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文檔簡介

間歇培育或分批培育:微生物在化學(xué)成分肯定的培育基中進(jìn)展培育。同步培育:培育基中全部細(xì)胞處于同一生長階段,群體與個(gè)體的行為全都。芽孢:某些細(xì)菌在生長的肯定階段,細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形、橢圓形或圓柱形,對(duì)不良環(huán)境條件具有較強(qiáng)抗性的休眠體。伴孢晶體:有些芽孢桿菌在形成芽孢的同時(shí),在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生晶體狀內(nèi)含物。連續(xù)培育:在對(duì)數(shù)生長期的培育容器中不斷參加穎的培育基,同時(shí)不斷放出代謝物,使微生物所需的養(yǎng)分準(zhǔn)時(shí)得到補(bǔ)充,有害的代謝產(chǎn)物準(zhǔn)時(shí)排解,菌體的生長不受影響。發(fā)酵熱:發(fā)酵過程中釋放出來的凈熱量。原生質(zhì)體融合:通過人工的方法,使遺傳性狀不同的兩個(gè)細(xì)胞的原生質(zhì)體發(fā)生融合,并產(chǎn)生重組子的過程。養(yǎng)分缺陷型菌株:野生菌株經(jīng)過人工誘變處理后,喪失了合成某種養(yǎng)分物質(zhì)的力量,這些菌株生長的培育基中必需添加該種養(yǎng)分物質(zhì)。接合:通過供體菌和受體菌的細(xì)胞直接接觸、傳遞大段DNA〔包括質(zhì)粒〕遺傳信息的現(xiàn)象。整合DNA片段插入染色體中的過程。轉(zhuǎn)導(dǎo)DNA片段攜帶到受體細(xì)胞中,從而使后者獲得前者局部遺傳性狀的現(xiàn)象。轉(zhuǎn)染DNA〔或RNA〕人為地抽提分別出來,用它來感染感受態(tài)的受體細(xì)胞,并進(jìn)而產(chǎn)生正常病毒的后代,是特別的“轉(zhuǎn)化”。轉(zhuǎn)化:某一基因型的細(xì)胞直接從四周介質(zhì)中吸取另一基因型細(xì)胞的DNA,并將它整合到自己的基因組中,造成基因型和表型發(fā)生相應(yīng)變化的現(xiàn)象。巴斯德效應(yīng):指在厭氧條件下,向高速發(fā)酵的培育基中通入氧氣,抑制糖酵解的現(xiàn)象。半合成抗生素:通過人工化學(xué)合成的方法對(duì)它的構(gòu)造進(jìn)展修飾與改造,把它的“短板”彌補(bǔ)上,揚(yáng)長避短,發(fā)揮更好的效力。由于是基于它原有的構(gòu)造作為起始原料。組成酶:它的合成與環(huán)境無關(guān),隨菌體形成而合成,是細(xì)胞固有酶,在菌體內(nèi)的含量相對(duì)穩(wěn)定。誘導(dǎo)酶:只有在環(huán)境中存在誘導(dǎo)劑時(shí),才開頭合成,一旦環(huán)境中沒有了誘導(dǎo)劑,合成就終止。同工酶:催化一樣的化學(xué)反響,而酶蛋白的分子構(gòu)造、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。初級(jí)代謝產(chǎn)物:對(duì)微生物的生產(chǎn)是必需的,與微生物細(xì)胞的形成過程同步。如氨基酸、核苷酸、乙醇等。次級(jí)代謝產(chǎn)物:對(duì)微生物的生存,生長或生殖不是必需的,以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體,形成的頂峰在微生物生長的穩(wěn)定期后期或衰亡期。如抗生素、生長激素、生物堿、維生素、色素、毒素等。抗原:任何可誘發(fā)免疫反響的物質(zhì)??贵wB淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。補(bǔ)料分批培育:依據(jù)菌株生長和初始培育基的特點(diǎn),在分批培育的某些階段適當(dāng)補(bǔ)加培育基,使菌體或其代謝產(chǎn)物的生長時(shí)間延長。半連續(xù)培育或流加培育活性污泥:是由污水中生殖的好氣性微生物群體組成的絮狀污泥,具有很強(qiáng)的吸咐、分散和氧化分解污水中有機(jī)物質(zhì)和其它物質(zhì)的力量。生理性酸性物質(zhì):經(jīng)微生物代謝后能形成酸性物質(zhì)的無機(jī)氮源,如硫酸胺。生理性堿性物質(zhì):經(jīng)微生物代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的無機(jī)氮源,如硝酸鉀。氣升式生物反響器:承受內(nèi)環(huán)流氣升式中心進(jìn)氣的反響器,內(nèi)部無攪拌裝置,是在傳統(tǒng)的鼓泡塔中參加導(dǎo)流筒構(gòu)成的。當(dāng)氣體通過氣體分布器進(jìn)入中心導(dǎo)流筒后,造成管內(nèi)流體密度比管外低,在靜壓差和進(jìn)入氣體的動(dòng)量作用下,使液體攜帶氣泡在反響器內(nèi)形成循環(huán)流淌,從而到達(dá)良好的氣液混合。高溫短時(shí)滅菌:利用高溫使微生物的蛋白質(zhì)及酶發(fā)生凝固或變性而死亡。紅曲米:以秈稻、粳稻、糯米等稻米為原料,用紅曲霉菌發(fā)酵而成,棕紅色或紫紅色的米粒。半合成培育基:由自然材料和的純化學(xué)藥品組成的培育基。自然培育基:利用生物的組織、器官及其抽取物或制品配成的培育基。合成培育基:成分完全了解的化學(xué)藥品配成的培育基。根本培育基:滿足野生型菌株最低養(yǎng)分要求的合成培育基。完全培育基:,在根本培育基中參加富含生長因子的養(yǎng)分物質(zhì),滿足各種養(yǎng)分缺陷型菌株的生長需要的培育基菌種復(fù)壯:在菌種發(fā)生退化后,通過純種分別和性能測定,從退化群體中,找出未退化的個(gè)體,以到達(dá)恢復(fù)該菌株原有外形。光復(fù)活作用:將受紫外線照耀后的細(xì)胞馬上暴露在可見光下,菌體的突變率和致死率均下降。革蘭染色法:初染〔草酸銨結(jié)晶紫---紫色〕,媒染〔碘液—紫色〕,脫色〔95%乙醇---無色或紫色〕,復(fù)染〔沙黃〔番紅〕 無色被染成紅色,紫色仍為紫色〕。。。革蘭氏陽性菌為紫色;革蘭氏陰性菌被染成紅色。革蘭氏陽性菌:垣酸〔磷壁酸〕 革蘭氏陰性菌:脂多糖〔內(nèi)毒素〕放線菌主要通過無性孢子進(jìn)展生殖。放線菌:鏈霉菌; 抗生素:鏈霉素、土霉素、博來霉素、卡那霉素單細(xì)胞蛋白:一類源于酵母菌或其他微生物的蛋白。〔SCP〕70S(50S/30S),80S(60S/40S)。芽殖是酵母菌最常見的生殖方式。假酵母:只進(jìn)展無性生殖的酵母菌。真酵母:能進(jìn)展有性生殖的酵母菌。無性生殖:不經(jīng)生殖細(xì)胞結(jié)合,由母體直接產(chǎn)生子代的生殖方法。嘧啶比嘌呤對(duì)紫外線更敏感DNA斷裂。有些細(xì)菌能直接利用纖維素和半纖維素發(fā)酵。一個(gè)物種的學(xué)名由屬名〔字首大寫〕+種名〔字首小寫〕,學(xué)名應(yīng)為斜體字。基因重組:兩個(gè)不同性狀個(gè)體內(nèi)的基因轉(zhuǎn)移到一起,形成的遺傳型個(gè)體。質(zhì)粒:游離于染色體外,具有獨(dú)立復(fù)制力量的小型共價(jià)閉合環(huán)狀DNA。菌落:單個(gè)細(xì)胞在有限的空間中進(jìn)展成肉眼可見的細(xì)胞堆。物理滅菌:高溫滅菌法,紫外線滅菌,過濾除菌,微波滅菌,γ射線滅菌。高溫引起蛋白質(zhì)、核酸等活性大分子氧化或變性失活,導(dǎo)致微生物死亡。過濾除菌:確定過濾器---攔截作用,通過掌握孔的大小除去肯定大小范圍的顆粒,慣性碰撞、集中、吸附等作用除去比孔徑小的顆粒。缺點(diǎn)是流淌阻力造成巨大的壓力降。紫外線滅菌:作用于DNA,形成胸腺嘧啶二聚體,造成菌體死亡。對(duì)芽孢,細(xì)胞起作用,穿透力弱,不能透過一般玻璃。物體外表和空間的消毒。γ射線滅菌:密封物體,不耐熱物體滅菌,不留下污染物。醫(yī)用一次性塑料用品。微波滅菌:微波造成分子加速運(yùn)動(dòng)使細(xì)胞內(nèi)部受到損害,導(dǎo)致微生物死亡。加熱均勻,熱能利用率高,穿透力強(qiáng),加熱時(shí)間短,用于培育基滅菌,酒類消毒。細(xì)菌生長曲線:調(diào)整期、對(duì)數(shù)生長期、穩(wěn)定期、衰亡期。①調(diào)整期:菌體質(zhì)量增加,體積增大;菌體代謝格外活潑,生產(chǎn)誘導(dǎo)酶,輔酶及某些中間代謝產(chǎn)物;對(duì)外界理化因素影響的抵抗力量較弱。工業(yè)指導(dǎo):縮短調(diào)整期,承受適當(dāng)菌齡〔對(duì)數(shù)生長期〕的強(qiáng)健菌種,發(fā)酵培育基的組成應(yīng)接近種子培育基。②對(duì)數(shù)生長期:菌體數(shù)高數(shù)增長;易受培育溫度影響,接近最適生長溫度;該階段前期的細(xì)胞對(duì)理化環(huán)境敏感;菌體大小,形態(tài),生理特征比較全都,大多單個(gè)存在工業(yè)指導(dǎo):爭論微生物遺傳和代謝性能,生產(chǎn)接種的種子③穩(wěn)定期:活菌數(shù)動(dòng)態(tài)平衡;細(xì)胞分裂速度下降,細(xì)胞內(nèi)開頭積存內(nèi)含物,產(chǎn)芽孢適應(yīng)不利的環(huán)境;開頭合成次級(jí)代謝工業(yè)指導(dǎo):菌體在該階段收獲;某些代謝產(chǎn)物、酶的收獲期④衰亡期:活菌數(shù)下降,細(xì)胞內(nèi)顆粒更明顯,消滅液泡,細(xì)胞消滅畸形,芽孢開頭釋放,因菌體本身產(chǎn)生的酶及代謝產(chǎn)物的作用,菌體死亡、自溶,有的微生物連續(xù)產(chǎn)生次級(jí)代謝產(chǎn)物,衰亡期比其他各期時(shí)間更長。工業(yè)指導(dǎo):抗生素:低分子質(zhì)量的微生物代謝產(chǎn)物,能夠在很低的濃度下抑制其他微生物生長。抑制蛋白質(zhì)合成:鏈霉素、大慶霉素、四環(huán)素、紅霉素〔大的內(nèi)酯環(huán)〕抑制細(xì)胞壁合成:青霉素、頭孢菌素、碳青霉烯類、單環(huán)內(nèi)酰胺DNA合成:蒽環(huán)類,道諾紅霉素RNA聚合酶的抑制劑:利福霉素;抑制細(xì)胞膜合成:兩性霉素B溶源性細(xì)菌對(duì)其本身產(chǎn)生的噬菌體或外來的同源噬菌體不敏感,可以進(jìn)入溶源性細(xì)菌,但不能增殖,不能導(dǎo)致細(xì)菌裂解,有免疫性。前病毒或原病毒DNA。溫順性噬菌體或溶源性使菌體:感染細(xì)胞后,并不馬上引起細(xì)胞裂解,而是以原噬菌體方式整合到宿主的DNA中,隨寄主生殖而連續(xù)傳代的噬菌體。帶有原噬菌體的細(xì)菌稱為溶源性細(xì)菌。溶源性是細(xì)菌的遺傳特性。每個(gè)溶源性細(xì)菌的子細(xì)胞也有溶源性。溶源性噬菌體特點(diǎn):具有產(chǎn)生噬菌體的潛在力量;具有抗同源噬菌體感染的免疫性;溶源性細(xì)菌的復(fù)愈;獲得的生理特性。溶原轉(zhuǎn)變:當(dāng)溫順性噬菌體感染宿主而使它發(fā)生溶原化,因噬菌體的基因整合到宿主基因組上,使宿主獲得除免疫性以外性狀的現(xiàn)象。檢測是否是溶源性細(xì)菌:將待測菌樣在適宜的培育基中培育,在生長的對(duì)數(shù)期進(jìn)展紫外線照耀,誘導(dǎo)原噬菌體復(fù)制。進(jìn)一步培育后,將培育物濾去,除去活菌體,將濾液與指示菌混合后倒入平皿,假設(shè)有噬菌斑消滅,則被測菌是溶源性細(xì)菌。指示菌是敏感的、非溶源性的菌株。篩選菌株平皿快速檢測法:利用菌體在特定固體培育基平皿上的生理反響,將肉眼觀看不到的性狀轉(zhuǎn)化成可見的形態(tài)。生長圈法:工具菌為養(yǎng)分缺陷型菌株,篩選氨基酸、核苷酸、維生素的生產(chǎn)菌。生產(chǎn)菌四周圍繞生長工具菌。透亮圈法:在固體培育基中摻入溶解性差、可被特定菌利用的養(yǎng)分成分,造成渾濁不透亮的培育基背景。在待測菌落四周會(huì)形成透亮圈,透亮圈的大小反映了菌落利用此物質(zhì)的力量。檢測菌株產(chǎn)淀粉酶,蛋白、酸的力量。變色圈法:將指示劑直接摻入固體培育基中,進(jìn)展待篩選菌培育,變色圈越大,菌落產(chǎn)酶力量越強(qiáng)。推斷水解產(chǎn)物的狀況抑制圈法:春雷霉素生產(chǎn)菌的篩選。衣原體對(duì)四環(huán)素、紅霉素、氯霉素,磺胺類藥物敏感。對(duì)NISIN不敏感。霉菌:在養(yǎng)分基質(zhì)上形成絨毛狀、網(wǎng)狀或絮狀菌絲體的真菌。霉菌的無性孢子:孢子囊包子、分生孢子、厚垣孢子、節(jié)孢子;霉菌的有性孢子:卵孢子、接合孢子、子囊孢子突變:染色體數(shù)目變化,染色體構(gòu)造的變化、染色體局部座位內(nèi)的變化。最終一種即,基因突變,點(diǎn)突變。分為堿基置換、移碼突變、缺失、插入。堿基置換:錯(cuò)義突變、無義突變、同義突變、沉默突變。支原體、衣原體、病毒可通過細(xì)菌過濾器;細(xì)菌、立克次體不能通過細(xì)菌過濾器。菌株退化的緣由及防治方法:菌種退化:生產(chǎn)菌株生產(chǎn)性狀的劣化、遺傳標(biāo)記的喪失。產(chǎn)生緣由:掌握生產(chǎn)性狀的基因發(fā)生負(fù)突變〔基因突變〕。由于誘變,后代發(fā)生分別現(xiàn)象〔分別現(xiàn)象〕防止方法:1.菌株選育——使用孢子或單核菌株;誘變處理后,進(jìn)展充分的后培育及分別提純,保證菌株純度,增加突變點(diǎn)位的篩選。菌種保藏——掌握菌種的傳代次數(shù),承受斜面保藏,承受沙土管、凍干管和液氮管等能長期保藏的手段。菌種培育——掌握碳源、氮源、PH值和溫度,避開消滅對(duì)生產(chǎn)菌不利的環(huán)境菌種治理——定期使菌種復(fù)壯。工業(yè)微生物的特點(diǎn):遺傳性狀穩(wěn)定;生長速度快,不易被噬菌體等污染;目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)量接近理論轉(zhuǎn)化率;目標(biāo)產(chǎn)物最好能分泌到胞外,以降低產(chǎn)物抑制并利于產(chǎn)物分別。;盡可能削減產(chǎn)物類似物的產(chǎn)量,以提高目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)量及利于產(chǎn)物分別;培育基成分簡潔、來源廣、價(jià)格低廉;對(duì)溫度,pH、離子強(qiáng)度等環(huán)境因素不敏感;對(duì)溶氧的要求低,便于培育及降低能耗。微生物養(yǎng)分類型:光能自養(yǎng)型:綠硫細(xì)菌、紅硫細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌 光能異養(yǎng)型:紅螺菌化能自養(yǎng)型:氫細(xì)菌、硫細(xì)菌、鐵細(xì)菌、硝化細(xì)菌化能異養(yǎng)型:真菌、大多數(shù)細(xì)菌、放線菌56.pH:7-87.5-8.53.8-64-5.8生長因子:氨基酸、維生素、堿基、脂肪酸〔固醇、膽堿、肌醇〕放線菌的基內(nèi)菌絲功能是吸取養(yǎng)分物質(zhì)。細(xì)胞壁的主要成分細(xì)菌:肽聚糖、脂多糖、脂蛋白、垣酸〔磷壁酸〕為革蘭氏陽性菌特有。酵母菌:甘露聚糖,葡聚糖 霉菌:幾丁質(zhì)培育基的配制原則:養(yǎng)分物質(zhì)應(yīng)滿足微生物的需要:菌種對(duì)各養(yǎng)分要素的不同要求進(jìn)展配制。養(yǎng)分物的濃度及配比應(yīng)恰當(dāng),碳氮比,考慮避開培育基中各物質(zhì)之間的相互作用。物理化學(xué)條件適宜,pH依據(jù)培育目的:培育菌體,或積存菌體代謝產(chǎn)物,產(chǎn)物是初級(jí)代謝產(chǎn)物還是次級(jí)代謝產(chǎn)物。培育基各成分的來源和價(jià)格,優(yōu)先選用來源廣泛、價(jià)格低廉的培育基。pH轉(zhuǎn)變的緣由:pH下降;pH上升。過酸:加氫氧化鈉、碳酸鈉〔治標(biāo)〕;加尿素、硫酸銨、蛋白質(zhì),提高通氣量〔治本〕過堿:加硫酸,鹽酸〔治標(biāo)〕;加糖、乳酸、油脂,降低通氣量〔治本〕在培育基中參加磷酸緩沖液或碳酸鈣。分批發(fā)酵、補(bǔ)料分批發(fā)酵、連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)缺點(diǎn):分批發(fā)酵:優(yōu)點(diǎn)-對(duì)溫度的要求低,工藝操作簡潔;比較簡潔解決雜菌污染和菌種退化等問題;對(duì)養(yǎng)分物的利用效率較高,產(chǎn)物濃度也比連續(xù)發(fā)酵要高。缺點(diǎn)-人力、物力、動(dòng)力消耗較大;生產(chǎn)周期較短;生產(chǎn)效率低補(bǔ)料分批發(fā)酵:優(yōu)點(diǎn)-可以消退底物抑制;到達(dá)高密度細(xì)胞培育;延長次級(jí)代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)時(shí)間;稀釋有毒代謝產(chǎn)物;降低染菌和避開遺傳不穩(wěn)定性。缺點(diǎn)-對(duì)補(bǔ)料過程中參加的物料無菌要求高,假設(shè)這個(gè)過程中有處理不當(dāng),之前的過程全部作廢,發(fā)酵倒罐。連續(xù)發(fā)酵:優(yōu)點(diǎn)-可連續(xù)運(yùn)行,生產(chǎn)周期縮短,提高設(shè)備利用率和生產(chǎn)效率,便于自動(dòng)化掌握,產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。缺點(diǎn)-長時(shí)間連續(xù)操作,較易受雜菌污染,發(fā)酵設(shè)備簡單簡潔染菌。菌體收率和產(chǎn)物濃度相對(duì)較低,不利于下游的提取。連續(xù)培育的養(yǎng)分利用率較低,會(huì)增加本錢。對(duì)設(shè)備要求高需要簡單的檢測和掌握系統(tǒng)。更易受菌種退化的影響。噬菌體抗性菌株的篩選:用紫外線照耀對(duì)噬菌體敏感的動(dòng)身菌株,使其發(fā)生變異,然后在該菌懸液中大量接入含有噬菌體的培育液,噬菌體數(shù)應(yīng)大于菌體細(xì)胞數(shù)。此時(shí)動(dòng)身菌株全部死亡,而變異產(chǎn)生的抗噬菌體突變株能在這樣的環(huán)境中連續(xù)生長生殖。通過平板分別即可得到純的抗噬菌體菌株。在菌體生長的培育基中參加甘氨酸,可以是菌體較簡潔被酶解。青霉素中,1mol32ATP。藍(lán)細(xì)菌是光合作用微生物,進(jìn)展非環(huán)式光合磷酸化作用。生長譜法確定養(yǎng)分缺陷型菌株的生長必需物:將待測菌與溶化的固體培育基混合均勻后倒入培育皿,待培育基凝固后,在平板上分區(qū)域放置酪素水解液、水溶性維生素、核酸水解液、酵母水解液并保溫培育。觀看四個(gè)區(qū)域的細(xì)菌生長狀況。酪素水解液——氨基酸缺陷,水溶性維生素——維生素缺陷性、核酸水解液——堿基缺陷性。其次步,進(jìn)一步確定哪種核苷酸缺陷性。四種核苷酸:腺嘌呤核苷酸,鳥嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸、胞嘧啶核苷酸。分成四組:1腺嘌呤核苷酸,鳥嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸;2鳥嘌3腺嘌呤核苷酸,胸腺嘧啶核苷酸、胞嘧啶核苷酸;4腺嘌呤核苷酸,鳥嘌

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