HLA I類單抗原特異性抗體檢測(cè)試劑盒(流式熒光免疫法)（JSZ2000045）

產(chǎn)品中文名稱：HLAI類單抗原特異性抗體檢測(cè)試劑盒(流式熒光免疫法)產(chǎn)品英文（原文）名稱：LABScreenSingleAntigenClassI–產(chǎn)品管理類申請(qǐng)人名稱：望嵐達(dá)公司OneLambda,Inc.目錄基本信息..........................................................................................................3一、申請(qǐng)人名稱..............................................................................................3二、申請(qǐng)人住所..............................................................................................3三、生產(chǎn)地址..................................................................................................3技術(shù)審評(píng)概述................................................................................................一、產(chǎn)品概述..................................................................................................4二、臨床前研究概述.....................................................................................5三、臨床評(píng)價(jià)概述.........................................................................................四、產(chǎn)品受益風(fēng)險(xiǎn)判定.................................................................................綜合評(píng)價(jià)意見(jiàn).................................................................................................21001KittridgeStreet,CanogaPark,CA91303，USA.21001KittridgeStreet,CanogaPark,CA91303，USA.1：、：L、、、：、本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)血清樣本中的I類特異性IgG抗體。本產(chǎn)品使用包被有純化的類抗原的微珠和預(yù)先優(yōu)化的試劑來(lái)檢測(cè)人血清中的類HLA抗體，可確認(rèn)抗體特異性，以幫助移植供體受體匹配。25多功能流式點(diǎn)陣儀或多功能流式分析儀可以同時(shí)檢測(cè)每個(gè)微珠上的藻紅蛋白發(fā)射的熒光信號(hào)以及微珠染色編號(hào)，并可近乎實(shí)時(shí)獲取數(shù)據(jù)。待測(cè)血清的反應(yīng)模式與該批次抗原特異工作表進(jìn)行比較，I申請(qǐng)人設(shè)計(jì)了完整的企業(yè)參考品，包括I類抗體陽(yáng)性參考品，陰性參考品，II類抗體陽(yáng)性參考品。參考品采用臨床樣本和單克隆抗體制備而成，涵蓋了本產(chǎn)品聲稱的所有79種I體血清型，其設(shè)置及來(lái)源見(jiàn)下表：類別設(shè)置及來(lái)源對(duì)大多數(shù)類抗原陽(yáng)性的人血清及單克隆抗HLAI類抗體陽(yáng)性體參考品對(duì)單個(gè)或多個(gè)I類抗原具有特異性的人血清及單克隆抗體陰性參考品對(duì)HLA和II類抗原為陰性的人血清HLA類抗體陽(yáng)對(duì)大多數(shù)II類抗原陽(yáng)性的人血清及單克隆抗性參考品體所有參考品中相關(guān)抗體的特異性采用已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行確認(rèn)。各項(xiàng)企業(yè)參考品綜合用于產(chǎn)品企業(yè)參考品符合性等性能評(píng)估，抗原原材料特異性驗(yàn)證以及內(nèi)部質(zhì)量控制。申請(qǐng)人通過(guò)企業(yè)參考品檢驗(yàn)等功能性試驗(yàn)確定最佳的生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系，包括：抗原包被濃度，抗原包被孵育時(shí)間，洗滌緩沖液用量，微珠緩沖液用量，二抗用量，反應(yīng)孵育條件及離心條件；同時(shí)通過(guò)檢測(cè)臨床樣本確定最佳的樣本用量以及微珠溶液本產(chǎn)品分析性能包括企業(yè)參考品符合性、準(zhǔn)確度、精密度、最低檢測(cè)限、特異性（交叉反應(yīng)、干擾試驗(yàn)）、包容性。申請(qǐng)人提交了多批產(chǎn)品（010、011、012、013批）在適用機(jī)型上的性能評(píng)估資料。--，-創(chuàng)-，最低檢測(cè)限以2特異性葡包容性對(duì)于給定的樣本，產(chǎn)品會(huì)為血清中存在的抗體確定值，通過(guò)計(jì)算對(duì)MFI值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化確定每個(gè)抗HLA反應(yīng)的強(qiáng)度，并為手動(dòng)分配反應(yīng)評(píng)分提供依據(jù)。同樣，采集的MFI值可以由軟件進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化并分配反應(yīng)評(píng)分。反應(yīng)評(píng)分基于國(guó)際權(quán)威組織（美國(guó)組織相容性與免疫遺傳學(xué)學(xué)會(huì)）的評(píng)分系統(tǒng)，該評(píng)分系統(tǒng)通過(guò)補(bǔ)體依賴性淋巴細(xì)胞毒性交叉配型試驗(yàn)（CDC）建立，使用細(xì)胞死亡百分比的分級(jí)量表來(lái)表示反應(yīng)強(qiáng)度，評(píng)分1、2、4、6和8分別表示陰性、疑似陰性、弱陽(yáng)性、陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性?；诖?，本產(chǎn)品在驗(yàn)證研究中，采用了從經(jīng)認(rèn)證的HLA實(shí)驗(yàn)室收集的54個(gè)臨床樣本對(duì)本產(chǎn)品進(jìn)行了評(píng)估。這些樣本由多個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用不同檢測(cè)方式所得的測(cè)試結(jié)果匯編而來(lái)，因此可作為參考樣本，其結(jié)果為共識(shí)結(jié)果。將本產(chǎn)品所檢測(cè)結(jié)果與共識(shí)結(jié)果進(jìn)行比較分析，匹?！闵暾?qǐng)人在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院、西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院、四川大學(xué)華西醫(yī)院和華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院共4采用試驗(yàn)體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進(jìn)行比較研究，共入組種試驗(yàn)結(jié)果顯示，該產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品的總陽(yáng)性符合率為，報(bào)產(chǎn)品與對(duì)比試劑比較，具有良好的一致性。針對(duì)申報(bào)產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果不一致的每個(gè)樣本，均進(jìn)行了充分的分析，分析結(jié)申報(bào)產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品的統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示：針對(duì)每種抗體，申報(bào)產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品均具有良好的陽(yáng)性符合率、陰性符合率和HLA抗體是指受體免疫系統(tǒng)中預(yù)先形成的循環(huán)抗體，是移植前（輸血、先前移植或懷孕等）由于致敏而產(chǎn)生的。無(wú)論是在移植前還是移植后，如果不對(duì)針對(duì)供體器官表達(dá)的抗原的抗體進(jìn)行臨床干預(yù)，移植的器官將受到免疫攻擊，這樣會(huì)增加移植物失功和/或產(chǎn)生排斥反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。供者特異性抗體將攻擊同種異體移植物的內(nèi)皮，導(dǎo)致隨后產(chǎn)生抗體介導(dǎo)的排斥（AMR）。供者特異性抗體不斷產(chǎn)生，與相應(yīng)的臨床事件共同作用，會(huì)損害同種異體移植物，隨時(shí)間推移會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生慢性變化，并最終損害移植物的功能和存活率。該產(chǎn)品用于檢測(cè)HLA特異性抗體，其應(yīng)用獲益主要是有助于有效提示移植排斥風(fēng)險(xiǎn)，并輔助醫(yī)生做出臨床決策。該產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果會(huì)受到樣本采集、儲(chǔ)存條件等樣本因素的影響，同時(shí)也受到實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)環(huán)境、試劑儲(chǔ)存等試驗(yàn)因素的影響，可能導(dǎo)致數(shù)據(jù)質(zhì)量降低或檢測(cè)失敗。使用者須了解檢測(cè)過(guò)程中可能存在的潛在風(fēng)險(xiǎn)及檢測(cè)的局限性，嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中根據(jù)申請(qǐng)人提供的申報(bào)資料，經(jīng)綜合評(píng)價(jià)，在目前認(rèn)知水平上，認(rèn)為該產(chǎn)品能夠較大程度地滿足醫(yī)療需求，預(yù)期為適用人群為確保使用安全，基于對(duì)主要剩余風(fēng)險(xiǎn)的防控，在產(chǎn)品說(shuō)明預(yù)期用途：本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)血清樣本中的HLA類特異性抗體。本申報(bào)項(xiàng)目為境外第三類體外診斷試劑產(chǎn)品注冊(cè)，屬于同品種首個(gè)產(chǎn)品首次申報(bào)。申請(qǐng)人提交的申報(bào)資料符合現(xiàn)行要求，依據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理?xiàng)l例》（國(guó)務(wù)院令第《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（原國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號(hào)）等相關(guān)醫(yī)療器械法規(guī)與配套規(guī)章，經(jīng)系統(tǒng)評(píng)價(jià)后，建議準(zhǔn)予注冊(cè)。2023年月27日HLAI類單抗原特異性抗體檢測(cè)試劑盒流式熒光免疫法說(shuō)明書(shū)【產(chǎn)品名稱】通用名稱：I類單抗原特異性抗體檢測(cè)試劑盒流式熒光免疫法)英文名稱：LABScreenSingleAntigenClassI–【包裝規(guī)格】25測(cè)試盒【預(yù)期用途】本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)人血清樣本中的HLAI類特異性抗體。本產(chǎn)品使用包被有純化的I類抗原的微珠和預(yù)先優(yōu)化的試劑來(lái)檢測(cè)人血清中的I類抗體，可確認(rèn)抗體特異性，以幫助移植供體受體匹配?！緳z驗(yàn)原理】待測(cè)血清與微珠一同孵育。待測(cè)血清中存在的抗體與微珠上的抗原相結(jié)合，然后使用藻紅蛋白標(biāo)記羊抗人二抗進(jìn)行標(biāo)記。多功能流式點(diǎn)陣儀或多功能流式分析儀可以同時(shí)檢測(cè)每個(gè)微珠上的藻紅蛋白發(fā)射的熒光信號(hào)以及微珠染色編號(hào)，并可近乎實(shí)時(shí)獲取數(shù)據(jù)。待測(cè)血清的反應(yīng)模式與該批次抗原特異工作表進(jìn)行比較，以確定抗體的特異性?！局饕M成成分】產(chǎn)品中包含的試劑組分組分名稱主要成分體積包被了I類單一抗原（79種血清型）的微珠，陰性質(zhì)控微珠，陽(yáng)性質(zhì)控微珠，牛血清白蛋白，葡萄糖，疊氮化鈉。包被的種抗原型別如下：HLA-A：微珠溶液A1A2A3、A11A23、A24A25A26A29、A30A31A32A33、A34、A36A43、A66A68A69A74A80125μLHLA-B：B7、B8、B13、B18、B27、B35、B37、B38、B39、B41、B42、B44、B45、B49、

B47、B48、B46、B50、B51、B52、B53、B54、B55、B56、B57、B58、B59、

B60、B61、B62、B63、B64、B65、B67、B71、B72、B73、B75、B76、B77、

B78、B81B82HLA-C：Cw1、Cw2、Cw4、Cw5Cw6、Cw7、Cw8、Cw9Cw10Cw12Cw14Cw15、

Cw16Cw17、Cw18洗滌緩沖液磷酸鹽緩沖液，吐溫，疊氮化鈉13mL考慮到移液損耗，產(chǎn)品所提供的體積略超出檢測(cè)所需的量。需要但未提供的試劑組分1.藻紅蛋白標(biāo)記羊抗人二抗（國(guó)械備20190666）2.不含抗體的陰性質(zhì)控血清貨號(hào)#LS-NC)3.已過(guò)濾的PBSUSA貨號(hào)#9242(50010X)）【儲(chǔ)存條件及有效期】本產(chǎn)品于或以下冷凍，有效期為個(gè)月。首次使用后，試劑可儲(chǔ)存在2～8保存長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月或者直到失效日期。一旦微珠解凍，不要再次冷凍。生產(chǎn)日期及失效日期見(jiàn)試劑包裝標(biāo)簽。【適用儀器】LABScan?100（Luminex?100/200）流式分析儀[LABScan?100（Luminex?100/200）主機(jī)，Luminex?XY平臺(tái)和鞘液輸送系統(tǒng)]或LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D?）流式分析儀[LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D）主機(jī)，XY平臺(tái)和鞘液輸送系統(tǒng)]【樣本要求】未開(kāi)封的血樣在室溫下最長(zhǎng)可放置4天。分離的血清（來(lái)自凝血樣本）冷藏時(shí)間最長(zhǎng)可達(dá)7天，或分裝在℃或更低溫度冷凍，最長(zhǎng)可保存36個(gè)月，檢測(cè)前再行融解。檢測(cè)前，可以通過(guò)離心（8000~10000g共10分鐘）或過(guò)濾（0.2）將凝集物從待測(cè)血清中移除。樣本的任何凝集物或污染都可能產(chǎn)生無(wú)效結(jié)果。待測(cè)血清不應(yīng)加熱滅活，因?yàn)樵跍y(cè)試中會(huì)導(dǎo)致背景值升高。測(cè)試一般使用未稀釋的血清。但如果高背景值的血清樣本在檢測(cè)時(shí)進(jìn)行了稀釋，陰性質(zhì)控血清也應(yīng)在相同比例下進(jìn)行稀釋?！緳z驗(yàn)方法】?jī)x器及耗材要求A.要求的設(shè)備LABScan?100（?100/200）流式分析儀[LABScan?100（Luminex?100/200）主機(jī)，?XY平臺(tái)和鞘液輸送系統(tǒng)]或LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP）流式分析儀[LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D）主機(jī)，XY平臺(tái)和鞘液輸送系統(tǒng)]離心機(jī)孔板平板轉(zhuǎn)子（1300）渦旋混勻器平板搖床或旋轉(zhuǎn)平臺(tái)B.設(shè)備校準(zhǔn)依據(jù)生產(chǎn)商的說(shuō)明校準(zhǔn)LABScan?100（Luminex?100/200）或LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP）流式分析儀。C.推薦軟件Fusion?(醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào)：，發(fā)布版本：4.1)D.需要但未提供的耗材移液器槍頭孔微孔板，μl，表面未處理微孔板密封膜實(shí)驗(yàn)步驟注意：應(yīng)特別留意分裝操作。未能遵守以下所描述的步驟可能會(huì)導(dǎo)致試劑的損失。開(kāi)始檢測(cè)前，至少提前分鐘打開(kāi)LABScan?100（Luminex?100/200）或LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D?）流式分析儀。為每次測(cè)試創(chuàng)建相應(yīng)文件名和樣本編碼列表。每批測(cè)試，應(yīng)測(cè)試陰性質(zhì)控血清，以確定背景值。I.在孔板中進(jìn)行測(cè)試：注意：在板的96孔邊緣處仔細(xì)按壓密封膜，將板完全密封，防止孔與孔之間交叉污染。密封膜不要反復(fù)使用。密封時(shí)每步都要使用新的密封膜。1.使用前輕微渦旋處理或上下抽吸數(shù)次以充分混合LABScreen微珠。2.將5μLLABScreenμL待測(cè)血清添加到孔微孔板的對(duì)應(yīng)孔中，輕輕搖動(dòng)，于～25下避光孵育分鐘。3.用去離子水稀釋10X洗滌緩沖液配置1X洗滌緩沖液。4.孵育后，向板內(nèi)每孔添加150μL的1X洗滌緩沖液，使用密封膜密封并渦旋混勻。在1300g下離心5分鐘。5.甩干或真空抽吸并去除洗滌緩沖液。6.向板內(nèi)每孔添加μL的1X洗滌緩沖液，使用新密封膜密封并渦旋混勻。在1300g下離心5分鐘。7.甩干或真空抽吸并去除洗滌緩沖液。8.重復(fù)步驟6和步驟7。9.將99μL1X洗滌緩沖液與1μL100X藻紅蛋白標(biāo)記羊抗人二抗混合稀釋成1X抗體工作液。10.向板內(nèi)每孔添加100μL1X藻紅蛋白標(biāo)記羊抗人二抗，使用密封膜密封并渦旋混勻，輕輕搖動(dòng)，然后在20～25下避光孵育30分鐘。11.在1300g下離心5分鐘。12.甩干或真空抽吸并去除洗滌緩沖液。13.重復(fù)步驟6和步驟7兩次。14.向板內(nèi)每孔添加80μL的1XPBS，使用新密封膜密封并渦旋混勻。讀取數(shù)據(jù)并分析，或在分析前將孔板避光儲(chǔ)存于2~8℃，最長(zhǎng)可達(dá)小時(shí)。數(shù)據(jù)處理I.數(shù)據(jù)獲取1.根據(jù)用戶手冊(cè)1，設(shè)定LABScan?100（Luminex?100/200）或LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D）流式分析儀，以進(jìn)行樣本讀取和校準(zhǔn)。2.根據(jù)產(chǎn)品試劑盒貨號(hào)和批號(hào)選擇模板。a.可以通過(guò)或公司的網(wǎng)頁(yè)，從One公司獲取模板。b.按照用戶手冊(cè)中數(shù)據(jù)獲取章節(jié)的說(shuō)明，用戶可以自行創(chuàng)建模板。3.為待處理樣本創(chuàng)建文件名。4.確保所有模板設(shè)置正確。模板要求為：a.設(shè)定樣本量為。b.設(shè)定樣本暫停時(shí)間為c.設(shè)定雙重鑒別器下限為：8000；上限為：16000。d.根據(jù)隨產(chǎn)品提供的特異性工作表設(shè)定微珠編號(hào)和。e.設(shè)定每份微珠收集的最少事件為100。5.輸入樣本ID（如果同一樣本測(cè)試超過(guò)一次，則分配不同的ID）。6.將板加載于XY平臺(tái)，并使用鞘液填充儲(chǔ)液器。7.點(diǎn)擊START（開(kāi)始）按鈕啟動(dòng)操作。操作完成后，將輸出數(shù)據(jù)保存到一個(gè)文件。8.操作結(jié)束時(shí)，使用鞘液清洗機(jī)器兩次。II.數(shù)據(jù)分析1.通過(guò)LABScan儀器讀取數(shù)據(jù)時(shí)生成的文件（.csv文檔）中記錄的每份包被微珠的“原始熒光值，從而計(jì)算每份測(cè)試樣本的反應(yīng)性。2.通過(guò)校正陰性質(zhì)控微珠的非特異性結(jié)合和背景值（通過(guò)測(cè)試陰性質(zhì)控血清獲得），計(jì)算抗血清反應(yīng)性，以確定標(biāo)準(zhǔn)化的背景比率值（比值）。見(jiàn)以下數(shù)據(jù)計(jì)算的過(guò)程。3.每一個(gè)包被微珠的標(biāo)準(zhǔn)化熒光值等于該微珠的熒光強(qiáng)度值除以NC微珠的熒光強(qiáng)度值。注意：熒光信號(hào)（值）可以是截尾均值或中位數(shù)值。III.數(shù)據(jù)計(jì)算縮略語(yǔ)定義如下：NBGratio標(biāo)準(zhǔn)化背景比率值，用于對(duì)每個(gè)抗反應(yīng)的強(qiáng)度進(jìn)行賦值S#N樣本反應(yīng)中微珠的特異性熒光值SNCbead樣本反應(yīng)中陰性質(zhì)控微珠的特異性熒光值BG#N陰性質(zhì)控血清反應(yīng)中的微珠的熒光強(qiáng)度背景值BGNCbead陰性質(zhì)控血清反應(yīng)中陰性質(zhì)控微珠的熒光強(qiáng)度背景值NCSerum經(jīng)指定批次的LABScreen微珠確認(rèn)過(guò)的陰性質(zhì)控血清計(jì)算公式：S#N/SNCbeadNBGBG#N/BGNCbead【陽(yáng)性判斷值】確定陽(yáng)性陰性Cut-Off值1.對(duì)于本產(chǎn)品：a.檢測(cè)陰性質(zhì)控血清或者檢測(cè)幾份陰性血清樣本（份未進(jìn)行過(guò)輸血和器官移植的男性捐獻(xiàn)者的血清樣本）b.確定工作范圍：工作范圍=NBGratio最大值-NBGratio最小值c.在工作范圍內(nèi)定義Cut-Off：NBGratio=X%（工作范圍）+ratio最小值，其中X%=用戶定義的在工作范圍內(nèi)的百分比，據(jù)此可設(shè)置陰性（）、灰區(qū)（）、弱陽(yáng)性（）和強(qiáng)陽(yáng)性（）。d.設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)以判定是陽(yáng)性反應(yīng)，還是陰性反應(yīng)，例如：(1)如果ratio最大值ratio最小值]>8，則采用1c的計(jì)算方法。(2)如果ratio最大值ratio最小值]<8，以及(a)NBGratio最大值>5NBGratio最小值應(yīng)調(diào)整到最大值的一半，并根據(jù)調(diào)整后的NBG最小值，對(duì)NBG的off重新計(jì)算，（如1c所示）。(b)NBGratio最大值<5，則微珠和待測(cè)血清的反應(yīng)為陰性。評(píng)分為“1”。e.測(cè)試抗體特異性的參比血清，使用所得ratio，以驗(yàn)證cutoff值。(1)根據(jù)參比血清的檢測(cè)結(jié)果，建立區(qū)分強(qiáng)反應(yīng)和弱反應(yīng)的off值。(2)如果畫(huà)出NBG的直方圖，更有利于觀察每份血清的反應(yīng)性。2.通過(guò)調(diào)整off值可以調(diào)整檢測(cè)方法的靈敏度。3.可選分析方法——HLA軟件。4.綜上，推薦使用的cutoff：評(píng)分為6和8時(shí)為陽(yáng)性?！緳z驗(yàn)結(jié)果的解釋】1.一般原則a.每種微珠的計(jì)數(shù)應(yīng)大于。如果計(jì)數(shù)低于，原因有三：一是可能在洗滌過(guò)程中丟失了微珠；二是可能LABScan?100（?100/200）或LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D?）流式分析儀校準(zhǔn)有誤或發(fā)生堵塞；三是熒光微珠發(fā)生光漂白而沒(méi)有被計(jì)數(shù)。b.信號(hào)值是每一微珠對(duì)每一待測(cè)血清樣本的熒光強(qiáng)度。應(yīng)將陰性質(zhì)控血清與同一批樣本同時(shí)檢測(cè)以設(shè)定該輪檢測(cè)的背景值。c.建議使用One公司提供的陰性質(zhì)控血清。d.陰性質(zhì)控微珠（NC）沒(méi)有包被抗原。由于非特異結(jié)合或洗滌不充分，對(duì)不同的血清樣本其熒光強(qiáng)度可能會(huì)有不同。除了一些高背景的血清樣本外，一般情況下NC微珠的熒光強(qiáng)度值不超過(guò)500NC微珠的熒光強(qiáng)度值應(yīng)始終低于1500，并且小于或等于陽(yáng)性質(zhì)控微珠熒光值的一半。e.陽(yáng)性質(zhì)控微珠（PC）包被有純化的人IgG。其應(yīng)與二抗結(jié)合以產(chǎn)生陽(yáng)性信號(hào)。PC微珠熒光值應(yīng)該大于500，并且至少是NC微珠熒光值的兩倍。2.分析的確認(rèn)a.如果使用新的陰性質(zhì)控血清，Cut-Off值應(yīng)該重新驗(yàn)證確認(rèn)。b.對(duì)于任一給定血清樣本，PC/NC值應(yīng)大于2。如果該比值小于2，原因可能為：該血清反應(yīng)中NC微珠的背景值非常高：陰性質(zhì)控血清反應(yīng)中微珠的信號(hào)值比較高；二抗信號(hào)較弱；或LABScan?100（Luminex?100/200）和LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D?）流式分析儀讀數(shù)偏低。此時(shí)，應(yīng)對(duì)該結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。c.用戶應(yīng)評(píng)估各自實(shí)驗(yàn)室的使用情況，以驗(yàn)證選定的Cut-Off值是否合適。【檢驗(yàn)方法的局限性】A.血清樣本如含有污染物或凝集物，可能會(huì)造成流式分析儀堵塞，并產(chǎn)生不準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。檢測(cè)前應(yīng)用離心或過(guò)濾的方法去除樣本中的凝集物。B.一些病人樣本中的IgG-IgM免疫復(fù)合物的存在會(huì)導(dǎo)致免疫抑制。應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室制定的方案流程，預(yù)先處理樣本，去除免疫復(fù)合物。然而，樣本不應(yīng)采用加熱處理，以免產(chǎn)生非特異性的背景值。C.環(huán)境溫度可能會(huì)影響LABScan?（Luminex?100/200）和LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D）的性能。如果環(huán)境溫度變化，儀器或需要重新校準(zhǔn)。請(qǐng)參閱儀器使用手冊(cè)以獲得更多信息。D.LABScan?100（Luminex?100/200）和LABScan3D?（Luminex?FLEXMAP3D）流式分析儀必須妥善校準(zhǔn)和維護(hù)。如果沖洗不充分，樣本存在凝集物，可能會(huì)導(dǎo)致儀器堵塞，并且產(chǎn)生無(wú)效數(shù)據(jù)。E.所能檢測(cè)出的抗體特異性取決于試劑中每個(gè)微珠上所包被的抗原。由于等位基因定義的復(fù)雜性，應(yīng)由具有認(rèn)證的技術(shù)人員或?qū)I(yè)人士審核，解釋數(shù)據(jù)，和分配抗體特異性。G.本測(cè)試不能用作臨床決策的唯一依據(jù)。【產(chǎn)品性能指標(biāo)】A.使用上述的檢驗(yàn)結(jié)果的解釋中的cut-off值的解釋，LABScreen測(cè)定法給出的結(jié)果與OneLambdaFlowPRA和LAT?檢測(cè)法的結(jié)果具有可比性。然而，抗體類型可能非常復(fù)雜。給定測(cè)試樣本可能含有幾種I類和類特異性抗體，每種均具有不同的親和性；然而敏感性較低的檢測(cè)法并不一定能識(shí)別全部的特異性抗體。因此，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)其識(shí)別CREG類型的專業(yè)能力和通過(guò)使用已知HLA抗體特異性的血清所進(jìn)行的分析性能評(píng)估，來(lái)建立和確認(rèn)自己的值。B.如果背景值較高，可能表明測(cè)試期間的清洗操作不正確。陰性對(duì)照背景值較高時(shí)，所致的標(biāo)準(zhǔn)化值可能不準(zhǔn)確。C.臨床性能測(cè)試使用默認(rèn)值，評(píng)分值為陽(yáng)性。D.準(zhǔn)確度：與同品種產(chǎn)品FlowPRASingleAntigenClassI進(jìn)行比較時(shí)，陽(yáng)性符合率、陰性符合率和總符合率滿足接受標(biāo)準(zhǔn)大于或等于90%E.精密度：在不同實(shí)驗(yàn)室間（3個(gè)研究中心），不同儀器間（3臺(tái)不同儀器）、不同操作員間（3名技術(shù)人員）、不同批次間（3不同批次），不同日期間及不同運(yùn)行間（20天內(nèi)進(jìn)行5天的非連續(xù)運(yùn)行，每天運(yùn)行2次）的檢測(cè)結(jié)果相互比對(duì)，符合率達(dá)到90%以上。特異性：為評(píng)價(jià)潛在交叉反應(yīng)，檢測(cè)了甲型流感抗體(1.0μg/20μL)，水痘抗體(1.0μg/20μL)，乙肝抗體μg/20μL)，丙肝抗體μg/20μL)，抗核抗體μg/20μL)，抗雙鏈DNA抗體(1.0μg/20μL)，（促炎癥）抗體（0.5μg/20μL），促甲狀腺素抗體(1.0μg/20μL)，乙酰膽堿受體抗體(0.1μg/20μL)，檢測(cè)結(jié)果均為陰性?？贵w之間的交叉反應(yīng)現(xiàn)象，通常稱為交叉反應(yīng)組（CREG）。某種抗體的陰陽(yáng)性取決于該抗體對(duì)抗原表位的反應(yīng)性，而與抗體反應(yīng)的抗原表位可能由多種抗原共享。在抗體檢測(cè)領(lǐng)域，結(jié)合CREG組進(jìn)行抗體反應(yīng)性分析是行業(yè)共識(shí)。G.干擾：檢測(cè)在樣本中存在的可能產(chǎn)生干擾的物質(zhì)：白蛋白（），D-葡萄糖(9.9mg/mL)，膽紅素(0.2mg/mL)，膽固醇(5.031mg/mL)，肌酸酐(0.05mg/mL)，血紅蛋白(2mg/mL)，維生素C(0.0299mg/mL)，咖啡因(0.0598mg/mL)，尼古丁(0.001mg/mL)，撲熱息痛(0.2mg/mL)，布洛芬，利妥昔單抗，水楊酸(0.000694mg/mL)，將以上可能產(chǎn)生干擾的物質(zhì)加入每個(gè)樣品中并與該樣品的未處理形式進(jìn)行比較，結(jié)果的符合率達(dá)到90%以上。不同抗凝劑的影響：枸櫞酸葡萄糖溶液(ACD)，乙二胺鉀四乙酸(K-EDTA)，肝素鋰，肝素鈉，包含不同抗凝劑采集管中的樣品與無(wú)抗凝劑（血清）的樣品同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，加入抗凝劑與無(wú)抗凝劑結(jié)果的符合率達(dá)到90%以上。H.包容性：通過(guò)研究證明產(chǎn)品能夠特異性地檢測(cè)出所有包被抗原血清型和分子型對(duì)應(yīng)的抗體。中國(guó)臨床試驗(yàn)結(jié)果：本產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品的總陽(yáng)性符合率為94.0%(95%93.5%,94.5%)，總陰性符合率為97.0%(95%96.9%,97.1%)，總符合率為96.7%(95%96.6%,96.8%)?！咀⒁馐马?xiàng)】A.僅用于體外診斷。B.警告：所有血液制品應(yīng)被視為潛在的傳染性物質(zhì)，本產(chǎn)品的原材料都按照現(xiàn)行的要求進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果均為陰性。尚無(wú)方法可以保證血液制品不會(huì)成為傳染源。C.注意：對(duì)于人工甩板，應(yīng)迅速向下甩臂而無(wú)手腕移動(dòng)，以避免重復(fù)甩板。D.如果稀釋液中鹽分在運(yùn)送或存儲(chǔ)過(guò)程中析出，配制工作稀釋液前，應(yīng)輕微加溫以使重新溶解?！緲?biāo)識(shí)的解釋】體外診斷醫(yī)療器械注意，參閱所附文件貨號(hào)生物危險(xiǎn)溫度限制批號(hào)參考使用說(shuō)明使用期限生產(chǎn)日期生產(chǎn)商歐盟授權(quán)代表【參考文獻(xiàn)】1.Luminex100or200User’sManual,