細胞移植示蹤技術(shù)

細胞移植示蹤技術(shù)第1頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月細胞移植替代療法是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中發(fā)展最為迅速的領(lǐng)域之一第2頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月移植細胞的示蹤方法1.利用熒光染料標記細胞2.改變細胞基因，使其表達特異性的標志物3.選用雄性供體和雌性宿主，利用Y染色體作為標記物4.用胸腺嘧啶類似物來標記分裂細胞5.采用超順磁氧化鐵作為磁共振對比劑活體示蹤移植細胞第3頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月熒光染料標記示蹤技術(shù)熒光染料標記示蹤技術(shù)是利用熒光染料標記細胞，通過熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細胞儀等儀器檢測，達到定位、示蹤和定量等目的熒光色素主要有煙酸己可堿。3’-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸鹽、二脒基苯基吲哚等不足之處：隨著熒光衰減和細胞分裂而標記強度下降，不適宜檢測1~2個月以上的細胞，需離體狀態(tài)下進行病理學(xué)切片分析第4頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月改變細胞基因，使其表達特異性的標志物綠色熒光蛋白、熒光素酶、堿性磷酸酶、新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶等。將目的基因?qū)藰擞浖毎麅?nèi)并維持其生物學(xué)功能。使其表達特異性的標志物,熒光分子來作為生物體的標記。第5頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月利用Y染色體作為標記物最大優(yōu)點標記技術(shù)簡單，而標記效率很高，利用FISH技術(shù)細胞進行觀察.Y染色體標記的局限性是只能在雄性供體和雌性宿主之間標記，不能進行自體細胞的標記示蹤研究第6頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月用胸腺嘧啶類似物來標記分裂細胞利用5-溴脫氧尿嘧啶核苷、氚胸腺嘧啶核苷能競爭競爭性地參與細胞DNA合成，從而達到標記分裂細胞的目的。標記物具有放射性，易造成放射污染第7頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月磁共振示蹤目前較理想磁共振示蹤劑是超順磁性氧化鐵磁共振示蹤突出的優(yōu)勢在于極佳的空間分辨力，能利用磁共振延遲增強掃描明確部位，實時顯像并能連續(xù)跟蹤標記的細胞，同時能提供有關(guān)信息問題:

1）靈敏度相對不足

2）安全性有待進一步研究(影響分化能力）

3）非特異性顯像（鐵質(zhì)代謝）第8頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月隨著細胞標記示蹤技術(shù)的發(fā)展，可以在體外將細胞進行特異性標記，根據(jù)特異性標記可以追蹤到細胞，從而對細胞在體內(nèi)的遷移、增殖、分化和轉(zhuǎn)歸進行研究選擇一個合適的標記方法是能夠成功追蹤到種子細胞并對其研究的基礎(chǔ)。第9頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月理想的活體細胞示蹤劑應(yīng)具備以下幾個特征：（1）安全性：不影響細胞存活、生長、分化及其他生物學(xué)作用；不影響細胞基因組成；有其清除途徑（2）靈敏度：能準確反映少量標記細胞的行為（包括位置、移行）和標記細胞的數(shù)量等。（3）特異性：能反映標記細胞外移、死亡或被巨噬細胞吞噬等情況，間質(zhì)對標記細胞或標記物的非特異性處置不應(yīng)對靶細胞數(shù)量和生物學(xué)活動造成錯誤判斷。（4）長久性：示蹤時間較長，標記物不會自動衰減或隨細胞分裂而稀釋，可用