乳與乳制品中糖的測(cè)定-測(cè)定方法

乳與乳制品中糖的測(cè)定檢測(cè)方法——高效液相色譜法一二三四試劑和材料儀器和設(shè)備分析步驟分析結(jié)果表述1.乙腈2.乙腈：色譜純。

3.標(biāo)準(zhǔn)溶液（1）乳糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液（20mg/mL）：稱取在94℃±2℃烘箱中干燥2h的乳糖標(biāo)樣2g（精確至0.1mg），溶于水中，用水稀釋至100mL容量瓶中。放置4℃冰箱中。（2）乳糖標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別吸取乳糖標(biāo)準(zhǔn)貯備液0mL，1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成乳糖標(biāo)準(zhǔn)系列工作液，濃度分別為0mg/mL，2mg/mL，4mg/mL，6mg/mL，8mg/mL，10mg/mL。（試劑和材料）檢測(cè)的試劑和材料（3）蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（10mg/mL）：稱取在105℃±2℃烘箱中干燥2h的蔗糖標(biāo)樣1g（精確到0.1mg），溶于水中，用水稀釋至100mL容量瓶中。放置4℃冰箱中。（4）蔗糖標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別吸取蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0mL，1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于10mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度。配成蔗糖標(biāo)準(zhǔn)系列工作液，濃度分別為0mg/mL，1mg/mL，2mg/mL，3mg/mL，4mg/mL，5mg/mL。（試劑和材料）檢測(cè)的試劑和材料1.天平（感量為0.1mg）2.高效液相色譜儀，帶示差折光檢測(cè)器或蒸發(fā)光散射檢測(cè)器3.超聲波振蕩器（儀器和設(shè)備）檢測(cè)的儀器和設(shè)備（分析步驟）1.試樣處理固態(tài)試樣1g或液態(tài)試樣2.5g→50mL容量瓶中→加15mL、50℃～60℃水→溶解→超聲波振蕩10min→乙腈定容→靜置數(shù)分鐘→過(guò)濾。取5.0mL濾液→10mL容量瓶中→乙腈定容→0.45μm濾膜過(guò)濾→濾液供色譜分析。（分析步驟）2.測(cè)定——參考色譜條件氣流量：2.5L/min；色譜柱：氨基柱4.6mm×250mm，5μm；示差折光檢測(cè)器條件：溫度33℃～37℃；進(jìn)樣量：10μL；柱溫：35℃；流速：1mL/min；流動(dòng)相：乙腈:水=70:30；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器條件：飄移管溫度：85℃～90℃；撞擊器：關(guān)。（分析步驟）2.測(cè)定——標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別注入高效液相色譜儀中，測(cè)定相應(yīng)的峰面積或峰高，以峰面積或峰高為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線示例圖（分析步驟）2.測(cè)定——試樣溶液的測(cè)定將試樣溶液注入高效液相色譜儀中，測(cè)定峰面積或峰高，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得試樣溶液中糖的濃度。（分析結(jié)果表述）計(jì)算公式

c×V×100×nX=————————m×1000式中：X——試樣中糖的含量，g/100g；c——樣液中糖的濃度，mg/mL；V——試樣定容體積，Ml；n——樣液稀釋倍數(shù)；m——試樣的質(zhì)量，g。乳與乳制品中糖的測(cè)定檢測(cè)方法——萊因-埃農(nóng)氏法一二三四試劑和材料儀器和設(shè)備分析步驟分析結(jié)果表述1.乙酸鉛溶液（200g/L）；2.草酸鉀—磷酸氫二鈉溶液；3.鹽酸（1+1）；4.氫氧化鈉溶液（300g/L）；5.費(fèi)林氏液（甲液和乙液）；6.酚酞溶液（5g/L）；7.次甲基藍(lán)溶液（10g/L）。（試劑和材料）一、檢測(cè)的試劑和材料1.天平（感量為0.1mg）2.水浴鍋：溫度可控制在75℃±2℃。（儀器和設(shè)備）二、檢測(cè)的儀器和設(shè)備

三、分析步驟（一）費(fèi)林氏液的標(biāo)定

（1）稱取預(yù)先在94℃烘箱中干燥2h的乳糖標(biāo)樣約0.75g→用水溶解并定容至250mL→將此乳糖溶液轉(zhuǎn)入50mL滴定管中，待用。1.用乳糖標(biāo)定（分析步驟）

（分析步驟）三、分析步驟（一）費(fèi)林氏液的標(biāo)定

（2）預(yù)滴定：取10mL費(fèi)林氏液→三角瓶→加20mL蒸餾水→從滴定管中放15mL樣液→三角瓶→電爐上加熱→2min內(nèi)沸騰，保持微沸15s→加3滴次甲基藍(lán)溶液→繼續(xù)滴定→至藍(lán)色褪盡→記錄樣液消耗體積。（3）精確滴定：另取10mL費(fèi)林氏液→三角瓶→加20mL蒸餾水→加比預(yù)滴定量少1.0mL的樣液→電爐上加熱→2min內(nèi)沸騰，維持微2min→加3滴次甲基藍(lán)溶液→緩慢滴定→至藍(lán)色褪盡→記錄樣液消耗體積。1.用乳糖標(biāo)定（分析步驟）三、分析步驟（一）費(fèi)林氏液的標(biāo)定

（4）按式（1）、（2）計(jì)算費(fèi)林氏液的乳糖校正值（f1）：

…………（1）

………………（2）

式中：A1——實(shí)測(cè)乳糖數(shù)，mg；V1——滴定時(shí)消耗乳糖溶液的體積，mL；m1——稱取乳糖的質(zhì)量，g；AL1——由乳糖液滴定毫升數(shù)查乳糖及轉(zhuǎn)化糖因數(shù)表所得的乳糖數(shù)，mg。（分析步驟）三、分析步驟（一）費(fèi)林氏液的標(biāo)定

（1）取在105℃烘箱中干燥2h的蔗糖約0.2g→用50mL水溶解并洗入100mL容量瓶中→加水10mL→加10mL鹽酸→置75℃水浴鍋中→使溶液溫度在67.0℃～69.5℃，保溫5min→冷卻→加2滴酚酞溶液→用氫氧化鈉溶液調(diào)至微粉色→用水定容。再用乳糖標(biāo)定法中的預(yù)滴定和精確滴定操作。2.用蔗糖標(biāo)定（分析步驟）三、分析步驟（一）費(fèi)林氏液的標(biāo)定

（2）按式（3）、（4）計(jì)算費(fèi)林氏液的蔗糖校正值（f2）：

………（3）………………（4）

式中：A2——實(shí)測(cè)轉(zhuǎn)化糖數(shù)，mg；V2——滴定時(shí)消耗蔗糖溶液的體積，mL；m2——稱取蔗糖的質(zhì)量，g；AL2——由蔗糖液滴定的毫升數(shù)查乳糖及轉(zhuǎn)化糖因數(shù)表所得的轉(zhuǎn)化糖數(shù)，mg。（分析步驟）三、分析步驟（二）乳糖的測(cè)定1.試樣處理（1）稱取嬰兒食品或脫脂粉2g，全脂加糖粉或全脂粉2.5g，乳清粉1g→用100mL水分?jǐn)?shù)次溶解并洗入250mL容量瓶中。（2）徐徐加入4mL乙酸鉛溶液、4mL草酸鉀-磷酸氫二鈉溶液→振蕩容量瓶→用水稀釋至刻度→靜置數(shù)分鐘→過(guò)濾，棄去最初25mL濾液→所得濾液作滴定用。2.滴定（1）預(yù)滴定：操作同上述費(fèi)林氏液的標(biāo)定中的預(yù)滴定。（2）精確滴定：操作同上述費(fèi)林氏液的標(biāo)定中的精確滴定。（分析步驟）三、分析步驟（三）蔗糖的測(cè)定樣液的轉(zhuǎn)化與滴定：

取50mL樣液于100mL容量瓶中→按乳糖的測(cè)定1.（2）操作→按費(fèi)林氏液的標(biāo)定1.（2）自“加10mL水”起操作。（分析結(jié)果表述）四、分析結(jié)果表述步驟（一）乳糖

試樣中乳糖的含量X，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)（g/100g）表示，按式（5）計(jì)算：…………（5）式中：X——試樣中乳糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，g/100g；F1——由消耗樣液的毫升數(shù)查表1-23所得乳糖數(shù)，mg；f1——費(fèi)林氏液乳糖校正值；V1——滴定消耗濾液量，mL；m——試樣的質(zhì)量，g。（分析結(jié)果表述）四、分析結(jié)果表述步驟（二）蔗糖

利用測(cè)定乳糖時(shí)的滴定量，按式（6）計(jì)算出轉(zhuǎn)化前轉(zhuǎn)化糖X1，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(g/100g)表示?！?）式中：X1——轉(zhuǎn)化前轉(zhuǎn)化糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，g/100gF2——由測(cè)定乳糖時(shí)消耗樣液的毫升數(shù)查表2-11所得轉(zhuǎn)化糖數(shù)，mg；f2——費(fèi)林氏液蔗糖校正值；V1——滴定消耗濾液量，mL；m——樣品的質(zhì)量，g。（分析結(jié)果表述）四、分析結(jié)果表述步驟（二）蔗糖

用測(cè)定蔗糖時(shí)的滴定量，按式（7）計(jì)算出轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)化糖X2，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(g/100g)表示?！?）式中：X2—轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)化糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，g/100g；F3——由V2查得轉(zhuǎn)化糖數(shù)，mg；f2——費(fèi)林氏液蔗糖校正值；m——樣品的質(zhì)量，g；V2——滴定消耗的轉(zhuǎn)化液量，mL。（分析結(jié)果表述）四、分析結(jié)果表述步驟（二）蔗糖

試樣中蔗糖的含量X,以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(g/10