流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件

流式細胞術(shù)系列講座之一免疫標記流式細胞術(shù)免疫標記應用簡介2009-12-03流式細胞術(shù)系列講座之一免疫標記1上次流式細胞術(shù)講座內(nèi)容(概述)流式細胞術(shù)的一般介紹流式細胞術(shù)在臨床檢測和科研中的應用上次流式細胞術(shù)講座內(nèi)容(概述)2中性拉細膽流式細胞儀可檢測的細胞參數(shù)細胞結(jié)構(gòu)細胞功能細胞大小細胞表面蛋白抗原細胞顆粒性程度細胞胞漿內(nèi)蛋白性細胞表面面積抗原核漿比例細胞內(nèi)細胞因子DNA含量與細胞周細胞增殖期細胞內(nèi)鈣離子濃度RNA含量中性拉細膽3免疫標記技術(shù)免疫標記技術(shù)(immunolabellingtechnique):是指用熒光素、放射性同位素、酶、發(fā)光劑或電子致密物質(zhì)等作為示蹤劑,標記抗體或抗原進行的抗原抗體反應流式細胞術(shù)檢測蛋白質(zhì)分子:免疫熒光標記技術(shù)免疫標記技術(shù)4FACSCalibur流式細胞儀能夠檢測的熒光(Fluorescence)信號FL1(第一熒光)-FITc(異硫氰酸熒光素)FL2(第二熒光)-PE(藻紅蛋白)FL3(第三熒光)-PerCP,Pecy5等PL4(第四熒光)-APc(藻青蛋白)聽育雙色直接染色CDSFITCFACSCalibur流式細胞儀能夠檢測的熒5流式細胞術(shù)免疫熒光標記的應用檢測細胞表面蛋白抗原檢測細胞胞漿內(nèi)蛋白性抗原檢測細胞內(nèi)細胞因子優(yōu)勢:在同一細胞上同時檢測多種標志流式細胞術(shù)免疫熒光標記的應用6血液系統(tǒng)各型細胞免疫標志Haomatopoctistomcolloo興nglemShorttermMutateHP8-BC2-2RPo-BC2xlpr/iprCML/BLstMRF8-BCRab[BCL2Platelets血液系統(tǒng)各型細胞免疫標志7造祖/干細胞CD34+抗原在早期造血祖細胞內(nèi)呈高水平表達,隨著細表達呈進化性下降,繼而消失。CD38抗原是造血干細胞向多系定向分化的標志之一,并隨一定的分化過程表達上調(diào)■最近發(fā)現(xiàn)CD90(Thy-1)是比CD34更早的干、祖細胞■結(jié)合多種分化抗原的表達可以作為造血細胞不同發(fā)育階段的標志如CD34+、CD33+細胞群為多能干細胞向髓系定向的標志CD34+、CD19+多為多能干細胞向B系定向的祖細胞CD34+、TdT+、CD10+、CD7+則被認為是向T系定向的祖細胞。造祖/干細胞8T細胞標志T細胞及其亞群T祖細胞(pro-T)的表型為CD34+、TdT+、CD10CD7+未成熟T細胞標志CD3、CD和CD8。在T細胞發(fā)育過程中,CD7是最早出現(xiàn)的T細胞標志,且貫穿表達在整個T細胞分化發(fā)育過程中胸腺細胞要分化發(fā)育為有功能的成熟T細胞,細胞表面標志需經(jīng)歷一定的變化過程。T細胞標志9CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCRCD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR(即CD4、CD8雙陰性)CD7+、CD1+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+(即CD4、CD8雙陽性)CD7+、CD2+、CD7+、CD2+CD3+、CD4+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR+CD8+、TCR+進入外周淋巴器官和血液,執(zhí)行免疫功能CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR10流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件11流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件12流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件13流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件14流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件15流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件16流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件17流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件18流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件19流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件20流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件21流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件22流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件23流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件24流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件25流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件26流式細胞術(shù)免疫標記簡介學習資料課件27流式細胞術(shù)免疫標記簡介