀在婦沒慌有減互層補(bǔ)面堿漫基它序較列魄的獲部滔位悲，遍仍帽然明是兩餓條嬸游具離爐的光單尊鏈。（陜二蠻）咸鑒匪定存（戶個舟體呼生濃物連學(xué)船水華平躬）2、嫩檢逝測聾目界的賣基東因盤是鳥否霜轉(zhuǎn)項(xiàng)錄咬出劃了m氧R跟N醋A3、擦檢峽測線目孟的緞基緩因裂是僅否美翻躁譯亂成縮慧蛋賺白語質(zhì)抗煌蟲播鑒渠定糊、呢抗撲病隆鑒付定墻、密活很性騙鑒涂定并等①方莫法:分落子額雜純交方趟法:抗濾原-抗戀體敗雜登交②緒過念程:用脾上帽述朽探突針勻和間轉(zhuǎn)種基辜因臥生跡物削的m米R號N鞭A雜想交,若博出貞現(xiàn)爪雜唇交弓帶,表憐明膏目頓的民基慢因脖轉(zhuǎn)張錄頌出抬了m設(shè)R噸N碌A(chǔ)。提溝?。?）蠟檢爐測樓目布的革基罷因弱是桶否廳翻般譯倘成犧蛋掩白腫質(zhì)方醉法摧—尖—節(jié)抗挨原-抗蹲體翻雜負(fù)交蘇云金桿菌B啞t毒宗素