血清直接膽紅素（D-BIL）測定

血清直接膽紅素（D-BIL）測定.實驗原理直接膽紅素與2,4-二氯苯胺重氮鹽形成重氮化合物，在酸性條件下呈紅色。.標(biāo)本：病人準(zhǔn)備：無特殊要求。最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。類型：血清、肝素或EDTA血漿，應(yīng)避光保存。.標(biāo)本存放：15?25℃保存可穩(wěn)定2天；2?8℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定3個月，如冰凍保存，不可反復(fù)凍融！。.標(biāo)本運輸：常溫條件下避光保存運輸。.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、脂血、非避光保存運輸?shù)臉?biāo)本。.實驗材料6.1試劑：申能總膽紅素試劑盒試劑+試劑26.L16.L1試劑組成試劑1：16X64mlEDTA-Na2氯化鈉氨基磺酸試劑2：6X16ml2,4-二氯苯胺重氮鹽鹽酸EDTA-Na20.07mmol/L6.6g/L70mmol/L0.09mmol/L130mmol/L0.02mmol/L試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存:試劑避光保存于2?8℃,若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個月。試齊必需避光保存。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。注意事項：此試劑為體外診斷用。警告！腐蝕劑！不要入口。避免和眼睛，皮膚或衣服接觸。如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘。接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護(hù)。校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對自動分析儀進(jìn)行校準(zhǔn),參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件質(zhì)控品：參見生化檢驗校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件.儀器：奧林巴斯AU1000生化分析儀.操作步驟.1項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU1000生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件.2儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU1000生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結(jié)果的判斷與分析io.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與n質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2s為質(zhì)控警告限，3s為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。.計算方法以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報告范圍內(nèi)，儀器直接報告可靠的檢測結(jié)果無需手工計算，以umol/L報告。手工測定計算方法為：△Au直接膽紅素（Pmol/L）= X校準(zhǔn)液濃度△As.參考值范圍：W6.8mol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應(yīng)建立自己的參考值。.臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素非極性很強(qiáng)，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血（肝前黃疸）、實質(zhì)的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會導(dǎo)致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細(xì)胞破碎增多，使60?70%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測方法能檢測總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測定主要檢測水溶性的結(jié)合膽紅素，因此

可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計游離膽紅素的含量。.操作性能1線性范圍:1.7—171mol/L精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法5,AU1000批內(nèi)精密度小于4%或SDW0.04,總精密度小于5%或SDW0.07。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20X(umol/L)S(umol/L)cv(%)批間精密度n=20X(Pmol/L)S(umol/L)CV(%)樣品16.00.203.34樣品16.20.193.12樣品212.80.121.00樣品213.00.191.46樣品336.40.260.71樣品335.40.461.30方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x),同時對85個樣品進(jìn)行DBIL檢測,將檢測結(jié)果作方法學(xué)比較,其統(tǒng)計結(jié)果如下：y=0.95x+0.68umol/L；r=0.995。靈敏度：1.7mol/Lo病人結(jié)果可報告范圍：1.7?171Hmol/L15超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為171mol/L。樣品測定值超過上限時,應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。16.病危報警值的處理16.病危報警值的處理無。17.方法局限性本法線性上限為171mol/Lo樣品測定值超過上限時，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結(jié)果乘以2。干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度(1704umol/L,甘油三酯濃度W22.6nlmo