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人體及動物生理學(xué)實驗教案骨骼肌收縮特性和收縮形式實驗學(xué)時:6學(xué)時實驗類型:(綜合)每組人數(shù):3人/組一、實驗?zāi)康谋緦嶒炌ㄟ^對蛙類進(jìn)行解剖、制備坐骨神腓腸肌標(biāo)本、電磁刺激標(biāo)本坐骨神經(jīng)等實驗操作,來學(xué)習(xí)骨骼肌的生理特性,以達(dá)到以下目的:1.學(xué)習(xí)蛙類動物單毀髓和雙毀髓的方法;2.學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類坐骨神腓腸肌標(biāo)本的方法;3.觀察刺激強(qiáng)度和肌肉收縮反映的關(guān)系;4.觀察骨骼肌單收縮過程;5.觀察刺激頻率與肌肉收縮形式之間的關(guān)系,理解形成復(fù)合收縮與強(qiáng)直收縮條件。6.學(xué)習(xí)多通道生理信號采集系統(tǒng)的使用。通過以上學(xué)習(xí)使學(xué)生樹立嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度、形成較強(qiáng)的團(tuán)結(jié)協(xié)作意識、建立初步自主探究的能力。二、實驗原理蛙類的一些基本生命活動和生理功能與溫血動物相近似,而其離體組織所需的生活條件比較簡單,易于控制和掌握。因此在實驗中常用蟾蜍或蛙坐骨神腓腸肌標(biāo)本來觀察興奮性、興奮過程、刺激的一些規(guī)律以及骨骼肌的收縮及其特點(diǎn)等。故坐骨神腓腸肌標(biāo)本的制備是生理學(xué)實驗的一項基本操作技術(shù)。肌肉興奮的外在表現(xiàn)是收縮。給肌肉一個有效刺激,肌肉將發(fā)生一次收縮,稱為單收縮。單收縮一般要經(jīng)歷潛伏期、收縮期和舒張期三個過程。使用相繼的兩個有效刺激作用于肌肉,如果相繼的兩個刺激的間隔時間大于該肌肉單收縮的全部時間,則出現(xiàn)波形互相分開的兩個單收縮;逐漸縮短兩個刺激的間隔時間,使第二個刺激落在第一個收縮的舒張期,從而引起兩個單收縮的復(fù)合,即舒張期復(fù)合收縮;再縮短兩個刺激的間隔時間,使第二個刺激落在前一個收縮的收縮期或縮短期,此時前后兩個單收縮也會復(fù)合起來,形成一個收縮幅度比較高的收縮波形,稱為收縮期復(fù)合收縮。如果將一串有效刺激加于肌肉,可因刺激頻率不同呈現(xiàn)不同的收縮波形。如果頻率很低,即兩個刺激的間隔很大,則出現(xiàn)一連串單收縮;逐漸增大刺激頻率,若每兩個刺激的間隔長于單收縮的收縮期而又短于其全部歷時時,則出現(xiàn)相鄰兩個波形不同程度的復(fù)合,其曲線特點(diǎn)呈鋸齒狀,即為不完全強(qiáng)直收縮;再繼續(xù)加大刺激頻率,則肌肉處于完全、持續(xù)的收縮狀態(tài),看不出單收縮的舒張期的痕跡,此即完全強(qiáng)直收縮。強(qiáng)直收縮的幅度大于同樣刺激條件下單收縮的幅度,而且在一定范圍內(nèi)隨刺激頻率的增大,收縮高度也增大。正常機(jī)體在自然狀態(tài)下的肌肉收縮,幾乎都是完全強(qiáng)直收縮。本實驗通過解剖蛙類動物,制作坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本,固定刺激的其它參數(shù),僅改變刺激頻率的方法描記各種收縮形式,從而揭示刺激頻率與肌肉收縮形式之間的關(guān)系,涵蓋了動物學(xué)、解剖學(xué)、生理學(xué)等多學(xué)科的知識點(diǎn)。三、實驗方案本實驗方案可分為坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備和骨骼肌生理特性觀察兩部分。過程如下:(一)坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備方法1.破壞腦和脊髓:取蟾蜍一只,用水沖凈.左手握住蟾蜍,用食指壓住其頭部前端使頭部前端前俯,右手持探針從枕骨大孔垂直刺入,有落空感時即表明已進(jìn)入枕骨大再將探針抽出至枕骨大孔位,向后刺入椎管搗毀脊髓,此時如蟾蜍的四肢松,呼吸消,形體對稱,表示腦和脊髓已完全破,否則應(yīng)按上法再行搗毀。2.剪除軀干前部及內(nèi)臟:在骶髂關(guān)節(jié)水平以上0.5-1厘處剪脊柱,左手握蟾蜍后肢,用大拇壓住骶骨,使蟾蜍頭與內(nèi)自然下垂,右手持粗剪,沿骶兩側(cè)剪開背部膚,再恥骨聯(lián)前剪斷側(cè)軟組織(注勿損傷骨神經(jīng)),留下兩后肢、脊及由它出的坐神經(jīng)。3.剝皮:手捏脊斷端(意不握住和迫神經(jīng),右手住其上皮膚邊緣,向剝掉全后肢皮,將標(biāo)放在盛任氏液培養(yǎng)中。4.將手及過的剪、鑷子全部術(shù)器械凈,再行下述驟。5.分離兩:左手脊柱并標(biāo)本起,將面向上使尾骨翹。從骨尖開始,用剪刀緊尾骨兩游離尾并將其斷(注勿損坐骨神),然后沿線用剪將脊柱為兩半并從恥聯(lián)合中剪開側(cè)大腿這樣兩腿即完全離。將條腿浸盛有任液的培皿中。6.制作坐神經(jīng)腓肌標(biāo)本將一蟾蜍腿小腿背向上、柱腹側(cè)上,用刨釘固于蛙板。蛙腿墊浸有氏液的璃板。1)游離骨神經(jīng)用玻璃沿脊柱游離坐神經(jīng),于近樞端穿結(jié)扎。將標(biāo)本側(cè)向上置,剪位于坐神經(jīng)溝的梨狀及其近的結(jié)組織,再循坐骨經(jīng)溝(二頭肌半膜肌間的裂處),出坐神經(jīng)之腿部分,用玻璃小心分,然后脊柱根將坐骨經(jīng)剪斷手執(zhí)扎神經(jīng)線將神經(jīng)輕輕提,剪斷骨神經(jīng)所有分,并將經(jīng)一直離至關(guān)節(jié)為(圖3-1)。2)完成坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本:將游離干凈的坐骨神經(jīng)搭于腓腸肌上,在膝關(guān)節(jié)周圍剪斷并剝離全部大腿肌肉,用粗剪刀將股骨刮干凈,然后在股骨中部剪去上段股骨,保留的部分就是坐骨神經(jīng)小腿標(biāo)本。3)完坐神腓標(biāo):上坐神腿本跟處線扎斷跟。離腸至關(guān),后膝節(jié)小其分掉這就成一帶股的骨經(jīng)-腓肌。即標(biāo)浸盛干氏的養(yǎng)皿中。()骼收特的察1.儀器裝置準(zhǔn)備好生理信號采集系統(tǒng)及張力換能器的記錄裝置。2.將標(biāo)本與生理信號采集系統(tǒng)連接將標(biāo)本的股骨殘端固定于肌動器的螺旋孔內(nèi),將鍵張換器臂力用線接通調(diào)線張,腓肌處自拉的度。3.觀察與紀(jì)錄(1).從小到大調(diào)整刺激強(qiáng)度從而尋找最適刺激強(qiáng)度,并固定此刺激強(qiáng)度不變。(2).選擇刺激輸出方式為“單”,通過刺激器脈沖個數(shù)記數(shù)窗口設(shè)置單一刺激,開動慢鼓,描記單收縮曲線(圖3-11)。(3).選擇刺激輸出方式為“單”,通過刺激器脈沖個數(shù)記數(shù)窗口設(shè)置兩個刺激,從小到大調(diào)節(jié)刺激頻率,描記舒張期復(fù)合收縮和收縮期復(fù)合收縮曲線四、主要儀器及試劑1.儀器多通道生理信號采集系統(tǒng)、張力換能器、屏蔽盒。2.器械蛙手術(shù)器械一套、支架、雙凹夾等。3.藥品任氏液。五、實驗要求本實驗是一個涉及動物解剖學(xué)、生理學(xué)及生理儀器使用的綜合性實驗,要求同學(xué)們在實驗前預(yù)習(xí)實驗的目的內(nèi)容、材料用具和具體的操作步驟,提前準(zhǔn)備好實驗試驗用的蛙類動物、各種試劑和器材,查閱有關(guān)解剖學(xué)和生理學(xué)方面實驗資料,理解實驗原理,熟悉操作步驟,了解注意事項,并對查閱的知識進(jìn)行歸納總結(jié),寫出具體的實驗方案。六、思考題1.用各種刺激檢驗標(biāo)本興奮性時,為什么要從中樞端開始?2.為什么剝皮后必須清洗雙手和用過的器械?3.根據(jù)你的體會,要想使標(biāo)本興奮性良好必須注意什么問題?4.骨骼肌的收縮與刺激強(qiáng)度之間的關(guān)系如何?5.為什么在閾刺激和最大刺激之間,骨骼肌收縮會隨刺激強(qiáng)度的增強(qiáng)而增強(qiáng)?6.怎樣理解潛伏期?本實驗中的潛伏期包括哪些時間因素?7.說明形成不完全強(qiáng)直收縮和完全強(qiáng)直收縮的條件。完全強(qiáng)直收縮有何生理意義?七、實驗報告本實驗結(jié)束后以實驗報告的形式驗收,實驗報告內(nèi)容包括實驗的目的原理、材料用具、實驗的具體操作步驟、實驗結(jié)果及分析等(本實驗結(jié)果為打印的收縮曲線)。同時在實驗報告中要對實驗中出現(xiàn)的特殊現(xiàn)象進(jìn)行解
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