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文檔簡介
配制培養(yǎng)基的基本原則
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全由簡單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中至少要有一種有機(jī)物,通常是葡萄糖。
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)細(xì)菌常用肉湯蛋白胨培養(yǎng)基;培養(yǎng)放線菌常用高氏一號培養(yǎng)基;培養(yǎng)酵母菌常用麥芽汁培養(yǎng)基;培養(yǎng)霉菌常用察氏培養(yǎng)基。
2.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長良好。培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,特別是碳氮比(C/N)。
2.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適細(xì)菌和酵母菌培養(yǎng)基中C/N約為5:1
霉菌培養(yǎng)基中C/N約為10:1
3.控制合適的pH值
要想滿足不同類型微生物的生長繁殖或代謝的需要就必須控制合適的pH值。一般來講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7~7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5~6范圍內(nèi)生長。為了盡可能減緩培養(yǎng)過程中pH的變化,在配制培養(yǎng)基時(shí),需要加入一定的緩沖物質(zhì),如磷酸鹽類、碳酸鈣等。
3.原料的選擇
在實(shí)驗(yàn)研究中可以選擇成分清晰,純度較高的培養(yǎng)基。但在發(fā)酵工業(yè)中,應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分,因?yàn)榕囵B(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
如微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)常用糖蜜、乳清等作為培養(yǎng)基的原料。
培養(yǎng)基的類型
1.按營養(yǎng)成分的來源分天然培養(yǎng)基:天然動(dòng)植物器官和抽提物實(shí)驗(yàn)室常用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):取材廣泛、營養(yǎng)全面豐富,制備方便,價(jià)格低廉,適用于大規(guī)模培養(yǎng)微生物;缺點(diǎn):成分復(fù)雜,每批成分不穩(wěn)定
1.按營養(yǎng)成分的來源分合成培養(yǎng)基:用化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成實(shí)驗(yàn)室常用的高氏1號培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):成分精確、重復(fù)性強(qiáng)缺點(diǎn):配制復(fù)雜,生長緩慢,價(jià)格較貴,不宜用于大規(guī)模生產(chǎn)
1.按營養(yǎng)成分的來源分半合成培養(yǎng)基:一部分天然物質(zhì),補(bǔ)充少量無機(jī)鹽類實(shí)驗(yàn)室常用的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基應(yīng)用最廣,能使絕大多數(shù)微生物良好生長
2.按物理狀態(tài)分
液體培養(yǎng)基:溶解混合調(diào)pH值利于生長和積累代謝產(chǎn)物,常用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)
2.按物理狀態(tài)分
固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(約2%的瓊脂或5%~12%的明膠)
2.按物理狀態(tài)分
半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑(如0.2%~0.5%的瓊脂)而制成
特殊用途:穿刺培養(yǎng)觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)能力、厭氧菌培養(yǎng)
2.按培養(yǎng)基的用途分
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:基本營養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
2.按培養(yǎng)基的用途分
選擇培養(yǎng)基:用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基加入特殊的營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要微生物的生長利用以纖維素或石蠟油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,從混雜微生物群體分離出能分解纖維素或石蠟油的微生物
S.S培養(yǎng)基
用于沙門菌和志賀菌的篩選,在SS培養(yǎng)基上形成不分解乳糖的無色菌落,大腸桿菌等不致病的腸道細(xì)菌多為分解乳糖的粉紅色菌落
2.按培養(yǎng)基的用途分
加富培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)(血液、血清、酵母浸膏)制成的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基
用來富集或分離某種微生物增加所要分離的微生物的數(shù)量,使其形成生長優(yōu)勢,達(dá)到分離該種微生物的目的
2.按培養(yǎng)基的用途分
鑒別培養(yǎng)基:用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基加入特殊化學(xué)物質(zhì),使微生物的代謝產(chǎn)物與此特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化微生物的快速分類鑒定配制培養(yǎng)基的基本原則
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全由簡單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中至少要有一種有機(jī)物,通常是葡萄糖。
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)細(xì)菌常用肉湯蛋白胨培養(yǎng)基;培養(yǎng)放線菌常用高氏一號培養(yǎng)基;培養(yǎng)酵母菌常用麥芽汁培養(yǎng)基;培養(yǎng)霉菌常用察氏培養(yǎng)基。
2.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長良好。培養(yǎng)基中各營養(yǎng)物質(zhì)之間的配比也直接影響微生物的生長繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,特別是碳氮比(C/N)。
2.營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適細(xì)菌和酵母菌培養(yǎng)基中C/N約為5:1
霉菌培養(yǎng)基中C/N約為10:1
3.控制合適的pH值
要想滿足不同類型微生物的生長繁殖或代謝的需要就必須控制合適的pH值。一般來講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7~7.5范圍內(nèi)生長,酵母菌和霉菌通常在pH4.5~6范圍內(nèi)生長。為了盡可能減緩培養(yǎng)過程中pH的變化,在配制培養(yǎng)基時(shí),需要加入一定的緩沖物質(zhì),如磷酸鹽類、碳酸鈣等。
3.原料的選擇
在實(shí)驗(yàn)研究中可以選擇成分清晰,純度較高的培養(yǎng)基。但在發(fā)酵工業(yè)中,應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分,因?yàn)榕囵B(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
如微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)常用糖蜜、乳清等作為培養(yǎng)基的原料。
培養(yǎng)基的類型
1.按營養(yǎng)成分的來源分天然培養(yǎng)基:天然動(dòng)植物器官和抽提物實(shí)驗(yàn)室常用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):取材廣泛、營養(yǎng)全面豐富,制備方便,價(jià)格低廉,適用于大規(guī)模培養(yǎng)微生物;缺點(diǎn):成分復(fù)雜,每批成分不穩(wěn)定
1.按營養(yǎng)成分的來源分合成培養(yǎng)基:用化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成實(shí)驗(yàn)室常用的高氏1號培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):成分精確、重復(fù)性強(qiáng)缺點(diǎn):配制復(fù)雜,生長緩慢,價(jià)格較貴,不宜用于大規(guī)模生產(chǎn)
1.按營養(yǎng)成分的來源分半合成培養(yǎng)基:一部分天然物質(zhì),補(bǔ)充少量無機(jī)鹽類實(shí)驗(yàn)室常用的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基應(yīng)用最廣,能使絕大多數(shù)微生物良好生長
2.按物理狀態(tài)分
液體培養(yǎng)基:溶解混合調(diào)pH值利于生長和積累代謝產(chǎn)物,常用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)
2.按物理狀態(tài)分
固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(約2%的瓊脂或5%~12%的明膠)
2.按物理狀態(tài)分
半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑(如0.2%~0.5%的瓊脂)而制成
特殊用途:穿刺培養(yǎng)觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)能力、厭氧菌培養(yǎng)
2.按培養(yǎng)基的用途分
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:基本營養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
2.按培養(yǎng)基的用途分
選擇培養(yǎng)基:用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基加入特殊的營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要微生物的生長利用以纖維素或石蠟油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,從混雜微生物群體分離出能分解纖維素或石蠟油的微生物
S.S培養(yǎng)基
用于沙門菌和志賀菌的篩選,在SS培養(yǎng)基上形成不分解乳糖的無色菌落,大腸桿菌等不致病的腸道細(xì)菌多為分解乳糖的粉紅色菌落
2.按培養(yǎng)基的用途分
加富培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)(血液、血清、酵母浸膏)制成
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