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配制培養(yǎng)基的基本原則
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中至少要有一種有機(jī)物,通常是葡萄糖。
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)細(xì)菌常用肉湯蛋白胨培養(yǎng)基;培養(yǎng)放線菌常用高氏一號(hào)培養(yǎng)基;培養(yǎng)酵母菌常用麥芽汁培養(yǎng)基;培養(yǎng)霉菌常用察氏培養(yǎng)基。
2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好。培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,特別是碳氮比(C/N)。
2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適細(xì)菌和酵母菌培養(yǎng)基中C/N約為5:1
霉菌培養(yǎng)基中C/N約為10:1
3.控制合適的pH值
要想滿足不同類型微生物的生長(zhǎng)繁殖或代謝的需要就必須控制合適的pH值。一般來(lái)講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7~7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng),酵母菌和霉菌通常在pH4.5~6范圍內(nèi)生長(zhǎng)。為了盡可能減緩培養(yǎng)過(guò)程中pH的變化,在配制培養(yǎng)基時(shí),需要加入一定的緩沖物質(zhì),如磷酸鹽類、碳酸鈣等。
3.原料的選擇
在實(shí)驗(yàn)研究中可以選擇成分清晰,純度較高的培養(yǎng)基。但在發(fā)酵工業(yè)中,應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分,因?yàn)榕囵B(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
如微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)常用糖蜜、乳清等作為培養(yǎng)基的原料。
培養(yǎng)基的類型
1.按營(yíng)養(yǎng)成分的來(lái)源分天然培養(yǎng)基:天然動(dòng)植物器官和抽提物實(shí)驗(yàn)室常用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):取材廣泛、營(yíng)養(yǎng)全面豐富,制備方便,價(jià)格低廉,適用于大規(guī)模培養(yǎng)微生物;缺點(diǎn):成分復(fù)雜,每批成分不穩(wěn)定
1.按營(yíng)養(yǎng)成分的來(lái)源分合成培養(yǎng)基:用化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成實(shí)驗(yàn)室常用的高氏1號(hào)培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):成分精確、重復(fù)性強(qiáng)缺點(diǎn):配制復(fù)雜,生長(zhǎng)緩慢,價(jià)格較貴,不宜用于大規(guī)模生產(chǎn)
1.按營(yíng)養(yǎng)成分的來(lái)源分半合成培養(yǎng)基:一部分天然物質(zhì),補(bǔ)充少量無(wú)機(jī)鹽類實(shí)驗(yàn)室常用的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基應(yīng)用最廣,能使絕大多數(shù)微生物良好生長(zhǎng)
2.按物理狀態(tài)分
液體培養(yǎng)基:溶解混合調(diào)pH值利于生長(zhǎng)和積累代謝產(chǎn)物,常用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)
2.按物理狀態(tài)分
固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(約2%的瓊脂或5%~12%的明膠)
2.按物理狀態(tài)分
半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑(如0.2%~0.5%的瓊脂)而制成
特殊用途:穿刺培養(yǎng)觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)能力、厭氧菌培養(yǎng)
2.按培養(yǎng)基的用途分
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
2.按培養(yǎng)基的用途分
選擇培養(yǎng)基:用來(lái)將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基加入特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要微生物的生長(zhǎng)利用以纖維素或石蠟油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,從混雜微生物群體分離出能分解纖維素或石蠟油的微生物
S.S培養(yǎng)基
用于沙門菌和志賀菌的篩選,在SS培養(yǎng)基上形成不分解乳糖的無(wú)色菌落,大腸桿菌等不致病的腸道細(xì)菌多為分解乳糖的粉紅色菌落
2.按培養(yǎng)基的用途分
加富培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(血液、血清、酵母浸膏)制成的一類營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基
用來(lái)富集或分離某種微生物增加所要分離的微生物的數(shù)量,使其形成生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),達(dá)到分離該種微生物的目的
2.按培養(yǎng)基的用途分
鑒別培養(yǎng)基:用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基加入特殊化學(xué)物質(zhì),使微生物的代謝產(chǎn)物與此特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化微生物的快速分類鑒定配制培養(yǎng)基的基本原則
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全由簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物組成。異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中至少要有一種有機(jī)物,通常是葡萄糖。
1.明確微生物特點(diǎn)和培養(yǎng)目的培養(yǎng)細(xì)菌常用肉湯蛋白胨培養(yǎng)基;培養(yǎng)放線菌常用高氏一號(hào)培養(yǎng)基;培養(yǎng)酵母菌常用麥芽汁培養(yǎng)基;培養(yǎng)霉菌常用察氏培養(yǎng)基。
2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度合適時(shí)微生物才能生長(zhǎng)良好。培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,特別是碳氮比(C/N)。
2.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和配比要合適細(xì)菌和酵母菌培養(yǎng)基中C/N約為5:1
霉菌培養(yǎng)基中C/N約為10:1
3.控制合適的pH值
要想滿足不同類型微生物的生長(zhǎng)繁殖或代謝的需要就必須控制合適的pH值。一般來(lái)講,細(xì)菌與放線菌適于在pH7~7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng),酵母菌和霉菌通常在pH4.5~6范圍內(nèi)生長(zhǎng)。為了盡可能減緩培養(yǎng)過(guò)程中pH的變化,在配制培養(yǎng)基時(shí),需要加入一定的緩沖物質(zhì),如磷酸鹽類、碳酸鈣等。
3.原料的選擇
在實(shí)驗(yàn)研究中可以選擇成分清晰,純度較高的培養(yǎng)基。但在發(fā)酵工業(yè)中,應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成分,因?yàn)榕囵B(yǎng)基用量很大,利用低成本的原料更體現(xiàn)出其經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
如微生物單細(xì)胞蛋白的工業(yè)生產(chǎn)常用糖蜜、乳清等作為培養(yǎng)基的原料。
培養(yǎng)基的類型
1.按營(yíng)養(yǎng)成分的來(lái)源分天然培養(yǎng)基:天然動(dòng)植物器官和抽提物實(shí)驗(yàn)室常用的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):取材廣泛、營(yíng)養(yǎng)全面豐富,制備方便,價(jià)格低廉,適用于大規(guī)模培養(yǎng)微生物;缺點(diǎn):成分復(fù)雜,每批成分不穩(wěn)定
1.按營(yíng)養(yǎng)成分的來(lái)源分合成培養(yǎng)基:用化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成實(shí)驗(yàn)室常用的高氏1號(hào)培養(yǎng)基優(yōu)點(diǎn):成分精確、重復(fù)性強(qiáng)缺點(diǎn):配制復(fù)雜,生長(zhǎng)緩慢,價(jià)格較貴,不宜用于大規(guī)模生產(chǎn)
1.按營(yíng)養(yǎng)成分的來(lái)源分半合成培養(yǎng)基:一部分天然物質(zhì),補(bǔ)充少量無(wú)機(jī)鹽類實(shí)驗(yàn)室常用的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基應(yīng)用最廣,能使絕大多數(shù)微生物良好生長(zhǎng)
2.按物理狀態(tài)分
液體培養(yǎng)基:溶解混合調(diào)pH值利于生長(zhǎng)和積累代謝產(chǎn)物,常用于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)
2.按物理狀態(tài)分
固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(約2%的瓊脂或5%~12%的明膠)
2.按物理狀態(tài)分
半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入少量凝固劑(如0.2%~0.5%的瓊脂)而制成
特殊用途:穿刺培養(yǎng)觀察細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)能力、厭氧菌培養(yǎng)
2.按培養(yǎng)基的用途分
基礎(chǔ)培養(yǎng)基:基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
2.按培養(yǎng)基的用途分
選擇培養(yǎng)基:用來(lái)將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來(lái)的培養(yǎng)基加入特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì),抑制不需要微生物的生長(zhǎng)利用以纖維素或石蠟油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,從混雜微生物群體分離出能分解纖維素或石蠟油的微生物
S.S培養(yǎng)基
用于沙門菌和志賀菌的篩選,在SS培養(yǎng)基上形成不分解乳糖的無(wú)色菌落,大腸桿菌等不致病的腸道細(xì)菌多為分解乳糖的粉紅色菌落
2.按培養(yǎng)基的用途分
加富培養(yǎng)基:在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(血液、血清、酵母浸膏)制成
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