衛(wèi)微第九章 空氣微生物

空氣微生物第一節(jié)

空氣生境特性第一節(jié)

空氣生境特性電離層微生物難以生存平流層（50km）空氣稀薄，只有水平流動(dòng)；含臭氧層（吸收紫外線）。微生物難以生存對(duì)流層（8-15km）含空氣、水蒸氣、煙塵、微生物等?？諝獯怪?、水平流動(dòng)；有氣象現(xiàn)象。對(duì)流層是大氣中微生物生存和擴(kuò)散的主要場(chǎng)所電離層空氣中缺乏微生物生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和水分?？諝獾奈锢砘瘜W(xué)參數(shù)不適合微生物生存和生長(zhǎng)。氣溫隨高度增加而降低，至對(duì)流層頂部溫度低于大多數(shù)微生物能夠生長(zhǎng)的最低溫度。高度↑，氣壓↓，不利于滲透壓的維持。干燥、日光輻射、大氣污染物不利于微生物生長(zhǎng)。一般情況下，空氣中污染物越多，污染越嚴(yán)重，空氣微生物的種類和濃度也會(huì)越高。具有流動(dòng)性，空氣中無(wú)固有微生物叢，空氣中的微生物是暫時(shí)的、可變的。因?yàn)榱鲃?dòng)快，流動(dòng)范圍廣，雖然數(shù)量少但危害和影響面大，微生物傳播的重要媒介。第二節(jié)

空氣微生物的來(lái)源、種類、分布及其衛(wèi)生學(xué)意義自然界：主要來(lái)源，土壤、水、腐爛物等植物：某些細(xì)菌、真菌孢子動(dòng)物：動(dòng)物帶菌和排菌量可能比人類更大人體：皮膚、毛發(fā)、口鼻、排泄物或分泌物生產(chǎn)活動(dòng)：工業(yè)、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)其他：牙科、空調(diào)加濕器、微生物實(shí)驗(yàn)室一、空氣微生物的來(lái)源細(xì)菌：絕大多數(shù)。芽胞桿菌屬、微球菌屬、葡萄球菌屬、假單胞菌屬。（G+球菌最多）致病菌：結(jié)核分枝桿菌、白喉?xiàng)U菌、炭疽芽孢桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、百日咳桿菌、鼠疫桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌等。真菌：重要組成部分。4萬(wàn)多種。鏈格孢屬、曲霉屬、青霉屬、枝孢霉屬、酵母屬、鐮刀菌屬。曲霉屬引起“蔗渣工人肺”和“農(nóng)民肺”病毒及其他微生物流感病毒，鼻病毒、腮腺炎病毒、風(fēng)疹病毒、麻疹病毒、腸病毒等肺炎支原體、Q熱立克次體二、空氣微生物的種類垂直分布：微生物在空氣中的濃度與距離地面的高度呈對(duì)數(shù)下降。水平分布：決定于空氣中塵埃、地面微生物的多少及氣象條件。城市細(xì)菌濃度高于農(nóng)村，鄉(xiāng)村的霉菌、花粉、植物孢子濃度高于城市。干燥寒冷少，潮濕溫暖多。時(shí)間分布：早晚多，中午（12-14點(diǎn)）少。夏季多，冬季少；春天多，秋季少。易受氣象和大氣污染影響氣象、氣候(濕度、溫度、風(fēng)力等)對(duì)空氣微生物的種類和數(shù)量影響較大三、空氣微生物的分布鬧市區(qū)不同高度細(xì)菌數(shù)量變化高度(M)平均菌落數(shù)G+芽胞菌G+球菌其它菌數(shù)％數(shù)％數(shù)％419563.116484.1189.3815795.712479.02515.8111541711.011776.01912.3336146.64878.7914.8747222.86286.01013.9Bovallius等研究瑞典四個(gè)功能地區(qū)發(fā)現(xiàn)：海岸地區(qū)63（0-560）CFU/m3

農(nóng)業(yè)地區(qū)99（2-3400）CFU/m3

市內(nèi)地區(qū)763（100-2500）CFU/m3

城市街道850（100-4000）CFU/m3上海地區(qū)各場(chǎng)所空氣中細(xì)菌分布地區(qū)菌落數(shù)(每皿)人群密度（個(gè)/10m3）地區(qū)菌落數(shù)(每皿)人群密度（個(gè)/10m3）中百一店466.22.6電影院162.61.0繁忙交通點(diǎn)428.0--一般交通點(diǎn)96.0--兒科候診室314.05.2成人候診室115.81.5舞廳85.00.8宿舍44.90.9公園39.6--郊區(qū)17.6--動(dòng)物疫病的傳播和感染。引起變態(tài)或過(guò)敏反應(yīng)。食品的腐敗變質(zhì)或引起食物中毒。植物疫病的傳播。環(huán)境污染生物戰(zhàn)劑及危害。四、空氣微生物的衛(wèi)生學(xué)意義第三節(jié)

空氣微生物的檢測(cè)

與衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)采集與檢測(cè)方法自然沉降法慣性撞擊式采樣法液體撞擊式采樣器固體撞擊式采樣器：?jiǎn)渭?jí)、多級(jí)過(guò)濾阻留式采樣器靜電沉著類采樣器溫差迫降式采樣法一、空氣微生物的檢測(cè)1.自然沉降法：（沉降平板法）

空氣中微生物粒子在自身重力作用下，以垂直的自然方式沉降到瓊脂培養(yǎng)基上。于37℃條件下培養(yǎng)48hr，計(jì)算菌落數(shù)。以cfu/皿或cfu/m3表示。采集與檢測(cè)方法空氣采樣（1）選擇有代表性的采樣點(diǎn)，一般在室內(nèi)四角及室中央，放置含營(yíng)養(yǎng)瓊脂的平皿(距墻1m，地面1.5m）。（2）打開(kāi)皿蓋，將有培養(yǎng)基的平皿，暴露于空氣5分鐘（視空氣清潔程度而定），采樣畢合上皿蓋，記錄暴露時(shí)間。（3）將已采集的培養(yǎng)基在6hr內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，置于37℃培養(yǎng)48hr。（4）記錄5個(gè)平皿的菌落總數(shù)。操作注意事項(xiàng)：平皿直徑不小于9cm；采樣點(diǎn)避開(kāi)空調(diào)、門窗；皿蓋扣置于皿底之下，勿暴露在空氣之中。結(jié)果計(jì)算（奧姆斯基公式）N-培養(yǎng)后平皿上菌落數(shù)；

A-平皿面積（cm2）

t-暴露時(shí)間（min）優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單方便臟環(huán)境采樣效率較好缺點(diǎn)：采集效率低穩(wěn)定性差，易受外界氣流影響（2）自然沉降法的優(yōu)缺點(diǎn)2.慣性撞擊式采樣法：

利用抽氣裝置在單位時(shí)間內(nèi)將一定容量的含有微生物粒子的空氣，通過(guò)某些裝置形成高速氣流，氣流中的微生物粒子隨之高速運(yùn)動(dòng)，當(dāng)氣流改變方向時(shí)，運(yùn)動(dòng)的粒子因慣性繼續(xù)向前撞擊并粘集于培養(yǎng)基表面上。直線氣流式全玻璃液體撞擊式采樣器固體撞擊式采樣器曲線氣流式直線氣流式：

（1）全玻璃液體撞擊式采樣器利用噴射氣流的方式將空氣中的微生物粒子收集在小體積的液體中。優(yōu)點(diǎn)適于高濃度的空氣微生物采樣。樣品可接種不同的培養(yǎng)基培養(yǎng)計(jì)數(shù)。能測(cè)出空氣中活微生物數(shù)量。采樣液有保護(hù)作用，對(duì)脆弱的微生物(如病毒、立克次體)也能采樣。捕獲率高，尤其是對(duì)于小顆粒。采樣器一般由玻璃制成，利于消毒滅菌處理，使用方便、價(jià)格低廉、可反復(fù)使用。缺點(diǎn)：氣溫5℃以下噴嘴易凍結(jié)采樣液量較多而接種量較少，常需濾膜進(jìn)一步濃縮。不適宜多點(diǎn)多次采樣，因每采一次需要事先在無(wú)菌條件下準(zhǔn)備好加采樣液的采樣器，攜帶不便。適用范圍：實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行微生物氣溶膠研究（2）固體撞擊式采樣器利用抽氣裝置，使空氣通過(guò)狹小的噴嘴，形成高速氣流，在離開(kāi)噴嘴時(shí)氣流射向采集面，氣體沿采集面拐彎而去，而顆粒則按慣性繼續(xù)直線前進(jìn)，撞擊并粘附于采集面上，從而被捕獲。使用方便、采樣效率高，可用于定量測(cè)定，是目前應(yīng)用最廣泛的一類采樣器。A單級(jí)固體撞擊式采樣器：JWL型采樣器為代表。將空氣中不同大小的含菌粒子撞擊于一個(gè)采集面上，只能測(cè)定空氣中微生物的濃度。B多級(jí)固體撞擊式采樣器：Anderson采樣器為代表。將空氣中不同大小的含菌顆粒采集于不同采集面，既可測(cè)定空氣微生物的濃度，又可了解粒子大小分布情況。單級(jí)固體撞擊式采樣器JWL-I空氣微生物采樣器Anderson多級(jí)篩孔空氣撞擊采樣器采樣頭、抽氣泵、流量計(jì)、橡膠連接管、采樣平皿流量為28.3L/minAnderson采樣器使用注意事項(xiàng)采樣器流量為28.3L/min?？捎棉D(zhuǎn)子流量計(jì)進(jìn)行校對(duì)。注意各節(jié)的密封度。撞擊距離對(duì)采樣有影響。平皿中培養(yǎng)基厚度影響采樣距離，以加27ml培養(yǎng)基較為合適，此時(shí)撞擊距離為2.5mm左右。采樣器的消毒可用酒精擦拭，也可用高壓蒸氣滅菌或環(huán)氧乙烷熏蒸。微生物濃度過(guò)高時(shí)，顆粒重疊，會(huì)產(chǎn)生誤差。最多的一節(jié)菌落數(shù)以50～250cfu為宜。結(jié)果計(jì)算優(yōu)點(diǎn)：采集粒譜范圍廣；效率高；微生物存活率高；可同時(shí)測(cè)定微生物不同大小粒子的分布；敏感度高；操作簡(jiǎn)便。缺點(diǎn)：由于壁缺失、粒子滑脫或被打碎等導(dǎo)致采樣結(jié)果誤差；手續(xù)復(fù)雜，所需平板多。撞擊法檢測(cè)空氣中微生物數(shù)量培養(yǎng)后培養(yǎng)前2.曲線氣流式－離心撞擊式采樣器LWC-1型離心式空氣微生物采樣器3.過(guò)濾阻留式采樣器：

利用抽氣裝置，使空氣通過(guò)濾材，而使微生物粒子阻留在濾材上。優(yōu)點(diǎn)：可在各種氣溫下應(yīng)用，采集效率高。缺點(diǎn)：阻留在濾材上的微生物受到通過(guò)濾材氣流的不斷沖擊，有可能被吹干致死，且濾膜孔易堵塞，難以保持穩(wěn)定的采氣量。4.靜電沉著類采樣器：

利用高壓靜電場(chǎng)，使空氣中的微生物粒子帶上一定量的電荷后，被帶相反電荷的采集面所吸附，使空氣微生物采集下來(lái)。這種采樣器對(duì)氣流的阻力很小，能允許較大的采氣量，可將大量空氣中采集的微生物濃縮于少量的采樣液中，有利于對(duì)空氣含量很少的微生物的檢測(cè)。選用采樣方法應(yīng)考慮的因素：

（1）采樣器的靈敏度（2）采樣效率（3）重復(fù)性（4）微生物存活率（5）使用方便（6）易于分析（7）可區(qū)分粒子大?。?）價(jià)格一般情況下，可選單級(jí)固體撞擊式采樣器。多級(jí)固體撞擊式采樣器較準(zhǔn)確，但采樣復(fù)雜，瓊脂消耗較多，只在做空氣微生物的顆粒大小測(cè)定時(shí)應(yīng)用。在空氣微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的研究中，可選用液體撞擊式采樣器。自然沉降法可適用要求不高的場(chǎng)所。以細(xì)菌作為標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌選用的指標(biāo)是菌落總數(shù)、溶血性鏈球菌表示方法：cfu/皿或cfu/m3二、空氣微生物的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)日本評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)/皿<3031～7576～300>300空氣清潔度清潔普通空氣輕污染嚴(yán)重污染撞擊法（cfu/m3）沉降法（cfu/皿）適用范圍≤1000≤103~5星級(jí)賓館、飯店≤1500≤102星級(jí)以下賓館和非星級(jí)帶空調(diào)賓館、飯店≤2500≤30普通飯店、招待所、酒吧、茶座、咖啡廳、圖書(shū)館、博物館、美術(shù)館、飛機(jī)客艙≤4000≤40音樂(lè)廳、影劇院、錄像廳、游戲廳、舞廳、理發(fā)店、美容院、游泳館、體育館、醫(yī)院候診室、候機(jī)室、旅客列車車廂、輪船客艙、飯館（餐廳）≤7000≤75展覽館、商店、書(shū)店、候車室、侯船室我國(guó)公共場(chǎng)所空氣細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)二、空氣微生物污染預(yù)防控制污染來(lái)源：用吸塵器打掃衛(wèi)生、灑水、減少走動(dòng)個(gè)人防護(hù)：戴口罩