POCT檢測(cè)技術(shù)與相關(guān)儀器

POCT檢測(cè)技術(shù)與相關(guān)儀器-標(biāo)準(zhǔn)化文件公布號(hào)：〔9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII10POCT概述POCT的概念、根本原理及主要技術(shù)POCT是指在病人旁邊分析病人標(biāo)本的分析技術(shù)，或者說只要測(cè)試不在主試驗(yàn)POCT。“POCT”的組成包〔point)、保健、照料〔care〕、檢驗(yàn)、試驗(yàn)〔testing〕，point-of-caretesting英文字面的意思是在受治療者現(xiàn)場(chǎng)的保健檢驗(yàn)。POCT的根本原理是：把傳統(tǒng)方法中的相關(guān)液體試劑浸潤(rùn)于濾紙和各種微孔膜的吸水材料中，成為整合的枯燥試劑塊，然后將其固定于硬質(zhì)型基質(zhì)上，成為各種形式的診斷試劑條；或把傳統(tǒng)器微型化，操作方法簡(jiǎn)潔化，使之成為便攜式和手掌式的設(shè)備；或?qū)⑸鲜鰞烧哒蠟榻y(tǒng)一的系統(tǒng)。POCT主要技術(shù)包括：簡(jiǎn)潔顯色〔干化學(xué)法測(cè)定〕技術(shù)將多種反響試劑枯燥、固定在紙片上，加上檢驗(yàn)標(biāo)本〔全血、血清、血漿、尿液等〕后產(chǎn)生顏色反響，用肉眼觀看定性或儀器檢測(cè)(半定量)。多層涂膜〔干化學(xué)法測(cè)定〕技術(shù)多層涂膜技術(shù)是從感光膠片制作技術(shù)移植而來的。將多種反響試劑依次涂布在片基上，制成干片，用儀器檢測(cè)，可以準(zhǔn)確定量。免疫金標(biāo)記技術(shù)膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的標(biāo)記處大量聚攏時(shí)，肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn)，這一反響可以通過銀顆粒的沉積被放大。該類技術(shù)主要有斑點(diǎn)免疫滲濾法〔DIGFA〕和免疫層析法〔ICA〕。pg/ml為單位的檢測(cè)板條上單個(gè)或多個(gè)標(biāo)志物。檢測(cè)系統(tǒng)通常由熒光讀數(shù)儀和檢測(cè)板組標(biāo)曲線，可檢測(cè)未知樣本中分析物的濃度。生物傳感器技術(shù)利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導(dǎo)傳感器等特定的生物檢測(cè)器進(jìn)展分析檢測(cè)。該類技術(shù)是酶化學(xué)、免疫化學(xué)、電化學(xué)與計(jì)算機(jī)技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物。生物芯片技術(shù)生物芯片是最進(jìn)展起來的技術(shù)。其特點(diǎn)是在小面積的芯片上同時(shí)測(cè)定多個(gè)工程。生物芯片可分基因芯片、蛋白質(zhì)芯片和細(xì)胞芯片。它們具有高靈敏度、分析時(shí)間短、能同時(shí)檢測(cè)的工程多等特點(diǎn)。紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)此類技術(shù)常用于經(jīng)皮檢測(cè)儀器，用于檢測(cè)血液中血紅蛋白、膽紅素、葡萄糖等成分。這類床邊檢驗(yàn)儀器可連續(xù)監(jiān)測(cè)病人血液中的目的成分，無需抽血，可避開抽血可能引起的穿插感染和血液標(biāo)本的污染，降低每次檢驗(yàn)的本錢和縮短報(bào)告時(shí)間。其他技術(shù)POCT的特點(diǎn)及與傳統(tǒng)試驗(yàn)室檢查的不同POCT的主要特點(diǎn)就是，可以快速地獲得牢靠的檢驗(yàn)結(jié)果，從而提高病人的臨床醫(yī)療效果。簡(jiǎn)潔的說，試驗(yàn)儀器小型化，操作方法簡(jiǎn)潔化，結(jié)果報(bào)告即時(shí)化。POCT的主要不同點(diǎn)比較工程 臨床試驗(yàn)室測(cè)試 POCT周轉(zhuǎn)時(shí)間慢快標(biāo)本鑒定簡(jiǎn)單簡(jiǎn)潔標(biāo)本處理通常需要不需要血標(biāo)本血清、血漿多為全血校正頻繁不頻繁試劑需要配制隨時(shí)可用消耗品相對(duì)少相對(duì)多檢測(cè)儀簡(jiǎn)單簡(jiǎn)潔對(duì)操作者的要求專業(yè)人員一般人亦可以靈敏度相對(duì)高相對(duì)低每個(gè)試驗(yàn)花費(fèi)低高試驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量高一般POCT依據(jù)用途來分，可以分為血液、快速血糖檢測(cè)儀、電解質(zhì)分析狀腺激素檢測(cè)儀、酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)儀、放射免疫等種類繁多的儀器。依據(jù)其大小和重量，可以將監(jiān)測(cè)離體血液標(biāo)本的，分為桌面〔benchtop〕型、便攜型、手提式及手提式一次性使用型。最近，一種被稱為驗(yàn)功能，通過標(biāo)準(zhǔn)或定制的閱讀器獵取監(jiān)測(cè)結(jié)果，有人又稱之為CD試驗(yàn)室。物傳感器裝置、微制造裝置以及其他多孔材料等多種裝置。POCTPOCT在醫(yī)院外進(jìn)展。一些特別工程甚至在家里或在某些特別的場(chǎng)合〔如室外、現(xiàn)場(chǎng)〕均可檢測(cè)，極大地便利了病人和一些特別人群的需要。糖尿病診治方面的應(yīng)用各種快速血糖儀、多種無創(chuàng)傷性血糖檢測(cè)儀的使用使報(bào)告時(shí)間(TAT)大大縮短，是臨床、患者家庭最常用的檢測(cè)儀器；全定量免疫熒光檢測(cè)儀檢測(cè)糖尿病患者的糖化血紅蛋白與尿微量白蛋白等指標(biāo)，有助于早期覺察糖尿病腎病，有利于患者病情的估量與長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)；傳感器相關(guān)檢測(cè)儀可檢測(cè)患者血?dú)饧半娊赓|(zhì)等指標(biāo)；干化學(xué)可檢測(cè)患者血液中各種生化指標(biāo)。心血管疾病方面的應(yīng)用急性心肌梗死〔AcuteMyocardialInfarction，AMI〕發(fā)病急，嚴(yán)峻影響到患者的生命安全。POCTAMICRPI(cTnI)、肌紅蛋白〔Mb〕、肌酸激酶同工酶MB(CK-D-二聚體、腦鈉肽(BNP)、CRP；利用干片式血凝進(jìn)展凝血酶原時(shí)間測(cè)定、活化局部凝血活酶時(shí)間〔APTT〕測(cè)定；干化學(xué)可檢測(cè)血液〔AST〕、乳酸脫氫酶〔LDH〕、肌酸激酶〔CK〕等生化指標(biāo)的檢測(cè)；傳感器相關(guān)可檢測(cè)患者血?dú)饧半娊赓|(zhì)等指標(biāo)。感染性疾病中的應(yīng)用POCT菌培育條件的基層醫(yī)院、民營(yíng)診所、社區(qū)保健所進(jìn)展微生物的快速檢測(cè)，也可〔HBsAg、HCV、HIV、TP〕、內(nèi)鏡檢查前的病毒性肝炎篩選等。發(fā)熱性疾病方面的應(yīng)用患者感染病原體的性質(zhì)〔細(xì)菌或病毒〕比單一檢測(cè)更具特異性。ICU病房?jī)?nèi)的應(yīng)用器可定期獵取待測(cè)指標(biāo)的數(shù)據(jù)。兒科診療中的應(yīng)用適合兒童的診斷行為需要輕松、易用、無創(chuàng)傷或創(chuàng)傷性小、樣品需求量少、無需預(yù)處理、快速得出結(jié)論等要素，以縮短就診周期，還需要關(guān)注父母的POCT陪伴在孩子身邊，隨時(shí)了解檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的含義，更好地與醫(yī)護(hù)人員溝通，有利于患兒疾病的診治。循證醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用從循證醫(yī)學(xué)的角度來評(píng)價(jià)，POCT。循證醫(yī)學(xué)〔Evidencebasedmedicine，EBM〕POCT儀器體積小、攜帶便利、簡(jiǎn)潔使用，操作人員可以在試驗(yàn)室外的任何場(chǎng)所進(jìn)展，快速、便利地獵取患者某些與疾病相關(guān)的數(shù)據(jù)，這正是循證醫(yī)學(xué)所要到達(dá)的主要目的——有據(jù)可循。醫(yī)院外的應(yīng)用各種免疫金標(biāo)技術(shù)相關(guān)的POCT儀、傳感器技術(shù)相關(guān)的POCT儀、干化學(xué)〕、出入境檢疫、禁毒、戒毒中心、公安部門和運(yùn)發(fā)動(dòng)尿液檢測(cè)等醫(yī)院外的很多部門和場(chǎng)所廣泛應(yīng)用。POCT1.POCTPOCTPOCT2023POCTNCCLS1995AST2-PNCCLSPOCT，POCT日趨得到保障。文件對(duì)有關(guān)試驗(yàn)室認(rèn)可、POCT量評(píng)估、方法學(xué)評(píng)價(jià)、結(jié)果記錄及報(bào)告等均有明確規(guī)定。在我國，POCTPOCT方法〔試行草案〕POCTPOCTPOCTPOCT理、床邊檢驗(yàn)的操作程序、結(jié)果的報(bào)告、以及費(fèi)用方面的問題等都有具體的規(guī)定與說明。評(píng)估．費(fèi)用問題。POCT單個(gè)檢驗(yàn)費(fèi)用，高于常規(guī)性檢驗(yàn)。2.POCT用、不需要額外人工處理標(biāo)本、不需要格外準(zhǔn)確的加樣，結(jié)果準(zhǔn)確、并能自動(dòng)保存全部記錄的微型移動(dòng)系統(tǒng)。應(yīng)用無創(chuàng)性/少創(chuàng)性技術(shù)的POCT儀器將是POCT的另一個(gè)進(jìn)展方向。POCTPOCTPOCTPOCT〔最主要是沒有簡(jiǎn)單的液路系統(tǒng)〕，儀器的根本構(gòu)造包括：電源開關(guān)。狀態(tài)燈。池?！?〕(熱敏)打印機(jī)、顯示器。顯示器和打印機(jī)用于輸出結(jié)果。鍵盤。鍵盤屬于輸入設(shè)備。閱讀儀及光源等〕。樣本測(cè)量室的光源，可以是一般的檢測(cè)光源，也可能是激發(fā)光的光源。閱讀儀可以幫助掌握、簡(jiǎn)化局部分析反響，還可以整合數(shù)據(jù)的處理、存儲(chǔ)功能。比方，校正曲線計(jì)算法所使用的校正曲線，質(zhì)量掌握限度和結(jié)果數(shù)據(jù)存儲(chǔ)等。帶有微處理器的閱讀儀甚至可以對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)展校正，然后解釋結(jié)果。裝上都帶有獨(dú)特的條碼，其中包含有試劑的各種信息；有的儀器還帶有密碼牌，用于校準(zhǔn)及質(zhì)量掌握。所以，POCT/密碼牌閱讀器。及儲(chǔ)存中心，增加了儲(chǔ)存質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)或患者數(shù)據(jù)及其他數(shù)據(jù)處理功能。及儲(chǔ)存中心，增加了儲(chǔ)存質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)或患者數(shù)據(jù)及其他數(shù)據(jù)處理功能?！矌в袠颖靖袘?yīng)器或限流閥以及樣本注入口等〕。一次性裝置又可以分成單一或多墊試劑條〔包括單層、多層試紙墊〕、酶層析裝置、免疫橫流〔層析〕分析裝置、卡片式裝置、微制造裝置、生物傳感器裝置等。4.2.2多層涂膜技術(shù)相關(guān)POCT(1)19-1干片中的涂層按其功能分干片中的涂層按其功能分4層：分布層〔有時(shí)又分成集中層和遮擋或凈化劑層〕、試劑層、指示劑層、支持層。小顆粒，還可以讓大分子〔如蛋白質(zhì)〕滯留。分布層中朝下的一面參加反光物質(zhì)如Ti02和BaS04來掩蓋病人標(biāo)本中的有色物質(zhì)，使反射光度計(jì)不受其影響。同時(shí)這些反光化合物也給干片底層的指示劑層供給反射背景。反響所需干試劑，把標(biāo)本中的待測(cè)成分轉(zhuǎn)變成可定量物質(zhì)，同時(shí)去除干擾。指示劑層 生成一種可以定量且與待測(cè)物含量直接成比例的產(chǎn)物。指示劑層中的色原含量用反射光度計(jì)讀取。用。(3)影響因素及質(zhì)量掌握偏差。6維護(hù)，主要是光路的清潔和校正以及干片貯存盒內(nèi)的枯燥劑和保濕劑的準(zhǔn)時(shí)更換等。4.2.3免疫金標(biāo)記技術(shù)相關(guān)POCT19-4.119-4.1所測(cè)工程大多為定性或半定量的結(jié)果，不需要特別的儀器。局部一般由電腦、輸入輸出接口、模數(shù)轉(zhuǎn)換器、掃描掌握電路、光電轉(zhuǎn)換電〔如反射型光纖傳感器〕，才能解決金標(biāo)定量測(cè)試的問發(fā)出的光經(jīng)發(fā)送光纖射向被測(cè)體的外表，反射光由接收光纖收集，并傳送到光探測(cè)器轉(zhuǎn)換成電信號(hào)輸出。另外該儀器還設(shè)計(jì)了一系列軟件，以提高檢測(cè)結(jié)果的牢靠性和準(zhǔn)確性。如依據(jù)水的滲透規(guī)律，編制特別的軟件，補(bǔ)償滲透不均勻引起的干擾信號(hào)；依據(jù)不同的測(cè)試條、不同的批號(hào)，編制軟件嚴(yán)格掌握測(cè)試時(shí)型來表示，并輸入電腦，每次測(cè)定時(shí)，電腦即可自動(dòng)將光密度值轉(zhuǎn)換成濃度值并顯示。原理，測(cè)量環(huán)境的光照變化、測(cè)量筆尖密封性的變化及其他物理?xiàng)l件〔溫度、水等液體〕變化均會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾。正確的定標(biāo)是確保儀器重復(fù)準(zhǔn)確讀數(shù)的必要步驟。對(duì)不同測(cè)量條件和筆尖各種變化可能引起各種誤差的調(diào)整，可以通過定標(biāo)〔散射光調(diào)整和空白調(diào)零程序〕來完成。試劑盒內(nèi)含陽性定值范圍的質(zhì)控物，用于試劑穩(wěn)定性及試驗(yàn)的質(zhì)量掌握。原理，測(cè)量環(huán)境的光照變化、測(cè)量筆尖密封性的變化及其他物理?xiàng)l件〔溫度、水等液體〕變化均會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生干擾。正確的定標(biāo)是確保儀器重復(fù)準(zhǔn)確讀數(shù)的必要步驟。對(duì)不同測(cè)量條件和筆尖各種變化可能引起各種誤差的調(diào)整，可以通過定標(biāo)〔散射光調(diào)整和空白調(diào)零程序〕來完成。試劑盒內(nèi)含陽性定值范圍的質(zhì)控物，用于試劑穩(wěn)定性及試驗(yàn)的質(zhì)量掌握。4.2.4免疫熒光測(cè)定技術(shù)相關(guān)POCT參加了溶血緩沖液后的全血混勻時(shí)，熒光標(biāo)記的抗HbA1c抗體與血樣中的HbA1cHbA1c〔熒光標(biāo)記抗體〕競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合，記抗體結(jié)合的時(shí)機(jī)就越少，最終讀出檢測(cè)板所示熒光強(qiáng)度。熒光信號(hào)強(qiáng)弱與HbA1cHbA1c；另一個(gè)光學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)總血紅蛋白濃度。儀器將這兩個(gè)參數(shù)轉(zhuǎn)換為比值〔Hb〕HbA1cHbA1c19-5)?！睧u〕獒合物作熒光增加液，使熒光信號(hào)增加，有利于熒光測(cè)量。4.2.5葡萄糖酶電極傳感器相關(guān)的POCT4.2.5葡萄糖酶電極傳感器相關(guān)的POCT電化學(xué)酶?jìng)鞲衅鞣ㄎ⒘垦焖傺菧y(cè)試儀，承受生物傳感器原理將生物敏感元件酶同物理或化學(xué)換能器相結(jié)合，對(duì)所測(cè)定對(duì)象作出準(zhǔn)確定量反響，并借助現(xiàn)代電子技術(shù)將所測(cè)得信號(hào)以直觀數(shù)字形式輸出的一類型分析裝置，即承受酶法葡萄糖分析技術(shù)、并結(jié)合絲網(wǎng)印刷和微電子技術(shù)制作的電極，以及智能化儀器的讀出裝置，組合成微型化的血糖。依據(jù)所用酶的不同，此類儀器可以分為承受葡萄糖脫氫酶和承受葡萄糖氧化酶技術(shù)的兩大類。酶電極的組成〔葡萄糖氧化酶電極為例〕包括印刷電極、電極底片、葡萄糖氧化酶及固定保護(hù)層。電極的測(cè)試原理為：在印刷電極的兩端施加肯定的恒定電壓，當(dāng)被測(cè)血樣滴在電極的測(cè)試區(qū)后，電極上的固定的葡萄糖氧化酶與血中的葡萄糖發(fā)〕，酶電極的響應(yīng)電流與被測(cè)血樣中的葡萄糖濃度呈線性關(guān)系。血糖儀就是依據(jù)這一關(guān)系來計(jì)算并顯示血標(biāo)本中的葡萄糖濃度值的。羅氏優(yōu)越血糖儀所用的ADVANTAGEⅡ可吸血試紙條利用了葡萄糖脫氫酶法的原理和鈀電極的技術(shù)，并設(shè)置了密碼牌，自動(dòng)校準(zhǔn)血糖儀和試紙。試紙條構(gòu)造包括聚酯薄膜頂膜、底膜，標(biāo)本采集區(qū)，試劑區(qū)、鈀電極等。測(cè)試時(shí)，先插入試紙，滴血在血糖儀以外的試紙端上，滴血后自動(dòng)起反響計(jì)時(shí)，不必抹去血滴，再次插入試紙，反響產(chǎn)生的電流轉(zhuǎn)換為血糖濃度數(shù)字而顯示在屏幕上。由于承受葡萄糖脫氫酶法，反響過程中不需氧直接參與反響，消退了血氧分壓產(chǎn)生的偏差。承受承受葡萄氧化酶生物傳感器技術(shù)的也有不少，ONETOUCH強(qiáng)生穩(wěn)豪血糖儀是比較具有代表性的一種。其試紙工作原理為：使用一種被稱為計(jì)時(shí)安培電流法的電化學(xué)技術(shù)來測(cè)定病人血樣中的葡萄糖濃度。當(dāng)血樣到達(dá)試紙的頂端血液中的葡萄糖進(jìn)展反響，從而使電子從葡萄糖流向化學(xué)中間體。施加在試紙上的電壓促使電子從化學(xué)中間體流向電極。血糖儀通過電極來測(cè)量電子的流度。度。常監(jiān)測(cè)，而不能作為準(zhǔn)確診斷糖尿病的工具。4.2.6熒光傳感器相關(guān)的POCT儀器的根本構(gòu)造包括電源開關(guān)、電池、顯示屏、內(nèi)置打印機(jī)、鍵盤、測(cè)〕、條形碼閱讀器、數(shù)據(jù)傳輸系統(tǒng)、數(shù)據(jù)存儲(chǔ)系統(tǒng)、一次性測(cè)試片〔測(cè)試片上多帶有樣本感應(yīng)器或限流閥以及樣本注入口等〕，為保證結(jié)果準(zhǔn)確，儀器還配備定標(biāo)氣體及大氣壓測(cè)量裝置等。OPTICCA血?dú)獾臋z測(cè)技術(shù)包括光學(xué)熒光法和光學(xué)吸取反射法，運(yùn)用了固態(tài)一次性的熒光傳感器測(cè)試卡。熒光傳感器測(cè)試卡構(gòu)造示意圖pO2傳感器電極工作原理示意圖pO2OPTICCApO2〔tHb〕和氧的飽和度〔SO2〕進(jìn)展分析。因此一個(gè)樣品可在同一個(gè)傳感器上測(cè)量三個(gè)參數(shù)