紅細胞檢查專題知識講座

紅細胞檢查專題知識講座紅細胞檢查專題知識講座第1頁紅細胞（redbloodcell,RBC;erythrocyte）血液中數(shù)量最多有形成份主要成份：血紅蛋白主要功效：呼吸載體直徑：6.7~9.5um，平均7.2um形狀：雙凹圓盤狀紅細胞檢查專題知識講座第2頁RBC紅細胞檢查專題知識講座第3頁紅細胞檢查專題知識講座第4頁紅細胞檢查專題知識講座第5頁紅細胞檢查專題知識講座第6頁紅細胞生成StemcellEpo原始紅細胞早幼紅細胞中幼紅細胞晚幼紅細胞網(wǎng)織紅細胞

成熟紅細胞釋放入血72h48h平均壽命120d紅細胞檢查專題知識講座第7頁紅細胞計數(shù)

（redbloodcellcount，RBC）定義：單位體積（每升）血液內(nèi)紅細胞數(shù)量原理：用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)，充入計數(shù)池，于顯微鏡下計數(shù)一定體積范圍紅細胞數(shù)，并換算得每升血液中紅細胞數(shù)(/L)紅細胞檢查專題知識講座第8頁紅細胞稀釋液稀釋液：保護計數(shù)細胞，破壞非計數(shù)細胞，同時抗凝，要求不含雜質(zhì)紅細胞稀釋液：Hayem液，由氯化鈉、結(jié)晶硫酸鈉、氯化高汞組成作用：

氯化鈉調(diào)整滲透壓，結(jié)晶硫酸鈉預(yù)防細胞粘連，氯化高汞防腐紅細胞檢查專題知識講座第9頁計數(shù)方法

手工法：取樣→稀釋→計數(shù)→計算儀器法：電阻抗分析或激光分析紅細胞檢查專題知識講座第10頁手工法10uL末梢血+2ml稀釋液

混勻稀釋充池計數(shù)計算紅細胞檢查專題知識講座第11頁成年男性（4.0-5.5）×1012/L成年女性（3.5-5.0）×1012/L初生兒（6.0-7.0）×1012/L外周血紅細胞參考值紅細胞檢查專題知識講座第12頁思考手工法VS儀器法？紅細胞檢查專題知識講座第13頁血紅蛋白測定（hemoglobin，Hb）紅細胞檢查專題知識講座第14頁血紅蛋白組成珠蛋白（globin）（4條肽鏈）亞鐵血紅素（heme）（1個）血紅蛋白紅細胞檢查專題知識講座第15頁珠蛋白含有種屬特異性，含有兩條α鏈和兩條非α鏈

正常成人Hb包含：

HbAα2β2

（90%以上）

HbA2α2δ2

（2~3%）

HbFα2γ2

（2%以下；新生兒占70%）紅細胞檢查專題知識講座第16頁

受激素調(diào)整

紅細胞生成素：直接

雄激素：直接和間接本身調(diào)整

血紅素過多氧化為高鐵血紅素負反饋

血紅蛋白合成紅細胞檢查專題知識講座第17頁

血紅蛋白代謝珠蛋白

氨基酸血紅素

膽色素（膽綠素、膽紅素、膽素原及膽素）血紅蛋白紅細胞檢查專題知識講座第18頁還原血紅蛋白（reducedhemoglobin，Hbred）氧合血紅蛋白（oxyhemoglobin，HbO2）高鐵血紅蛋白（hemiglobin，Hi）碳氧血紅蛋白（HbCO）硫化血紅蛋白（SHb）

血紅蛋白種類紅細胞檢查專題知識講座第19頁血紅蛋白測定定義指單位體積血液中所含血紅蛋白量參考值

成年男性：

120-160g/L

成年女性：

110-150g/L

初生兒：

170-200g/L紅細胞檢查專題知識講座第20頁Hb測定方法分光光度計比色

氰化高鐵血紅蛋白測定法（HiCN）（國際標(biāo)準(zhǔn)參考方法）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測定法（SDS-Hb）（次選方法）疊氮高鐵血紅蛋白測定法（HiN3）堿羥血紅蛋白測定法（AHD575）目視比色

沙利法、測鐵法、測氧法、比重法、折射儀法、光譜分析法儀器法紅細胞檢查專題知識講座第21頁氰化高鐵血紅蛋白測定法（HiCN）為國際標(biāo)準(zhǔn)參考方法步驟：取樣加轉(zhuǎn)化液（溶血、轉(zhuǎn)化）比色紅細胞檢查專題知識講座第22頁原理：血液在血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中溶血后，除SHb外各血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白，再與CN-結(jié)合生成穩(wěn)定棕紅色氰化高鐵血紅蛋白，經(jīng)過比色依據(jù)吸光度測得血紅蛋白濃度。紅細胞檢查專題知識講座第23頁

方法：計算：有三種方法求得Hb濃度

1.A×367.7

2.

得A值后，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接查找

3.A×KK＝ΣHb/ΣA轉(zhuǎn)化液5ml+血20ul(5min)，比色讀吸光度（A）(540nm)紅細胞檢查專題知識講座第24頁標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制用一組已知濃度HiCN參考液，在分光光度計上分別測定A值，以A為縱座標(biāo)，血紅蛋白參考值為橫座標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

比如：HiCN參考品

Hbg/L：

50100150200A：

0.140.270.410.54

假如標(biāo)本A為0.32，則標(biāo)本Hb=0.32×370.37=118.52（g/L）K＝ΣHb/ΣA=370.37紅細胞檢查專題知識講座第25頁

優(yōu)點操作簡單呈色快且穩(wěn)定除SHb外均可檢測依據(jù)吸光度直接定值方法學(xué)評價

缺點KCN有劇毒HbCO轉(zhuǎn)化較慢高WBC和高球蛋白血癥可致溶液渾濁紅細胞檢查專題知識講座第26頁紅細胞計數(shù)與血紅蛋白測定臨床意義紅細胞檢查專題知識講座第27頁生理改變年紀(jì)與性別新生兒：RBC高，兩周后下降，6-7歲最低男性：25-30歲高峰女性：13歲-15歲達高值，21歲-35歲低水平，以后漸漸增高

紅細胞檢查專題知識講座第28頁精神原因腎上腺素RBC猛烈體力勞動或運動相對缺氧EpoRBC氣壓降低

缺氧代償性RBC妊娠中后期

血液稀釋RBC老年人

造血功效減退RBC紅細胞檢查專題知識講座第29頁病理改變

紅細胞和血紅蛋白增多相對增多：血漿中水分丟失，血液濃縮所致，如嘔吐、腹瀉絕對增多：

原發(fā)性

—

真性紅細胞增多

繼發(fā)性

—

低氧血癥Epo（如心血管病、肺疾病、異常血紅蛋白病）

—腎上腺皮質(zhì)功效亢進紅細胞檢查專題知識講座第30頁紅細胞生成素代償性增加生理性：

新生兒高原居民病理性：嚴(yán)重慢性心、肺疾患、異常血紅蛋白病紅細胞生成素非代償性增加：一些腫瘤或腎臟疾患紅細胞檢查專題知識講座第31頁紅細胞檢查專題知識講座第32頁紅細胞和血紅蛋白量降低主要見于貧血：因為各種原因引發(fā)全身血循環(huán)中紅細胞總數(shù)、血紅蛋白和紅細胞比積降低，低于該地域、該年紀(jì)及性別組參考范圍低限時稱貧血。貧血病因生成降低破壞過多失血過多紅細胞檢查專題知識講座第33頁1）骨髓造血功效減退藥品、物理原因、慢性腎衰、再障、白血病、惡性腫瘤骨髓轉(zhuǎn)移2）造血原料不足

缺鐵（缺鐵性貧血）、缺乏VitB12或葉酸（巨幼細胞性貧血）3）紅細胞破壞增加

溶血性貧血（輸血不合、蠶豆病、遺傳性球形細胞增多癥）4）紅細胞丟失過多各種原因失血（如消化性潰瘍、痔瘡、鉤蟲病）紅細胞檢查專題知識講座第34頁紅細胞檢查專題知識講座第35頁注意問題Hb測定對貧血程度判斷優(yōu)于RBC計數(shù)在一些病理情況下，Hb和RBC濃度不一定能正確反應(yīng)全身紅細胞總?cè)萘?，如：急性失血、水潴留、失水等發(fā)生大細胞貧血或小細胞低色素貧血時，RBC計數(shù)與Hb濃度不成百分比紅細胞檢查專題知識講座第36頁紅細胞形態(tài)檢驗紅細胞檢查專題知識講座第37頁紅細胞形態(tài)觀察

大小及均勻程度紅細胞形狀血紅蛋白含量細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)紅細胞檢查專題知識講座第38頁紅細胞大小改變

直徑比如小紅細胞

<6um缺鐵性貧血大紅細胞

>10um巨幼細胞貧血巨紅細胞

>15um巨幼細胞貧血大小不均增生性貧血紅細胞檢查專題知識講座第39頁ACBA：normalB：megalocyteC：anisocytosis紅細胞檢查專題知識講座第40頁紅細胞形狀改變球形紅細胞遺傳性或取得性橢圓形紅細胞遺傳性靶形紅細胞珠蛋白生成障礙性貧血、HbC病口形紅細胞遺傳性鐮形紅細胞異常血紅蛋白S（HbS）棘形紅細胞遺傳性或取得性β-脂蛋白缺乏癥新月形紅細胞陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥淚滴形紅細胞貧血、骨髓纖維化癥緡錢狀形成纖維蛋白原和球蛋白增高裂紅細胞

DIC、微血管病性溶血性貧血紅細胞形態(tài)不整巨幼細胞性貧血紅細胞檢查專題知識講座第41頁spherocyte紅細胞檢查專題知識講座第42頁Elliptocyte紅細胞檢查專題知識講座第43頁人為假橢圓紅細胞紅細胞檢查專題知識講座第44頁Targetcell紅細胞檢查專題知識講座第45頁stomatocyte紅細胞檢查專題知識講座第46頁Sicklecell紅細胞檢查專題知識講座第47頁鐮形紅細胞紅細胞檢查專題知識講座第48頁acanthocyte紅細胞檢查專題知識講座第49頁紅細胞檢查專題知識講座第50頁meniscocyte紅細胞檢查專題知識講座第51頁Teardropcell紅細胞檢查專題知識講座第52頁Rouleauxformation紅細胞檢查專題知識講座第53頁schistocyte紅細胞檢查專題知識講座第54頁poikilocytosis紅細胞檢查專題知識講座第55頁血紅蛋白含量改變正常色素性

急性失血、再障、白血病低色素性

缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血高色素性

巨幼細胞性貧血嗜多色性

溶血性或急性失血性貧血細胞著色不一鐵粒幼紅細胞性貧血紅細胞檢查專題知識講座第56頁normochromichypochromichyperchromicpolychromatic紅細胞檢查專題知識講座第57頁人為面包圈紅細胞紅細胞檢查專題知識講座第58頁鐵粒幼紅細胞性貧血紅細胞檢查專題知識講座第59頁細胞內(nèi)異常結(jié)構(gòu)●

嗜堿性點彩紅細胞：RNA，鉛中毒●

染色質(zhì)小體（豪焦小體）：核殘余物，巨幼細胞貧血、脾切除后●

卡波環(huán)：脂蛋白變性，巨幼細胞貧血、鉛中毒●

寄生蟲：瘧原蟲、微絲蚴、杜利什曼原蟲●

有核紅細胞：

溶血性貧血、造血系統(tǒng)惡性疾患或骨髓轉(zhuǎn)移性腫瘤、慢性骨髓增生性疾病、脾切除后紅細胞檢查專題知識講座第60頁Basophilicstipplingcell紅細胞檢查專題知識講座第61頁HowellJolly’sbody紅細胞檢查專題知識講座第62頁Cabotring紅細胞檢查專題知識講座第63頁瘧原蟲（malarialparasite）紅細胞檢查專題知識講座第64頁有核紅細胞紅細胞檢查專題知識講座第65頁紅細胞檢查專題知識講座第66頁紅細胞各種改變紅細胞檢查專題知識講座第67頁紅細胞比容測定

（Hematocrit，HCT）定義：抗凝血在一定條件下離心沉淀，求出單位體積血液中紅細胞占體積百分比（L/L）。

與紅細胞數(shù)量以及紅細胞大小相關(guān)紅細胞檢查專題知識講座第68頁

溫氏法（常量，中速離心）

微量法——首選常規(guī)方法放射性核素法——參考方法

折射計法、黏度法、比重法、電阻抗法（儀器）測定方法紅細胞檢查專題知識講座第69頁參考值

溫氏法：男性0.4~0.54女性0.37~0.47

微量法：男性0.42~0.52女性0.37~0.48

儀器法：男性0.40~0.52女性0.37~0.48紅細胞檢查專題知識講座第70頁離心法EDTA抗凝離心

PlasmPLTWBCRBC-redRBC-O2紅細胞檢查專題知識講座第71頁診療貧血并判斷其嚴(yán)重程度，結(jié)合相關(guān)指數(shù)改變可推斷貧血病因，并對貧血進行分類；評定血漿容量有沒有增減或稀釋濃縮程度，有利于補液量控制。

●增高：血液濃縮、原發(fā)性或繼發(fā)性紅細胞增多癥

●降低：貧血、稀釋血癥（充血性心力衰竭、妊娠、輸液過多）臨床意義紅細胞檢查專題知識講座第72頁紅細胞平均指數(shù)

經(jīng)過RBC計數(shù)、Hb測定、HCT測定可計算出紅細胞平均指數(shù)紅細胞檢查專題知識講座第73頁定義：每個紅細胞平均體積。以飛升（fL）為單位計算：MCV=HCT/RBC比如：RBC為3.50×1012/L，Hct為0.36，則：

MCV=0.363.50×1012/L=103fL參考值：手工法80~92fL儀器法80~100fL紅細胞平均容積（meancorpuscularvolume,MCV）紅細胞檢查專題知識講座第74頁紅細胞平均血紅蛋白量

（meancorpuscularhemoglobin，MCH）定義：每個紅細胞內(nèi)所含平均血紅蛋白量，以皮克（pg）為單位計算：MCH=Hb/RBC比如：RBC為3.50×1012/L，Hb為120g/L，則：

MCH=120g/L3.50×1012/L=34.20pg參考值：手工法27~31pg儀器法27~34pg紅細胞檢查專題知識講座第75頁紅細胞平均血紅蛋白濃度

(meancorpuscularhemoglobinconcentration,MCHC）

定義：單位容積紅細胞平均血紅蛋白濃度，以g/L為單位計算：MCHC=Hb/Hct比如：Hb為120g/L，Hct為0.36，則：

MCHC=120g/L0.36=333g/L參考值：320~360g/L紅細胞檢查專題知識講座第76頁臨床意義MCV、MCH、MCHC可從不一樣側(cè)面反應(yīng)紅細胞病理改變，有利于分析病人紅細胞形態(tài)特征，進行貧血分類、診療和判別診療。紅細胞檢查專題知識講座第77頁貧血分類MCVMCHMCHC常見病因正常細胞性正常正常正常再障、急性失血、急性溶血、白血病大細胞性增高增高正常巨幼細胞性貧血單純小細胞性減低減低正常慢性感染、尿毒癥小細胞低色素性減低減低減低缺鐵性貧血、地中海貧血、慢性失血貧血紅細胞形態(tài)學(xué)分類紅細胞檢查專題知識講座第78頁紅細胞體積分布寬度

（RBCVolumeDistributionWidth，RDW）定義

紅細胞體積分布寬度是由血液分析儀依據(jù)紅細胞體積直方圖導(dǎo)出，反應(yīng)周圍血紅細胞體積異質(zhì)性參數(shù)，是反應(yīng)紅細胞大小均一程度客觀指標(biāo)，常見變異系數(shù)（CV）或標(biāo)準(zhǔn)差（S）表示。紅細胞檢查專題知識講座第79頁臨床意義與MCV結(jié)合進行貧血分類：這種分類法更能反應(yīng)貧血病理改變，對貧血判別診療有一定價值。診療缺鐵性貧血：IDA病人95%以上RDW增高，可與β-珠蛋白生成障礙性貧血（88%RDW正常）判別。紅細胞檢查專題知識講座第80頁

貧血類型常見疾病大細胞均一性個別再障大細胞不均一性巨幼細胞性貧血正細胞均一性急性失血正細胞不均一性再障、個別溶貧小細胞均一性地中海貧血小細胞不均一性缺鐵性貧血紅細胞檢查專題知識講座第81頁思考某女性病人，測得紅細胞為2.8*1012/L，血紅蛋白為65g/L，血細胞比積0.20。計算：MCV、MCH、MCHC該病人屬于哪種類型貧血下一步檢測方向紅細胞檢查專題知識講座第82頁網(wǎng)織紅細胞計數(shù)

（reticulocyte，Ret）紅細胞檢查專題知識講座第83頁Ret是介于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間還未完全成熟紅細胞，其胞質(zhì)中殘余嗜堿性物質(zhì)（核糖體和RNA），可被一些染料（如煌焦油藍等）活體染色呈藍色網(wǎng)狀或顆粒狀結(jié)構(gòu)，故而得名。直徑：8~9.5um骨髓中網(wǎng)織紅細胞數(shù)比外周血高約3倍定義紅細胞檢查專題知識講座第84頁依據(jù)Ret形態(tài)特征和成熟程度分為五型：

0

型（花冠型）：有核網(wǎng)織紅細胞Ⅰ型（絲球型）：紅細胞幾乎被網(wǎng)織物充滿Ⅱ型（網(wǎng)型）：紅細胞中央線團樣結(jié)構(gòu)開始渙散Ⅲ型（破網(wǎng)型）：網(wǎng)織結(jié)構(gòu)稀小，呈不規(guī)則枝點狀排列Ⅳ型（點粒型）：呈分散細顆粒、短絲狀I(lǐng)CSH將網(wǎng)織紅細胞分為I~IV型紅細胞檢查專題知識講座第85頁紅細胞檢查專題知識講座第86頁紅細胞檢查專題知識講座第87頁紅細胞檢查專題知識講座第88頁方法學(xué)選擇手工法（manual）染料：

新亞甲藍、煌焦油藍等

新亞甲藍對Ret染色力強且穩(wěn)定，為WHO推薦染料。

煌焦油藍應(yīng)用歷史長，但易產(chǎn)生沉淀。紅細胞檢查專題知識講座第89頁原理：

RNA帶負電荷，與帶正電荷染料形成復(fù)合物，呈深染顆粒狀或彼此連綴成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。凡含兩個以上深染顆粒或含有線網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)無核紅細胞，即為Ret。紅細胞檢查專題知識講座第90頁玻片法10g/L煌焦油藍乙醇溶液加染液→加血液→制備涂片→觀察，計算

混合血液中水分易蒸發(fā)，染色時間短，染料沉渣干擾，計數(shù)結(jié)果不準(zhǔn)確。紅細胞檢查專題知識講座第91頁試管法10g/L煌焦油藍生理鹽水溶液

染液+血液（等量），混勻，置室溫15~20分鐘→制備涂片→觀察、計算

重復(fù)性好，染色時間長。紅細胞檢查專題知識講座第92頁Miller窺盤計數(shù)法將Miller窺盤置于接目鏡內(nèi)，選擇紅細胞散在且分布均勻部位計數(shù)。AB紅細胞檢查專題知識講座第93頁計算

1.

網(wǎng)織紅細胞%=×1002.

絕對值計算：（×109/L）大格網(wǎng)織紅細胞總數(shù)小格紅細胞總數(shù)×9紅細胞檢查專題知識講座第94頁儀器法染料：熒光染料（吖啶橙等）原理：熒光染色，激光測量。方法：流式細胞儀網(wǎng)織紅細胞計數(shù)儀紅細胞檢查專題知識講座第95頁可同時將Ret分為高熒光強度（HFR）、中熒光強度（MFR）、低熒光強度（LFR）測量細胞多，防止主觀原因影響，方法易于標(biāo)準(zhǔn)化如遇NRBC、Howell-Jolly小體、巨大血小板可呈假陽性紅細胞檢查專題知識講座第96頁Referencevalue成人：

0.008~0.0225~75×109/L新生兒：

0.02~0.06紅細胞檢查專題知識講座第97頁臨床意義正常外周血中網(wǎng)織紅細胞多為Ⅲ型（0.2~0.3）和Ⅳ型（0.7~0.8）判斷骨髓紅細胞生成情況觀察貧血療效主要指標(biāo)骨髓移植后監(jiān)測其造血功效放/化療時骨髓功效監(jiān)測紅細胞檢查專題知識講座第98頁網(wǎng)織紅細胞其它參數(shù)

Reticulocytematurityindex（RMI）

RMI=（HFR+MFR）/LFR×100

增高：溶貧、ITP、CLL、AL、PV、AA、MM

降低：骨髓衰竭、無效造血，如巨幼貧紅細胞檢查專題知識講座第99頁Reticulocyteproductionindex（RPI）被測Hct正常人Hct表示網(wǎng)織紅細胞生成相當(dāng)于正常人多少倍Ret成熟天數(shù)1RPI=Ret%××紅細胞檢查專題知識講座第100頁LFR和HFR——作為判別診療初篩指標(biāo)

溶貧：Ret、LFR和HFR升高

腎性貧血：HFR升高、LFR降低、Ret正常IRF（Immaturereticulocytefraction）

——未成熟網(wǎng)織紅細胞比率

IRF=MFR+HFR

預(yù)計骨髓移植后造血恢復(fù)早期指標(biāo)紅細胞檢查專題知識講座第101頁點彩紅細胞計數(shù)

（Basiphilicstipplingcount）紅細胞在發(fā)育過程中受到損害，胞質(zhì)中殘余嗜堿性物質(zhì)RNA變性沉淀，瑞氏染色時展現(xiàn)粗細不等藍黑色顆粒。紅細胞檢查專題知識講座第102頁紅細胞檢查專題知識講座第103頁紅細胞檢查專題知識講座第104頁參考值：＜0.01%臨床意義：重金屬及硝基苯、苯胺中毒、貧血點彩紅細胞（%）=50個視野內(nèi)點彩紅細胞數(shù)5個視野內(nèi)紅細胞總數(shù)×10紅細胞檢查專題知識講座第105頁紅細胞沉降率

（Erythrocytesedimentationrate，ESR）定義單位時間內(nèi)紅細胞在一定條件下沉降速度，以mm/h表示紅細胞檢查專題知識講座第106頁紅細胞與血漿密度差離體抗凝血逐步形成緡錢狀紅細胞，自然下沉，堆積于試管底部原理紅細胞檢查專題知識講座第107頁1期：緡錢狀紅細胞形